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In-vitro cultivation of normal human oral keratinocytes

Chinese Medical Journal 2001年第7期114卷 59-62,107页

作者：周曾同周海文商庆新曹谊林上海第二医科大学第九人民医院口腔内科上海200011 上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程重点实验室上海200011

Abstract:Objective To establish a method for culturing normal human oral *** Specimens obtained from healthy humans undergoing oral surgery were dissociated into single cell suspensions by dispase and trypsin. The cells were grown in serum-free medium. Morphological characteristics were studied under light microscope and electron microscope. Cytokeratins were shown by *** Cells could be maintained in culture up to 4-5 passages or 30-50 days. Electron microscope revealed that there were desmosomes and tonofibrils in the oral keratinocytes. The cells showed positive staining for cytokeratin antibody. Conclusion Human oral keratinocytes have been successfully grown in serial culture.

关键词： cell culture · oral keratinocytes/epithelial cells · morphology · cytokeratin

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应用可注射性生物材料再生自体组织工程化软骨组织的实验研究

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中华整形外科杂志 2001年第5期17卷 302-305页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春刘德莉徐蓉吴娟娟上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究中心重点实验室上海200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海200011

目的　探讨自体组织工程化软骨在动物自体内形成的最佳细胞浓度 ,为临床应用提供理论依据。方法　取贵州香猪部分耳廓软骨组织 ,于体外消化分离软骨细胞 ,与可注射性生物材料PluronicF12 7混合形成复合物 ,浓度为 10 ,2 0 ,3 0 ,4 0 ,5 ... 详细信息

目的　探讨自体组织工程化软骨在动物自体内形成的最佳细胞浓度 ,为临床应用提供理论依据。方法　取贵州香猪部分耳廓软骨组织 ,于体外消化分离软骨细胞 ,与可注射性生物材料PluronicF12 7混合形成复合物 ,浓度为 10 ,2 0 ,3 0 ,4 0 ,5 0 ,60和 70× 10 6 ml,并将其接种于猪自体腹外侧壁皮下 ,于第 6周取材 ,分别进行大体、组织学、氨基糖氨多糖 (GAG)和Ⅱ型胶原含量检测 ,对再生软骨组织进行评价。结果　细胞浓度为 5 0× 10 6 ml时 ,再生的软骨组织 ,软骨细胞均匀分布 ,包埋在软骨陷窝内 ,与正常软骨组织有相似的组织学特征。而细胞浓度为 10× 10 6 ml、3 0× 10 6 ml则形成软骨组织不完全 ,软骨细胞散在分布 ,并被未降解的生物材料分隔。对所有样本称重 ,在 3 0～ 110mg之间 ,各样本GAG含量在 5 .8%～ 9.2 %之间 ,正常耳软骨含量为 9.2 %。WesternBlot证实所有样本都有Ⅱ型胶原。结论　利用组织工程技术可在具有免疫功能的自体动物内形成软骨组织 ,并确定了软骨组织形成的最佳细胞接种浓度为 5 0× 10 6 ml。

关键词：软骨细胞软骨组织组织工程生物材料软骨修复动物实验

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角膜基质细胞-PGA生物支架复合物体外培养研究

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眼科研究 2001年第4期19卷 308-311页

作者：胡晓洁商庆新曹谊林上海市第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室 200011

目的　　研究角膜基质细胞与ＰＧＡ亲和力，为组织工程技术构建角膜提供重要的理论依据和参数。方法体外分离获得角膜基质细胞，经培养扩增后接种于ＰＧＡ，并对细胞－生物材料复合物进行体外培养，观察细胞生长代谢。应用ＭＴＴ技术测... 详细信息

目的　　研究角膜基质细胞与ＰＧＡ亲和力，为组织工程技术构建角膜提供重要的理论依据和参数。方法体外分离获得角膜基质细胞，经培养扩增后接种于ＰＧＡ，并对细胞－生物材料复合物进行体外培养，观察细胞生长代谢。应用ＭＴＴ技术测定角膜基质细胞与ＰＧＡ的黏附率。结果　角膜基质细胞能够在ＰＧＡ中黏附、伸展和分泌基质，ＭＴＴ测得细胞黏附率为７１．４０％。结论　　角膜基质细胞与ＰＧＡ具有较好的亲和力，ＰＧＡ可以作为构建角膜的生物材料。

关键词：组织工程角膜基质细胞生物支架聚羟基乙酸角膜疾病实验研究

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同种异体组织工程化软骨组织形成的初步研究

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中华整形外科杂志 2000年第5期16卷 264-266页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春王倬崔磊王健上海市第二医科大学组织工程研究中心 200011 上海市组织工程研究重点实验室 200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科 200011

