检索结果-内蒙古大学图书馆

基于CRISPR/Cas9技术的刚地弓形虫bfd2缺陷虫株的构建及表型分析

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2025年第02期 217-222页

作者：章孝成胡媛彭荟沈玉娟刘华曹建平中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所（国家热带病研究中心）；传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室；国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室；世界卫生组织热带病合作中心；科技部国家级热带病国际联合研究中心上海交通大学医学院-国家热带病研究中心全球健康学院

目的基于成簇规律间隔短回文重复序列核酸酶技术（CRISPR/Cas9）构建刚地弓形虫ME49株缓殖子形成缺陷基因2 (bfd2)缺陷虫株并进行表型分析，探讨弓形虫BFD2对虫体分化和增殖作用。方法运用E-CRISPR数据库设计bfd2向导RNA (SgRNA)，并... 详细信息

目的基于成簇规律间隔短回文重复序列核酸酶技术（CRISPR/Cas9）构建刚地弓形虫ME49株缓殖子形成缺陷基因2 (bfd2)缺陷虫株并进行表型分析，探讨弓形虫BFD2对虫体分化和增殖作用。方法运用E-CRISPR数据库设计bfd2向导RNA (SgRNA)，并使用Q5定点基因敲除试剂盒突变pSAG1::CAS9-U6::SgUPRT质粒上的SgRNA，构建pSAG1::CAS9-U6::SgBFD2质粒。将乙胺嘧啶抗性基因、bfd2基因上下游序列连接成供体DNA(donorDNA)并克隆于pUC19质粒上，PCR扩增donorDNA。以ME49虫株为背景，pSAG1::CAS9-U6::SgBFD2质粒和donorDNA片段电穿孔共转染ME49弓形虫速殖子，电转后悬液接种至人包皮成纤维细胞（HFF）,3μmol/L乙胺嘧啶单克隆筛选电转虫株。将筛选出的单克隆虫株接种HFF细胞，培养传代后，PCR鉴定虫株?bfd2敲除情况。通过体外增殖试验观察虫株在HFF内的增殖情况，噬斑试验观察虫株在HFF细胞上形成噬斑的能力，苏木精-伊红（HE）染色观察虫株感染小鼠的肝脏病理情况。采用GraphPadPrism9进行统计学分析，实验数据使用双尾非成对Studentt检验和ANOVA检验。结果成功构建pSAG1::CAS9-U6::SgBFD2质粒和donorDNA质粒，编码乙胺嘧啶抗性基因（DHFR）序列成功插入靶位点，经PCR鉴定、筛选出?bfd2基因敲除单克隆虫株（ME49?bfd2株）。增殖试验结果显示，ME49株感染的HFF内，每个纳虫泡中> 16、=16和≤8个速殖子的纳虫泡数量占比分别为（55.33±5.03）%、（27.00±3.00）%和（17.67±4.04）%,ME49?bfd2株感染的分别为（25.33±4.16）%、（42.67±3.06）%和（32.00±6.93）%,ME49株感染的HFF中> 16个速殖子的纳虫泡数量高于ME49?bfd2虫株（t=6.337,P <0.01）。噬斑试验结果显示，接种100、1 000、10 000个ME49株速殖子感染的HFF分别形成（13.50±3.11）、（119.75±4.86）和（264.25±28.61）个噬斑，均高于ME49?bfd2株感染的（1.25±0.96）、（6.75±0.96）和（22.00±5.72）个（t=7.415、 57.72、 18.04，均P <0.01）。HE结果显示，ME49?bfd2株感染小鼠肝脏炎症较ME49株感染小鼠减轻。结论基于CRISPR/Cas9技术成功构建BFD2缺陷虫株，且BFD2的缺失可抑制弓形虫的分化、增殖，并减轻小鼠肝脏炎症。

关键词：刚地弓形虫缓殖子形成缺陷基因2 CRISPR/Cas9 表型分析质粒

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建设无烟健康中国,献礼建党100周年--回顾我国控烟之路

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中国临床医生杂志 2021年第8期49卷 I0001-I0001,I0002页

