检索结果-内蒙古大学图书馆

禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织CD4^+/CD8^+细胞及相关细胞因子表达的影响

畜牧兽医学报 2020年第6期51卷 1447-1454页

作者：刘丹华郑世民刘晓静吕晓萍高雪丽刘超男东北农业大学动物医学学院黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室哈尔滨150030 北京昭衍新药研究中心股份有限公司北京100176

旨在探讨禽网状内皮组织增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织中T淋巴细胞数量以及相关细胞因子表达的影响。将96只1日龄SPF雏鸡随机分为REV感染组和对照组,应用流式细胞术、酸性α-醋酸萘酯酶染色(... 详细信息

旨在探讨禽网状内皮组织增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织中T淋巴细胞数量以及相关细胞因子表达的影响。将96只1日龄SPF雏鸡随机分为REV感染组和对照组,应用流式细胞术、酸性α-醋酸萘酯酶染色(acidα-naphthyl acetate esterase,ANAE)、荧光定量PCR等方法对上述指标进行检测。试验数据表明,与对照组相比,感染组雏鸡血液CD4^+T淋巴细胞数量在第7-35天显著降低、CD8^+T淋巴细胞数量在第7-28天显著升高,CD4^+/CD8^+比值在第7-28天显著降低(均P<0.05或P<0.01);局部淋巴组织哈德尔腺(Hader’s gland,HG)、派伊尔结(Peyer’s patch,PP)和盲肠扁桃体(caecal tonsil,CT)中ANAE^+T淋巴细胞数量均显著降低(均P<0.05或P<0.01);GH、PP和CT中细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α转录量都有不同程度升高。本研究表明,REV感染引起雏鸡血液中CD4^+T淋巴细胞数量降低、CD4^+/CD8^+T淋巴细胞比例失衡、局部淋巴组织中T淋巴细胞数量相对减少及细胞因子TNF-α转录持续升高与REV造成感染雏鸡细胞免疫功能显著降低密切相关。

关键词：禽网状内皮组织增生病病毒局部淋巴组织细胞免疫

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猪NLRC5对PK15细胞中SLA Ⅰ类分子表达的调控研究

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中国预防兽医学报 2021年第7期43卷 746-752页

作者：刘英华马丽娜王有祺高彩霞陈洪岩东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物与比较医学创新团队/国家禽类实验动物资源库黑龙江哈尔滨150069

为探究猪核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLR)家族端酶募集(CARD)结构域-5(NLRC5)在PK15细胞中的表达情况及其对猪白细胞抗原I类分子(SLA I)表达的调控作用,本研究利用不同终浓度(1μg/mL、1.5μg/mL、2μg/mL)Poly I:C刺激PK15细胞后24... 详细信息

