检索结果-内蒙古大学图书馆

中华创伤杂志 2020年第3期36卷 275-282页

作者：彭威黎中雪卢彦竹艾秋池周江玲侯天勇陆军军医大学西南医院骨科全军矫形外科中心组织工程国家地方联合工程中心全军骨组织工程重点实验室400038

目的初步探讨大段骨缺损移植组织工程骨(TEB)后,Arpin蛋白介导的宿主骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移至移植区参与骨修复的作用。方法免疫荧光观察BMSCs中Arpin蛋白和肌动蛋白相关蛋白2/3(Arp2/3蛋白)的表达及相对定位。构建干扰Arpin蛋白... 详细信息

目的初步探讨大段骨缺损移植组织工程骨(TEB)后,Arpin蛋白介导的宿主骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移至移植区参与骨修复的作用。方法免疫荧光观察BMSCs中Arpin蛋白和肌动蛋白相关蛋白2/3(Arp2/3蛋白)的表达及相对定位。构建干扰Arpin蛋白表达慢病毒,转染BMSCs,通过qRT-PCR和Western blot检测Arpin的抑制水平。按照Arpin蛋白表达含量不同,分为空载体对照组和Arpin表达抑制组进行体外和体内实验。体外实验:用迁移小室建立细胞迁移模型,上室接种空载体对照组和Arpin表达抑制组细胞,荧光显微镜检测细胞迁移数量;6孔板接种空载体对照组和Arpin表达抑制组细胞,建立“伤口愈合实验”模型,显微镜检测“伤口愈合”情况。体内实验:选取8周龄C57BL/6小鼠,所有小鼠按照随机数字表法分为空载体对照组(6只)和Arpin表达抑制组(6只)。切除股骨中段2 mm骨干和骨膜,制作大段骨缺损并移植TEB模型。每只小鼠经尾静脉注射100万个BMSCs细胞,术后2,7 d免疫荧光染色检测BMSCs迁移至骨缺损区数量的差异。术后4周,取股骨进行Micro-CT扫描,检测骨密度(BMD)、相对骨体积(BV/TV)、骨小梁间距(***)、骨小梁厚度(***),然后标本进行病理HE和Masson染色,观察成骨质量。结果小鼠BMSCs表达Arpin蛋白,相对于Arp2/3,其定位在细胞边缘。在转染慢病毒后,BMSCs表达绿色荧光蛋白,并且Arpin表达抑制组Arpin基因及蛋白表达较空载体对照组显著降低(P<0.01)。体外细胞迁移实验中,Arpin表达抑制组细胞迁移数量[(105.7±6.5)个]较空载体对照组[(76.6±6.6)个]高(P<0.01)。“伤口愈合实验”中,Arpin表达抑制组“伤口愈合”百分比[(62.6±3.2)%]较空载体对照组[(43.8±1.9)%]高(P<0.01)。体内实验的免疫荧光结果表示,术后2 d,两组迁移细胞计数差异无统计学意义(P>0.05),几乎无标记细胞迁移;术后7 d,Arpin表达抑制组细胞迁移至移植区的数量[(11.3±1.5)个]较空载体对照组[(5.7±1.5)个]更多(P<0.01)。术后4周,Micro-CT结果显示,相对于空载体对照组[BMD:(140.0±6.0)mg/cm3,BV/TV:(23.4±0.9)%,***:(0.28±0.01)μm,***:(0.15±0.01)μm],Arpin表达抑制组[BMD:(172.7±6.0)mg/cm3,BV/TV:(28.8±1.3)%,***:(0.33±0.01)μm,***:(0.11±0.01)μm]成骨质量更高(P<0.05);病理染色提示,Arpin表达抑制组存在更多的新生骨组织。结论沉默Arpin蛋白的表达会促进BMSCs的迁移,增加宿主BMSCs迁移至骨缺损区域,提高骨修复效果。

关键词：组织工程间充质干细胞细胞迁移分析 Arpin蛋白

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反应器内构建组织工程血管平滑肌层的实验研究

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中华整形外科杂志 2008年第3期24卷 220-224页

作者：许志成李宏周广东李纲刘阳张文杰崔磊刘伟曹谊林上海交通大学医学院附属第九人民医院整形外科上海市组织工程重点实验室上海组织工程研究与开发中心200011

目的探讨生物反应器内构建组织工程血管的可行性。方法于6个月龄犬颈总动脉血管获取平滑肌细胞，经体外培养扩增后接种于聚羟基乙酸（PGA）上，形成细胞一材料复合物，并将其置于生物反应器内培养。实验组模拟成年哺乳动物循环系统的参... 详细信息

