检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农业科学 2012年第13期45卷 2737-2742页

作者：乔娜徐旭俊刘思国王学斌俞慧清童永星陈建泉成国祥上海转基因研究中心上海杰隆生物工程股份有限公司

【目的】分析转基因对人乳铁蛋白(human Lactoferrin,hLF)转基因羊繁殖性能的影响,及转基因在不同世代中的遗传与表达稳定性。【方法】应用自主研发的原代hLF转基因山羊(G0代公羊)建系,与普通奶山羊常规交配获得F1代;F1代公羊与F1、F2... 详细信息

【目的】分析转基因对人乳铁蛋白(human Lactoferrin,hLF)转基因羊繁殖性能的影响,及转基因在不同世代中的遗传与表达稳定性。【方法】应用自主研发的原代hLF转基因山羊(G0代公羊)建系,与普通奶山羊常规交配获得F1代;F1代公羊与F1、F2代母羊或普通奶山羊(N)交配获得F2代;F2代公羊与F2代母羊交配获得F3代。分别采用PCR和ELISA方法对其后代个体进行整合与表达鉴定;统计各世代不同配种方式所获得的后代数量、转基因整合率、母羊受胎率、羔羊异常率等繁殖性能数据。【结果】经过多个繁殖周期,各世代转基因羊受胎率、产羔率等繁殖性状均正常。获得F1代hLF羊19只,转基因整合率为24.7%(19/77);F2代hLF羊86只,其中通过(F1♂×N♀)交配方式获得的是62只,转基因整合率为33.2%(62/187);通过(F1♂×F1♀)交配方式获得hLF羊16只,转基因整合率为76.2%(16/21);通过(F1♂×F2♀)交配方式获得hLF羊8只,转基因整合率为34.8%(8/23);获得F3代hLF羊9只,转基因整合率为52.9%(9/17)。ELISA方法测定F1、F2、F3代羊泌乳20周乳汁中hLF的表达发现,hLF在转基因羊乳汁中稳定表达,3个世代hLF羊乳中的平均表达量分别为351.75、340.00和326.25μg·mL-1。【结论】hLF基因的转入未对转基因羊群的繁殖性能产生显著影响,hLF基因能在山羊群体世代间稳定遗传和表达。

关键词：人乳铁蛋白转基因山羊繁殖遗传表达稳定性

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山羊品种间体细胞核移植研究

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实验生物学报 2002年第4期35卷 278-282页

作者：陈建泉潘勇赵建阳曹莹莹徐旭俊周汝江张锁林王述宇成国祥上海转基因研究中心上海201203 上海杰隆生物工程股份有限公司

萨能奶山羊是著名的奶用山羊品种,波尔山羊则是世界著名的肉用山羊品种。为了研究波尔山羊体细胞在奶山羊卵母细胞中的去分化,我们将成年波尔山羊的颗粒细胞或耳皮肤成纤维细胞作为供核细胞(试验组),移入奶山羊中Ⅱ期的去核卵母细胞透... 详细信息

萨能奶山羊是著名的奶用山羊品种,波尔山羊则是世界著名的肉用山羊品种。为了研究波尔山羊体细胞在奶山羊卵母细胞中的去分化,我们将成年波尔山羊的颗粒细胞或耳皮肤成纤维细胞作为供核细胞(试验组),移入奶山羊中Ⅱ期的去核卵母细胞透明带下,经电融合和离子霉素与6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)激活,直接移入同期发情奶山羊输卵管或经体内培养,将发育的重构胚移入同期发情羊子宫内。妊娠早期作B超诊断,确立妊娠的观察至足月。同时将奶山羊的35日龄胎儿成纤维细胞作供核细胞(对照组),按试验组同样方法处理,将重构胚直接移入同期发情的奶山羊输卵管内。结果:试验组,波尔羊颗粒粒细胞与耳皮肤成纤维细胞的融合率分别为78.2%(115/147)、57.4%(116/202),重构胚卵裂率为85.8%(115/134),桑椹胚、囊胚的发育率38.8%(52/134),早期妊娠三头,分别于妊娠40、60、60日龄终止妊娠。对照组,融合率为89.5%(136/152),早期妊娠率为42.9%(6/14),四头受体足月分娩,产四头公羊羔,其中三头存活,一头分娩时死于肺不扩张,并体重过大,显示胎儿过大综合症。经基因型鉴定证实,这四头克隆羔羊均源于同一胎儿成纤维细胞系。以上结果表明,波尔羊体细胞核在奶山羊卵母细胞中能够去分化,并维持一定程度的发育。

