检索结果-内蒙古大学图书馆

中国科学：生命科学 2014年第2期44卷 132-138页

作者：张文杰曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室组织工程国家工程中心上海200011

组织工程技术已被普遍认为是解决组织、器官缺损修复与功能重建的有效手段,它的飞速发展依赖于细胞学、材料学、工程学、临床医学等多学科的交叉渗透.作为组织工程的三大核心,种子细胞、生物材料、组织构建各方面的突破,为组织工程技术... 详细信息

组织工程技术已被普遍认为是解决组织、器官缺损修复与功能重建的有效手段,它的飞速发展依赖于细胞学、材料学、工程学、临床医学等多学科的交叉渗透.作为组织工程的三大核心,种子细胞、生物材料、组织构建各方面的突破,为组织工程技术的发展奠定了基础.组织工程国家工程中心近年来围绕上述核心开展了系列研究,通过研究胚胎干细胞、成体干细胞、同种异体干细胞、以及发育同源细胞替代的探索,为解决种子细胞来源问题提供了多种选择;生物支架材料的开发,为细胞增殖分化、组织再生提供理想的支持与空间,而生物反应器的开发与应用,进一步提高了组织构建技术,为促进组织的体外形成、重塑和功能成熟创造了条件.在此基础上,开展了大动物体内组织构建和缺损修复的研究,形成了以应用为目标的研究特色,并成功将部分技术应用于临床治疗.本文将对组织工程国家工程中心已有进展做简单介绍并对面临的挑战进行分析.

关键词：再生医学组织工程干细胞生物材料

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聚乳酸-聚羟基乙酸膜体外复合兔脂肪源性间充质细胞的生长规律

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第51期13卷 10011-10015页

作者：洪佳旭徐建江崔磊尹烁李纲复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科上海市200031 上海组织工程重点实验室上海市200011

背景:虽然国外已有报道应用间充质干细胞复合聚乳酸-聚羟基乙酸应用于组织的构建,但研究重点在于这些复合物能否修复组织缺损,尚缺乏间充质细胞与材料相容性的研究。目的:观察兔脂肪源性间充质细胞在聚乳酸-聚羟基乙酸膜上的黏附及生长... 详细信息

背景:虽然国外已有报道应用间充质干细胞复合聚乳酸-聚羟基乙酸应用于组织的构建,但研究重点在于这些复合物能否修复组织缺损,尚缺乏间充质细胞与材料相容性的研究。目的:观察兔脂肪源性间充质细胞在聚乳酸-聚羟基乙酸膜上的黏附及生长情况。设计、时间及地点:体外观察实验,于2007-09/2009-03在复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科研究所和上海组织工程重点实验室完成。材料:6月龄雌性新西兰大白兔6只用于提取脂肪源性间充质细胞。聚乳酸及聚羟基乙酸购自美国Sigma公司。方法:兔麻醉后取颈背处的皮下脂肪,I型胶原酶消化法获得原代细胞,接种至含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养液中,细胞达80%融合时传代,取第4代细胞用于实验。将聚乳酸与聚羟基乙酸按照7:3的比例合成聚乳酸-聚羟基乙酸膜,相对分子质量为104900。主要观察指标:用Dio染料标记第4代细胞后测定不同接种浓度细胞在聚乳酸-聚羟基乙酸膜上的黏附率;在细胞与材料共培养1周以后,分别利用荧光倒置显微镜、扫描电镜及双光子显微镜观察细胞在材料表面及内部的生长情况。结果:不同接种浓度细胞与材料的黏附率最高可达99%。细胞与材料共培养1周以后,荧光倒置显微镜检查发现材料中有表达绿色荧光的大量细胞,形态呈纤维样或卵圆状;扫描电镜表明细胞在材料表面呈复层生长且与材料黏附良好,细胞分泌基质较旺盛;双光子显微镜检查提示细胞在内部分布均匀且形态以纤维样为主。结论:脂肪源性间充质细胞可在聚乳酸-聚羟基乙酸膜材料表面及内部生长,两者生物相容性较好。

关键词：聚乳酸-聚羟基乙酸脂肪源性间充质细胞组织工程

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自体骨髓间充质干细胞复合β-磷酸三钙修复犬下颌骨节段缺损

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中华创伤杂志 2006年第9期22卷 663-668页

作者：袁捷祝联刘广鹏许锋翁雨来崔磊刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市组织工程研究重点实验室 200011

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合β-磷酸三钙(β-TCP)构建的组织工程骨修复犬下颌骨节段缺损的可行性方法体外成骨诱导犬BMSCs,将第2代细胞复合β- TCP后修复6只犬右侧3cm的下颌骨节段缺损；6只犬以单纯β-TCP植入作为对照,术后4,1... 详细信息

