检索结果-内蒙古大学图书馆

东北农业大学学报 2020年第10期51卷 45-55页

作者：王宁尤欣徐海冬娄明娄钰琦闫晓红李辉东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 农业农村部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030

选取小鼠IL-6基因转录起始位点上游2000 bp序列作为启动子序列,采用在线生物信息学软件分析转录因子结合位点;利用PCR扩增小鼠IL-6基因启动子及其5'端截短突变体片段,构建相应的荧光素酶报告基因重组质粒,转染3T3-L1细胞后检测报告... 详细信息

选取小鼠IL-6基因转录起始位点上游2000 bp序列作为启动子序列,采用在线生物信息学软件分析转录因子结合位点;利用PCR扩增小鼠IL-6基因启动子及其5'端截短突变体片段,构建相应的荧光素酶报告基因重组质粒,转染3T3-L1细胞后检测报告基因活性;采用共转染分析转录因子KLF7对IL-6基因启动子活性的影响;利用siRNA技术探究敲低KLF7对细胞内源性IL-6基因表达的影响。生物信息学分析显示,小鼠IL-6基因启动子区存在5个Sp1/KLFs结合位点;报告基因分析和定点突变分析发现,KLF7通过IL-6基因启动子区-98至-89 bp处(CCCCACCCAC)发挥调控IL-6基因启动子活性的作用;Real-time RT-PCR和Western blot分析显示,敲低KLF7抑制细胞内源性IL-6基因表达。文章首次发现KLF7直接调控IL-6基因表达,研究结果对揭示KLF7在脂肪生成中的作用机制具有重要意义。

关键词：鼠 KLF7 IL-6 启动子转录调控

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抑制剂T0070907对鸡PPARγ基因表达影响的研究

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中国预防兽医学报 2020年第2期42卷 157-162页

作者：王宇祥李超翟桂影庞永佳李瑞孙宇航杜智恒东北农业大学动物科学技术学院黑龙江哈尔滨150030 农业农村部鸡遗传育种重点实验室黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室黑龙江哈尔滨150030

为了验证过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ选择性抑制剂T0070907对鸡PPARγ基因表达的促进作用,本研究利用荧光定量PCR检测了不同浓度T0070907对鸡成纤维细胞(DF-1细胞)中PPARγ基因mRNA转录水平的影响,结果显示,随着T0070907浓度的... 详细信息

为了验证过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ选择性抑制剂T0070907对鸡PPARγ基因表达的促进作用,本研究利用荧光定量PCR检测了不同浓度T0070907对鸡成纤维细胞(DF-1细胞)中PPARγ基因mRNA转录水平的影响,结果显示,随着T0070907浓度的增加,鸡PPARγ基因的表达量逐渐升高,并且在T0070907浓度为5μmol/L时极显著高于对照组(p<0.01);利用western blot检测了T0070907对PPARγ蛋白表达的影响,结果显示,5μmol/L的T0070907对DF-1细胞中PPARγ2蛋白的表达有一定的促进作用;利用双荧光素酶报告基因技术检测了不同浓度T0070907对PPRE报告基因活性的影响,结果显示,随着T0070907浓度的增加,DF-1细胞中PPRE报告基因活性逐渐增强,并且在T0070907浓度为0.5μmol/L时该报告基因活性显著高于对照组(p<0.05),当T0070907浓度为2μmol/L、5μmol/L时,与对照组之间的差异达到极显著水平(p<0.01);利用双荧光素酶报告基因技术检测了T0070907和罗格列酮(Rosi)对PPRE报告基因活性的影响,结果显示,单独添加T0070907或Rosi均可显著增强PPRE报告基因活性(p<0.05),同时,添加T0070907并不能降低Rosi对PPRE报告基因活性的促进作用。本研究结果表明,作为PPARγ抑制剂的T0070907对鸡PPARγ基因的mRNA的转录水平、蛋白表达及其蛋白活性均具有促进作用,推测与哺乳动物不同,鸡PPARγ可能具有其独特的表达方式和调控机制。本研究结果对完善PPARγ抑制剂在生理学及药理学上的研究、为PPARγ功能研究选择准确的拮抗剂、预防和治疗炎症相关疾病等方面具有重要意义。

关键词：鸡 T0070907 抑制剂 PPARγ 基因表达

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肉鸡屠体脂肪含量间接选择方法及其效果评估

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东北农业大学学报 2020年第8期51卷 39-46页

作者：李辉陈冲冷丽王守志宿志勇肖凡郭怀顺李玉茂栾鹏农业农村部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030 福建圣泽生物科技发展有限公司福建光泽354100