作者：刘朝肖丹中日友好医院烟草病学与戒烟中心、世界卫生组织戒烟与呼吸疾病预防合作中心、国家呼吸医学中心、国家呼吸系统疾病临床医学研究中心、中国医学科学院呼吸病学研究院

吸烟危害健康是不争的医学事实。在1978年全国科学大会上,“中国控烟之父”翁心植院士建议成立专门组织,领导全国开展控烟运动,并积极开展“吸烟有害健康”的宣传教育工作。1979年7月,在国务院批准下,卫生部、财政部、农业部及轻工业部... 详细信息

吸烟危害健康是不争的医学事实。在1978年全国科学大会上,“中国控烟之父”翁心植院士建议成立专门组织,领导全国开展控烟运动,并积极开展“吸烟有害健康”的宣传教育工作。1979年7月,在国务院批准下,卫生部、财政部、农业部及轻工业部四部联合发布了吸烟危害健康和控制吸烟的通知,明确了我国政府对控烟的立场。1984年,翁心植院士开展了我国吸烟状况调查,填补了我国控烟领域的空白,为制定控烟战略提供了科学、可信的依据。他在75岁高龄时,率代表团远赴巴黎,申办第十届世界烟草与健康大会。为表彰翁心植院士在控烟事业中的贡献,1989年,翁心植院士获得世界卫生组织颁授的烟草或健康纪念奖金质奖章,成为获此殊荣的第一位中国人。2001年,世界卫生组织破例再度将此奖授予翁心植院士.

关键词：全国科学大会吸烟危害控烟翁心植宣传教育工作控制吸烟吸烟状况世界卫生组织

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带您了解耳朵的秘密

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生活与健康 2022年第3期 1-1,4-11页

作者：王宁宇杜晶艳首都医科大学附属北京朝阳医院耳鼻咽喉头颈外科首都医科大学耳鼻喉学院国际耳内科医师协会中国分会中国老年医学学会耳科学分会第一届委员会世界卫生组织全球防聋合作中心防聋专家委员会不详

我们为什么要做医学科普?为什么医学科普很重要?理由可能一箩筐,从大处说,是响应国家号召,普及科学知识,提高国民素质。但我更愿意从临床医生的角度去思考这个问题。从我父母到我自己,加起来已有70年的行医经历,在此期间,医学进步日新月... 详细信息

我们为什么要做医学科普?为什么医学科普很重要?理由可能一箩筐,从大处说,是响应国家号召,普及科学知识,提高国民素质。但我更愿意从临床医生的角度去思考这个问题。从我父母到我自己,加起来已有70年的行医经历,在此期间,医学进步日新月异,疾病的治愈率今非昔比,可是每天面对的患者并没有减少。这其中有很多原因,也有很多亟待解决的问题,医学科普就是需要格外重视的一个领域。只有搞好医学科普,才可以从根本上减少疾病发生、做到疾病诊治“三早”,以达到延长寿命、快乐生活的终极目的。

关键词：医学进步医学科普临床医生亟待解决的问题终极目的延长寿命提高国民素质疾病诊治

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老年医学领域的临床实践指南:现状、挑战、发展

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老年医学与保健 2022年第2期28卷 227-230页

作者：王晓辉陈耀龙兰州大学公共卫生学院甘肃兰州730000 兰州大学健康数据科学研究院甘肃兰州730000 兰州大学基础医学院循证医学中心中国医学科学院循证评价与指南研究创新单元甘肃兰州730000 世界卫生组织指南实施与知识转化合作中心甘肃兰州730000

人口老龄化是当今全球人口发展的趋势,联合国发布的2019年《世界人口展望》显示,2020年全球60岁以上的人口将达到10.5亿,占全世界人口的13.5%。相较于全世界,我国人口老龄化更加突出:2020年,中国60岁以上的人口约2.6亿,占我国总人口的18... 详细信息

