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中国组织工程研究的开拓者——记国家“973”组织工程首席科学家曹谊林教授

中华损伤与修复杂志（电子版） 2012年第3期7卷 1-3页

作者：吕晓杰应颖中国人民解放军第二炮兵总医院北京100088 上海第二医科大学第九人民医院上海市组织工程研究重点实验室200235

本刊设立专家风采栏目,旨在宣传老一代损伤与修复专家献身于祖国医学事业、造福人民的奉献精神,高尚的医德,诲人不倦的工作作风,勇攀医学高峰、走创新之路的崇高意识。学习他们做人、做事的高尚情操和尊师育人的伟大胸怀,在构建社会主... 详细信息

本刊设立专家风采栏目,旨在宣传老一代损伤与修复专家献身于祖国医学事业、造福人民的奉献精神,高尚的医德,诲人不倦的工作作风,勇攀医学高峰、走创新之路的崇高意识。学习他们做人、做事的高尚情操和尊师育人的伟大胸怀,在构建社会主义和谐社会的新长征道路上以他们为榜样,为祖国、为人民做出新的贡献。

关键词：中国组织工程研究国家"973"组织工程科学家曹谊林教授

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9例应用组织工程骨修复颅骨缺损患者的护理

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中华护理杂志 2010年第7期45卷 660-661页

作者：唐军刘广鹏李新庆上海交通大学医学院附属第九人民医院急诊科上海市200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院组织工程重点实验室上海市200011 南京医科大学附属常州第二人民医院整形外科

总结了9例自体骨髓基质干细胞组织工程骨修复颅骨缺损的护理经验。术前做好心理护理,术中护理配合恰当,术后重点观察切口渗血、渗液情况,保持引流管通畅,预防各种并发症的发生。6例获得颅骨缺损的良好修复,2例发生不同程度的组织工程骨... 详细信息

总结了9例自体骨髓基质干细胞组织工程骨修复颅骨缺损的护理经验。术前做好心理护理,术中护理配合恰当,术后重点观察切口渗血、渗液情况,保持引流管通畅,预防各种并发症的发生。6例获得颅骨缺损的良好修复,2例发生不同程度的组织工程骨吸收现象,1例术后3个月失去随访。

关键词：颅脑损伤骨髓基质干细胞组织工程干细胞移植护理

来源：评论

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自体骨髓基质干细胞在齿槽裂骨缺损修复中的应用

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中华整形外科杂志 2006年第6期22卷 409-411页

作者：柴岗张艳胡晓洁王敏刘伟崔磊曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院整形外科上海市组织工程研究重点实验室

目的探讨人自体骨髓基质干细胞（human bone marrow stromal cells，hBMSCs）在治疗齿槽裂骨缺损中的可行性。方法2002至2005年，选择齿槽裂骨缺损患者7例（单侧6例，双侧1例），以患者自体骨髓基质干细胞为种子细胞，部分脱钙骨（partl... 详细信息

目的探讨人自体骨髓基质干细胞（human bone marrow stromal cells，hBMSCs）在治疗齿槽裂骨缺损中的可行性。方法2002至2005年，选择齿槽裂骨缺损患者7例（单侧6例，双侧1例），以患者自体骨髓基质干细胞为种子细胞，部分脱钙骨（partly demineralized bone matrix，pDBM）为支架材料构建组织工程骨，治疗齿槽裂骨缺损。从患者髂前上棘穿刺取骨髓，密度梯度离心法分离hBMSCs，经体外成骨诱导和扩增至第3代。将诱导的hBMSCs，复合部分脱钙骨体外培养1周后，手术回植骨缺损区。分别于术后1、3、6、12、24、36个月进行临床外形和三维CT检查随访。结果6例患者头部三维CT检查，结果示术后3个月能形成组织工程化骨，并修复骨组织缺损。术后1～3年的随访表明组织工程骨稳定存在，无明显骨吸收现象，临床治疗效果稳定。1例患者（双侧齿槽裂）植入物外露感染。结论以自体hBMSCs为种子细胞，部分脱钙骨为支架材料，利用组织工程技术可在人体内形成稳定的组织工程化骨组织，并临床修复齿槽裂骨缺损。