关键词：奶山羊同期发情品种波尔山羊波尔羊日龄卵母细胞核细胞对照组早期妊娠

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浅谈中国加入WTO与肉山羊业的发展

引用

中国畜牧杂志 2004年第1期40卷 52-54页

作者：李福刚上海转基因研究中心/上海杰隆生物工程股份有限公司上海201203

近年来我国养羊业有了很大的发展，特别是肉山羊业的发展十分迅速，根据联合国粮农组织(FAO)1999年统计资料，1999年我国绵、山羊存栏数量约为2．69亿只，其中山羊占1．42亿只，肉山羊占山羊总数的1/3以上。山羊业的发展有力地促进了我... 详细信息

近年来我国养羊业有了很大的发展，特别是肉山羊业的发展十分迅速，根据联合国粮农组织(FAO)1999年统计资料，1999年我国绵、山羊存栏数量约为2．69亿只，其中山羊占1．42亿只，肉山羊占山羊总数的1/3以上。山羊业的发展有力地促进了我国羊肉、山羊绒和羊奶业的发展。山羊肉产量

关键词：中国 WTO 肉山羊业存栏数量

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转hLYZ基因山羊繁殖、遗传及hLYZ基因的表达稳定性

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江苏农业学报 2013年第3期29卷 570-573页

作者：乔娜徐旭俊刘思国王学斌陈建泉成国祥上海杰隆生物工程股份有限公司上海201210 上海转基因研究中心上海201210

为研究人溶菌酶(hLYZ)转基因山羊繁殖情况及外源基因在不同世代中的遗传与表达稳定性,通过常规育种方法对转hLYZ基因山羊进行繁殖,并采用PCR、Western-blot和ELISA方法对其后代个体进行整合与表达鉴定。经过3个繁殖周期,共获得转hLYZ基... 详细信息

为研究人溶菌酶(hLYZ)转基因山羊繁殖情况及外源基因在不同世代中的遗传与表达稳定性,通过常规育种方法对转hLYZ基因山羊进行繁殖,并采用PCR、Western-blot和ELISA方法对其后代个体进行整合与表达鉴定。经过3个繁殖周期,共获得转hLYZ基因山羊F1代9只,转基因整合率28.13%;F2代140只,转基因整合率45.31%;F3代22只,转基因整合率40.00%。hLYZ基因在G0、F1、F2代羊乳汁中稳定表达,3个世代平均表达量分别为3.46 g/L、2.28 g/L和2.22 g/L。研究结果表明转hLYZ基因山羊能正常繁殖,hLYZ基因能在山羊群体中稳定遗传和表达。

关键词：人溶菌酶转基因山羊遗传表达稳定性

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转hLF基因山羊血液生理生化指标检测分析

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南京农业大学学报 2016年第3期39卷 483-487页

作者：乔娜干驰朱佳琪徐旭俊陈建泉成国祥上海杰隆生物工程股份有限公司上海转基因研究中心上海转基因动物育种与制药工程技术研究中心上海201210

[目的]本试验旨在研究人乳铁蛋白(human lactoferrin,h LF)基因的整合对转基因山羊代谢和血液学指标的影响。[方法]选择出生日期相近,饲养条件相同,健康、无病的转h LF基因山羊(试验组)30只,非转基因山羊(对照组)20只,公、母各半,分别... 详细信息

