检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究与临床康复 2008年第14期12卷 2721-2726页

作者：雷万军李秉哲曹谊林 Karl Ulrich Kainero 彭淑鸽崔磊周宁生河南科技大学医学技术及工程学院河南省洛阳市471003 上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究与开发中心上海市200011 GKSS Research Center Institute for Materials ResearchCenter for Magnesium Technology D-21502 Geesthacht Germany

学术背景:虽然已经有应用组织工程骨修复颅颌面骨缺损的报道,但因其缺乏植入早期的力学强度,尚不能应用在四肢负重部位修复骨缺损。目的:探讨负重组织工程骨的新型支架的仿生力学设计、多孔纯镁支架的仿生形态学设计和多孔纯镁支架仿人... 详细信息

学术背景:虽然已经有应用组织工程骨修复颅颌面骨缺损的报道,但因其缺乏植入早期的力学强度,尚不能应用在四肢负重部位修复骨缺损。目的:探讨负重组织工程骨的新型支架的仿生力学设计、多孔纯镁支架的仿生形态学设计和多孔纯镁支架仿人骨材料表面涂层的仿生技术,以及其他负重组织工程骨候选支架仿生技术和外科人工金属植入物仿生表面涂层技术的发展现状。检索策略:应用计算机检索EI数据库1899/2007与仿生材料相关的文献,并以ELSERVIER、Springer、万方外文文献数据库以及CHKI中文数据库文献索引为辅助,英文检索词"Biomimetic materials",中文检索词"仿生学"。纳入与仿生学、仿生力学、仿生材料及技术相关的文章。文献评价:共得到3501个索引,选择35篇完全符合标准的文献进行综述。其中有关仿生学1篇,生物力学1篇,组织工程用仿生材料1篇,负重组织工程骨的新型支架3篇,医学用金属材料的仿生表面涂层技术12篇,医学用生物陶瓷的仿生表面涂层技术1篇,医学用生物高分子聚合物的仿生涂层技术4篇,纳米生物有机物大分子和生物无机物分子的自组装6篇,生物材料的体积修饰或改性2篇。资料综合:①为解决负重组织工程骨早期力学强度不足问题,仿生涂层的多孔纯镁新型支架是临床试用前期研究最佳候选方案,仿生涂层的多孔纯钛支架,可能作为上述研究的其他选择。②多孔双相生物陶瓷支架压缩强度较低,可能不足以解决问题,利用仿生技术对整体修饰或改性可能是有前景的。③多孔生物高分子聚合物支架,可以利用仿生技术对整体修饰或改性以改善力学性能,但是效果非常有限。结论:到目前为止还不能解决负重组织工程骨的早期力学性能不足问题。外科植入物金属,以及多孔生物金属、生物陶瓷、生物高分子聚合物等组织工程骨支架表面,均可利用仿生涂层技术进行表面修饰或改性。

关键词：负重组织工程骨多孔纯镁支架仿生涂层仿生技术生物材料

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体外诱导人骨髓间充质干细胞向血管平滑肌细胞分化的实验研究

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中华整形外科杂志 2007年第4期23卷 335-339页

作者：吴莹琛崔磊李纲尹烁高永娟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科 200011 上海组织工程研究与开发中心

目的应用血小板衍生生长因子BB（platelet-derived growthfactor BB,PDGF-BB）,体外诱导人骨髓间充质干细胞（human bone marrowmesenchymal stemcells,hBMSCs）向血管平滑肌细胞表型分化,探讨该方法的可行性及诱导细胞作为组织工程血... 详细信息