人口老龄化是当今全球人口发展的趋势,联合国发布的2019年《世界人口展望》显示,2020年全球60岁以上的人口将达到10.5亿,占全世界人口的13.5%。相较于全世界,我国人口老龄化更加突出:2020年,中国60岁以上的人口约2.6亿,占我国总人口的18.7%。研究显示,23%的全球疾病总负担归因于60岁以上的人群[1]。老龄人口的增长给全球医疗卫生事业带来了挑战[2]。

关键词：老年医学临床实践指南方法学质量

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基于LAMP-CRISPR/Cas12a的日本血吸虫核酸快速检测方法的建立与初步评价

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2025年第02期 167-174页

作者：林伟娜邓王平杨颖李银龙秦志强洪炀冯婷吕超许静中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所（国家热带病研究中心）；传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室；国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室；世界卫生组织热带病合作中心；科技部国家级热带病国际联合研究中心上海交通大学医学院-国家热带病研究中心全球健康学院

目的结合环介导等温扩增（LAMP）技术与规则成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白12a（CRISPR/Cas12a）系统，建立一种高度敏感、特异的日本血吸虫核酸片段的快速检测方法。方法选取Sj28S核糖体基因片段作为靶序列，设计LAMP引物、单链... 详细信息

目的结合环介导等温扩增（LAMP）技术与规则成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白12a（CRISPR/Cas12a）系统，建立一种高度敏感、特异的日本血吸虫核酸片段的快速检测方法。方法选取Sj28S核糖体基因片段作为靶序列，设计LAMP引物、单链DNA （ssDNA）和CRISPR RNA （crRNA），确定各组分浓度，筛选最佳反应体系和条件，建立日本血吸虫核酸LAMP-CRISPR/Cas12a快速荧光检测方法。用不同浓度的日本血吸虫成虫基因组DNA （1 ng/μl、100 pg/μl、10 pg/μl、1 pg/μl、100 fg/μl、10 fg/μl、1 fg/μl）及构建的含Sj28S核糖体基因片段的重组质粒(10～6、10～5、10～4、10～3、10～2、10～1、10～0、10-1拷贝/μl)评估该方法的敏感性，用日本血吸虫、曼氏血吸虫、华支睾吸虫、大片形吸虫、卫氏并殖吸虫、广州管圆线虫、多房棘球绦虫、湄公血吸虫感染的开放拟钉螺以及日本血吸虫感染湖北钉螺和阴性湖北钉螺基因组DNA评价其特异性。构建40、20、10条日本血吸虫尾蚴感染小鼠模型，采集感染后第3～6周小鼠粪样以及感染后第3天及第1～6周小鼠血浆样本，以qPCR法为平行对照，评价所建方法检测日本血吸虫感染鼠粪样与血浆DNA的效果。结果选择crRNA-2建立LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法，筛选ssDNA、crRNA和Cas12a的最适终浓度分别为400、200、200 nmol/L,LAMP预扩增时间为30 min。该方法对日本血吸虫成虫基因组的最低检出限为10 fg/μl，对重组质粒的最低检出限为1拷贝/μl。该方法与曼氏血吸虫、华支睾吸虫、大片形吸虫、卫氏并殖吸虫、广州管圆线虫、多房棘球绦虫等常见寄生虫以及湄公血吸虫感染的开放拟钉螺和阴性湖北钉螺等中间宿主基因组DNA均无交叉反应。LAMP-CRISPR/Cas12a、qPCR法对感染小鼠混合粪样检测阳性率分别为85.42%（41/48）和51.02%（175/343）(χ2=8.71,P<0.05)，且LAMP-CRISPR/Cas12a法最早可检出小鼠感染后第3周的粪样，早于qPCR法（可检出感染第4周粪样）。LAMP-CRISPR/Cas12a、qPCR法对感染小鼠血浆样本检测阳性率分别为58.3%（28/48）和27.11%（93/343）(χ2=9.77,P<0.05);LAMP-CRISPR/Cas12a和qPCR方法均最早可检出小鼠感染后第3天血浆中的血吸虫循环DNA，阳性率分别为53.06%（26/49）、22.45%（11/49）(χ2=9.77,P<0.05)。结论本研究建立了一种LAMP-CRISPR/Cas12a日本血吸虫核酸快速检测方法，操作简便快捷、高度敏感与特异，且具有较好的早期检测价值，有望为血吸虫病的现场检测提供新的工具。