关键词：骨髓基质干细胞骨缺损组织工程齿槽裂

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皮肤组织工程的基础和应用研究

皮肤组织工程的基础和应用研究

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作者：曹谊林杨光辉刘伟崔磊杨军等上海第二医科大学附属第九人民医院上海组织工程研究与开发中心上海市组织工程研究重点实验室

皮肤被覆于人体全身表面，与外界环境直接接触，是解剖学和生理学上的重要边界器官。作为人体最大的器官，皮肤在维持机体内环境的稳定中发挥着极其重要的作用。目前临床上对于皮肤缺损的修复尚缺乏有效的治疗方法，亟需一种有功能的、... 详细信息

标准号: 0602180059

皮肤被覆于人体全身表面，与外界环境直接接触，是解剖学和生理学上的重要边界器官。作为人体最大的器官，皮肤在维持机体内环境的稳定中发挥着极其重要的作用。目前临床上对于皮肤缺损的修复尚缺乏有效的治疗方法，亟需一种有功能的、永久性的皮肤替代物。组织工程为皮肤替代物的构建提供了崭新的途径。该项目从组织工程学科特点出发，通过学科交叉，系统研究了皮肤组织工程的种子细胞、生物材料、细胞-材料相互作用、体外构建技术、修复皮肤缺损、冷冻保存等一系列基本科学问题。在此基础上，开展了组织工程皮肤的临床应用和技术推广。在种子细胞方面，通过对体外培养的人表皮角质形成细胞形态学的观察及计算克隆形成率、群体倍增时间，结合细胞中表皮干细胞相关基因的表达检测等，掌握了人表皮角质形成细胞体外生长扩增规律，确定了适于皮肤组织工程构建的最佳种子细胞。生物材料方面，制备了异体/异种脱细胞真皮基质、具有自主知识产权的壳聚糖-明胶材料，系统评价了皮肤组织工程材料的生物安全性，研究了表皮细胞与生物材料的相互作用，建立了皮肤组织工程生物支架材料的指导性标准。在体外构建方面，进行了组织工程表皮替代物和组织工程双层复合皮肤的体外构建研究。利用壳聚糖、明胶生物材料构建了表皮角质形成细胞转载系统；研究了以聚羟基乙酸、壳聚糖/明胶三维材料为培养支架，用组织工程方法在体外构建双层、有活性皮肤的可行性。组织工程皮肤体外构建技术的成熟为动物皮肤缺损的修复和进一步的临床应用提供了基础。在修复缺损的研究中，成功应用组织工程表皮替代物修复了裸鼠皮肤缺损，应用组织工程复合皮肤修复了大型哺乳动物(猪)全层皮肤缺损：在此基础上进行了组织工程皮肤的初步临床应用，应用组织工程技术成功修复了临床供皮区皮肤缺损，并将组织工程皮肤用于临床增殖性疤痕、色素脱失症的治疗。组织工程皮肤的低温冷冻保存是组织工程皮肤研究中不可或缺的环节，通过研究不同低温保护剂、保护剂浓度以及不同降温速率和复温速率对组织工程皮肤保存的影响，初步建立了组织工程皮肤的低温保存技术和评价体系，为组织工程皮肤的储存、运输提供了可能的解决方案。通过该研究基本解决了组织工程皮肤产业链上一系列关键科学问题，为皮肤组织工程的产业化奠定了坚实基础。

关键词：皮肤缺损修复皮肤替代物皮肤组织工程

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脱细胞细胞外基质及其预构建桥接物修复坐骨神经缺损的实验研究

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中华神经外科杂志 2005年第7期21卷 435-438页