探讨同种异体组织工程化软骨在动物体内形成。方法　取怀孕１００ｄ胚胎羊的关节软骨经体外消化分离软骨细胞，与可吸收生物材料ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ１２７混合形成细胞──生物材料复合物，将细胞──生物材料复合物注射到异体羊腹壁皮... 详细信息

探讨同种异体组织工程化软骨在动物体内形成。方法　取怀孕１００ｄ胚胎羊的关节软骨经体外消化分离软骨细胞，与可吸收生物材料ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ１２７混合形成细胞──生物材料复合物，将细胞──生物材料复合物注射到异体羊腹壁皮下，每隔２周取材，连续半年对所取标本进行大体观察、称重，并作ＨＥ、ＳａｆｒａｎｉｎＯ、Ｍａｓｓｏｎ’ｓｔｒｉｃｈｒｏｍｅ染色，对再生的软骨组织进行评价。结果在同种异体动物体内能形成软骨组织，所形成软骨组织的氨基多糖和胶原分布与正常羊关节软骨组织有相似的组织学特性。组织学结果可见第２，４周的软骨组织有一定程度的免疫排斥反应和炎症细胞浸润。第６周后软骨组织基本成熟，免疫反应减轻，但未消退。结论　应用组织工程技术可在同种异体动物体内再生软骨组织，再生的组织周围存在一定程度的免疫反应，随接种时间的延长逐渐减弱。

关键词：软骨细胞软骨组织同种异体组织工程化复合物

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组织工程研究中的胚胎干细胞问题

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世界科技研究与发展 2000年第6期22卷 54-59页

作者：曹谊林汪铮李晓红商庆新上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海200011

胚胎干细胞研究是组织工程基本科学问题中一个重要的组成部分。本文回顾了近年来胚胎干细胞领域的研究进程 ,尤其是人体胚胎干细胞研究的最新成果 ;提出了组织工程中“治疗性克隆”的战略目标。并且确立了未来人体胚胎干细胞研究解决组... 详细信息

胚胎干细胞研究是组织工程基本科学问题中一个重要的组成部分。本文回顾了近年来胚胎干细胞领域的研究进程 ,尤其是人体胚胎干细胞研究的最新成果 ;提出了组织工程中“治疗性克隆”的战略目标。并且确立了未来人体胚胎干细胞研究解决组织工程种子细胞问题的具体步骤 ;指出了每项具体研究中所要解决的关键问题。

关键词：组织工程胚胎干细胞治疗性克隆核移植

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专家论坛：生物工程领域的崭新前沿组织工程

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中国社区医学 2000年第2期6卷 5-6页

作者：商庆新曹谊林张涤生上海第二医科大学组织工程研究中心，上海200011 上海市组织工程研究重点实验室，上海200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科，上海200011

组织工程是在组织水平上操作的生物工程，主要致力于组织和器官的形成和再生。组织工程的提出和建立只有10年时间，却得到了迅猛的发展。软骨、骨、肌腱等组织再生的成功，已展示了它广阔的发展前景；血管、器管等复合组织的再生，标志... 详细信息

组织工程是在组织水平上操作的生物工程，主要致力于组织和器官的形成和再生。组织工程的提出和建立只有10年时间，却得到了迅猛的发展。软骨、骨、肌腱等组织再生的成功，已展示了它广阔的发展前景；血管、器管等复合组织的再生，标志着组织工程已由单一组织再生向复合组织预制迈出重大一步，而在胰腺、肝脏等组织再生研究中取得的突破性进展，更向人们展示了人类有能力再生具有复杂组织结构和生理功能的器官。随着组织工程研究的不断深入和发展，它必将给生命科学带来革命性变化。

关键词：组织工程组织再生肌腱软骨血管胰腺肝脏复合组织展示生理功能

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组织工程学的回顾和未来的研究方向

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中国创伤骨科杂志 2000年第4期2卷 308-310页

作者：刘伟曹谊林商庆新上海第医科大学组织工程研究中心上海市200011 上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科

组织工程学是一门新兴的学科,它应用细胞生物学和工程学的原理在体外或在体内制造组织和器官从而达到修复损伤组织和改善其功能的目的。组织工程学的提出和建立虽然只有10多年的时间,但其迅猛发展的势头展示出在未来医学发展中的重要作... 详细信息

