检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2002年第3期82卷 191-193页

作者：崔一民曹谊林商庆新崔磊刘伟上海第二医科大学组织工程研究中心上海第九人民医院整复外科 200011

目的　应用组织工程方法在具完全免疫功能的哺乳动物体内修复半月板缺损。方法　15只 4 5日龄的长枫杂交仔猪为实验动物 ,以改良的Klagsbrun酶消化法从左膝半月板获得的自体纤维软骨细胞在体外扩增至一定数量 ,在右膝内侧副韧带前方的... 详细信息

目的　应用组织工程方法在具完全免疫功能的哺乳动物体内修复半月板缺损。方法　15只 4 5日龄的长枫杂交仔猪为实验动物 ,以改良的Klagsbrun酶消化法从左膝半月板获得的自体纤维软骨细胞在体外扩增至一定数量 ,在右膝内侧副韧带前方的内侧半月板造成长 1cm的全层缺损 ,分别将复合聚羟基乙酸 (PGA) 纤维软骨细胞 Pluronic复合物、纤维软骨细胞 Pluronic复合物和单纯PGA植入缺损 ,以正常半月板和旷置缺损作为对照 ,分 9、16和 2 5周取材。标本采用大体观察、组织学、生物化学和生物力学作为评估指标。结果　PGA 细胞 Pluronic复合物在大体形态、组织学结构和压弹性模量 (2 5周为正常组的 5 9 7% )方面均显示形成了最佳的修复组织 ,并使对应股骨髁软骨的糖氨聚糖含量 (2 5周为正常组的 74 5 % )保持相对稳定。结论　自体组织工程化纤维软骨能够修复乃至再造半月板。

关键词：生物医学工程半月板缺损软骨细胞修复

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骨髓间质干细胞向软骨细胞表型定向诱导分化的实验研究

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中华整形外科杂志 2002年第1期18卷 12-14页

作者：夏万尧商庆新崔磊徐蓉丁小邦曹谊林上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科

目的　研究体外培养的猪骨髓间质干细胞 (BoneMarrowStemCells,MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型转化 ,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性。方法　取成年崇明长枫杂交猪髂骨骨髓 5ml,在低糖DMEM完全培养液培养 2周 ,传... 详细信息

目的　研究体外培养的猪骨髓间质干细胞 (BoneMarrowStemCells,MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型转化 ,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性。方法　取成年崇明长枫杂交猪髂骨骨髓 5ml,在低糖DMEM完全培养液培养 2周 ,传代后以高糖DMEM无血清特定培养液诱导 (含胰岛素 2mg L、转铁蛋白 3mg L、丙酮酸 10 0mg L、地塞米松 10 - 7mol L、TGF β110ng ml) ,在相差显微镜和电镜下进行观察 ,免疫组化检测Ⅱ型胶原分泌 ,原位杂交检测Ⅱ型胶原mRNA表达。结果　细胞形态由成纤维样梭形向多角形、多边形转变 ,透视电镜观察见大量扩张粗面内质网、高尔基体、线粒体。诱导培养后第 7,14dⅡ型胶原免疫组化阳性 ,同时原位杂交检测Ⅱ型胶原mRNA表达呈阳性。结论　MSCs在特定培养液诱导下能向软骨细胞表型转化 ,并能分泌软骨特异性基质 ,有可能成为软骨组织工程较理想的种子细胞来源的应用前景。

关键词：组织工程骨髓间充质干细胞分化软骨细胞表型动物实验

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真核表达载体pcDNA3.1-h转化生长因子-β1的构建

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中华实验外科杂志 2002年第3期19卷 270-271页

作者：刘方军曹谊林商庆新崔磊刘伟上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科 200011 上海第二医科大学组织工程研究中心

目的　为研究软骨细胞基因转染的可行性创造条件 ,从而为基因修饰的软骨组织工程研究奠定基础。方法　应用基因重组技术和限制性内切酶酶切构建并鉴定 pcDNA3 .1 TGF β1真核表达载体 ,经Fugene6介导质粒转染 3T3细胞后应用逆转录聚... 详细信息

目的　为研究软骨细胞基因转染的可行性创造条件 ,从而为基因修饰的软骨组织工程研究奠定基础。方法　应用基因重组技术和限制性内切酶酶切构建并鉴定 pcDNA3 .1 TGF β1真核表达载体 ,经Fugene6介导质粒转染 3T3细胞后应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测hTGF β1mRNA在真核细胞中的表达。结果　重组真核表达载体 pcDNA3 .1 TGF β1经限制性内切酶XhoⅠ和HindⅢ酶切 ,电泳后显示 1 .35kb的hTGF β1目的片段和 5 .40kb的 pcDNA3 .1载体片段 ,证明重组质粒连接正确 ;经RT PCR检测了hTGF β1在转录水平mRNA的表达情况 ,表明质粒转染 3T3细胞后hTGF β1mRNA的表达明显增强。结论　重组真核表达载体构建正确 ,并能在真核细胞 3T3中表达hTGF β1mRNA 。

