检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床康复 2003年第6期7卷 922-923,T003页

作者：刘阳张燕中许志成刘伟崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海第二医科大学组织工程重点实验室上海市200011 上海第二医科大学附属仁济医院血管外科上海市200000

目的:构建组织的方法和环境是组织工程研究所涉及的另一重要环节,对于能否最终形成新生组织以及新生组织质量的好坏起着关键作用。探讨运用组织工程技术构建血管中膜组织的方法。方法:将体外培养、扩增的犬平滑肌细胞接种于片状聚羟基乙... 详细信息

目的:构建组织的方法和环境是组织工程研究所涉及的另一重要环节,对于能否最终形成新生组织以及新生组织质量的好坏起着关键作用。探讨运用组织工程技术构建血管中膜组织的方法。方法:将体外培养、扩增的犬平滑肌细胞接种于片状聚羟基乙酸(PGA)材料上,形成细胞-材料复合物,将该复合物包绕于硅胶管使成管状结构后移植于裸鼠皮下,第2,6,11周后行大体及组织学检测。结果:裸鼠皮下形成的组织工程化血管中膜组织学结构在不同的时间点具有不同的特征。结论:运用组织工程技术可形成具有与天然血管中膜组织学结构相似的血管。

关键词：组织工程技术构建血管壁实验研究生物医学工程

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生物反应器构建组织工程化血管的初步研究

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上海第二医科大学学报 2005年第11期25卷 1113-1116页

作者：许志成李宏杨军刘天一刘阳崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海组织工程研究与开发中心上海200011

目的探讨生物反应器内构建具有一定力学强度的组织工程化血管的可行性。方法从6月龄毕格犬的颈总动脉、颈外静脉分别获取平滑肌细胞和内皮细胞,体外培养扩增后,将平滑肌细胞接种于聚羟基乙酸(PGA)上形成细胞—材料复合物,置于生物反应器... 详细信息

目的探讨生物反应器内构建具有一定力学强度的组织工程化血管的可行性。方法从6月龄毕格犬的颈总动脉、颈外静脉分别获取平滑肌细胞和内皮细胞,体外培养扩增后,将平滑肌细胞接种于聚羟基乙酸(PGA)上形成细胞—材料复合物,置于生物反应器内(搏动频率75次/m in;扩张量<5%)培养3周,接种内皮细胞继续培养1周后取新生血管,进行大体观察、组织学和免疫组化检测。结果生物反应器内培养的组织工程化血管大体观察具有良好的弹性,管腔圆;平滑肌纤维成分排列规则且有层次感;免疫组化染色显示,平滑肌细胞呈棕黄色层状排列,内皮细胞于血管内侧呈单层排列。结论应用生物反应器可构建具有良好弹性的组织工程化血管。

关键词：组织工程生物反应器血管

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壳聚糖作为组织工程软骨支架的实验研究

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中华显微外科杂志 2002年第1期25卷 34-37页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春钟伟 200011 上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科复旦大学高分子科学系

目的　探索壳聚糖作为组织工程技术中软骨细胞培养支架的可行性。　方法　消化分离猪耳郭软骨细胞 ,接种于自制壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架上培养 ,从光镜和扫描电镜观察其亲水性和对细胞吸附力 ,MTT检测软骨细胞在壳聚糖、壳聚... 详细信息

目的　探索壳聚糖作为组织工程技术中软骨细胞培养支架的可行性。　方法　消化分离猪耳郭软骨细胞 ,接种于自制壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架上培养 ,从光镜和扫描电镜观察其亲水性和对细胞吸附力 ,MTT检测软骨细胞在壳聚糖、壳聚糖胶原上的黏附率及壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架对细胞的增殖、功能的影响。　结果　软骨细胞能够在壳聚糖、壳聚糖胶原支架上黏附、伸展、增殖和发挥正常功能 ,MTT测得细胞黏附率分别为 81 2 5 %和 87 5 0 % ,MTT测得软骨细胞在壳聚糖胶原支架中的增殖能力较强。　结论　壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架与软骨细胞具有较好的相容性 ,壳聚糖胶原复合多孔支架更适合作为软骨组织工程中的细胞培养支架。

关键词：组织工程软骨细胞壳聚糖支架细胞培养

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同种异体组织工程化软骨组织形成的初步研究

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中华整形外科杂志 2000年第5期16卷 264-266页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春王倬崔磊王健上海市第二医科大学组织工程研究中心 200011 上海市组织工程研究重点实验室 200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科 200011

探讨同种异体组织工程化软骨在动物体内形成。方法　取怀孕１００ｄ胚胎羊的关节软骨经体外消化分离软骨细胞，与可吸收生物材料ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ１２７混合形成细胞──生物材料复合物，将细胞──生物材料复合物注射到异体羊腹壁皮... 详细信息