作者：韩克军王者生高景恒周广东崔磊刘伟曹谊林中国医科大学附属第一医院沈阳110001 辽宁省人民医院上海第二医科大学附属第九人民医院组织工程实验室

目的比较脱细胞细胞外基质(acellularextracellularmatris,AECM)同周围神经并行端侧吻合预构建桥接物修复坐骨神经缺损并与自体神经移植后神经再生的效果比较,探讨其修复长段周围神经缺损的可行性。方法将组织工程化技术制备的AECM10mm... 详细信息

目的比较脱细胞细胞外基质(acellularextracellularmatris,AECM)同周围神经并行端侧吻合预构建桥接物修复坐骨神经缺损并与自体神经移植后神经再生的效果比较,探讨其修复长段周围神经缺损的可行性。方法将组织工程化技术制备的AECM10mm、15mm、20mm预构建,形成一种新的神经桥接物并对其进行了观察和动物移植试验。预构建即将AECM与坐骨神经并行端侧吻合2周。结果发现组织工程化技术制备的AECM虽然细胞被完全消蚀,但还具备原有三维结构及生物活性,经预构建后用其修复SD大鼠15mm坐骨神经缺损时,取得了接近自体神经移植的结果,并且没有缺血或炎性表现,无瘢痕形成。结论这种新的AECM预构建桥接物有可能成为自体神经移植的替代材料。

关键词：脱细胞细胞外基质预构建桥接物坐骨神经缺损组织工程

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Tet-on基因表达系统转染胚胎干细胞和调控效应检测

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中国科学（C辑） 2005年第3期35卷 192-195页

作者：王彦丛笑倩刘德莉张文杰崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

以荧光素酶基因为目的基因,应用Lipofectamine介导的瞬时转染方法,将pTet-on调控质粒和pTRE2hyg-luciferase表达质粒共转染小鼠胚胎干细胞,滴加系列浓度的DOX后,观察其诱导效应.结果显示,随DOX浓度升高,荧光素酶的活性也逐渐增强;而未... 详细信息

以荧光素酶基因为目的基因,应用Lipofectamine介导的瞬时转染方法,将pTet-on调控质粒和pTRE2hyg-luciferase表达质粒共转染小鼠胚胎干细胞,滴加系列浓度的DOX后,观察其诱导效应.结果显示,随DOX浓度升高,荧光素酶的活性也逐渐增强;而未转染细胞与转染细胞未加诱导剂时,其RLU值均接近空白对照.表明转染Tet-on基因表达系统的胚胎干细胞对DOX诱导有较好的反应性,目的基因的表达与DOX具有严格的剂量依赖关系.

关键词：基因表达系统调控效应小鼠胚胎干细胞检测荧光素酶基因目的基因转染细胞表达质粒诱导效应依赖关系共转染诱导剂反应性 LU值浓度

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生物反应器构建组织工程化血管的初步研究

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上海第二医科大学学报 2005年第11期25卷 1113-1116页

作者：许志成李宏杨军刘天一刘阳崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海组织工程研究与开发中心上海200011

目的探讨生物反应器内构建具有一定力学强度的组织工程化血管的可行性。方法从6月龄毕格犬的颈总动脉、颈外静脉分别获取平滑肌细胞和内皮细胞,体外培养扩增后,将平滑肌细胞接种于聚羟基乙酸(PGA)上形成细胞—材料复合物,置于生物反应器... 详细信息

目的探讨生物反应器内构建具有一定力学强度的组织工程化血管的可行性。方法从6月龄毕格犬的颈总动脉、颈外静脉分别获取平滑肌细胞和内皮细胞,体外培养扩增后,将平滑肌细胞接种于聚羟基乙酸(PGA)上形成细胞—材料复合物,置于生物反应器内(搏动频率75次/m in;扩张量<5%)培养3周,接种内皮细胞继续培养1周后取新生血管,进行大体观察、组织学和免疫组化检测。结果生物反应器内培养的组织工程化血管大体观察具有良好的弹性,管腔圆;平滑肌纤维成分排列规则且有层次感;免疫组化染色显示,平滑肌细胞呈棕黄色层状排列,内皮细胞于血管内侧呈单层排列。结论应用生物反应器可构建具有良好弹性的组织工程化血管。