为探究猪核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLR)家族端酶募集(CARD)结构域-5(NLRC5)在PK15细胞中的表达情况及其对猪白细胞抗原I类分子(SLA I)表达的调控作用,本研究利用不同终浓度(1μg/mL、1.5μg/mL、2μg/mL)Poly I:C刺激PK15细胞后24 h,通过荧光定量PCR(qPCR)和western blot方法分别检测NLRC5 mRNA转录水平和蛋白的表达水平;设计NLRC5的3条siRNA和对照siRNA分别转染PK15细胞48 h后,分别采用qPCR和western blot检测PK15细胞中NLRC5 mRNA转录水平和蛋白表达水平,从而筛选出最优敲低NLRC5表达的siRNA;将筛选出的最优siRNA和对照siRNA分别转染PK15细胞48 h后,采用qPCR分别检测PK15细胞中NLRC5和SLA I类分子mRNA的转录水平,采用western blot检测PK15细胞中NLRC5蛋白表达水平,通过流式细胞术检测PK15细胞表面SLA I类分子的表达。构建重组质粒pCAGGS-HA-NLRC5并鉴定正确后转染PK15细胞,48 h后,采用qPCR分别检测PK15细胞中NLRC5和SLA I类分子mRNA的转录水平,采用western blot检测PK15细胞中NLRC蛋白表达水平,通过流式细胞术检测PK15细胞表面SLA I类分子表达水平。结果显示,与正常PK15细胞相比,经不同浓度Poly I:C刺激后PK15细胞中NLRC5 mRNA转录水平和蛋白水平均显著升高(p<0.01)。siRNA的筛选结果显示,NLRC5-sus-3为最优siRNA;将其转染PK15细胞后的qPCR和流式细胞术检测结果显示,与转染对照siRNA的PK15细胞相比,敲低NLRC5的PK15细胞中SLA I类分子的mRNA转录水平(p<0.01)和细胞表面SLA I类分子的表达水平均显著降低(p<0.01);重组质粒pCAGGS-HA-NLRC5转染PK15细胞后的结果显示,NLRC5 mRNA转录水平和蛋白水平均显著增高(p<0.01),表明NLRC5在PK15细胞中获得了过表达。qPCR和流式细胞术结果显示,过表达NLRC5后的PK15细胞中SLA I类分子mRNA的转录水平(p<0.01)和其在细胞表面的表达量均升高(p<0.05)。综上所述,经Poly I:C刺激可促进PK15细胞中NLRC5的表达,且NLRC5对SLA I类分子的表达具有正调控作用。本实验是首次在猪源细胞中进行了NLRC5对SLA I类分子表达的调控研究,为进一步探究机体在病原感染过程中的免疫防御机制提供了新思路。

关键词： PK15细胞猪NLRC5 SLAⅠ类分子表达

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融媒体时代大学生科普实践创新——以自办动物医学类杂志《刃知》为例

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畜牧兽医科技信息 2021年第2期37卷 6-8页

作者：韩秀臻孙可欣单雅婷罗严白志坤罗继龙东北农业大学黑龙江实验动物与比较医学重点实验室黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学艺术学院黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物科学与技术学院黑龙江哈尔滨150030

融媒体时代背景下,传统科普杂志的运营管理模式的弊端尽显,科普杂志产业受到巨大冲击,然而相较于网络科普形式,科普杂志在发挥科普功能时仍有着新兴互联网媒体所无可比拟的优势。《刃知》是主要面向东北农业大学学生的借助融媒体进行创... 详细信息

融媒体时代背景下,传统科普杂志的运营管理模式的弊端尽显,科普杂志产业受到巨大冲击,然而相较于网络科普形式,科普杂志在发挥科普功能时仍有着新兴互联网媒体所无可比拟的优势。《刃知》是主要面向东北农业大学学生的借助融媒体进行创作推广的学生自办科普刊物。本文以《刃知》为例,对其创新性的制作模式和运营方式进行分析,以供同类科普杂志转型参考。

关键词：融媒体科普杂志《刃知》创新

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基于图灵机器人的兽医辅助临床诊断APP开发的研究

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中国兽医杂志 2020年第2期56卷 42-45页

作者：杨凯一刘中旺王楚翘范月圆顾莹罗严尹航冯国峰白志坤东北农业大学动物医学学院实验动物与比较医学重点实验室黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学经济管理学院黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物科学与技术学院黑龙江哈尔滨150030

开发出一款适用于兽医临床病例分析和诊断的手机APP,不仅可以加快临床兽医的决策过程,而且可以辅助没有专业知识的宠物主了解病情。本文阐述了借助Android手机软件开发平台APP Inventor与图灵机器人API相结合设计并开发一款基于移动终... 详细信息

开发出一款适用于兽医临床病例分析和诊断的手机APP,不仅可以加快临床兽医的决策过程,而且可以辅助没有专业知识的宠物主了解病情。本文阐述了借助Android手机软件开发平台APP Inventor与图灵机器人API相结合设计并开发一款基于移动终端的智能诊断APP的具体实施步骤及技术实现。该款APP可以为兽医临床诊断提供快速便捷的线上帮助。