关键词：真核表达载体 pcDNA3.1-h 转化生长因子-β1 构建

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皮肤成纤维细胞构建组织工程化肌腱的初步研究

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中华医学杂志 2002年第16期82卷 1105-1107页

作者：陈兵丁小邦刘方军崔磊刘伟商庆新曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究中心 200011

目的　探讨以皮肤成纤维细胞为种子细胞的组织工程化肌腱体内形成。方法　取猪自体皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增 ,与可吸收生物材料聚羟基乙酸形成细胞—生物材料复合物 ,将该复合物植入手术缺损的右侧趾浅屈肌腱处 ,6周取材 ,对标... 详细信息

目的　探讨以皮肤成纤维细胞为种子细胞的组织工程化肌腱体内形成。方法　取猪自体皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增 ,与可吸收生物材料聚羟基乙酸形成细胞—生物材料复合物 ,将该复合物植入手术缺损的右侧趾浅屈肌腱处 ,6周取材 ,对标本进行大体、组织学、电镜检查及生物力学评价。结果　新生组织在大体形态、细胞与胶原排列方式上与正常肌腱相似。新生组织的最大张力和最大应力分别为 1 73 0± 1 8 2与 1 8 9± 1 9N/mm2 ,分别达到左侧同一部位正常肌腱的 57 4%与51 9%。

关键词：皮肤肌腱人体组织工程成纤维细胞种子细胞体外培养

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基因转染3T3细胞的hTGFβ_1表达

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上海第二医科大学学报 2002年第5期22卷 388-390页

作者：刘方军曹谊林崔磊刘伟商庆新刘德莉上海第二医科大学第九人民医院整复外科组织工程研究中心上海200011

目的鉴定重组pcDNA3.1-TGFβ1 载体在真核细胞中的表达 ,为其在软骨组织工程中的基因转染创造条件。　方法利用脂质体Fugene 6将TGFβ1 真核表达载体转染至NIH3T3细胞 ,RT -PCR、ELISA检测hTGFβ1 基因的表达 ,并利用CCL 6 4细胞株鉴定... 详细信息

目的鉴定重组pcDNA3.1-TGFβ1 载体在真核细胞中的表达 ,为其在软骨组织工程中的基因转染创造条件。　方法利用脂质体Fugene 6将TGFβ1 真核表达载体转染至NIH3T3细胞 ,RT -PCR、ELISA检测hTGFβ1 基因的表达 ,并利用CCL 6 4细胞株鉴定重组hTGFβ1 的生物学活性。　结果质粒转染 3T3细胞后 ,hTGFβ1 mRNA及其蛋白的表达均显著增强 ,且分泌表达的hTGFβ1 能明显抑制CCL 6 4细胞的生长。　结论重组载体在 3T3细胞中能表达具有一定生物学活性的hTGFβ1 。

关键词： hTGFβ1 基因重组组织工程 DNA转移

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壳聚糖作为组织工程软骨支架的实验研究

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中华显微外科杂志 2002年第1期25卷 34-37页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春钟伟 200011 上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科复旦大学高分子科学系

目的　探索壳聚糖作为组织工程技术中软骨细胞培养支架的可行性。　方法　消化分离猪耳郭软骨细胞 ,接种于自制壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架上培养 ,从光镜和扫描电镜观察其亲水性和对细胞吸附力 ,MTT检测软骨细胞在壳聚糖、壳聚... 详细信息

目的　探索壳聚糖作为组织工程技术中软骨细胞培养支架的可行性。　方法　消化分离猪耳郭软骨细胞 ,接种于自制壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架上培养 ,从光镜和扫描电镜观察其亲水性和对细胞吸附力 ,MTT检测软骨细胞在壳聚糖、壳聚糖胶原上的黏附率及壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架对细胞的增殖、功能的影响。　结果　软骨细胞能够在壳聚糖、壳聚糖胶原支架上黏附、伸展、增殖和发挥正常功能 ,MTT测得细胞黏附率分别为 81 2 5 %和 87 5 0 % ,MTT测得软骨细胞在壳聚糖胶原支架中的增殖能力较强。　结论　壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架与软骨细胞具有较好的相容性 ,壳聚糖胶原复合多孔支架更适合作为软骨组织工程中的细胞培养支架。

关键词：组织工程软骨细胞壳聚糖支架细胞培养

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犬骨髓基质干细胞诱导为成骨细胞的实验研究

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上海口腔医学 2002年第4期11卷 327-331页

作者：王敏翁雨来胡晓洁崔磊刘伟冯希平曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海第二医科大学组织工程研究中心上海第二医科大学附属第九人民医院口腔医学院口腔内科上海200011 上海第二医科大学附属第九人民医院口腔医学院口腔预防科上海200011

目的研究骨髓基质干细胞(Bonemarrowstromalcells,BMSCs)在体外培养、诱导后的成骨活性,探讨BMSCs作为骨组织工程种子细胞的可能性和可行性。方法抽取成年犬骨髓,用梯度离心法获取单核细胞,经条件培养液体外诱导培养后,进行组织化学、... 详细信息

