检索结果-内蒙古大学图书馆

中华外科杂志 2002年第1期40卷 24-26,T001页

作者：曹谊林蔡霞崔磊商庆新刘伟关文祥上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海第二医科大学组织工程研究重点实验室 210011

目的　为制成含表皮细胞与成纤维细胞的双层皮肤替代物 ,直接用于修复全层皮肤缺损。方法　选用长枫杂交仔猪 10只 ,酶消化法获取皮肤表皮细胞与成纤维细胞 ,将原代培养处于对数生长期的表皮细胞、成纤维细胞分别与 3 0 %氧化异丙烯F 1... 详细信息

目的　为制成含表皮细胞与成纤维细胞的双层皮肤替代物 ,直接用于修复全层皮肤缺损。方法　选用长枫杂交仔猪 10只 ,酶消化法获取皮肤表皮细胞与成纤维细胞 ,将原代培养处于对数生长期的表皮细胞、成纤维细胞分别与 3 0 %氧化异丙烯F 12 7混匀成细胞悬液后 ,种植聚羟基乙酸(polyglycolicacid ,PGA)形成细胞生物材料复合物 ,用于修复自体动物背部直径 4cm全层皮肤缺损 ,以单纯生物材料 (PGA +氧化异丙烯 )充填的创面作为对照组。修复术后 1,2 ,4 ,8周取材 ,通过组织学和基底膜特殊染色等方法对新生组织进行评价。结果　第 1周新生组织即出现表皮与真皮 2层结构 ,特殊染色观察到连续的基底膜。第 2周表皮与真皮均较前增厚。修复后第 8周组织工程化皮肤的形态结构均与正常皮肤相似。对照组则无皮肤形成 ,仅见大量肉芽组织。结论　应用组织工程技术 ,以PGA +氧化异丙烯为表皮细胞。

关键词：人工皮肤皮肤移植成纤维细胞动物实验

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骨髓间质干细胞向软骨细胞表型定向诱导分化的实验研究

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中华整形外科杂志 2002年第1期18卷 12-14页

作者：夏万尧商庆新崔磊徐蓉丁小邦曹谊林上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科

目的　研究体外培养的猪骨髓间质干细胞 (BoneMarrowStemCells,MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型转化 ,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性。方法　取成年崇明长枫杂交猪髂骨骨髓 5ml,在低糖DMEM完全培养液培养 2周 ,传... 详细信息

目的　研究体外培养的猪骨髓间质干细胞 (BoneMarrowStemCells,MSCs)在特定培养液作用下向软骨细胞表型转化 ,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性。方法　取成年崇明长枫杂交猪髂骨骨髓 5ml,在低糖DMEM完全培养液培养 2周 ,传代后以高糖DMEM无血清特定培养液诱导 (含胰岛素 2mg L、转铁蛋白 3mg L、丙酮酸 10 0mg L、地塞米松 10 - 7mol L、TGF β110ng ml) ,在相差显微镜和电镜下进行观察 ,免疫组化检测Ⅱ型胶原分泌 ,原位杂交检测Ⅱ型胶原mRNA表达。结果　细胞形态由成纤维样梭形向多角形、多边形转变 ,透视电镜观察见大量扩张粗面内质网、高尔基体、线粒体。诱导培养后第 7,14dⅡ型胶原免疫组化阳性 ,同时原位杂交检测Ⅱ型胶原mRNA表达呈阳性。结论　MSCs在特定培养液诱导下能向软骨细胞表型转化 ,并能分泌软骨特异性基质 ,有可能成为软骨组织工程较理想的种子细胞来源的应用前景。

关键词：组织工程骨髓间充质干细胞分化软骨细胞表型动物实验

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壳聚糖作为组织工程软骨支架的实验研究

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中华显微外科杂志 2002年第1期25卷 34-37页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春钟伟 200011 上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科复旦大学高分子科学系

