检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2007年第8期27卷 46-52页

作者：何晨光高永娟赵莉崔磊曹谊林上海组织工程研究与开发中心

目的以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为材料,采用静电纺丝方法制备纤维支架,考察制备参数对纤维支架结构及纤维直径的影响规律。方法以四氢呋喃(THF)和N,N-二甲基甲酰胺(DMF)的混合液为溶剂,调节PLGA溶液浓度、流量及电场强度分别制备了... 详细信息

目的以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为材料,采用静电纺丝方法制备纤维支架,考察制备参数对纤维支架结构及纤维直径的影响规律。方法以四氢呋喃(THF)和N,N-二甲基甲酰胺(DMF)的混合液为溶剂,调节PLGA溶液浓度、流量及电场强度分别制备了具有不同表面形貌的纤维支架。通过扫描电镜(SEM)观察了纺丝溶液的浓度、流量及电场强度对纤维形貌和直径的影响。同时在制备的PLGA纤维支架上接种了人的真皮成纤维细胞,并对细胞在PLGA支架上的黏附和增殖情况进行了研究,从而来评价支架材料的细胞相容性。结论结果表明,随着纺丝溶液浓度的增加,纤维直径逐渐增大,纤维直径的分布也随之增大。随着流量的增加,纤维直径略有增大。随着电场强度的增大,纤维直径没有明显的变化。但是电压和浓度的增大有助于减少珠丝的产生。体外细胞培养实验证明,制备的PLGA纤维支架能支持细胞正常的黏附和增殖活动。

关键词：静电纺丝 PLGA 纤维支架

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壳聚糖-明胶-透明质酸薄膜的制备及其性能的研究

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中国生物医学工程学报 2005年第3期24卷 271-276页

作者：刘海峰尹玉姬毛津淑姚康德杨光辉崔磊曹谊林天津大学材料科学与工程学院天津300072 上海组织工程研究与开发中心上海200235

本实验采用表面修饰法和共混法两种不同的方法将透明质酸引入壳聚糖- 明胶体系,制备了壳聚糖- 明胶-透明质酸复合薄膜,考察了薄膜的表面形貌、亲水性和力学性能等理化性能以及生物相容性。实验结果表明,壳聚糖- 明胶- 透明质酸薄膜具有... 详细信息

本实验采用表面修饰法和共混法两种不同的方法将透明质酸引入壳聚糖- 明胶体系,制备了壳聚糖- 明胶-透明质酸复合薄膜,考察了薄膜的表面形貌、亲水性和力学性能等理化性能以及生物相容性。实验结果表明,壳聚糖- 明胶- 透明质酸薄膜具有良好的亲水性,而共混法和表面修饰法制备的薄膜在力学性能上各有所长。体外细胞培养结果表明,成纤维细胞在共混法制备的薄膜上的黏附和生长情况要明显好于表面修饰法制备的薄膜。

关键词：壳聚糖-明胶体系透明质酸表面修饰共混成纤维细胞

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Me_2SO浓度及预处理条件对组织工程化真皮活性的影响

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上海理工大学学报 2007年第4期29卷 311-314页

作者：王欣华泽钊刘宝林杨光辉崔磊曹谊林上海理工大学医疗器械与食品学院上海200093 国家组织工程研究与开发中心上海200235

以二甲基亚砜（Me2SO）为低温保护剂,在就Me2SO浓度、处理温度及时间对真皮成纤维细胞的活性影响进行研究的基础上,研究了Me2SO浓度对低温保存后组织工程化真皮活性的影响.采用胎盼蓝拒染法和四唑盐（MTT）比色法检测细胞存活率.结果表... 详细信息

以二甲基亚砜（Me2SO）为低温保护剂,在就Me2SO浓度、处理温度及时间对真皮成纤维细胞的活性影响进行研究的基础上,研究了Me2SO浓度对低温保存后组织工程化真皮活性的影响.采用胎盼蓝拒染法和四唑盐（MTT）比色法检测细胞存活率.结果表明,Me2SO浓度、预处理时间及温度对细胞及组织的活性有明显影响.将添加低温保护剂后的细胞悬液在4℃下保持20 min有利于保持较高的细胞活性;且当Me2SO的体积分数在10%-20%时,可使低温保存后的组织工程化真皮组织的细胞活性保持在60%以上.