探讨同种异体组织工程化软骨在动物体内形成。方法　取怀孕１００ｄ胚胎羊的关节软骨经体外消化分离软骨细胞，与可吸收生物材料ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ１２７混合形成细胞──生物材料复合物，将细胞──生物材料复合物注射到异体羊腹壁皮下，每隔２周取材，连续半年对所取标本进行大体观察、称重，并作ＨＥ、ＳａｆｒａｎｉｎＯ、Ｍａｓｓｏｎ’ｓｔｒｉｃｈｒｏｍｅ染色，对再生的软骨组织进行评价。结果在同种异体动物体内能形成软骨组织，所形成软骨组织的氨基多糖和胶原分布与正常羊关节软骨组织有相似的组织学特性。组织学结果可见第２，４周的软骨组织有一定程度的免疫排斥反应和炎症细胞浸润。第６周后软骨组织基本成熟，免疫反应减轻，但未消退。结论　应用组织工程技术可在同种异体动物体内再生软骨组织，再生的组织周围存在一定程度的免疫反应，随接种时间的延长逐渐减弱。

关键词：软骨细胞软骨组织同种异体组织工程化复合物

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不同类型人软骨细胞体外生物学特性比较

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中华实验外科杂志 2003年第6期20卷 497-498页

作者：张艳柴岗崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究重点实验室上海组织工程研究开发中心 200011

目的　通过研究人耳软骨和肋软骨两种不同类型软骨细胞体外分离、增殖、老化规律 ,为选择合适的组织工程种子细胞提供依据。方法　取小耳畸形残耳软骨和肋软骨 ,体外分别用0 .0 5 %和 0 .15 %Ⅱ型胶原酶消化 16h分离 ,台盼蓝染色计活细... 详细信息

目的　通过研究人耳软骨和肋软骨两种不同类型软骨细胞体外分离、增殖、老化规律 ,为选择合适的组织工程种子细胞提供依据。方法　取小耳畸形残耳软骨和肋软骨 ,体外分别用0 .0 5 %和 0 .15 %Ⅱ型胶原酶消化 16h分离 ,台盼蓝染色计活细胞数 ,得原代细胞获得率。体外单层培养 6代 ,观察形态学改变 ,群体倍增时间 (PDT ) ,免疫细胞化学染色及逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测Ⅱ型胶原和Aggrecan评定软骨细胞老化规律。结果　人残耳软骨组织平均细胞获得率为 ( 1.5 4± 0 .14 )× 10 6/ g ,肋软骨平均获得率为 ( 0 .46± 0 .0 9)× 10 6/ g ,两类软骨细胞P1的PDT最短 ,前 3代增殖力较强 ,P3 以后PDT明显延长 ,P6代细胞不再增殖。免疫细胞化学及RT PCR均证实耳软骨细胞 3代内、肋软骨细胞 4代内软骨细胞表型稳定。结论　第 2代的耳软骨细胞与第 3代肋软骨细胞可作为人体内组织工程化软骨构建的种子细胞。

关键词：软骨细胞体外生物学特性组织工程种子细胞

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TGF-β细胞内信号转导与伤口过度愈合

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上海第二医科大学学报 2004年第7期24卷 587-589,596页

作者：蔡泽浩刘伟钱云良关文祥张涤生上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

作者查阅近期TGF-β信号转导及TGF-β与伤口愈合相关的文献,追溯近阶段国内外有关生长因子TGF-β、TGF-β受体及其信号转导机制和TGF-β及SMAD分子在伤口愈合过程中的作用等方面的最新进展。SMAD分子在TGF-β的信号转导及其生物学效应... 详细信息

作者查阅近期TGF-β信号转导及TGF-β与伤口愈合相关的文献,追溯近阶段国内外有关生长因子TGF-β、TGF-β受体及其信号转导机制和TGF-β及SMAD分子在伤口愈合过程中的作用等方面的最新进展。SMAD分子在TGF-β的信号转导及其生物学效应中起重要作用,可通过人为方法来干扰TGF-β信号转导从而减少TGF-β在伤口愈合过程中的病理性作用。

关键词： TGF-β细胞信号转导伤口愈合 SMAD 纤维化疾病

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角膜基质细胞体外长期培养过程中生物学特性的改变

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上海第二医科大学学报 2004年第4期24卷 307-310,318页

作者：王爱丽胡晓洁李卿崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

目的研究兔角膜基质细胞在体外长期培养传代过程中,细胞增殖能力和胞外基质表达水平的改变。方法取体外培养兔角膜基质细胞,由光镜对各代细胞的形态学变化进行观测。通过对各代细胞生长曲线的绘制,得出其各自的群体倍增时间;MTT法比... 详细信息