关键词：图灵机器人病例分析辅助治疗 APP Inventor

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加米霉素在比格犬体内的药代动力学研究

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动物医学进展 2020年第4期41卷 67-71页

作者：刘雪松杨庆稳张承欢雷磊牟婧范玉营丁焕中刘云东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室黑龙江哈尔滨150030 华南农业大学兽医学院广东广州510642 重庆三峡职业学院动物科技系重庆404155

为探究加米霉素在比格犬体内的药物代谢动力学特征,了解其在比格犬机体内的吸收、分布、转化以及排泄规律,选取6只比格犬,加米霉素以推荐剂量6 mg/kg皮下以及静脉分别单次给药,分别于不同时间点静脉采集犬血液,用高效液相色谱串联二级... 详细信息

为探究加米霉素在比格犬体内的药物代谢动力学特征,了解其在比格犬机体内的吸收、分布、转化以及排泄规律,选取6只比格犬,加米霉素以推荐剂量6 mg/kg皮下以及静脉分别单次给药,分别于不同时间点静脉采集犬血液,用高效液相色谱串联二级质谱法测定血液中药物浓度。用非房室模型对药时曲线进行分析,皮下注射药动学参数为:达峰时间(T max)为0.875 h±0.186 h,消除半衰期(T 1/2β)为59.978 h±7.861 h,药时曲线下面积(AUC)为4.912μg·h/mL±0.738μg·h/mL。静脉注射药动学参数为:达峰时间(T max)为0.336 h±0.144 h,消除半衰期为(T 1/2β)为49.028 h±5.012 h,药时曲线下面积(AUC)为3.774μg·h/mL±0.211μg·h/mL。试验结果表明,静脉或皮下注射加米霉素后,药物在比格犬体内的浓度较高,且皮下注射的生物利用度较高,推荐使用皮下注射的方式给药。

关键词：加米霉素比格犬静脉注射皮下注射药物代谢动力学

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联合用药对奶牛源乳房链球菌耐药突变选择窗的影响

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黑龙江畜牧兽医 2020年第24期 77-82页

作者：张佩李婉莹关桐旭刘雪松杜垣逸刘云东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室(外科) 哈尔滨150030 黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院黑龙江齐齐哈尔161005

为了探讨体外阿米卡星(AK)与头孢噻呋(EFT)、红霉素(E)以及马波沙星(MBF)单独及联合应用对奶牛乳房链球菌耐药突变选择窗(MSW)的影响,试验对临床采集的奶样进行乳房链球菌的分离鉴定,采用微量肉汤稀释法和棋盘法测定AK、EFT、E、MBF单... 详细信息

为了探讨体外阿米卡星(AK)与头孢噻呋(EFT)、红霉素(E)以及马波沙星(MBF)单独及联合应用对奶牛乳房链球菌耐药突变选择窗(MSW)的影响,试验对临床采集的奶样进行乳房链球菌的分离鉴定,采用微量肉汤稀释法和棋盘法测定AK、EFT、E、MBF单用及联用后对分离的乳房链球菌的最小抑菌浓度(MIC),计算部分抑菌浓度(FIC)指数,判断药物联用后的相互作用;采用琼脂二倍稀释法测定药物单用及联用后对乳房链球菌的的防耐药突变浓度(MPC),计算选择指数SI(MPC/MIC),判定能否缩小MSW,筛选出最佳联合用药方案。结果表明:分离得到7株乳房链球菌,单用时,AK、EFT、E、MBF对分离的7株乳房链球菌的MIC分别为8~64、0.5~8、0.125~16、1~16μg/mL;联用后,AK与EFT、E、MBF的FIC指数分别为0.5~1、0.3125~0.75、0.3125~0.75。单用时,AK、EFT、E、MBF对分离的7株乳房链球菌的MPC分别为128~512、64~512、16~256、64~512μg/mL;AK与EFT、E、MBF联用后,SI分别为原来的50%~100%、25%~100%、12.5%~100%。说明AK与其他三种药物联用后,对乳房链球菌均具有协同或相加作用,且AK与其他三种药物联用后均可以缩小MSW,其中AK与MBF联用后效果较为明显。