[目的]本试验旨在研究人乳铁蛋白(human lactoferrin,h LF)基因的整合对转基因山羊代谢和血液学指标的影响。[方法]选择出生日期相近,饲养条件相同,健康、无病的转h LF基因山羊(试验组)30只,非转基因山羊(对照组)20只,公、母各半,分别在不同时期检测血液常规指标白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)等,血液生化指标直接胆红素(DBIL)、肌酐(CREA)、甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU)、尿素等,并对指标进行品种(转h LF基因羊和非转基因羊)和性别间的比较分析。[结果]各时期转h LF基因羊与正常非转基因羊的白细胞数、红细胞数、血红蛋白含量和红细胞压积差异均不显著(P>0.05),18月龄雄性转h LF基因羊总蛋白水平显著高于非转基因羊(P<0.05)。各时期性别间的比较结果显示:直接胆红素、甘油三酯、丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶和尿素等指标在不同性别之间存在显著差异(P<0.05),其他各项生化指标在各时期的转基因羊和非转基因羊之间、性别之间差异均不显著(P>0.05)。[结论]h LF基因对山羊的代谢和血液学指标无显著影响。

关键词：人乳铁蛋白转基因山羊血液常规指标血液生化指标

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B型超声妊娠诊断技术在波尔山羊胚胎移植产业化中的应用

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中国畜牧杂志 2003年第1期39卷 24-25页

作者：李福刚高功奇徐旭俊袁玉国聂春应上海市转基因研究中心/上海杰隆生物工程股份有限公司上海201203

应用B型超声断层扫描仪对 2 79只波尔山羊胚胎移植受体白山羊和 87只自然交配波尔山羊进行早期妊娠检查。在胚胎移植后 2 0～ 10 0天试验羊妊娠诊断阴性 (B超判断未怀孕 )的准确率为 10 0 % ;正常交配羊妊娠诊断阳性 (B超判断怀孕 )的... 详细信息

应用B型超声断层扫描仪对 2 79只波尔山羊胚胎移植受体白山羊和 87只自然交配波尔山羊进行早期妊娠检查。在胚胎移植后 2 0～ 10 0天试验羊妊娠诊断阴性 (B超判断未怀孕 )的准确率为 10 0 % ;正常交配羊妊娠诊断阳性 (B超判断怀孕 )的准确率为 10 0 % ;部分胚胎移植后 2 0天左右的受体羊出现假阳性 ,这可能与胚胎移植后胎儿发育停止或出现流产或手术造成的粘连有关。试验证明 ,在胚胎移植 (2 - 8细胞胚胎 ) 30天以后进行B超妊娠检查不仅可准确判断妊娠情况 ,而且能得到胚胎移植羊流产或妊娠中止的数据 ,试验说明 ,B超妊娠诊断是目前波尔山羊胚胎移植产业化过程中的一个重要环节。

关键词：产业化应用妊娠超声扫描诊断波尔山羊胚胎移植 B型超声诊断仪

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山羊乳腺生物反应器表达人促红细胞生成素的分离纯化

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中国生物工程杂志 2004年第8期24卷 59-62页

作者：田阳苗静陈光玉陈辉成国祥上海转基因研究中心上海杰隆生物工程股份有限公司上海201203

以离子交换、疏水作用、HPLC和凝胶过滤层析等方法对山羊乳腺生物反应器表达的人促红细胞生成素 (erythropoietin ,EPO)进行了分离纯化 ,初步探讨了其分离工艺 ,结果得到了纯度达到 96%以上的纯品 ,所纯化的EPO分子质量为 32kDa ,糖基... 详细信息

以离子交换、疏水作用、HPLC和凝胶过滤层析等方法对山羊乳腺生物反应器表达的人促红细胞生成素 (erythropoietin ,EPO)进行了分离纯化 ,初步探讨了其分离工艺 ,结果得到了纯度达到 96%以上的纯品 ,所纯化的EPO分子质量为 32kDa ,糖基化程度根据理论分子质量测算为40 %。Western blot证明所得纯化产品具有天然EPO免疫原性 ,N端氨基酸序列测定与文献报道一致 ,ELISA检测免疫活性为 2 4 0 0 0 0IU mg,表明通过 4步纯化步骤可以得到高纯度的产品。

关键词：山羊乳腺生物反应器红细胞生成素糖蛋白激素纯化

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利用PRNP-/-羊制备朊蛋白多克隆抗体及其特性分析

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中国农业科学 2012年第7期45卷 1399-1405页