研究以东北农业大学肉鸡高、低腹脂双向选择品系第18世代、第22世代和第23世代鸡为试验材料,测定其腹脂性状、饲料转化效率性状和屠体脂肪含量,比较分析高、低脂系鸡腹脂性状、饲料转化效率性状和屠体脂肪含量差异,评估上述测定性状遗... 详细信息

研究以东北农业大学肉鸡高、低腹脂双向选择品系第18世代、第22世代和第23世代鸡为试验材料,测定其腹脂性状、饲料转化效率性状和屠体脂肪含量,比较分析高、低脂系鸡腹脂性状、饲料转化效率性状和屠体脂肪含量差异,评估上述测定性状遗传参数。两系间性状差异比较结果表明,高脂系肉鸡腹脂重(AFW)、腹脂率(AFP)、饲料转化率(FCR)、剩余采食量(RFI)、屠体干物质含量(DMPC)、屠体干物质中脂肪含量(FPDM)和屠体鲜样中脂肪含量(FPWC)极显著高于低脂系肉鸡(P<0.01);遗传参数估计结果表明,AFW和AFP为中等遗传力(h^2=0.30,0.35)性状;FCR和RFI为高遗传力(h^2=0.41,0.43)性状;DMPC、FPDM和FPWC为高遗传力(0.48≤h2≤0.64)性状;腹脂性状与饲料转化效率性状呈较高程度正遗传相关(0.52≤rg≤0.62);腹脂性状与屠体脂肪含量呈中等偏高程度正遗传相关(0.28≤rg≤0.47);饲料转化效率性状与屠体脂肪含量呈较高程度正遗传相关(0.38≤rg≤0.78)。通过肉鸡腹脂性状或饲料转化效率性状选择可有效降低肉鸡屠体脂肪含量;饲料转化效率性状包括FCR和RFI,从遗传参数估计结果看,RFI间接选择肉鸡屠体脂肪含量效果更好。研究为肉鸡屠体脂肪含量间接选择提供理论依据。

关键词：肉鸡腹脂性状饲料转化效率性状屠体脂肪含量遗传参数

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白羽快大型肉鸡胸肌病研究进展

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中国家禽 2020年第11期42卷 78-90页

作者：宿志勇姜海煦肖凡郭怀顺冷丽张慧李辉农业农村部鸡遗传育种重点实验室黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院黑龙江哈尔滨150030 福建圣泽生物科技发展有限公司福建光泽354100

经长期定向选择,肉鸡生长速度、胸肉产量等重要经济性状得以明显改良,但同时伴随出现许多问题。其中,由肉鸡肌肉生长发育异常导致的肉鸡胸肌病发生率高、发病严重,近几年倍受行业关注。肉鸡胸肌病包括:白纹肉,表现为胸肉表面出现白色条... 详细信息

经长期定向选择,肉鸡生长速度、胸肉产量等重要经济性状得以明显改良,但同时伴随出现许多问题。其中,由肉鸡肌肉生长发育异常导致的肉鸡胸肌病发生率高、发病严重,近几年倍受行业关注。肉鸡胸肌病包括:白纹肉,表现为胸肉表面出现白色条纹;木质肉,表现为胸肉出现坚硬凸起,缺乏弹性;黑干肉,表现为胸肉呈暗褐色、表面粗糙、肉质坚硬;类PSE禽肉,表现为胸肉颜色苍白、汁液外渗、肉质柔软;胸深肌病,表现为宰后小胸肌呈绿色;意大利面肉,表现为肌肉组织稀松,肌纤维松散。文章综述了六种胸肌病的发生原因、发生时间、活体特征及其鉴定、宰后肌肉特征、肉品质变化、遗传现象,希望能为肉鸡育种工作者和肉鸡从业者提供参考。

关键词：肉鸡胸肌病肌肉发育缺陷

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鸡OBR基因g.7851G>A单核苷酸多态性功能性鉴定及分析

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东北农业大学学报 2019年第5期50卷 71-79页

作者：王守志谢可嘉李紫薇张长超王伟佳王宁李辉农业农村部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

瘦蛋白受体(OBR)对脂肪沉积和体重调节有重要影响。基于前期发现鸡(Gallus gallus)OBR基因g.7851G>A单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)与鸡腹脂重极显著相关(P=0.0076)。生物信息学分析显示,该SNP位于多个转录因... 详细信息