关键词：日本血吸虫环介导等温扩增 CRISPR/Cas12a

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S-烯虫酯对登革热媒介伊蚊控制效果的系统综述

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中国媒介生物学及控制杂志 2024年第1期35卷 115-120页

作者：胡文博杨丽萍包文风梁莹宋秀平苏天运刘小波李学文刘起勇山东大学齐鲁医学院公共卫生学院山东济南250012 山东大学齐鲁医学院公共卫生学院媒介生物控制学系山东济南250012 常州胜杰生命科技股份有限公司江苏常州213000 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所媒介生物控制室传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室世界卫生组织媒介生物监测与管理合作中心北京102206 EcoZone International RiversideCA 92506USA 新疆病媒传染病重点实验室新疆乌鲁木齐830002 山东大学齐鲁医学院公共卫生学院环境卫生学系山东济南250012

目的对现场单独应用S-烯虫酯控制登革热媒介伊蚊的中、英文文献进行系统检索,对其控制效果进行归类分析,并提出相应建议。方法使用“登革热”“S-烯虫酯”“dengue fever”“S-methoprene”等关键词系统检索Web of Science、Embase、Pub... 详细信息

目的对现场单独应用S-烯虫酯控制登革热媒介伊蚊的中、英文文献进行系统检索,对其控制效果进行归类分析,并提出相应建议。方法使用“登革热”“S-烯虫酯”“dengue fever”“S-methoprene”等关键词系统检索Web of Science、Embase、PubMed、中国知网、万方数据服务平台和维普中文科技期刊等数据库。检索时间范围为从1974年1月-2023年1月1日。结果最终纳入10篇文献,其中8项研究被归类为有效性研究,其余2项研究在半现场的环境中探明S-烯虫酯的有效性。筛选结果显示当S-烯虫酯应用于目标容器中的幼蚊时可以产生很好的羽化抑制效果,但在城镇或登革热疫区使用时,能够表明单独使用S-烯虫酯有效性的证据是有限的。结论S-烯虫酯可以在短期内有效减少容器中未发育成熟伊蚊的数量,但目前尚无足够的证据表明单独使用S-烯虫酯可以长期控制登革热媒介伊蚊。有必要进一步研究S-烯虫酯与其他控制登革热媒介伊蚊措施相结合的控制效果。

关键词：登革热 S-烯虫酯媒介伊蚊控制效果

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中国血吸虫病防控历史回顾与展望：从发现到阻断传播

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2025年第02期 155-161页

作者：许静王强郭苏影张利娟周晓农李石柱中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所（国家热带病研究中心）；传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室；国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室；世界卫生组织热带病合作中心；科技部国家级热带病国际联合研究中心上海交通大学医学院-国家热带病研究中心全球健康学院

我国发现首例现代确诊血吸虫病病例迄今已120年，经过几代人的努力，血吸虫病防治工作取得举世瞩目的成就。至2023年底，全国实现血吸虫病传播阻断目标，78.49%的流行县均达到了消除目标。但受气候变化、自然灾害、人口流动等因素影响... 详细信息

我国发现首例现代确诊血吸虫病病例迄今已120年，经过几代人的努力，血吸虫病防治工作取得举世瞩目的成就。至2023年底，全国实现血吸虫病传播阻断目标，78.49%的流行县均达到了消除目标。但受气候变化、自然灾害、人口流动等因素影响，全国要实现血吸虫病消除目标并持续巩固消除成果仍面临挑战。各地应继续坚持“以传染源控制为主、强化重点环境钉螺控制”的综合防治策略，加强监测预警和风险评估，以科技赋能，创新防治手段，强化能力建设，高质量推进消除进程。

关键词：血吸虫病发现阻断传播消除

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Tsc22d3在日本血吸虫感染小鼠肝脏NK细胞中的表达及对NK杀伤功能的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2025年第2期 175-180页

作者：徐方方陈权胡媛曹建平中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心) 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织热带病合作中心科技部国家级热带病国际联合研究中心上海交通大学医学院-国家热带病研究中心全球健康学院