关键词：乳房链球菌联合用药耐药突变选择窗最小抑菌浓度防突变浓度

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鸡骨髓源树突状细胞体外诱导

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畜牧兽医学报 2019年第12期50卷 2571-2577页

作者：张淑君周放吴乐高雪丽刘超男吕晓萍郑世民东北农业大学动物医学学院黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室

为了探讨鸡骨髓源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)的体外诱导培养方法,并分析鸡树突状细胞(DCs)的主要生物学特性,将用淋巴细胞分离液分离的鸡骨髓细胞经差速贴壁纯化后获得单个核细胞,然后经粒细胞-巨噬细胞集... 详细信息

为了探讨鸡骨髓源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)的体外诱导培养方法,并分析鸡树突状细胞(DCs)的主要生物学特性,将用淋巴细胞分离液分离的鸡骨髓细胞经差速贴壁纯化后获得单个核细胞,然后经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)体外诱导分化,细胞培养后第7天再加入脂多糖(LPS)继续培养48 h刺激成熟,分别于倒置显微镜和电子显微镜下进行形态变化观察,同时应用流式细胞仪对鸡骨髓源树突状细胞表面标志进行分析、鉴定。结果显示鸡骨髓细胞培养7 d后,细胞体积增大,细胞表面长出树突状小突起,细胞表面高表达MHCⅡ和CD11c分子,经LPS刺激后,突起伸长变粗,扫描电镜观察呈典型的树突状细胞形态,细胞表面MHCⅡ表达显著升高,依据上述方法成功获得大量而高纯度的鸡骨髓源树突状细胞,为进一步研究禽类DCs的生物学功能及其在某些疾病发生中的作用奠定了基础。

关键词：鸡骨髓源树突状细胞鉴定生物学特征

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抗菌肽Sublancin对蛋鸡免疫功能的影响研究

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中国预防兽医学报 2020年第3期42卷 268-273页

作者：田丽娜王秀荣李广兴东北农业大学动物医学学院/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为研究抗菌肽Sublancin对蛋鸡免疫功能的调节作用,本研究将216只海兰褐壳蛋鸡随机分为对照组(饲喂基础饲粮,C组)、低剂量抗菌肽组(饲喂基础饲粮+100 mg/kg Sublancin,L组)、中剂量抗菌肽组(饲喂基础饲粮+200 mg/kg Sublancin,M组)和高... 详细信息

为研究抗菌肽Sublancin对蛋鸡免疫功能的调节作用,本研究将216只海兰褐壳蛋鸡随机分为对照组(饲喂基础饲粮,C组)、低剂量抗菌肽组(饲喂基础饲粮+100 mg/kg Sublancin,L组)、中剂量抗菌肽组(饲喂基础饲粮+200 mg/kg Sublancin,M组)和高剂量抗菌肽组(饲喂基础饲粮+300 mg/kg Sublancin,H组)进行抗菌肽调控蛋鸡免疫的实验。实验持续30 d,分别在饲喂Sublancin后第1 d、15 d和30 d用ELISA试剂盒检测每组鸡血清中免疫球蛋白IgA、IgG和IgM含量;检测肝脏和脾脏指数;利用免疫印迹法检测每组鸡脾脏中干扰素γ(IFN-γ)表达;利用ELISA试剂盒检测每组鸡血清中IL-2、IL-4和IL-6含量。结果显示:与C组比较,L组、M组和H组鸡血清中IgA、IgG和IgM含量、肝脏和脾脏指数、脾脏中IFN-γ的表达、血清中IL-2、IL-4和IL-6的含量在饲喂Sublancin后第1 d均无显著变化(p>0.05),在饲喂Sublancin后第15 d和第30 d均显著升高(p<0.05);与L组比较,M组和H组中上述检测指标在饲喂Sublancin后第15 d和第30 d均显著升高(p<0.05);与M组比较,H组中上述检测指标在饲喂Sublancin后第15 d和第30 d均无显著变化(p>0.05)。实验表明饲粮中添加抗菌肽Sublancin可以显著增强蛋鸡免疫力,其添加浓度在100 mg/kg^200 mg/kg时,作用效果有剂量依赖性;但添加浓度在200 mg/kg^300 mg/kg时,作用效果与浓度无关。本研究为家禽养殖业中功能性饲料添加剂的开发及抗菌肽Sublancin在养殖业中的应用提供了新的参考依据。