目的探讨生物反应器内构建组织工程血管的可行性。方法于6个月龄犬颈总动脉血管获取平滑肌细胞，经体外培养扩增后接种于聚羟基乙酸（PGA）上，形成细胞一材料复合物，并将其置于生物反应器内培养。实验组模拟成年哺乳动物循环系统的参数予以动态力学刺激培养（搏动频率：75次，分；扩张量〈5％）；对照组为静态培养，其余与实验组相同，分别于3与6周后取材检测。结果生物反应器内培养的血管大体观察具有良好的弹性，管腔圆，色泽光亮；HE染色显示平滑肌纤维成分排列较规则，有层次感；弹力纤维染色显示弹力纤维成分较多而密；免疫组织化学检测显示为棕黄色层状排列的平滑肌纤维。对照组弹性欠佳，管腔塌陷，色泽暗淡；平滑肌纤维与弹力纤维成分较少且排列紊乱，层次感差。结论应用生物反应器可构建具有良好结构的血管样结构的平滑肌层组织。

关键词：组织工程生物反应器血管

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丙交酯合成条件的研究

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高分子材料科学与工程 2007年第1期23卷 53-55页

作者：陈佳程超王远亮重庆大学生物工程学院重庆400044 生物力学及组织工程教育部重点实验室

丙交酯作为合成聚乳酸的重要中间体,它的制备是影响开环聚合高分子量PLA的关键因素。反应时间和反应温度是制备丙交酯的两个重要的工艺参数,直接影响丙交酯的产率。本文着重就反应时间对丙交酯产率的影响进行了初步研究,并提出了一种制... 详细信息

丙交酯作为合成聚乳酸的重要中间体,它的制备是影响开环聚合高分子量PLA的关键因素。反应时间和反应温度是制备丙交酯的两个重要的工艺参数,直接影响丙交酯的产率。本文着重就反应时间对丙交酯产率的影响进行了初步研究,并提出了一种制备丙交酯的优化工艺。

关键词：丙交酯反应时间产率优化工艺

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组织工程化肌腱种子细胞深低温保存的实验研究

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生物医学工程学杂志 2006年第1期23卷 159-165页

作者：朱肖奇杨志明解慧琪秦廷武四川大学华西医院教育部重点实验室干细胞与组织工程研究室

对肌腱种子细胞进行深低温保存,研究保存过程中多个环节的影响因素对细胞存活率的影响及深低温保存对种子细胞生物学特性、胶原分泌功能的影响。实验结果表明二甲基亚砜是肌腱种子细胞深低温保存中比较好的抗冻保护剂;冻存后使用与培养... 详细信息

对肌腱种子细胞进行深低温保存,研究保存过程中多个环节的影响因素对细胞存活率的影响及深低温保存对种子细胞生物学特性、胶原分泌功能的影响。实验结果表明二甲基亚砜是肌腱种子细胞深低温保存中比较好的抗冻保护剂;冻存后使用与培养时不同的营养血清处理对细胞有损害,可降低细胞存活率;在冷冻保存过程中,细胞存活率与细胞浓度有一定关系,浓度太低可能降低细胞存活率;细胞在冷冻保存时,降温速度对细胞存活率有影响,慢速的分步降温组细胞存活率明显高于直接入液氮的快速降温组;采用10%二甲基亚砜加15%小牛血清加75%DM EM配方保存肌腱种子细胞,对其分泌胶原功能无明显影响,对其生长曲线、细胞周期及染色体众数无明显改变,适于肌腱种子细胞的保存。

关键词：深低温保存肌腱种子细胞组织工程抗冻保护剂流式细胞分析

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由自组装构筑蛋白酶响应性近红外/磁共振双显影微球

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高分子学报 2018年第8期28卷 1127-1140页

作者：郭和泽宋晟戴婷婷李圣利窦红静上海交通大学材料科学与工程学院金属基复合材料国家重点实验室上海200240 上海交通大学医学院附属第九人民医院上海市组织工程重点实验室上海200011

由分子侧链上修饰近红外荧光分子的聚赖氨酸及表面聚丙烯酸修饰的磁共振显影磁性纳米颗粒为组装单元,采用自组装法构筑了在近红外、磁共振双重显影中均具有蛋白酶响应性的纳米尺度自组装微球.微球形成的组装驱动力为聚赖氨酸侧链氨基与... 详细信息