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合β-磷酸三钙(β-TCP)构建的组织工程骨修复犬下颌骨节段缺损的可行性方法体外成骨诱导犬BMSCs,将第2代细胞复合β- TCP后修复6只犬右侧3cm的下颌骨节段缺损；6只犬以单纯β-TCP植入作为对照,术后4,12,26,32周分别通过影像学、大体形态、组织学和生物力学检测判断骨缺损的修复效果。结果诱导后第2代细胞已具成骨活性。4～26周X线片示实验组新骨形成增加,密度增高,对照组则材料吸收形成明显阴影区,只有少量骨痂。32周实验组骨愈合良好,有较多板层骨；对照组为纤维性愈合骨不连,骨密度检测实验组显著高于对照组。实验组力学强度与正常下颌骨差异无统计学意义。结论自体成骨诱导BMSCs复合β-TCP形成的织工程骨可良好修复犬下颌骨节段缺损。

关键词：下颌损伤骨髓基质干细胞 β-磷酸三钙组织工程

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干细胞、组织工程与再生医学

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中国修复重建外科杂志 2006年第2期20卷 95-97页

作者：杨志明四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室

在上世纪80年代提出的组织工程概念、90年代发现成体干细胞的可塑性之后,在研究中逐渐认识到细胞、支架材料、生物活性因子、干细胞在促进组织、器官愈合与再生治疗中的重要作用。因此,Suh等认为组织修复、组织工程与再生医学有不可分... 详细信息

在上世纪80年代提出的组织工程概念、90年代发现成体干细胞的可塑性之后,在研究中逐渐认识到细胞、支架材料、生物活性因子、干细胞在促进组织、器官愈合与再生治疗中的重要作用。因此,Suh等认为组织修复、组织工程与再生医学有不可分割的相关性。Goldfarb认为组织工程、干细胞和克隆技术是再生医学发展的良机;Hipp等提出组织工程、干细胞、克隆技术和单性生殖是一种新的治疗模式。本期集中刊出了22篇干细胞和组织工程相关研究的论文,以一个侧面反映了我国干细胞、组织工程研究在发展再生医学中所作出的贡献。[第一段]

关键词：组织工程研究成体干细胞再生医学生物活性因子克隆技术支架材料再生治疗组织修复医学发展治疗模式

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脂肪干细胞诱导成肌细胞构建尿路肌性管腔的研究

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中华实验外科杂志 2012年第12期29卷 2424-2425页

作者：王营傅强赵仁淹刘伟上海交通大学附属第六人民医院泌尿外科 200233 上海市组织工程研究重点实验室

目的探讨脂肪干细胞与聚羟基乙酸（PGA）材料复合在体外诱导构建尿路肌性管腔的可行性。方法酶消化法获取脂肪干细胞，经体外培养和扩增后，流式细胞技术检测细胞表面抗原CD90、CDl05、CD34，并接种于PGA上，形成细胞一材料复合物，体... 详细信息

目的探讨脂肪干细胞与聚羟基乙酸（PGA）材料复合在体外诱导构建尿路肌性管腔的可行性。方法酶消化法获取脂肪干细胞，经体外培养和扩增后，流式细胞技术检测细胞表面抗原CD90、CDl05、CD34，并接种于PGA上，形成细胞一材料复合物，体外培养4周后，采用由10txmol／L5。氮杂胞苷＋5％马血清＋5％胎牛血清组成的成肌诱导培养液诱导4周，行大体观察及组织学检测，免疫组织化学法检测成肌细胞特异性抗原结蛋白（desmin）和肌球蛋白（myosin）表达。结果流式细胞技术检测CD90、CDl05及CD34的阳性率分别为94．2％、90．7％和0．6％，所构建组织形成类似尿道的肌性管腔结构，管腔轻度塌陷，免疫组织化学染色显示：脂肪干细胞在诱导4周后，表达desmin和myosin；细胞材料复合物胶原成分较多。结论脂肪干细胞复合PGA后生长良好，可在体外完成成肌诱导，构建肌性管腔。

关键词：脂肪干细胞成肌细胞尿路组织工程

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ADSCs-壳聚糖/明胶水凝胶工程化软骨的三维动态构建

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功能材料 2015年第15期46卷 15021-15030页

作者：宋克东杨延飞李文芳李丽颖朱艳霞刘天庆大连理工大学精细化工国家重点实验室干细胞与组织工程研究室辽宁大连116024 深圳大学医学部深圳抗衰老与再生医学重点实验室广东深圳518060