关键词：组织工程生物反应器血管

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人胚胎干细胞培养建系及其应用

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细胞生物学杂志 2005年第4期27卷 374-378页

作者：王彦丛笑倩曹谊林上海第二医科大学第九人民医院整形修复外科上海市组织工程研究重点实验室上海200011

简要概述了自1998年首次建立hES细胞系以来近6￣7年国内外的现况、分离培养建系、鉴定标准和冻存技术发展、定向诱导分化及其应用等方面的研究进展。

关键词：人胚胎干细胞内细胞团培养建系定向分化细胞干细胞培养应用建系人胚胎定向诱导分化 ES细胞系

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软骨细胞与成纤维细胞共培养体外构建软骨的初步研究

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组织工程与重建外科杂志 2005年第4期1卷 217-219页

作者：刘霞周广东吕晓杰崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属第九人民医院组织工程实验室 200011

目的软骨微环境对软骨形成具有重要作用。本实验探讨软骨细胞与成纤维细胞共培养体外构建软骨的可行性。方法分别培养猪软骨细胞与人成纤维细胞,将两种细胞按3:7(软骨细胞:成纤维细胞)比例混匀,以5．0×107／ml终浓度接种于聚羟基... 详细信息

目的软骨微环境对软骨形成具有重要作用。本实验探讨软骨细胞与成纤维细胞共培养体外构建软骨的可行性。方法分别培养猪软骨细胞与人成纤维细胞,将两种细胞按3:7(软骨细胞:成纤维细胞)比例混匀,以5．0×107／ml终浓度接种于聚羟基乙酸支架(PGA,直径9mm,高2mm)作为共培养组,相同终浓度单纯软骨细胞和单纯成纤维细胞分别接种于相同支架作为阳性对照及阴性对照。每组各接种3例标本,每例接种细胞悬液200μl。全部标本均体外培养12周后取材,通过大体观察、组织学及免疫组化等检测对构建软骨进行评价。结果各组细胞均与材料支架粘附良好。体外培养12周后,阳性对照组(软骨细胞组)及共培养组均形成成熟的软骨样组织,组织学及免疫组化显示有成熟的软骨陷窝样结构及Ⅱ型胶原表达。软骨细胞组在体外培养过程中能基本保持复合物初始的大小和形状,形成的软骨在组织学上也教为均匀一致。共培养组在培养过程中稍有缩小,在复合物的周边区域形成了均质的软骨样组织,但在近中心区域存在一定量的纤维性组织。阴性对照组(单纯成纤维细胞组)在体外培养过程中逐渐皱缩变形,未形成软骨样组织。结论软骨微环境在体外软骨分化及软骨形成中具有重要作用,软骨细胞与成纤维细胞体外共培养能形成软骨样组织。

关键词：组织工程软骨细胞成纤维细胞共培养

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生物陶瓷作为骨组织工程支架材料的研究进展

引用

组织工程与重建外科杂志 2005年第5期1卷 299-300页

作者：刘广鹏崔磊上海第二医科大学附属第九人民医院组织工程实验室 200011

组织工程支架材料是组织工程研究的重要内容之一。骨组织工程模拟了自体骨移植的骨形成过程,支架材料、种子细胞、生长因子构成了骨组织工程的三要素。在构建组织工程骨的过程中,自体骨髓基质干细胞作为骨种子细胞,支架材料提供细胞外... 详细信息

组织工程支架材料是组织工程研究的重要内容之一。骨组织工程模拟了自体骨移植的骨形成过程,支架材料、种子细胞、生长因子构成了骨组织工程的三要素。在构建组织工程骨的过程中,自体骨髓基质干细胞作为骨种子细胞,支架材料提供细胞外基质和机械支持,生长因子能诱导骨髓基质干细胞向成骨方向发展。

关键词：组织工程支架材料生物陶瓷材料骨髓基质干细胞磷酸三钙磷灰石新生骨组织工程骨骨组织工程生物活性材料生物可降解性

来源：评论

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