关键词：二甲基亚砜组织工程真皮替代物低温保存

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人血源性间充质干细胞培养与体外成骨研究

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中国修复重建外科杂志 2005年第8期19卷 642-647页

作者：曹聪董英海董宇启路丽明崔磊刘伟曹谊林上海第二医科大学附属仁济医院骨科上海200127 上海组织工程研究与开发中心

目的建立分离、培养成人外周血来源的间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)的方法,观察成人血源性MSCs体外成骨潜能。方法抽取成年志愿者外周静脉血30份,每份15ml。用淋巴细胞分离液(密度为1.077g/ml)梯度离心,取单个核细胞在含有20... 详细信息

目的建立分离、培养成人外周血来源的间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)的方法,观察成人血源性MSCs体外成骨潜能。方法抽取成年志愿者外周静脉血30份,每份15ml。用淋巴细胞分离液(密度为1.077g/ml)梯度离心,取单个核细胞在含有20%胎牛血清的α-MEM培养液中培养扩增MSCs,流式细胞仪分析MSCs表型。第2次传代培养时在培养液中添加成骨诱导因子(地塞米松、β-磷酸甘油、维生素C和1,25二羟维生素D3)。第5代传代细胞检测碱性磷酸酶、型胶原(collagentype,Col)、骨钙素(osteocalcin,OC)和骨粘连蛋白(osteonectin,ON)表达,连续培养1个月后检测钙结节形成情况。结果成人外周血中存在MSCs,集落形成率为0.27±0.22/106单个核细胞,表达CD44、CD54、CD105和CD166,而不表达与造血系相关的CD14、CD34、CD45及内皮细胞特异的CD31。地塞米松、β-磷酸甘油、维生素C和1,25二羟维生素D3可作用于传代培养的血源性MSCs,表现为碱性磷酸酶染色阳性细胞增多,逆转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)产物电泳条带显示ColI、OC和ON表达,盐酸四环素荧光标记证实有钙结节形成。结论建立的成人MSCs分离、培养条件可分选出外周血贴壁生长的细胞中一组独特的细胞群。成人血源性MSCs具有较强的体外成骨潜能,可望成为一种新的骨组织工程种子细胞。

关键词：血细胞间允质干细胞骨生成

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基于改进分水岭算法的组织细胞图像分析

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生物医学工程学杂志 2005年第6期22卷 1151-1156页

作者：赵宇明崔磊柴岗吴越朱锴上海交通大学图像处理与模式识别研究所上海200030 上海组织工程研究与开发中心上海200011

组织细胞图像分割算法的研究是组织学图像检测技术的关键和难点所在。本文提出的细胞分割算法首先运用基于数学形态学的预处理把图像灰度间距拉开,然后模拟梯田灌溉的方式,通过先过分割再合并的改进分水岭算法来分割组织细胞图像,以得... 详细信息

组织细胞图像分割算法的研究是组织学图像检测技术的关键和难点所在。本文提出的细胞分割算法首先运用基于数学形态学的预处理把图像灰度间距拉开,然后模拟梯田灌溉的方式,通过先过分割再合并的改进分水岭算法来分割组织细胞图像,以得到最终结果。针对骨髓和软骨细胞进行实验,实验结果表明该算法的有效性。

关键词：数学形态学分水岭组织细胞分割

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组织工程化表皮膜片构建及其在供皮区的应用研究

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中华整形外科杂志 2005年第4期21卷 281-284页

作者：杨军杨光辉刘伟崔磊钱云良曹谊林上海市第九人民医院整复外科上海组织工程研究与开发中心200011

目的构建组织工程化表皮细胞膜片并应用于供皮区创面治疗。方法利用患者少量自体或同种异体正常皮肤分离、培养、扩增的表皮细胞,接种于壳聚糖明胶膜构建成表皮细胞膜片;将膜片移植于治疗组供皮区创面、适度加压,同时设立对照组:空白材... 详细信息