组织工程软骨的体外构建被认为是一种有希望治疗关节软骨缺损的有效途径。为评估载脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)壳聚糖/明胶水凝胶支架,在体外动态构建组织工程软骨相对传统静态培养的优势,本研究用壳聚糖/明胶制备了... 详细信息

组织工程软骨的体外构建被认为是一种有希望治疗关节软骨缺损的有效途径。为评估载脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)壳聚糖/明胶水凝胶支架,在体外动态构建组织工程软骨相对传统静态培养的优势,本研究用壳聚糖/明胶制备了软骨仿生支架,并检测其物理性质。在制备的水凝胶支架上以1×107cells/m L密度接种ADSCs后,分别置于转瓶及T-瓶的软骨诱导基中培养两周,通过试剂染色、代谢检测和电镜观察,考察了细胞的软骨分化能力、活性、生长分布、渗透深度、增殖及胞外基质分泌情况。结果表明,壳聚糖/明胶支架的平均孔径为118.25±19.51μm,孔隙率为82.60±2.34%,吸水率为361.28±0.47%,弹性模量为61.2±0.16 k Pa,具有良好生物相容性。ADSCs生长状态良好,可向软骨细胞分化,适于作为组织工程软骨构建的种子细胞。表征结果显示,转瓶内水凝胶支架中细胞蛋白多糖的表达更显著,细胞生长分布更加均匀,细胞外基质分泌基本填满整个支架。因此,转瓶载壳聚糖/明胶支架所提供的三维动态环境,是体外构建组织工程软骨的良好方法。

关键词：转瓶组织工程软骨脂肪干细胞壳聚糖/明胶水凝胶细胞培养

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低温保存的组织工程骨修复骨缺损的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2005年第7期19卷 569-573页

作者：罗晓中杨志明邓力李秀群四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室

目的探讨低温保存的组织工程骨修复骨缺损的能力及低温保存的可行性。方法将人源性生物衍生骨材料复合成骨细胞构建的组织工程骨,在4℃和-196℃的温度环境中保存3个月和6个月,同时以未行低温保存的组织工程骨和生物衍生骨材料作为对照,... 详细信息

目的探讨低温保存的组织工程骨修复骨缺损的能力及低温保存的可行性。方法将人源性生物衍生骨材料复合成骨细胞构建的组织工程骨,在4℃和-196℃的温度环境中保存3个月和6个月,同时以未行低温保存的组织工程骨和生物衍生骨材料作为对照,分别修复实验兔桡骨的长段骨缺损。80只成年日本大耳白兔,随机分为4个实验组(左前肢植入材料):A3组:组织工程骨在4℃保存3个月;A6组:组织工程骨在4℃保存6个月;B3组:组织工程骨在-196℃保存3个月;B6组:组织工程骨在-196℃保存6个月。2个对照组(右前肢植入材料):C组:组织工程骨未行低温保存;D组:单纯生物衍生骨材料。于术后2、4、6和12周行大体和组织学观察,并于6周和12周行X线片检查和生物力学检测。结果术后大体观察,A3、A6、B3、B6和C组间无显著差异,D组骨痂少且断端更为明显。各时间点组织学观察,A3、A6、B3、B6和C组植入材料周围胶原及骨痂均较D组明显,术后12周组织学评分,D组与其它各组比较P值<0.05。X线片示D组植入材料皮质骨无明显变化,骨痂较少;余各组12周植入材料与自体骨融合,髓腔开通,骨折线消失,塑形好。生物力学检测D组与其它各组比较P值<0.05。结论以4℃和-196℃保存方法能有效保存组织工程骨,对修复骨缺损有明显效果,这一方法适宜推广应用。

关键词：组织工程骨低温保存骨缺损

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离心管培养软骨作为半月板移植替代物的可能性研究

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中国修复重建外科杂志 2004年第5期18卷 426-430页

作者：王建杨志明解慧琪秦廷武四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验室:干细胞与组织工程研究室

目的　比较培养关节软骨和半月板软骨细胞的生物学特性 ,探讨培养软骨作为半月板移植替代物的可能性。　方法　分别自 3周龄大耳白兔关节软骨和半月板分离软骨细胞 ,行单层传代培养和离心管培养。将离心管培养形成的软骨和 6周龄兔半月... 详细信息