瘦蛋白受体(OBR)对脂肪沉积和体重调节有重要影响。基于前期发现鸡(Gallus gallus)OBR基因g.7851G>A单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)与鸡腹脂重极显著相关(P=0.0076)。生物信息学分析显示,该SNP位于多个转录因子结合区域,可能与某个或某些转录因子结合,影响OBR基因转录效率,为功能性SNP。为确定SNP功能性,研究该基因在高、低脂两系肉鸡各组织中差异表达;构建含该SNP位点A和G等位基因荧光素酶报告基因载体,利用双荧光素酶报告系统分析转录因子C/EBPα和PPARα对该SNP位点不同等位基因荧光素酶活性的影响。Real-timeRT-PCR结果表明,肝脏和腹部脂肪中,高脂系公鸡OBR基因表达量显著高于低脂系公鸡;在大脑中,高脂系公鸡OBR基因表达量显著低于低脂系公鸡(P<0.05)。报告基因结果表明,A等位基因荧光素酶活性显著高于G等位基因(P<0.05)。此外,转录因子PPAR录对G等位基因荧光素酶活性抑制作用显著强于A等位基因(P<0.05),转录因子C/EBα因对G等位基因荧光素酶活性抑制作用显著弱于A等位基因(P<0.05)。研究表明,OBR基因g.7851G>A可能是功能性SNP位点,确定为优质鸡育种功能性分子标记。研究为深入探讨OBR基因对脂肪代谢分子机制的影响提供试验依据。

关键词：鸡(Gallusgallus) 瘦蛋白受体基因(OBR) 内含子功能性单核苷酸多态性

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低脂肉鸡选育方法研究进展

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中国家禽 2019年第12期41卷 1-4页

作者：冷丽张慧王宇祥王守志李辉农业农村部鸡遗传育种重点实验室黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院黑龙江哈尔滨150030

肉鸡腹脂沉积过多有许多负面影响,选育节粮型低脂肉鸡配套系是我国也是世界范围内肉鸡育种的重要目标之一。本文对利用表型直接选择、利用血液生化标记进行间接选择,以及分子标记辅助选择、全基因组选择等方面对低脂肉鸡的选育方法进行... 详细信息

肉鸡腹脂沉积过多有许多负面影响,选育节粮型低脂肉鸡配套系是我国也是世界范围内肉鸡育种的重要目标之一。本文对利用表型直接选择、利用血液生化标记进行间接选择,以及分子标记辅助选择、全基因组选择等方面对低脂肉鸡的选育方法进行了综述。

关键词：肉鸡脂肪选育方法

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N^6-甲基腺嘌呤RNA修饰研究进展

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中国家禽 2019年第14期41卷 50-54页

作者：刘畅陈洪艳张琦张心扬李辉程博涵农业农村部鸡遗传育种重点实验室黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院黑龙江哈尔滨150030

N^6-甲基腺嘌呤(N^6-methyladenosine,m6A)作为一种重要的表观遗传修饰方式,在干细胞命运决定、精子形成、肌肉发育、脂肪沉积及人类肿瘤发生中发挥重要作用。m^6A修饰最重要的作用是调控基因表达,它是细胞中基因表达调控的表观遗传学... 详细信息

N^6-甲基腺嘌呤(N^6-methyladenosine,m6A)作为一种重要的表观遗传修饰方式,在干细胞命运决定、精子形成、肌肉发育、脂肪沉积及人类肿瘤发生中发挥重要作用。m^6A修饰最重要的作用是调控基因表达,它是细胞中基因表达调控的表观遗传学机制之一。文章综述了m^6A调控基因表达的分子机制及m^6A介导的生物学功能的研究进展,探讨了m^6A RNA甲基化的研究趋势和未来发展方向。

关键词： N6-甲基腺嘌呤(m^6A) RNA化学修饰基因表达调控生物学功能

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鸡PPARγ基因相关长链非编码RNA的鉴定及其转录调控

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农业生物技术学报 2018年第11期26卷 1909-1918页

作者：姜修英武春艳董翔宇高卓然李辉杜志强农业部鸡遗传育种重点实验室/黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室/东北农业大学动物科学技术学院

哺乳动物中的研究发现长链非编码RNA (long non-coding RNA, lncRNA)参与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma, PPARγ)基因的转录调控,进而影响脂肪细胞的增殖和分化。为了探究鸡(Gallus g... 详细信息

