检索结果-内蒙古大学图书馆

目的 :通过原核表达系统获得研制ZP疫苗的靶抗原。方法 :用PCR方法删除猪卵透明带 3α(pZP3α)cDNA 5’端非编码区碱基顺序。在扩增的该基因 5’端小片段与双酶切 3’端大片段在ApaI位点相连后 ,通过双酶切位点将读框完整的目的基因定向插入pBV2 2 1表达质粒PRPL 启动子下游的多克隆区。结果 :此重组表达质粒转化宿主菌后经热诱导培养 ,可在SDS PAGE胶上观察到 6 1kD的特异蛋白表达条带 ,而且它在Westernblot鉴定实验中能被抗pZPIgGs识别。结论

关键词：猪ZP3acDNA 大肠杆菌基因表达避孕疫苗

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HCG避孕疫苗:β-亚单位免疫原的分子修饰和重建

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自然杂志 2000年第1期22卷 22-25页

作者：徐万祥谢毅上海市计划生育科学研究所副研究员上海200032 复旦大学遗传工程国家重点实验室教授上海200433

以印度Talwar的HSD-hCG疫苗通过人临床Ⅱ期试验为标志,hCG疫苗在证实人类免疫避孕可行这一点上,第一个获得了具有里程碑意义的重大突破。但此类原型hCG疫苗存在制备困难、成本高及其免疫应答受MHC遗传限制等明显缺陷,被判定不适合推广... 详细信息

以印度Talwar的HSD-hCG疫苗通过人临床Ⅱ期试验为标志,hCG疫苗在证实人类免疫避孕可行这一点上,第一个获得了具有里程碑意义的重大突破。但此类原型hCG疫苗存在制备困难、成本高及其免疫应答受MHC遗传限制等明显缺陷,被判定不适合推广应用。因此,如何克服hCG疫苗现有问题,使之早日为人类生育控制作出贡献,乃是近年来相关学者普遍关注并积极探索的重要课题。本文以抗原的基因工程制备、hCGβ分子修饰或重建以及免疫方式变革为侧重点,介绍了目前国内外hCG疫苗研究中有代表性的若干最新进展。

关键词：基因表达分子修饰 HCG疫苗 β亚单位免疫原

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猪卵透明带-3β融合蛋白在***中的表达和鉴定

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中国免疫学杂志 1998年第6期14卷 420-423页

作者：徐万祥邱德义王健谢毅顾少华黄燕赵寿元上海市计划生育科学研究所复旦大学遗传工程国家重点实验室

对全长猪卵透明带－３β（ｐＺＰ３β）ｃＤＮＡ的５端重新测序分析，发现文献报道的该克隆基因５端非编码序列中漏读了两个碱基，继而选择符合ｐＺＰ３βｃＤＮＡ阅读框的ｐＷＲ４５０－２载体质粒，通过双酶切构建了β－半乳糖苷... 详细信息

对全长猪卵透明带－３β（ｐＺＰ３β）ｃＤＮＡ的５端重新测序分析，发现文献报道的该克隆基因５端非编码序列中漏读了两个碱基，继而选择符合ｐＺＰ３βｃＤＮＡ阅读框的ｐＷＲ４５０－２载体质粒，通过双酶切构建了β－半乳糖苷酶／ｐＺＰ３β融合蛋白基因的细菌表达质粒。转化宿主菌后用ＩＰＴＧ诱导，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明ｐＺＰ３β融合蛋白在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得表达，并在蛋白印迹鉴定中能同兔抗猪ＺＰＩｇＧ呈特异性免疫反应。

关键词：猪卵透明带 pZP3β 融合蛋白基因表达

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左旋18-甲基炔诺酮不影响人工配制液中铜的腐蚀作用

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生殖与避孕 1997年第3期17卷 151-154页

作者：薛华实徐乃欣张承典陆菊芳计划生育药具国家重点实验室上海200032 中国科学院上海冶金研究所上海200050

本文应用可以测出钢的瞬时腐蚀速度的腐蚀电化学科化电阻技术，及XRD和SEM方法，研究了左旋18-甲基炔诺酮（LNG）在人工配制的模拟宫腔液中对铜的腐蚀影响。结果表明，介质pH对铜的腐蚀速率起关键作用，在同一pH下，加入LNG基本上不影... 详细信息