目的　比较培养关节软骨和半月板软骨细胞的生物学特性 ,探讨培养软骨作为半月板移植替代物的可能性。　方法　分别自 3周龄大耳白兔关节软骨和半月板分离软骨细胞 ,行单层传代培养和离心管培养。将离心管培养形成的软骨和 6周龄兔半月板行组织学和透射电镜观察 ,比较关节软骨细胞和半月板纤维软骨细胞的生长曲线。流式细胞术检测第 2、4代关节软骨细胞和半月板纤维软骨细胞周期。　结果　第 4代关节软骨细胞呈去分化 ,似成纤维细胞。离心管关节软骨细胞培养能形成软骨 ,半月板纤维软骨细胞不能形成软骨。培养软骨和半月板的组织学及超微结构差异显著 ,培养软骨中软骨细胞 5 %呈现凋亡。第 2、4代关节软骨细胞中亚二倍体细胞比例明显多于第 2、4代半月板纤维软骨细胞 ( P<0 .0 5 )。　结论　半月板来源的软骨细胞经离心管培养不能形成软骨组织 ,关节软骨细胞离心培养形成软骨不能作为半月板的移植物。

关键词：半月板移植关节软骨细胞离心管培养软骨软骨组织组织学养形传代培养去分化生长曲线

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体外构建壳聚糖/β-甘油磷酸钠/明胶仿生梯度支架

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高校化学工程学报 2019年第5期33卷 1133-1140页

作者：胡雪岩宋克东卢延国李文芳李丽颖郑双双刘天庆大连理工大学精细化工国家重点实验室干细胞与组织工程研究室辽宁大连116024 郑州中科新兴产业技术研究院河南郑州450000

针对软骨特定结构缺损后不能自我修复的特点,通过调控单层原料质量比,构建具有复杂分层结构的壳聚糖/β-甘油磷酸钠/明胶(chitosan/β-sodium glycerophosphates/gelatin,Cs/GP/Gel)仿生复合梯度支架。通过对比物理性能优选适宜比例的... 详细信息

针对软骨特定结构缺损后不能自我修复的特点,通过调控单层原料质量比,构建具有复杂分层结构的壳聚糖/β-甘油磷酸钠/明胶(chitosan/β-sodium glycerophosphates/gelatin,Cs/GP/Gel)仿生复合梯度支架。通过对比物理性能优选适宜比例的支架材料,并将骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)接种到梯度支架上考察其生物相容性。结果表明,Cs/GP/Gel复合梯度支架具有良好的吸水性能[(584.24±3.79)%^(677.47±1.70)%]、孔隙率[(86.34±5.10)%^(95.20±2.86)%]和降解性能[(86.09±2.46)%^(92.48±3.86)%]。扫描电镜(SEM)结果表明,支架材料在纵向维度呈现出明显的生理分层结构和孔径梯度渐进性,可有效模拟真实软骨的天然生理分层结构。比例为9:1:5的Cs/GP/Gel复合梯度支架适于作为骨软骨的支撑材料。对BMSCs-支架复合物Live/Dead染色后发现,细胞在梯度支架材料上存活、分布及伸展良好。该仿生梯度支架为开发新型生物医用材料提供了重要依据。

关键词：仿生梯度支架壳聚糖/β-甘油磷酸钠/明胶骨髓间充质干细胞骨/软骨组织工程

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成骨细胞Cbfa1和Osterix基因在体外构建组织工程骨膜中的表达

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中国修复重建外科杂志 2006年第6期20卷 666-669页

作者：祁洁杨志明罗静聪四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室

目的体外构建组织工程骨膜,研究生物衍生羊膜(humanacellularamnioticmembrane,HAAM)对成骨细胞分化的影响。方法采用人胚骨膜来源的成骨细胞与HAAM体外复合培养构建组织工程骨膜(n=60)。于培养后2、4、6、8和10d,分别提取总RNA,经过逆... 详细信息

目的体外构建组织工程骨膜,研究生物衍生羊膜(humanacellularamnioticmembrane,HAAM)对成骨细胞分化的影响。方法采用人胚骨膜来源的成骨细胞与HAAM体外复合培养构建组织工程骨膜(n=60)。于培养后2、4、6、8和10d,分别提取总RNA,经过逆转录成cDNA,行实时定量PCR,分别扩增成骨细胞特异转录因子(Cbfa1)和成骨细胞特异基因(Osterix),读取扩增循环数(cyclethreshold,Ct)。以单纯培养的成骨细胞作为对照组(n=20)。结果实验组Cbfa1表达以培养后2d和10d最高,且培养后2d与4、6、8d比较,以及培养后10d与4、8d比较,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组Osterix表达随培养时间延长逐渐升高,培养后8d达最高,与其余各时间点比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组Cbfa1和Osterix表达均随培养时间延长逐渐降低。组间各时间点两基因表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论成骨细胞与HAAM结合后,Cbfa1和Osterix可持续正常表达。HAAM作为支架材料,可诱导并促进成骨细胞分化。成骨细胞与HAAM构建的组织工程骨膜在分子水平已具有产生骨组织的基础。

关键词：组织工程骨膜成骨细胞生物衍生羊膜基因表达

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