目的应用血小板衍生生长因子BB（platelet-derived growthfactor BB,PDGF-BB）,体外诱导人骨髓间充质干细胞（human bone marrowmesenchymal stemcells,hBMSCs）向血管平滑肌细胞表型分化,探讨该方法的可行性及诱导细胞作为组织工程血管平滑肌种子细胞的可行性。方法抽取健康成人志愿者骨髓,经密度梯度离心分离得单个核细胞,PDGF-BB（20ng/ml）诱导hBMSCs向血管平滑肌样细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）分化,观察细胞形态变化。免疫荧光检测细胞内血管平滑肌肌动蛋白α（vascular smooth muscleα-actin,SMα-actin）,血管平滑肌钙结合蛋白（vascular smoothmuscle calponin,SMcalponin）,血管平滑肌肌球蛋白重链（vascular smooth muscle myosin heavy chain,SMMHC）和细胞血管平滑肌钙结合相关蛋白（smooth muscle22α,SM22α）表达情况;反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测诱导后血管平滑肌细胞SMα-actin,SMcalponin,SMMHC和SM22α的mRNA表达。Western印记检测SM22α的表达。流式细胞分析技术（fluorescence activated cell sorter,FACS）分析诱导后细胞内SMα-actin,SMcalponin,SMMHC的表达。结果PDGF-BB20ng/ml诱导后可见单层培养的细胞形态呈“成纤维细胞样”。免疫荧光检测示SMα-actin,SMcalponin,SMMHC,SM22α表达阳性;RT-PCR检测SMα-actin,SMcalponin,SMMHC,SM22α的mRNA阳性表达。Western印迹检测SM22α的表达为阳性。FACS分析表明诱导后,SMα-actin,SMcalponin,SMMHC表达均增高,与未诱导组比较差异有统计学意义（P〈0.05,n=3）。结论人骨髓间充质干细胞在PDGF-BB的诱导下可向血管平滑肌细胞表型分化,有望成为血管组织工程血管平滑肌种子细胞的来源。

关键词：人骨髓间充质干细胞血管平滑肌细胞分化血小板衍生生长因子BB

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脂肪来源细胞体外增殖规律及定向诱导分化研究

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分子细胞生物学报 2006年第2期39卷 152-162页

作者：张英周广东杨平尹烁刘德莉崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海组织工程研究中心上海200011

脂肪组织由整形外科吸脂术获得（19例，31．5±5．8岁）。酶消化法分离抽吸物中细胞，体外扩增至第10代，测定细胞生长曲线、累计倍增数目，明确其体外生长规律和增殖能力：通过对表面抗原CD29、CD105、CD106、CD166、CD49d、CD34、... 详细信息

脂肪组织由整形外科吸脂术获得（19例，31．5±5．8岁）。酶消化法分离抽吸物中细胞，体外扩增至第10代，测定细胞生长曲线、累计倍增数目，明确其体外生长规律和增殖能力：通过对表面抗原CD29、CD105、CD106、CD166、CD49d、CD34、CD31、3G5等的检测分析脂肪来源细胞的群体组成；分别向软骨、骨、脂肪定向诱导，进一步明确该细胞群体定向分化能力。实验表明．每300ml脂肪抽吸物平均可获得5×10^7个有核细胞，体外扩增10代，平均每代倍增数目为1．59±0．224，累计倍增数目为15．53。流式细胞学及免疫细胞化学检测显示，干细胞相关抗原CD29、CD105、CD106、CD166等表达率均〉60％，但与造血系相关的CD34、CD31表达率也分别达到7．3％、29．2％。ADC向软骨诱导可检测到Ⅱ型胶原表达；向成骨诱导可见矿化结节形成．并可检测到AKP、Osteonectin基因表达；向脂肪诱导可检测到PPARr2、GLU-4、Leptin基因表达．细胞内有脂滴形成。脂肪来源的细胞获得量大，体外增殖能力强，并含有具有多向分化潜能细胞．有可能作为组织构建的种子细胞。

关键词：脂肪干细胞增殖分化潜能体外

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组织工程技术修复兔气管软骨缺损的实验研究

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中华胸心血管外科杂志 2006年第1期22卷 45-48页

作者：肖开颜周广东刘伟崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海第二医科大学组织工程研究中心 200011

目的探讨以兔耳廓软骨细胞（auricular chondrocytes）为种子细胞,利用组织工程技术修复其自体气管软骨缺损的可行性.方法取兔耳廓软骨,以Ⅱ型胶原酶消化分离软骨细胞,体外培养并扩增至第2代后,接种于聚羟基乙酸（PGA）纤维支架（3 cm&#... 详细信息