组织工程学是一门新兴的学科,它应用细胞生物学和工程学的原理在体外或在体内制造组织和器官从而达到修复损伤组织和改善其功能的目的。组织工程学的提出和建立虽然只有10多年的时间,但其迅猛发展的势头展示出在未来医学发展中的重要作用。组织工程的建立和发展大约在十多年以前,美国哈佛大学外科医生Vacanti JP因器官供应来源的问题在大海边上瞑思苦想之际,碰到了麻省理工学院的化学生物工程师Robert Langer。Langer向Vacanti建议把细胞放在可吸收的合成材料中来形成组织或器官。这次偶然的海边相遇引发了组织工程在美国的兴起和在全世界的扩展和发展。1987年,美国国家科学基金会正式提出“组织工程”一词并确定这一门新兴学科的建立。早期的组织工程主要集中在单一组织的构建。1988年,Vacanti等用分离的软骨细胞和可降解的生物材料首先在动物皮下构建成透明软骨,这一研究成果具有重要的意义。由于在体内,软骨损伤之后很难使透明软骨得到再生和修复,采用组织工程手段构建成具有功能的透明软骨无疑为将来的组织和器官的修复开辟了一条重要的途径。以后,Kim和Vacanti等又用PGA和PLA在裸鼠皮下构建成软骨组织。

关键词：发展史组织工程学研究方向

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生物工程领域的崭新前沿——组织工程

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中国创伤骨科杂志 2000年第4期2卷 265-268页

作者：商庆新曹谊林张涤生上海第二医科大学组织工程研究中心上海市200011 上海市组织工程研究重点实验室上海市200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市200011

20世纪生命科学领域中细胞生物学和分子生物学的两大飞跃,使人类对生命本质的认识达到了一个前所未有的高度,也使人类对健康、长寿和生命质量有了更高的追求。从对生命的认识发展到对生命质量的把握,是人类文明进步的必然需求和结果。2... 详细信息

20世纪生命科学领域中细胞生物学和分子生物学的两大飞跃,使人类对生命本质的认识达到了一个前所未有的高度,也使人类对健康、长寿和生命质量有了更高的追求。从对生命的认识发展到对生命质量的把握,是人类文明进步的必然需求和结果。21世纪将是人类以完善自我为目标,以生物工程为主要趋势的生物世纪。组织工程作为生物工程的主要内容之一,是继细胞生物学和分子生物学之后,生命科学发展史上又一新的里程碑,标志着医学将走出器官移植的范畴,步人制造组织和器官的新时代,从某种意义上讲,它已成了一个国家医学发展水平的标志之一。

关键词：科学意义研究现状研究方向组织工程生物工程

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利用组织工程技术再生软骨组织的实验研究

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中华显微外科杂志 1999年第2期22卷 122-124页

作者：刘彦春王炜曹谊林商庆新夏万尧钟伟上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究重庆实验室复旦大学高分子科学系

目的在有免疫力的动物体兔体内探索组织工程化软骨生成的影响因素。方法经不同物质修饰的聚羟基乙酸支架与软骨细胞体外培养，观察基质产生情况，并将细胞支架复合物体内回植，观察软骨的生成，并进行组织学及超微结构评价。结果以卵磷... 详细信息

目的在有免疫力的动物体兔体内探索组织工程化软骨生成的影响因素。方法经不同物质修饰的聚羟基乙酸支架与软骨细胞体外培养，观察基质产生情况，并将细胞支架复合物体内回植，观察软骨的生成，并进行组织学及超微结构评价。结果以卵磷脂、多聚赖氨酸及聚乳酸共同修饰的聚羟基乙酸与软骨细胞体外培养，结果基质产生旺盛，体内回植后软骨生成良好。结论细胞支架复合物体外培养期间有基质产生，是组织工程化软骨生成的前提条件；以卵磷脂。

关键词：软骨组织再生组织工程软骨细胞体外培养

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生物工程领域的崭新前沿—组织工程

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引进国外医药技术与设备 1999年第11期5卷 11-15,27页

作者：商庆新曹谊林张涤生上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科

组织工程是应用细胞生物学和工程学的原理,研究和开发、修复和改善损伤组织和功能的生物替代物的一门科学,是继细胞生物学和分子生物学之后,生命科学发展史上又一新的里程碑,标志着医学将走出器官移植的范畴,步入制造组织和器官的新时代... 详细信息

组织工程是应用细胞生物学和工程学的原理,研究和开发、修复和改善损伤组织和功能的生物替代物的一门科学,是继细胞生物学和分子生物学之后,生命科学发展史上又一新的里程碑,标志着医学将走出器官移植的范畴,步入制造组织和器官的新时代。组织工程是在组织水平上操作的生物工程,主要致力于组织和器官的形成和再生,它是对外科领域中组织、器官缺损和功能障碍传统治疗方法和模式的一次革命。同时组织工程是一门多学科交叉的边缘学科,将是21世纪具有巨大潜力的高技术产业,必将产生巨大的社会和经济效益。目前组织工程己得到了迅猛发展,在许多方面已取得重大突破,由于其所孕育的巨大科学价值及广阔的研究和应用前景,成了未来21世纪生命科学研究领域的焦点之一。因此,在国内尽快地建立和开展组织工程研究,对加快我国医学科学事业和国民经济的发展具有重大意义。

关键词：生物工程组织工程生物可降解材料研究

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