目的探讨Tsc22结构域家族成员3 (Tsc22domainfamilymember3,Tsc22d3)在日本血吸虫感染小鼠肝脏自然杀伤（naturalkiller,NK）细胞亚群中的表达及其对NK细胞杀伤功能的影响。方法将42只C57BL/6雌性小鼠经腹部贴片法感染日本血吸虫尾蚴... 详细信息

目的探讨Tsc22结构域家族成员3 (Tsc22domainfamilymember3,Tsc22d3)在日本血吸虫感染小鼠肝脏自然杀伤（naturalkiller,NK）细胞亚群中的表达及其对NK细胞杀伤功能的影响。方法将42只C57BL/6雌性小鼠经腹部贴片法感染日本血吸虫尾蚴（20±1条/只），分别在感染前、感染后第4、6周取6只小鼠剖杀，磁珠分选富集肝脏NK细胞，并进行单细胞测序，分析Tsc22d3在NK细胞的表达及活化的信号通路。其余24只小鼠随机均分为感染组和对照组，每组12只，感染后第4、6周各取6只小鼠进行麻醉，分离小鼠肝非实质细胞，流式细胞术检测Tsc22d3在对照组和感染组小鼠肝脏NK细胞中的表达变化。采用脂质体转染法将空载质粒、Tsc22d3表达质粒转染NK92细胞，获得空载质粒对照组（NC组）和Tsc22d3过表达NK92细胞组（Tsc22d3+NK92细胞组）；用可溶性虫卵抗原（SEA）刺激Tsc22d3+NK92组和NC组24、48 h，流式细胞术和实时荧光定量PCR (qPCR)检测NK细胞中γ干扰素（IFN-γ）和穿孔素（Prf1）表达的变化。使用GraphPadPrism9软件进行统计学分析，两组比较采用t检验。结果单细胞测序结果提示，与感染前小鼠（2.41）相比，感染后第4周（3.16）、第6周（3.76） Tsc22d3的表达持续增加，Tsc22d3高表达于NK的C3亚群，KEGG结果显示C3亚群中NK细胞介导的细胞毒性通路显著活化；流式细胞术结果显示，感染组第4、第6周小鼠肝脏NK细胞中Tsc22d3+NK的占比分别为（0.24±0.01）%、（1.40±0.14）%，高于对照组的（0.12±0.02）%(t=12.110、22.010，均P <0.01)。SEA刺激24 h后Tsc22d3+NK92组中IFN-γ、Prf1的阳性细胞的占比分别为（1.66±0.15）%、（53.23±0.81）%，高于NC组的（0.88±0.13）%、（29.93±1.85）%(t=6.800、20.010，均P <0.01)。SEA刺激24 h后，Tsc22d3+NK92组中IFN-γ、Prf1的mRNA相对转录水平分别为1.53±0.24、1.41±0.04，均高于NC组的1.00±0.07、1.00±0.14 (t=3.573、4.973，均P <0.05、0.01);SEA刺激48 h后Tsc22d3+NK92组中IFN-γ、Prf1的mRNA相对转录水平分别为2.06±0.39、1.54±0.26，均高于NC组的1.06±0.44、1.00±0.04 (t=2.953、3.588，均P <0.05)。结论日本血吸虫感染进程中Tsc22d3高表达于肝脏NK的C3亚群，Tsc22d3高表达可增强NK细胞的杀伤功能。

关键词：日本血吸虫 Tsc22结构域家族成员3 肝纤维化自然杀伤细胞

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康复临床实践指南：方法学质量研究

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中国康复理论与实践 2020年第2期26卷 144-149页

作者：魏莉莉李浩冉王子君黄嘉骏周奇黄天相陈佩瑶李兴杰陈耀龙杨克虎兰州大学第二医院甘肃兰州市730000 兰州大学基础医学院循证医学中心甘肃兰州市730000 甘肃省循证医学与临床转化重点实验室甘肃兰州市730000 世界卫生组织国际分类家族中国合作中心北京市100068 中国ICF研究院/潍坊医学院山东潍坊市261053 世界卫生组织指南实施与知识转化合作中心甘肃兰州市730000 GRADE中国中心甘肃兰州市730000 兰州大学第一临床医学院甘肃兰州市730000