目的探讨以兔耳廓软骨细胞（auricular chondrocytes）为种子细胞,利用组织工程技术修复其自体气管软骨缺损的可行性.方法取兔耳廓软骨,以Ⅱ型胶原酶消化分离软骨细胞,体外培养并扩增至第2代后,接种于聚羟基乙酸（PGA）纤维支架（3 cm×2 cm,约60mg）,形成细胞-材料复合物.体外培养7 d后,细胞-材料复合物环行包裹于直径为0.7cm的硅胶管外表面,置于裸鼠皮下.6周后取出,并将形成的管状软骨用于修复兔自体约1.5cm长的节段性气管软骨全层缺损.结果兔耳廓软骨细胞有较强的体外增殖能力,扩增至第2代时即可满足组织构建所需要的细胞量.软骨细胞种植于PGA后,细胞和材料黏附良好,细胞外基质分泌旺盛.置于裸鼠皮下6周后,细胞-材料复合物可形成弹性、韧性良好的管状软骨;其大体外观,组织学结构均与兔自体气管软骨相似.修复兔气管缺损后,组织工程化气管和周围组织愈合良好,实验动物可自主呼吸,成活1～28d不等,平均12.3d,死亡原因多为痰液积存和气管内肉芽增生.结论以兔耳廓软骨细胞与PGA相复合,利用组织工程学技术可以形成大体外观、组织学结构均与兔自体气管软骨相似的“组织工程化气管”,并能用于修复兔自体气管全层缺损.

关键词：气管组织工程软骨细胞兔气管软骨缺损

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猪气管上皮细胞的分离、培养和鉴定

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中华胸心血管外科杂志 2006年第5期22卷 326-328页

作者：肖开颜周广东刘伟崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科组织工程研究中心 200011

目的探索猪气管上皮细胞体外适宜的生长、增殖条件,以期为组织工程化气管内壁上皮化提供种子细胞。方法无菌切取猪颈段气管,细菌蛋白酶消化。以明胶作为铺层,接种、培养。待细胞贴壁后,进行光镜观察、广谱角蛋白免疫组化检测、免疫荧光... 详细信息

目的探索猪气管上皮细胞体外适宜的生长、增殖条件,以期为组织工程化气管内壁上皮化提供种子细胞。方法无菌切取猪颈段气管,细菌蛋白酶消化。以明胶作为铺层,接种、培养。待细胞贴壁后,进行光镜观察、广谱角蛋白免疫组化检测、免疫荧光鉴定。结果光镜观察可见细胞呈铺路石样生长。角蛋白检测和免疫荧光检测均呈阳性,而阴性对照组和空白对照组呈阴性。结论以明胶作为铺层可以培养出活力较好、纯度高的气管上皮细胞。

关键词：生物假体上皮细胞明胶气管

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皮肤成纤维细胞构建组织工程肌腱的实验研究

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中华医学杂志 2006年第6期86卷 416-418页

作者：陈兵刘伟邓丹许锋崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究中心 200011

近年来,研究者们应用类似于骨髓基质干细胞的细胞作为组织工程肌腱的种子细胞[1-3],未获明显进展.皮肤成纤维细胞和肌腱细胞均来源于中胚层,细胞形态相似.如果成纤维细胞能取代肌腱细胞,作为种子细胞应用于肌腱组织工程则可望解决种子... 详细信息

近年来,研究者们应用类似于骨髓基质干细胞的细胞作为组织工程肌腱的种子细胞[1-3],未获明显进展.皮肤成纤维细胞和肌腱细胞均来源于中胚层,细胞形态相似.如果成纤维细胞能取代肌腱细胞,作为种子细胞应用于肌腱组织工程则可望解决种子细胞缺乏的难题.作者曾应用成纤维细胞作为种子细胞修复肌腱缺损取得初步成功[4],但缺乏长期观察结果.本研究旨在长期观察皮肤成纤维细胞构建的组织工程肌腱,并与肌腱细胞作为种子细胞的组织工程肌腱进行比较。

关键词：皮肤成纤维细胞组织工程肌腱细胞构建实验研骨髓基质干细胞种子细胞肌腱细胞肌腱组织工程细胞形态细胞修复

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应用组织工程技术构建角膜上皮组织的研究进展

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国际生物医学工程杂志 2006年第5期29卷 285-288页

作者：张艳青张文杰曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究与开发中心

角膜上皮功能异常所导致的角膜盲,在疾病早期往往仅需进行角膜上皮移植即可治愈。组织工程技术发展迅速,应用该技术构建的组织工程化角膜上皮层可成为角膜上皮移植的供体来源。综合探讨组织工程角膜上皮构建时种子细胞、载体材料的选择... 详细信息

角膜上皮功能异常所导致的角膜盲,在疾病早期往往仅需进行角膜上皮移植即可治愈。组织工程技术发展迅速,应用该技术构建的组织工程化角膜上皮层可成为角膜上皮移植的供体来源。综合探讨组织工程角膜上皮构建时种子细胞、载体材料的选择和构建方法。