哺乳动物中的研究发现长链非编码RNA (long non-coding RNA, lncRNA)参与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma, PPARγ)基因的转录调控,进而影响脂肪细胞的增殖和分化。为了探究鸡(Gallus gallus)中是否存在lncRNA能够调控PPARγ基因的表达,进而影响脂肪细胞的分化,本研究利用生物信息学方法分析鸡的RNA-seq数据,筛选到1条长度为1 483 bp的长链非编码RNA(命名为PLNC),其位于鸡PPARγ基因第一内含子处,并与PPARγ基因具有一致的转录方向。随后利用qRT-PCR方法分析发现,在鸡1、4、7周龄脂肪组织中,PLNC和PPARγ转录本1 (cPPARγ1)的表达量相对较高。直接分离爱拨益加(Arbor Acres, AA)鸡12日龄腹部脂肪组织中的前脂肪细胞和成熟脂肪细胞,发现PLNC与PPARγ和cPPARγ1在前脂肪细胞中的表达量均显著高于成熟脂肪细胞。鸡前脂肪细胞诱导分化过程中,PLNC与PPARγ和cPPARγ1的转录水平表达趋势一致。PLNC干扰片段与启动子报告基因共转实验表明,抑制PLNC可以显著提高cPPARγ1启动子活性。最后,不同浓度罗格列酮(rosiglitazone)处理前脂肪细胞24 h后,发现随着罗格列酮浓度上升,PLNC和cPPARγ1表达量均先上升,而当cPPARγ1表达量上升到最高点时PLNC表达量开始下降。综上所述,本研究发现PLNC可能竞争性调控cPPARγ1的启动子活性和转录水平,从而参与鸡脂肪细胞分化过程。研究结果为鸡脂肪组织生长发育的分子调控机制研究提供了新的线索,也为减少腹部脂肪沉积、以及肥胖症和代谢相关疾病的治疗提供了分子依据。

关键词：鸡脂肪生成过氧化物酶体增殖物激活受体γ基因(PPARγ) 长链非编码RNA (lncRNA) 转录调控

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鸡ApoB基因g.-112A>G单核苷酸多态性的功能性鉴定与分析

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农业生物技术学报 2018年第11期26卷 1919-1927页

作者：陈耀峰谢可嘉张长超王宁李辉王守志农业部鸡遗传育种重点实验室/黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室/东北农业大学动物科学技术学院

载脂蛋白B (apolipoprotein B, ApoB)在极低密度脂蛋白(very low density lipoproteins, VLDL)组装、转运以及脂类代谢中都具有重要作用。本课题组前期研究发现鸡(Gallus gallus) ApoB基因g.-112A>G单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)与鸡腹脂重和腹脂率显著相关。生物信息学分析显示,该SNP位于鸡ApoB基因的启动子区,可能是功能性SNP。为确定该SNP的功能性,本研究开展了该位点不同基因型与血清生化指标的相关分析;比较了ApoB基因3种基因型在鸡肝脏和小肠中的表达水平;构建了含该SNP位点A和G等位基因的启动子报告基因载体,并利用双荧光素酶报告系统分析候选转录因子TATA-box binding protein (TBP)和CCAAT/enhancer binding protein alpha (C/EBPα)对该SNP位点不同等位基因荧光素酶活性的影响。关联分析结果显示,携带GG基因型的公鸡高密度脂蛋白(highdensity lipoprotein, HDL)/低密度脂蛋白(low-density lipoprotein, LDL)显著高于AA型个体(P<0.05);qRTPCR结果显示,在鸡肝脏和小肠组织,AG基因型的ApoB基因表达量显著低于AA和GG基因型(P<0.05);报告基因检测结果显示,A等位基因荧光素酶活性显著高于G等位基因(P<0.05)。此外,转录因子TBP和C/EBPα对A等位基因荧光素酶活性的促进作用强于G等位基因(P<0.05)。上述结果提示,ApoB基因g.-112A>G可能是功能性SNP位点,可初步确定其为优质鸡育种的功能性分子标记。本研究为深入探讨ApoB基因在脂肪生长发育中的功能提供了实验数据。

关键词：鸡(Gallus gallus) 载脂蛋白B基因(ApoB) 启动子功能性SNP

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DNA与蛋白质的相互作用及其生物学研究方法

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生命科学 2018年第5期30卷 585-592页

作者：孙宇航王宇祥东北农业大学动物科学技术学院农业部鸡遗传育种重点实验室黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030

DNA和蛋白质是构成生物体最为重要的两类生物大分子,两者特异性或非特异性识别及相互作用在整个基因组表达调控过程中发挥着重要的作用,是了解生命活动基本过程的分子基础。为此,从DNA与蛋白质相互作用的概述及其作用形式入手,对目前应... 详细信息

DNA和蛋白质是构成生物体最为重要的两类生物大分子,两者特异性或非特异性识别及相互作用在整个基因组表达调控过程中发挥着重要的作用,是了解生命活动基本过程的分子基础。为此,从DNA与蛋白质相互作用的概述及其作用形式入手,对目前应用较多的几种分子生物学检测方法,如电泳迁移率变动分析(EMSA)、DNase I足迹法(DNase I footprinting)、酵母单杂交技术(Y1H)以及染色质免疫沉淀技术(Ch IP)的原理、优缺点、优化方法及其最新应用等进行了综述。

关键词： DNA 蛋白质相互作用

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