由分子侧链上修饰近红外荧光分子的聚赖氨酸及表面聚丙烯酸修饰的磁共振显影磁性纳米颗粒为组装单元,采用自组装法构筑了在近红外、磁共振双重显影中均具有蛋白酶响应性的纳米尺度自组装微球.微球形成的组装驱动力为聚赖氨酸侧链氨基与磁性纳米颗粒表面羧基在水相中的静电相互作用,两类组装前驱体在静电力作用下组装为纳米尺度团聚体,再通过戊二醛对氨基的适度交联来构筑胰蛋白酶响应的双显影复合微球.该复合微球处于自组装聚集状态时,微球内近红外荧光分子间的距离减小从而发生荧光共振能量转移,导致荧光分子的自淬灭;而在胰蛋白酶活化后的解组装状态,微球内聚赖氨酸重复单元间的酰胺键被胰蛋白酶切断,荧光分子间距扩大,共振能量转移现象消失,从而导致复合微球在胰蛋白酶存在下释放荧光,荧光释放强度/淬灭强度的比值最高可达18.此外,自组装微球的磁共振显影同样具有胰蛋白酶敏感性,这与组装—解组装过程导致微球内磁性纳米颗粒的局部浓度及聚集状态发生变化有关.细胞和动物实验研究表明,复合微球呈现低细胞毒性,并可特异性地对胰蛋白酶阳性的细胞和组织进行近红外/磁共振双显影,在胰蛋白酶的生物影像学检测中具有潜在的应用前景.

关键词：聚赖氨酸蛋白酶响应性磁性纳米颗粒自组装近红外荧光/磁共振双显影

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In-vitro cultivation of normal human oral keratinocytes

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Chinese Medical Journal 2001年第7期114卷 59-62,107页

作者：周曾同周海文商庆新曹谊林上海第二医科大学第九人民医院口腔内科上海200011 上海第二医科大学组织工程研究中心上海市组织工程重点实验室上海200011

Abstract:Objective To establish a method for culturing normal human oral *** Specimens obtained from healthy humans undergoing oral surgery were dissociated into single cell suspensions by dispase and trypsin. The cells were grown in serum-free medium. Morphological characteristics were studied under light microscope and electron microscope. Cytokeratins were shown by *** Cells could be maintained in culture up to 4-5 passages or 30-50 days. Electron microscope revealed that there were desmosomes and tonofibrils in the oral keratinocytes. The cells showed positive staining for cytokeratin antibody. Conclusion Human oral keratinocytes have been successfully grown in serial culture.

关键词： cell culture · oral keratinocytes/epithelial cells · morphology · cytokeratin

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转化生长因子β_1诱导时间对骨髓基质细胞体外成软骨分化的影响

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中华医学杂志 2007年第31期87卷 2218-2222页

作者：刘天一周广东魏娴武晓莉陈付国崔磊刘伟曹谊林上海交通大学附属第九人民医院整复外科上海市组织工程重点实验室200011

目的：探讨转化生长因子β1（TGF-β1）诱导时间对骨髓基质细胞（BMSC）体外成软骨分化，及构建组织工程化软骨的影响。方法：将体外培养扩增的第二代猪BMSC按5．0×10^7个／ml的密度接种于聚羟基乙酸（PGA）制成的圆柱形支架材料... 详细信息

目的：探讨转化生长因子β1（TGF-β1）诱导时间对骨髓基质细胞（BMSC）体外成软骨分化，及构建组织工程化软骨的影响。方法：将体外培养扩增的第二代猪BMSC按5．0×10^7个／ml的密度接种于聚羟基乙酸（PGA）制成的圆柱形支架材料上，第5天开始应用含TGF-β1（10μg/L）、IGF-I（50μg/L）和地塞米松（40μg/L）的软骨诱导液培养。按TGF-β1诱导时间的不同分为A（诱导2周）、B（诱导4周）、C（诱导6周）、D（诱导8周）和E（诱导10周）5组。体外培养10周后取材行大体观察、组织学和组织化学检测、聚合蛋白多糖（GAG）定量分析和生物力学测定，同时利用Western印迹和免疫组织化学进行Ⅱ型胶原表达的分析。结果：随诱导时间延长，软骨陷窝由周边开始逐渐向内部增多，排列渐趋均匀，蛋白聚糖等软骨特异性基质成分积聚。免疫组化染色及Western印迹结果均显示Ⅱ型胶原含量随诱导时间延长逐渐递增。这种情况至诱导6周后逐渐稳定，诱导6周和诱导10周间差异无统计学意义。诱导6周以上组弹性模量和抗压强度均明显高于A、B两组。结论：利用BMSC作为种子细胞构建组织工程化软骨，诱导持续时间与形成的软骨质量相关，6周的诱导时间基本可以形成具有良好组织结构、化学组成和力学性质的软骨组织。