关键词：角膜上皮组织工程构建

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干细胞诱导形成软骨细胞研究进展

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国际生物医学工程杂志 2006年第3期29卷 138-141页

作者：谢峰张文杰曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究与开发中心 200011

组织工程技术构建软骨需要大量的软骨细胞,成熟的软骨细胞扩增能力有限,难以满足组织构建需要。干细胞,包括胚胎干细胞、成体干细胞,均具有强大的自我更新能力及多向分化潜能。在适当的诱导条件下,这些干细胞均可被诱导分化为软骨细胞,... 详细信息

组织工程技术构建软骨需要大量的软骨细胞,成熟的软骨细胞扩增能力有限,难以满足组织构建需要。干细胞,包括胚胎干细胞、成体干细胞,均具有强大的自我更新能力及多向分化潜能。在适当的诱导条件下,这些干细胞均可被诱导分化为软骨细胞,从而满足组织工程需求。

关键词：胚胎干细胞骨髓基质干细胞脂肪干细胞软骨细胞分化

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b-FGF和TGF-β1对体外培养的软骨细胞增殖的影响

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中国美容医学 2006年第6期15卷 622-624页

作者：丁小邦高建华夏万尧陈兵周广东崔磊刘伟曹谊林南方医科大学附属南方医院整形外科广东广州510515 上海第二医科大学附属第九人民医院整复外科上海组织工程研究开发中心

目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)对体外培养的软骨细胞增殖的影响。方法:细胞取自猪耳弹性软骨,体外培养原代至第6代软骨细胞,将培养液中加入TGF-β1或/和b-FGF作用于软骨细胞,并用MTT比色分析法对... 详细信息

目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)对体外培养的软骨细胞增殖的影响。方法:细胞取自猪耳弹性软骨,体外培养原代至第6代软骨细胞,将培养液中加入TGF-β1或/和b-FGF作用于软骨细胞,并用MTT比色分析法对其增殖行为进行分析,探讨两种因子对软骨细胞增殖行为的影响。结果:b-FGF明显促进原代至第3代软骨细胞的增殖,并逐渐减弱,对第4代细胞无增殖作用,TGF-β1仅促进原代软骨细胞的增殖,TGF-β1和b-FGF联合应用,其刺激细胞增殖的作用明显低于b-FGF单一作用。结论:b-FGF显著促进体外培养的软骨细胞的增殖,主要作用于原代至第2代软骨细胞,明显强于b-FGF和TGF-β1联合应用。

关键词：转化生长因子-β1(TGF-β1) 碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF) 软骨细胞

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重组BMP7腺病毒的构建及转染骨髓基质干细胞后的表达

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中国生物医学工程学报 2005年第2期24卷 245-253页

作者：祝联刘伟刘德莉吴娟娟王丹茹崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究中心上海200011

根据Clonetech公司的腺病毒载体构建流程 ,原核表达载体pBlue- BMP7经一系列特定的限制性内切酶酶切 ,重组成BMP7的腺病毒载体 ,并转染 2 93细胞进行大量扩增、滴度测定。重组Adeno- BMP7经限制性内切酶PI SceⅠ和Ⅰ CeuⅠ双酶切获得B... 详细信息

根据Clonetech公司的腺病毒载体构建流程 ,原核表达载体pBlue- BMP7经一系列特定的限制性内切酶酶切 ,重组成BMP7的腺病毒载体 ,并转染 2 93细胞进行大量扩增、滴度测定。重组Adeno- BMP7经限制性内切酶PI SceⅠ和Ⅰ CeuⅠ双酶切获得BMP7基因片段 ,PCR扩增得到特异的扩增片段 ,表明重组的Adeno-BMP7载体构建成功 ,其中携带有目的基因BMP7cDNA片段。Adeno- Lac- Z的体外转染骨髓基质干细胞 (BMSCs) ,染色表明转染率可达90 %以上 ;RT- PCR、免疫组化证明Adeno -BMP7转染BMSCs后BMP7在基因和蛋白水平上均有表达 ;转染Adeno- BMP7后的BMSCs细胞悬液裸鼠肌肉内注射后 ,x光片和组织学观察都表明BMP7转染可明显促进新骨的形成 ,与没转染Adeno -BMP7的BMSCs有显著差异。

关键词：重组腺病毒骨髓基质干细胞骨形成蛋白7

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