目的研究骨髓基质干细胞(Bonemarrowstromalcells,BMSCs)在体外培养、诱导后的成骨活性,探讨BMSCs作为骨组织工程种子细胞的可能性和可行性。方法抽取成年犬骨髓,用梯度离心法获取单核细胞,经条件培养液体外诱导培养后,进行组织化学、免疫组化、原位杂交检测,并在透射电镜下观察其成骨活性。结果第1代细胞Alkalinephosphatase(AKP)染色、Core-bindingfactoralphasubunit1(Osf2/Cbfa1)、Osteopotin(OPN)、Ⅰ型胶原的免疫细胞化学检测和I型胶原的原位杂交结果开始呈现阳性,第3代细胞BoneSailoplain(BSP)、Osteocalcin(OCN)免疫细胞化学染色开始呈现阳性,透射电镜显示细胞外有胶原分泌和钙盐沉积。结论BMSCs不仅能大量扩增,且在一定条件下可向成骨细胞分化,是骨组织工程理想的种子细胞。

关键词：骨髓基质干细胞诱导成骨细胞实验研究组织工程

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去细胞异体神经基膜管桥接神经缺损的实验研究

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中华整形外科杂志 2001年第6期17卷 366-368,I004页

作者：戴传昌王炜曹谊林董佳生祁佐良商庆新钟斌胡晓洁上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科 200011 上海第二医科大学组织工程研究中心

目的　探索修复周围神经缺损的新的有效替代材料。方法　将异体的预变性神经和正常神经经溶血卵磷脂裂解液处理后 ,得到一种没有细胞及细胞碎片的、空的神经基膜管 ,将其用来修复大鼠 15mm坐骨神经缺损 ,通过一般观察、肌萎缩测量、电... 详细信息

目的　探索修复周围神经缺损的新的有效替代材料。方法　将异体的预变性神经和正常神经经溶血卵磷脂裂解液处理后 ,得到一种没有细胞及细胞碎片的、空的神经基膜管 ,将其用来修复大鼠 15mm坐骨神经缺损 ,通过一般观察、肌萎缩测量、电生理检测、连续切片组织学观察和计算机图像分析来评价神经再生。结果　化学抽提的预变性神经和正常神经桥接物组均获得了密集的神经再生和良好的神经功能恢复 ,其中前者效果更为优越。

关键词：周围神经再生去细胞基膜管周围神经缺损移植治疗

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皮肤组织工程研究进展

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中华实验外科杂志 2001年第3期18卷 287-288页

作者：蔡霞曹谊林商庆新关文祥上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科 200011 上海第二医科大学组织工程研究中心

组织工程学是近年来发展起来的一门新兴学科，现就皮肤组织工程的研究作一简要概述：早在1951年，就有学者建议用实验室生长的皮肤来治疗烧伤病人［1］，但由于表皮细胞培养困难，此方法未能实施。直到1975年Rheinwald和 Green［2］攻... 详细信息

组织工程学是近年来发展起来的一门新兴学科，现就皮肤组织工程的研究作一简要概述：早在1951年，就有学者建议用实验室生长的皮肤来治疗烧伤病人［1］，但由于表皮细胞培养困难，此方法未能实施。直到1975年Rheinwald和 Green［2］攻克了体外大规模培养表皮细胞的难题，皮肤替代物的研究和制作才日渐广泛。皮肤替代物可分为：表皮替代物、真皮替代物和复合皮肤替代物。一、表皮替代物 1．表皮细胞悬液：Billingham等［3］首先用培养的表皮细胞悬液治疗大面积全厚皮肤缺损，但该方法存在两大难题：一是无法确定转移到病人体内时细胞悬液的合适浓度;二是细胞悬液会随敷料更换而丢失。

关键词：皮肤组织工程表皮替代物真皮替代物复合皮肤替代物

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软骨、骨组织工程的现状与趋势

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中华创伤杂志 2001年第1期17卷 7-9页

作者：曹谊林商庆新上海第二医科大学组织工程研究中心上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科200011

组织工程是应用细胞生物学和工程学的原理，研究开发修复和改善损伤组织形态和功能生物替代物的一门科学，是继细胞生物学和分子生物学之后，生命科学发展史上又一新的里程碑，标志着医学将走出器官移植的范畴，步入制造组织和器官的新... 详细信息

组织工程是应用细胞生物学和工程学的原理，研究开发修复和改善损伤组织形态和功能生物替代物的一门科学，是继细胞生物学和分子生物学之后，生命科学发展史上又一新的里程碑，标志着医学将走出器官移植的范畴，步入制造组织和器官的新时代。它的提出、建立和发展是对外科领域组织、器官缺损和功能障碍传统治疗方法和模式的一次革命，孕育着巨大的科学价值和广阔的研究应用前景，是未来21世纪生命科学研究领域的焦点之一。同时，组织工程是一门多学科交叉的边缘学科，将是21世纪具有巨大潜力的高技术产业，必将产生巨大的社会和经济效益。　　目前组织工程发展迅猛，在许多方面取得了重大突破，由于软骨、骨缺损在临床上的常见性和治疗上的迫切性，以及其组成结构上的相对单一性，软骨、骨组织工程已成为组织工程研究进展最快的内容之一。

关键词：软骨组织工程骨组织工程组织工程现状研究发展

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