关键词：生物医学工程软骨骨髓基质细胞

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间充质干细胞防治慢性移植物抗宿主病:进展与挑战

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器官移植 2023年第3期14卷 327-335页

作者：鲍颖颖陈小湧中山大学干细胞与组织工程教育部重点实验室广州510080

慢性移植物抗宿主病(cGVHD)是异基因造血干细胞移植后的主要并发症,也是导致非复发死亡的主要原因,因其病理生理过程复杂,常规糖皮质激素联合免疫抑制药的防治有效率不足50%。对于糖皮质激素抵抗的cGVHD患者需启动二线治疗,然而目前的... 详细信息

慢性移植物抗宿主病(cGVHD)是异基因造血干细胞移植后的主要并发症,也是导致非复发死亡的主要原因,因其病理生理过程复杂,常规糖皮质激素联合免疫抑制药的防治有效率不足50%。对于糖皮质激素抵抗的cGVHD患者需启动二线治疗,然而目前的二线治疗方法尚未形成共识,且治疗效果不佳。间充质干细胞(MSC)是最常见的成体干细胞之一,因其具有多维度、多靶点的免疫调控功能,已被广泛应用于cGVHD的预防及治疗,且大量研究证实了MSC治疗cGVHD的安全性和有效性,有望成为cGVHD防治的新策略。本文主要围绕MSC防治cGVHD的研究进展、作用机制及存在的问题等方面进行综述,以期为今后优化MSC治疗方案、提高cGVHD防治效果提供新思路。

关键词：异基因造血干细胞移植慢性移植物抗宿主病间充质干细胞免疫调节 B细胞稳态免疫耐受纤维化生物标志物

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一种检测低内毒素浓度的传感器

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生物医学工程学杂志 2005年第5期22卷 1040-1044页

作者：熊兴良王翔蔡绍皙重庆大学生物力学与组织工程教育部重点实验室重庆400044

内毒素(ET)是造成内毒素血症及并发症的因子,准确检测其浓度对于合理诊治该类疾病具有重要意义。利用石英晶体的液体阻尼效应,开发了一种用于检测水中内毒素含量的压电生物传感器。实验结果表明,传感器的最大频移值与内毒素浓度(0.1pg/m... 详细信息

内毒素(ET)是造成内毒素血症及并发症的因子,准确检测其浓度对于合理诊治该类疾病具有重要意义。利用石英晶体的液体阻尼效应,开发了一种用于检测水中内毒素含量的压电生物传感器。实验结果表明,传感器的最大频移值与内毒素浓度(0.1pg/ml^10ng/ml)的对数值以及频移曲线中d(Δf)/dtmax出现时刻与其浓度(0.01pg/ml^10ng/ml)对数值都存在很好的线性关系。后者较前者具有测量时间缩短和最低检测限下降的优点。与传统的检测方法相比具有简单、定量性好、自动化程度高和最低检测限低的优点。

关键词：内毒素石英晶体生物传感器压电生物传感器内毒素血症检测水浓度内毒素含量自动化程度石英晶体测量时间线性关系

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细胞因子治疗骨关节炎的研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2022年第11期42卷 1627-1632页

作者：董玉山张文杰上海交通大学医学院附属第九人民医院上海市组织工程重点实验室上海200011

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种临床常见的关节病变,多累及下肢负重关节,易导致关节畸形,严重影响生活质量。目前,OA的早期治疗主要集中在对症治疗及减缓关节软骨的磨损。各类细胞因子在OA的发生和发展过程中发挥重要作用。白细胞介... 详细信息

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种临床常见的关节病变,多累及下肢负重关节,易导致关节畸形,严重影响生活质量。目前,OA的早期治疗主要集中在对症治疗及减缓关节软骨的磨损。各类细胞因子在OA的发生和发展过程中发挥重要作用。白细胞介素(interleukin,IL)家族中,IL-1β/6/8与OA的发生及进展有关,是主要的致炎因子;IL-4/10作为抗炎成分,对关节起保护作用。肿瘤坏死因子-α也是促进关节炎症发生的主要成分。体内外研究表明,转化生长因子-β、胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子在延缓OA的进展过程中发挥积极作用。研究相关细胞因子的作用,不仅可以深入了解OA的发病机制,也可为OA的治疗提供新思路,有望解决当下OA传统治疗效果不理想的问题。目前,在细胞因子应用于OA的防治领域,已经获得了很多有益的研究成果,部分已经进入临床试验和应用。该文综述了几类对于OA防治具有潜在效果的细胞因子的研究进展和部分作用机制。

关键词：骨关节炎细胞因子软骨缺损修复

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