目的　探索壳聚糖作为组织工程技术中软骨细胞培养支架的可行性。　方法　消化分离猪耳郭软骨细胞 ,接种于自制壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架上培养 ,从光镜和扫描电镜观察其亲水性和对细胞吸附力 ,MTT检测软骨细胞在壳聚糖、壳聚... 详细信息

目的　探索壳聚糖作为组织工程技术中软骨细胞培养支架的可行性。　方法　消化分离猪耳郭软骨细胞 ,接种于自制壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架上培养 ,从光镜和扫描电镜观察其亲水性和对细胞吸附力 ,MTT检测软骨细胞在壳聚糖、壳聚糖胶原上的黏附率及壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架对细胞的增殖、功能的影响。　结果　软骨细胞能够在壳聚糖、壳聚糖胶原支架上黏附、伸展、增殖和发挥正常功能 ,MTT测得细胞黏附率分别为 81 2 5 %和 87 5 0 % ,MTT测得软骨细胞在壳聚糖胶原支架中的增殖能力较强。　结论　壳聚糖、壳聚糖胶原复合多孔支架与软骨细胞具有较好的相容性 ,壳聚糖胶原复合多孔支架更适合作为软骨组织工程中的细胞培养支架。

关键词：组织工程软骨细胞壳聚糖支架细胞培养

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小鼠胚胎干细胞分化为血管内皮细胞的永生化研究

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实验生物学报 2002年第3期35卷 218-228页

作者：沈干丛笑倩杜忠伟吴春芳刘晓音刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所上海200031

本文探讨了小鼠胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的血管内皮细胞永生化。在体外培养系统中,以维甲酸(RA)和转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)的拟胚体(EB)分化为“圆形细胞”和由这些“圆形细胞”组成的血管样结构。经光... 详细信息

本文探讨了小鼠胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的血管内皮细胞永生化。在体外培养系统中,以维甲酸(RA)和转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)的拟胚体(EB)分化为“圆形细胞”和由这些“圆形细胞”组成的血管样结构。经光学和扫描电镜及免疫荧光等法分析检测,证明组成血管样结构的细胞具有专一性vWF荧光染色,表明是血管内皮样细胞。利用脂质体将人端粒酶催化亚基逆转录酶(hTERT)基因转染诱导分化中的“圆形细胞”。应用Dot-blot,RT-PCR,Western blot及免疫组织化学等方法分析、观察和证明了诱导分化的组成血管样结构的园形细胞和被hTERT基因转染的“圆形”细胞的形态和生物学特性。结果表明,携带hTERT基因的从ES细胞分化来的圆形细胞在体外可大量增殖,持续传代,95%具有血管内皮细胞的一些特有标志和管道化生长特性。因此,通过人端粒酶基因的转染途径可解决由ES细胞诱导分化而来的内皮细胞扩增和永生化问题,为构建组织工程化血管及其它人工血管的内皮化提供种子细胞来源打下基础。

关键词：小鼠胚胎干细胞分化血管内皮细胞永生化 ES细胞诱导分化组织工程人端粒酶催化亚基逆转录酶

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肌腱构建与组织工程技术研究新进展

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生物医学工程与临床 2002年第3期6卷 166-169页

作者：曹德君曹谊林刘伟上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

本文综述组织工程化肌腱领域中取得的多项成果 ,如肌腱组织替代物、种子细胞、组织工程用生物材料及转基因技术应用研究等。论述建立生长、增殖可调的肌腱种子细胞系可行性。

关键词：组织工程技术肌腱组织替代物研究进展

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小鼠胚胎干细胞分化为血管内皮细胞的永生化研究

小鼠胚胎干细胞分化为血管内皮细胞的永生化研究

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中国细胞生物学学会医学细胞生物学、免疫细胞生物学和发育生物学专业委员会学术研讨会

作者：沈干丛笑倩杜忠伟吴春芳刘晓音刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所上海上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室