关键词：抗菌肽 Sublancin 蛋鸡免疫功能

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恩诺沙星在比格犬体内的药代动力学研究

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动物医学进展 2020年第12期41卷 132-136页

作者：张佩刘雪松姜岩迟新宇刘云东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室(外科) 黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院黑龙江齐齐哈尔161005

为探究恩诺沙星在比格犬体内的药物代谢动力学特征,了解其在比格犬机体内的吸收、分布、转化以及排泄规律,选取12只比格犬,恩诺沙星以推荐剂量2.5 mg/kg剂量分别静脉、皮下以及肌肉注射,于不同时间点静脉采集犬血液,利用高效液相色谱法... 详细信息

为探究恩诺沙星在比格犬体内的药物代谢动力学特征,了解其在比格犬机体内的吸收、分布、转化以及排泄规律,选取12只比格犬,恩诺沙星以推荐剂量2.5 mg/kg剂量分别静脉、皮下以及肌肉注射,于不同时间点静脉采集犬血液,利用高效液相色谱法测定血液中药物浓度。用非房室模型对药时数据进行分析,静脉注射药动学参数为:达峰时间(Tmax)为0.083 h±0.013 h,消除半衰期(T1/2β)为1.486 h±0.861 h,药时曲线下面积(AUC)为2.524μg.h/mL±0.438μg.h/mL;皮下注射药动学参数为:达峰时间(Tmax)为0.167 h±0.071 h,消除半衰期为(T1/2β)为6.418 h±1.012 h,药时曲线下面积(AUC)为2.136μg.h/mL±0.311μg.h/mL;肌肉注射药动学参数为:达峰时间(Tmax)为0.167 h±0.044 h,消除半衰期(T1/2β)为4.161 h±1.012 h,药时曲线下面积(AUC)为2.976μg.h/mL±0.111μg.h/mL。结果表明,恩诺沙星皮下注射消除半衰期相对较长,推荐使用。

关键词：恩诺沙星药物代谢动力学比格犬

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鸡Skp2实时荧光定量RT-PCR方法的建立及应用

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中国家禽 2019年第24期41卷 17-22页

作者：吴乐高海婷刘超男高雪丽张淑君周放吕晓萍边洋郑世民东北农业大学动物医学学院黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室

为了建立以及应用鸡细胞S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)的实时荧光定量PCR方法,以鸡Skp2基因为研究对象,根据GenBank中已发表的鸡Skp2和β-actin序列的高度保守区域设计引物,构建重组质粒作为标准品,成功... 详细信息

为了建立以及应用鸡细胞S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)的实时荧光定量PCR方法,以鸡Skp2基因为研究对象,根据GenBank中已发表的鸡Skp2和β-actin序列的高度保守区域设计引物,构建重组质粒作为标准品,成功建立了检测鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)中Skp2 mRNA表达的实时荧光定量RT-PCR方法,并对其Tm值和引物浓度等进行了优化。该方法最优反应体系为20.0μL,包含Real-time PCRMaster mix(2×)10.0μL,上、下游引物(10.0μmol/L)各1.0μL,cDNA 2.0μL,ddH2O 6.0μL;最佳反应条件为95℃预变性10 s,95℃变性5 s,60℃退火/延伸34 s,30个循环。应用该方法对CEF中Skp2 mRNA的表达量进行检测,发现在CEF感染禽网状内皮组织增生病病毒(REV)后,其细胞中Skp2 mRNA表达量均高于对照组,且在24、48、72 h显著增加。研究首次建立了检测鸡Skp2基因的检测方法,该方法稳定性良好,精确度高,特异性强,为进一步定量研究鸡Skp2 mRNA表达及其与细胞周期的关系奠定了基础。

关键词： CEF Skp2基因实时荧光定量PCR REV

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