目的构建组织工程化表皮细胞膜片并应用于供皮区创面治疗。方法利用患者少量自体或同种异体正常皮肤分离、培养、扩增的表皮细胞,接种于壳聚糖明胶膜构建成表皮细胞膜片;将膜片移植于治疗组供皮区创面、适度加压,同时设立对照组:空白材料对照以及传统油纱布对照覆盖创面。于术后5～10d、30d、90d行大体观察、组织学检查、广谱角蛋白、外皮蛋白、层粘连蛋白、免疫组织化学检测以及Ⅰ、Ⅲ型胶原比值测定(偏光显微镜、RTPCR)。结果利用自体及异体表皮细胞和壳聚糖明胶膜能够构建出人表皮细胞膜片,应用于临床供皮区创面治疗15例,经过3个月随访,疗效肯定。移植膜片创面愈合时间(8.1±1.3)d,空白材料对照区为(16.2±3.8)d,空白油纱布对照区为(23.0±5.8)d。移植膜片存活良好,结构较完整、术后30d及90d观察:12例无明显增生,3例有轻度增生(20.0%),而空白油纱布对照区11例遗留增生性瘢痕(74.4%,χ2=8.127,P<0.01)。结论表皮细胞-壳聚糖明胶膜片能促进供皮区创面早期愈合并减少后期瘢痕增生,具有良好治疗效果。

关键词：组织工程化表皮细胞膜片免疫组织化学检测供皮区创面异体表皮细胞创面愈合时间创面治疗组织学检查层粘连蛋白偏光显微镜增生性瘢痕壳聚糖油纱布皮肤分离同种异体覆盖创面比值测定 Ⅲ型胶原 PCR) 瘢痕增生

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血管生物反应器相关参数的测量与分析

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中国生物制品学杂志 2007年第11期20卷 844-846页

作者：李宏黄剑峰周彬安琦曹谊林上海组织工程研究与开发中心上海200235 华东理工大学上海200237

目的通过对组织工程生物反应器中相关参数的测量,了解培养液的物理化学特性,为控制组织工程产品培养提供理论依据。方法从反应器中吸取第1、2和3天的培养液,采用旋转黏度计进行黏度及相关参数测量,并分别用葡萄糖分析试剂盒、尿素氮测... 详细信息

目的通过对组织工程生物反应器中相关参数的测量,了解培养液的物理化学特性,为控制组织工程产品培养提供理论依据。方法从反应器中吸取第1、2和3天的培养液,采用旋转黏度计进行黏度及相关参数测量,并分别用葡萄糖分析试剂盒、尿素氮测定试剂盒和乳酸脱氢酶分析试剂盒测定葡萄糖、乳酸和氨的含量。结果当转速达到稳定时,应力、扭矩、剪切速率和角速度的值基本稳定,不同天数的黏度测量值基本保持在0.8～1.0之间;从葡萄糖、乳酸和氨的代谢可知,葡萄糖在逐渐消耗,乳酸和氨的含量在逐渐增加。结论不同天数的培养液黏度与牛顿流体的特性非常相似,黏度的变化将引起剪应力的改变。根据葡萄糖的代谢情况,生物反应器中培养的细胞材料复合物的最佳换液时间为2d。

关键词：组织工程生物反应器黏度葡萄糖乳酸

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人肋软骨细胞体外培养中生长代谢及功能的变化

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中华整形外科杂志 2004年第5期20卷 372-376页

作者：张艳柴岗刘伟崔磊曹谊林上海市第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室上海市组织工程研究与开发中心200011

目的　通过检测体外培养的人肋软骨细胞老化过程中Ⅰ、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖(aggrecan)的表达变化 ,为组织工程软骨构建的种子细胞选择适宜的回植时机。方法　取体外培养的P1 ～P5人肋软骨细胞 ,通过观察细胞形态 ,细胞增殖率 ,Alcianblu... 详细信息

目的　通过检测体外培养的人肋软骨细胞老化过程中Ⅰ、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖(aggrecan)的表达变化 ,为组织工程软骨构建的种子细胞选择适宜的回植时机。方法　取体外培养的P1 ～P5人肋软骨细胞 ,通过观察细胞形态 ,细胞增殖率 ,Alcianblue法定量检测每代Aggrecan中GAG含量 ,免疫组化蛋白水平观察Ⅰ、Ⅱ型胶原表达及RT PCR从mRNA水平分析Ⅰ、Ⅱ型胶原及Aggrecan基因表达量。结果　人肋软骨细胞从第 3代起逐渐向成纤维样细胞形态转换 ;每代软骨细胞Aggrecan中GAG含量随传代次数逐渐降低 ,第 3代后处于较低水平 ;Ⅰ、Ⅱ型胶原的表达在蛋白水平及mRNA水平基本一致 ,第 2代以前Ⅱ型胶原表达较强 ,Ⅰ型胶原表达较弱 ,之后随传代Ⅱ型胶原表达减弱 ,Ⅰ型胶原表达逐渐增强 ;而Aggrecan在第 3代以前表达较高 ,从第 4代后明显下降。结论　人软骨细胞体外培养老化过程中综合细胞扩增及细胞功能因素 ,第 2代的软骨细胞 (体外扩增约 18 32 6倍 )可作为构建人组织工程软骨的种子细胞。