作者：王学斌俞慧清吴晓东徐旭俊陈建泉成国祥上海转基因研究中心中国动物卫生与流行病学中心上海杰隆生物工程股份有限公司

【目的】利用朊蛋白双基因敲除(PRNP-/-)羊制备朊蛋白多克隆抗体,并对其特性进行分析。【方法】构建山羊朊蛋白(PrP)原核表达载体,转入大肠杆菌并诱导表达,纯化获得羊PrP;将获得的PrP免疫PRNP-/-山羊,制备朊蛋白特异性的多克隆抗体;并... 详细信息

【目的】利用朊蛋白双基因敲除(PRNP-/-)羊制备朊蛋白多克隆抗体,并对其特性进行分析。【方法】构建山羊朊蛋白(PrP)原核表达载体,转入大肠杆菌并诱导表达,纯化获得羊PrP;将获得的PrP免疫PRNP-/-山羊,制备朊蛋白特异性的多克隆抗体;并对获得的朊蛋白多克隆抗体进行ELISA及Western-blot检测。【结果】获得了大量的朊蛋白特异性抗血清,间接ELASA检测抗血清中朊蛋白多克隆抗体的效价为25600;Western-blot检测显示所制备抗体不仅可以识别鼠、牛、羊脑组织内源性朊蛋白,而且能识别鼠脑组织内朊病毒。【结论】PRNP-/-转基因山羊可用于制备大量高亲和力朊蛋白多克隆抗体,获得的抗体可用于多种动物朊蛋白及朊病毒类疾病的检测。

关键词：朊蛋白朊病毒多克隆抗体朊蛋白双基因敲除山羊

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利用家畜乳腺高效生产人溶菌酶

利用家畜乳腺高效生产人溶菌酶

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作者：成国祥刘思国陈建泉俞慧清张爱民 201210上海市浦东新区张江蔡伦路88号

本发明涉及利用家畜乳腺高效生产人溶菌酶,公开了一种乳腺特异性表达的融合基因,该融合基因从5’至3’依次包含以下元件：牛β-乳球蛋白基因的5’侧翼序列,人溶菌酶基因,和牛生长激素基因3’侧翼序列。本发明还公开了一种制备转基因...

标准号: CN101603045

本发明涉及利用家畜乳腺高效生产人溶菌酶,公开了一种乳腺特异性表达的融合基因,该融合基因从5’至3’依次包含以下元件：牛β-乳球蛋白基因的5’侧翼序列,人溶菌酶基因,和牛生长激素基因3’侧翼序列。本发明还公开了一种制备转基因动物的方法。本发明还公开了一种高效安全的去除标记基因的转基因家畜制备方法。

关键词：

来源：评论

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乳铁蛋白在预防和治疗肿瘤转移中的用途

乳铁蛋白在预防和治疗肿瘤转移中的用途

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作者：成国祥孙伟刘思国陈建泉 201210 上海市浦东新区蔡伦路88号

本发明提供了乳铁蛋白在预防和治疗肿瘤转移中的用途。具体地，本发明提供了乳铁蛋白在制备预防或抑制肿瘤转移或肿瘤细胞迁移的药物中的用途。本发明的药理实验证明：本发明提供的人乳铁蛋白对肿瘤转移具有良好的预防和治疗效果，能够... 详细信息

标准号: CN102600459B

本发明提供了乳铁蛋白在预防和治疗肿瘤转移中的用途。具体地，本发明提供了乳铁蛋白在制备预防或抑制肿瘤转移或肿瘤细胞迁移的药物中的用途。本发明的药理实验证明：本发明提供的人乳铁蛋白对肿瘤转移具有良好的预防和治疗效果，能够明显抑制小鼠黑色素瘤等恶性肿瘤的转移、定植及生长。

关键词：乳铁蛋白肿瘤转移预防小鼠黑色素瘤抑制肿瘤转移肿瘤细胞迁移人乳铁蛋白药理实验治疗效果恶性肿瘤定植制备抑制生长治疗转移证明明显

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