探讨了小鼠胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的血管内皮细胞永生化。在体外培养系统中,以维甲酸(RA)和外源重组转化生长因子-βl(TGF-β1)诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)的拟胚体(EB)分化为“圆形细胞”和由这些“圆形细胞”组成的血管样结构。... 详细信息

探讨了小鼠胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的血管内皮细胞永生化。在体外培养系统中,以维甲酸(RA)和外源重组转化生长因子-βl(TGF-β1)诱导小鼠胚胎干细胞(ES细胞)的拟胚体(EB)分化为“圆形细胞”和由这些“圆形细胞”组成的血管样结构。经光学和扫描电镜及免疫荧光等法分析检测,证明组成血管样结构的细胞具有专一性的vWF荧光染色,表明是血管内皮样细胞。利用脂质体将人端粒酶催化亚基逆转录酶(hTERT)基因转染诱导分化中的“圆形细胞”。应用Dot-blot,RT-PCR,Western blot及免疫组织化学等方法分析、观察和证明了诱导分化的、组成血管样结构的园形细胞和被hTERT基因转染的“圆形”细胞的形态和生物学特性。结果表明,携带hTERT基因的、从ES细胞分化来的圆形细胞在体外可大量增殖,持续传代,95%以上的细胞具有血管内皮细胞特有的一些标志和管道化生长特性。因此,通过人端粒酶基因的转染途径可解决由ES细胞诱导分化而来的内皮细胞扩增和永生化问题,为构建组织工程化血管及其它人工血管的内皮化提供种子细胞来源打下基础。

关键词：小鼠胚胎干细胞永生化基因转染

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应用可注射性生物材料再生自体组织工程化软骨组织的实验研究

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中华整形外科杂志 2001年第5期17卷 302-305页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春刘德莉徐蓉吴娟娟上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究中心重点实验室上海200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海200011

目的　探讨自体组织工程化软骨在动物自体内形成的最佳细胞浓度 ,为临床应用提供理论依据。方法　取贵州香猪部分耳廓软骨组织 ,于体外消化分离软骨细胞 ,与可注射性生物材料PluronicF12 7混合形成复合物 ,浓度为 10 ,2 0 ,3 0 ,4 0 ,5 ... 详细信息

目的　探讨自体组织工程化软骨在动物自体内形成的最佳细胞浓度 ,为临床应用提供理论依据。方法　取贵州香猪部分耳廓软骨组织 ,于体外消化分离软骨细胞 ,与可注射性生物材料PluronicF12 7混合形成复合物 ,浓度为 10 ,2 0 ,3 0 ,4 0 ,5 0 ,60和 70× 10 6 ml,并将其接种于猪自体腹外侧壁皮下 ,于第 6周取材 ,分别进行大体、组织学、氨基糖氨多糖 (GAG)和Ⅱ型胶原含量检测 ,对再生软骨组织进行评价。结果　细胞浓度为 5 0× 10 6 ml时 ,再生的软骨组织 ,软骨细胞均匀分布 ,包埋在软骨陷窝内 ,与正常软骨组织有相似的组织学特征。而细胞浓度为 10× 10 6 ml、3 0× 10 6 ml则形成软骨组织不完全 ,软骨细胞散在分布 ,并被未降解的生物材料分隔。对所有样本称重 ,在 3 0～ 110mg之间 ,各样本GAG含量在 5 .8%～ 9.2 %之间 ,正常耳软骨含量为 9.2 %。WesternBlot证实所有样本都有Ⅱ型胶原。结论　利用组织工程技术可在具有免疫功能的自体动物内形成软骨组织 ,并确定了软骨组织形成的最佳细胞接种浓度为 5 0× 10 6 ml。

关键词：软骨细胞软骨组织组织工程生物材料软骨修复动物实验

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角膜基质细胞-PGA生物支架复合物体外培养研究

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眼科研究 2001年第4期19卷 308-311页

作者：胡晓洁商庆新曹谊林上海市第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室 200011

目的　　研究角膜基质细胞与ＰＧＡ亲和力，为组织工程技术构建角膜提供重要的理论依据和参数。方法体外分离获得角膜基质细胞，经培养扩增后接种于ＰＧＡ，并对细胞－生物材料复合物进行体外培养，观察细胞生长代谢。应用ＭＴＴ技术测... 详细信息