本文应用可以测出钢的瞬时腐蚀速度的腐蚀电化学科化电阻技术，及XRD和SEM方法，研究了左旋18-甲基炔诺酮（LNG）在人工配制的模拟宫腔液中对铜的腐蚀影响。结果表明，介质pH对铜的腐蚀速率起关键作用，在同一pH下，加入LNG基本上不影响铜的腐蚀速率。XRD和SEM检测及Cu的腐蚀电位随时间的变化规律表明，无论加LNG与否，铜的表面上都只生成Cu2O，LNG使Cu2O对生成的量减少。

关键词：宫内节育器左旋18-甲基炔诺酮铜腐蚀极化电阻法

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不同生殖激素状态下兔卵巢、子宫钙调素免疫组化定位的研究

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生殖与避孕 1997年第3期17卷 136-140页

作者：冷颖杨纫姝杨丽珍谢衷明南京师范大学生物系南京210097 上海计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室上海200032

本文采用钙调素（CaM）免疫组化定位技术，经DAB显色观察问情期兔、假孕兔、假孕后经雌、孕激素或来非司酮处理兔卵巢和子宫中CaM的分布。结果显示：不同生殖激素状态下兔卵巢（基质和黄体）、子宫（内膜及肌层）组织均可见CaM免疫反应... 详细信息

本文采用钙调素（CaM）免疫组化定位技术，经DAB显色观察问情期兔、假孕兔、假孕后经雌、孕激素或来非司酮处理兔卵巢和子宫中CaM的分布。结果显示：不同生殖激素状态下兔卵巢（基质和黄体）、子宫（内膜及肌层）组织均可见CaM免疫反应阳性产物（显色剂DAB的棕色颗粒）存在，但其数量随激素状态而变化。卵巢中，间情期最低，假孕兔及假孕后雌、孕激素处理兔次之，假孕后米非司酮处理兔最高。子宫中，间情期最低，假孕兔次之，假孕后雌、孕激素或米非司酮处理克最高。提示CaM可能参与哺乳动物卵巢激素分泌功能的调节，并与卵巢激素对子宫生长、内膜发育等调控作用密切相关。

关键词：钙调素免疫组化定位卵巢子宫激素

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猪卵透明带—3βcDNA在大肠杆菌中的表达

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生殖与避孕 1997年第1期17卷 57-58页

作者：徐万祥林渊王健谢毅肖谷田顾少华上海计划生育科学研究所上海200032 复旦大学遗传工程国家重点实验室上海200433

猪卵透明带（PZP）是包绕在卵母细胞外的由ZPI、ZP3a和ZP35组成的一层丝状体酸性糖蛋白。其中的猪ZP39蛋白（分子量55kD，完全去糖基后为32kD）jfl当于小鼠精子受体ZP3和人ZP3蛋白，PZP35在受精过程中起何作用？特别是其抗体与猪精子受... 详细信息

猪卵透明带（PZP）是包绕在卵母细胞外的由ZPI、ZP3a和ZP35组成的一层丝状体酸性糖蛋白。其中的猪ZP39蛋白（分子量55kD，完全去糖基后为32kD）jfl当于小鼠精子受体ZP3和人ZP3蛋白，PZP35在受精过程中起何作用？特别是其抗体与猪精子受体PZP3a抗体一样也能在体外试验中阻断人精卵受精，所以长期以来PZP印也一直是生殖生物学和免疫避孕科研人员关注的研究对象。过去分离该蛋白组分是通过繁琐的生化提纯技术，随着分子生物学技术的广泛应用，以相对简便价廉的遗传工程方法大量制备无卵巢因子混杂的ZP目的蛋白已是势在必行。本文首次报道了PZP35基因在大肠杆菌中的表达，为以后制备相应的单克隆抗体，鉴别抗原决定簇进而研究ZP耿避孕疫苗打下了基础。一、目的基因的DNA测序为选择表达载体构建符合pZP30CDNA阅读框的融合基因，先用T。引物对pZ57质粒中PZP30基因的5’端重新作了DNA测序分析，结果发现已报道的该基因5’端非编码区漏读了二个碱基（T、G）。二、表达载体PWR450-2／ZP那的构建质粒PWR450-2带有裁短的LacZ’基因（编码6一半乳糖背酶N端461个氨基酸残基），外源基因插入LacZ’基因下游多聚克隆部位形成融合基因，以异丙基一p-Dwt代半乳糖着（IPTG）诱导上游的强启动子比c即产生高水平表达。

关键词：猪卵透明带 3β cDNA 大肠杆菌

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