目的研究兔角膜基质细胞在体外长期培养传代过程中,细胞增殖能力和胞外基质表达水平的改变。方法取体外培养兔角膜基质细胞,由光镜对各代细胞的形态学变化进行观测。通过对各代细胞生长曲线的绘制,得出其各自的群体倍增时间;MTT法比较各代细胞增殖能力的改变。RT-PCR和Western杂交检测各代细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平的改变;爱茜蓝法检测糖胺聚糖(GAG)的含量。结果体外培养兔角膜基质细胞随着传代的进程,逐渐显现衰老的形态特征。细胞群体倍增时间由第7代起显著延长(P<0.01);MTT比色法的结果亦显示,第7代细胞的增殖能力开始大幅下降(P<0.01)。第9-11代时,Ⅰ、Ⅲ型胶原在mRNA和蛋白水平的表达都有明显减少(P<0.01),降至第1代细胞的30％左右;GAG的含量也降至40％左右。结论兔角膜基质细胞经历长期体外培养后,细胞增殖能力和胞外基质表达水平显著下降,逐渐丧失原有的功能。但作为构建组织工程化角膜的种子细胞,在它的生物学特性未发生改变之前,经3次传代培养,获取的细胞量达到组织块消化所得细胞的240倍左右,已足以用于构建之用。

关键词：角膜基质细胞细胞培养生物学特性细胞外基质细胞增殖 MTT比色法

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重组hBMP7基因转染成纤维细胞及其表达

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上海第二医科大学学报 2004年第4期24卷 238-241页

作者：陈付国祝联刘德莉魏娴刘天一王敏柴岗王晓云周广东夏万尧崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

目的探讨重组骨形态发生蛋白-7腺病毒载体(AdCMV-BMP7)在人真皮成纤维细胞获得稳定表达的可行性。方法重组腺病毒载体AdCMV-BMP7经293细胞包装、扩增后,转染人真皮成纤维细胞。转染48 h后以免疫组织化学、RT-PCR等方法检测hBMP7基因在... 详细信息

目的探讨重组骨形态发生蛋白-7腺病毒载体(AdCMV-BMP7)在人真皮成纤维细胞获得稳定表达的可行性。方法重组腺病毒载体AdCMV-BMP7经293细胞包装、扩增后,转染人真皮成纤维细胞。转染48 h后以免疫组织化学、RT-PCR等方法检测hBMP7基因在人真皮成纤维细胞内的表达情况。结果在合适的滴度下,重组腺病毒载体AdCMV-BMP7对成纤维细胞的增殖能力无明显影响。转染48 h后免疫细胞化学显示已转染AdCMV-BMP7的成纤维细胞内有大量的hBMP7表达,RT-PCR也检测到特异的hBMP7基因片段的表达。结论重组腺病毒载体AdCMV-BMP7能够被转导入成纤维细胞内,并稳定表达hBMP7。

关键词：骨形态发生蛋白-7 腺病毒转基因技术成纤维细胞组织工程 RT-PCR

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软骨细胞老化特征及机制的研究进展

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上海第二医科大学学报 2004年第4期24卷 322-324,F003页

作者：张艳柴岗刘伟崔磊曹谊林上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

软骨细胞的老化是一个极其复杂的过程,其特征包括:细胞不可逆的生长停滞于G1期;老化相关β-半乳糖苷酶的表达;端粒长度缩短;软骨细胞分化特征的改变。目前认为其机制为基因表达的程序性或减进性改变,包括肿瘤抑制基因p53和pRb等在细胞... 详细信息

软骨细胞的老化是一个极其复杂的过程,其特征包括:细胞不可逆的生长停滞于G1期;老化相关β-半乳糖苷酶的表达;端粒长度缩短;软骨细胞分化特征的改变。目前认为其机制为基因表达的程序性或减进性改变,包括肿瘤抑制基因p53和pRb等在细胞生长停滞中的作用;端粒结合蛋白和端粒酶对端粒长度的调节;细胞骨架蛋白的重组使软骨细胞形态的变化;基质降解酶类表达增加以及各种细胞因子的变化对软骨细胞代谢的影响。

关键词：软骨细胞细胞老化细胞增殖去分化 β-半乳糖苷酶肿瘤抑制基因

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生长因子在人肌腱细胞和皮肤成纤维细胞中的表达差异

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上海第二医科大学学报 2004年第4期24卷 271-274页

作者：翟华玲许锋曹德君魏娴崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

目的对几种重要的生长因子在正常人体皮肤、肌腱中的表达差异进行研究。方法体外培养人肌腱细胞和人皮肤成纤维细胞,观察细胞的形态特点;用基因芯片、免疫组化、免疫细胞化学、RT-PCR的方法对肌腱细胞和成纤维细胞的几种生长因子进行... 详细信息

目的对几种重要的生长因子在正常人体皮肤、肌腱中的表达差异进行研究。方法体外培养人肌腱细胞和人皮肤成纤维细胞,观察细胞的形态特点;用基因芯片、免疫组化、免疫细胞化学、RT-PCR的方法对肌腱细胞和成纤维细胞的几种生长因子进行检测及比较。结果所测生长因子中除转化生长因子-βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)、类胰岛素生长因子-结合蛋白3(IGF-BP3)外,其余在肌腱细胞和成纤维细胞中的表达均无明显的差异。结论人成纤维细胞与人肌腱细胞的生长因子表达基本相似,通过对皮肤成纤维细胞的某些特性的改造,可以使其成为构建组织工程化肌腱的种子细胞。

关键词：生长因子肌腱细胞皮肤成纤维细胞表达差异组织工程种子细胞

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