目的　　研究角膜基质细胞与ＰＧＡ亲和力，为组织工程技术构建角膜提供重要的理论依据和参数。方法体外分离获得角膜基质细胞，经培养扩增后接种于ＰＧＡ，并对细胞－生物材料复合物进行体外培养，观察细胞生长代谢。应用ＭＴＴ技术测定角膜基质细胞与ＰＧＡ的黏附率。结果　角膜基质细胞能够在ＰＧＡ中黏附、伸展和分泌基质，ＭＴＴ测得细胞黏附率为７１．４０％。结论　　角膜基质细胞与ＰＧＡ具有较好的亲和力，ＰＧＡ可以作为构建角膜的生物材料。

关键词：组织工程角膜基质细胞生物支架聚羟基乙酸角膜疾病实验研究

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同种异体组织工程化软骨组织形成的初步研究

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中华整形外科杂志 2000年第5期16卷 264-266页

作者：夏万尧曹谊林商庆新刘彦春王倬崔磊王健上海市第二医科大学组织工程研究中心 200011 上海市组织工程研究重点实验室 200011 上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科 200011

探讨同种异体组织工程化软骨在动物体内形成。方法　取怀孕１００ｄ胚胎羊的关节软骨经体外消化分离软骨细胞，与可吸收生物材料ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ１２７混合形成细胞──生物材料复合物，将细胞──生物材料复合物注射到异体羊腹壁皮... 详细信息

探讨同种异体组织工程化软骨在动物体内形成。方法　取怀孕１００ｄ胚胎羊的关节软骨经体外消化分离软骨细胞，与可吸收生物材料ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ１２７混合形成细胞──生物材料复合物，将细胞──生物材料复合物注射到异体羊腹壁皮下，每隔２周取材，连续半年对所取标本进行大体观察、称重，并作ＨＥ、ＳａｆｒａｎｉｎＯ、Ｍａｓｓｏｎ’ｓｔｒｉｃｈｒｏｍｅ染色，对再生的软骨组织进行评价。结果在同种异体动物体内能形成软骨组织，所形成软骨组织的氨基多糖和胶原分布与正常羊关节软骨组织有相似的组织学特性。组织学结果可见第２，４周的软骨组织有一定程度的免疫排斥反应和炎症细胞浸润。第６周后软骨组织基本成熟，免疫反应减轻，但未消退。结论　应用组织工程技术可在同种异体动物体内再生软骨组织，再生的组织周围存在一定程度的免疫反应，随接种时间的延长逐渐减弱。

关键词：软骨细胞软骨组织同种异体组织工程化复合物

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组织工程研究中的胚胎干细胞问题

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世界科技研究与发展 2000年第6期22卷 54-59页

作者：曹谊林汪铮李晓红商庆新上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程研究重点实验室上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海200011

胚胎干细胞研究是组织工程基本科学问题中一个重要的组成部分。本文回顾了近年来胚胎干细胞领域的研究进程 ,尤其是人体胚胎干细胞研究的最新成果 ;提出了组织工程中“治疗性克隆”的战略目标。并且确立了未来人体胚胎干细胞研究解决组... 详细信息

胚胎干细胞研究是组织工程基本科学问题中一个重要的组成部分。本文回顾了近年来胚胎干细胞领域的研究进程 ,尤其是人体胚胎干细胞研究的最新成果 ;提出了组织工程中“治疗性克隆”的战略目标。并且确立了未来人体胚胎干细胞研究解决组织工程种子细胞问题的具体步骤 ;指出了每项具体研究中所要解决的关键问题。

关键词：组织工程胚胎干细胞治疗性克隆核移植

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