目的评价康复临床实践指南的方法学质量。方法检索PubMed、EMBASE、万方数据库、中国知网(CNKI)和中国生物医学文献数据库(CBM)及医脉通、英国国家卫生与临床优化研究所(NICE)、美国国立指南文库(NGC)、苏格兰校际指南协作网(SIGN)、世... 详细信息

目的评价康复临床实践指南的方法学质量。方法检索PubMed、EMBASE、万方数据库、中国知网(CNKI)和中国生物医学文献数据库(CBM)及医脉通、英国国家卫生与临床优化研究所(NICE)、美国国立指南文库(NGC)、苏格兰校际指南协作网(SIGN)、世界卫生组织(WHO)、国际指南协作网(GIN)网站已公开发表的与康复医学相关的临床实践指南,检索时限均为从建库至2020年1月11日。由2名研究人员独立筛选文献并交叉核对,基于指南研究与评价(AGREE)Ⅱ工具对纳入的临床实践指南的方法学质量进行评价。结果共纳入指南84篇,其中英文67篇,中文17篇。基于AGREEⅡ工具的整体评价平均得分为48.1%,其中国外指南为49.9%,国内指南为40.7%。AGREEⅡ6个领域中,除应用性外,国外指南平均得分均高于国内指南(|Z|>2.034,P<0.05);AGREEⅡ发布后,表达清晰性和编辑独立性的评分均高于发布前(Z>2.130,P<0.05);得分由高到低依次是范围和目的(41.6%)、表达清晰性(39.9%)、参与人员(24.5%)、制订严谨性(23.2%)、编辑独立性(15.5%)和应用性(12.9%)。结论国内外康复临床实践指南的方法学质量有待提高。建议未来康复指南制订者严格按照AGREEⅡ标准规范化制订并撰写相关指南,重视指南制订过程中的内容和全面性,从而更好地提升指南的质量。

关键词：康复临床实践指南指南研究与评价Ⅱ 指南评价

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水中运动治疗对脑性瘫痪儿童青少年运动功能和活动效果的系统评价与Meta分析

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中国康复理论与实践 2021年第1期27卷 79-92页

作者：崔尧萧敦武丁琳邱服冰丛芳邱卓英首都医科大学康复医学院北京市100068 中国康复研究中心北京博爱医院北京市100068 山西白求恩医院山西太原市030032 深圳大学体育部广东深圳市518060 中国ICF研究院山东潍坊市261000 中国康复科学所康复信息研究所北京市100068 世界卫生组织国际分类家族中国合作中心北京市100068

目的运用世界卫生组织国际健康分类家族的理论架构和方法,系统评价水中运动治疗对脑瘫儿童青少年运动功能及生活质量的干预效果。方法检索Cochrane Library、PEDro、PubMed、Embase、Web of Knowledge、Web of Science、OVID、EBSCO、... 详细信息

目的运用世界卫生组织国际健康分类家族的理论架构和方法,系统评价水中运动治疗对脑瘫儿童青少年运动功能及生活质量的干预效果。方法检索Cochrane Library、PEDro、PubMed、Embase、Web of Knowledge、Web of Science、OVID、EBSCO、中国生物医学期刊引文数据库、中国知网期刊全文数据库、万方数据知识服务平台、维普中文期刊全文数据库建库至2020年5月,筛选水中运动治疗应用于脑瘫儿童青少年的随机对照试验,进行方法学质量评价,提取相关数据,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果最终纳入9项研究,共162例。水中运动治疗能显著改善脑瘫儿童青少年的粗大运动功能测试量表评分(WMD=6.31,95%CI 2.57~10.06,P<0.001),对日常生活活动和生活质量也有改善作用。结论水中运动治疗有助于改善脑瘫儿童青少年的运动功能和活动,并可能改善其生活质量。

关键词：脑性瘫痪水中运动治疗运动功能活动生活质量 Meta分析

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