关键词： Ⅱ型胶原表达量肋软骨软骨细胞体外培养组织工程软骨 Ⅰ型胶原 mRNA水平传代生长代谢

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利用成体干细胞体外小口径血管的构建

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华东理工大学学报（自然科学版） 2009年第6期35卷 936-941页

作者：李宏安琦吴莹琛华东理工大学机械与动力工程学院上海200237 上海组织工程研究与开发中心上海200235

设计了一套血管生物反应器系统,采用有限元的方法对组织工程小血管托架材料进行了分析,从而开发完成了一套用于构建直径为2 mm的小血管托架;通过收集人的原代骨髓基质干细胞(hBMSCs)和脂肪基质干细胞(ADSCs)进行体外扩增和培养,并选用第... 详细信息

设计了一套血管生物反应器系统,采用有限元的方法对组织工程小血管托架材料进行了分析,从而开发完成了一套用于构建直径为2 mm的小血管托架;通过收集人的原代骨髓基质干细胞(hBMSCs)和脂肪基质干细胞(ADSCs)进行体外扩增和培养,并选用第3代细胞与聚羟基乙酸酯(PGA)复合后置于血管生物反应器中动态培养;在生物反应器中动态培养4周后,对材料复合物进行取材,分别进行大体观察、HE染色和扫描电镜等指标检测。结果表明:血管色泽明亮,有一定的弹性,细胞分泌的胶原基质排列较规则,免疫组化结果表明血管含有平滑肌弹性肌动蛋白的成分。说明改进的血管生物反应器能模拟血管的力学环境,并能利用人骨髓间充质干细胞和脂肪基质干细胞成功构建组织工程小血管组织。

关键词：组织工程血管生物反应器骨髓间充质干细胞脂肪基质干细胞计算流体力学

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人脐血间充质干细胞修复颅骨缺损的实验研究

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中华整形外科杂志 2010年第1期26卷 34-38页

作者：刘广鹏李宇琳孙剑崔磊张文杰曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院组织工程重点实验室 200011 上海组织工程研究与开发中心

目的应用人脐血间充质干细胞（umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells，UCB—MSCs）复合脱钙骨材料构建组织工程化骨，修复裸大鼠颅骨标准缺损。方法体外扩增培养、成骨诱导人UCB—MSCs，采用AlizarinRed染色和钙离子半... 详细信息

目的应用人脐血间充质干细胞（umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells，UCB—MSCs）复合脱钙骨材料构建组织工程化骨，修复裸大鼠颅骨标准缺损。方法体外扩增培养、成骨诱导人UCB—MSCs，采用AlizarinRed染色和钙离子半定量的方法测定细胞成骨分化能力。将第2代细胞接种在脱钙骨支架材料上继续诱导培养，扫描电镜检测细胞在材料上的生长状况。制备裸大鼠双侧颅骨全层标准缺损（直径5mm），一侧以细胞材料复合物修复作为实验侧（n=8）；另一侧以单纯脱钙骨材料修复作为对照侧（n=8）。术后6、12周取材，分别通过大体形态观察、显微CT（Micro—CT）、组织学方法检测颅骨缺损的修复效果。结果UCB—MSCs体外能够诱导分化为成骨细胞，且在脱钙骨支架材料上生长良好。Micro—CT检测显示术后6周实验侧有部分新生骨组织形成，12周时骨缺损修复率达（78．19±6．45）％，脱钙骨材料降解完全；对照侧6周时无明显新骨生成，12周时材料完全降解，骨缺损未修复。组织学检测显示12周时实验侧有较多成熟骨生成，为骨性愈合；对照侧骨缺损为纤维愈合。结论成骨诱导的人UCB—MSCs复合脱钙骨材料构建的组织工程化骨可修复裸大鼠颅骨全层标准缺损，有望成为新的组织工程骨种子细胞来源。

关键词：组织工程间充质干细胞颅骨脱钙骨

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