检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2024年第11期40卷 1608-1617页

作者：罗昊玉黄佳新高帆闫晓红牟芳王宁农业农村部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院动物遗传育种与繁殖系哈尔滨150030

神经调节蛋白4(NRG4)是一个新发现的脂肪细胞因子,它在机体能量平衡、糖脂代谢等许多生理过程中发挥重要调控作用。目前,NRG 4基因的转录调控机制尚不清楚。我们前期的5′RACE分析显示,鸡NRG 4基因转录起始位点(TSS)弥散分布于一段约200... 详细信息

神经调节蛋白4(NRG4)是一个新发现的脂肪细胞因子,它在机体能量平衡、糖脂代谢等许多生理过程中发挥重要调控作用。目前,NRG 4基因的转录调控机制尚不清楚。我们前期的5′RACE分析显示,鸡NRG 4基因转录起始位点(TSS)弥散分布于一段约200 bp的区域,提示鸡NRG 4基因的启动子为分散型启动子(dispersed promoter)。本研究开展了鸡NRG 4基因近端外显子和内含子的启动子活性分析,报告基因分析显示,包含NRG 4基因外显子1、内含子1和外显子2的基因组片段(-122/+452)具有很强的双向启动子活性。生物信息学分析显示,鸡NRG 4基因外显子2上存在1个转录因子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)的潜在结合位点;报告基因分析发现,删除或突变C/EBPα结合位点会导致C/EBPα丧失对NRG 4基因片段(-122/+452)启动子活性的调控作用。基因表达相关性分析显示,鸡脂肪组织中C/EBPα和NRG 4基因的mRNA表达存在显著正相关(P<0.01)。进一步的脂肪组织ChIP-qPCR分析显示,C/EBPα直接结合鸡NRG 4基因的外显子2。本研究发现,鸡NRG 4基因的近端外显子和内含子具有双向启动子活性,C/EBPα通过直接结合外显子2调控鸡脂肪组织NRG 4基因的表达。

关键词：神经调节蛋白4 近端外显子和内含子启动子活性转录调控 CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)

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鸡胰岛素信号通路的研究进展

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畜牧兽医学报 2024年第8期55卷 3288-3296页

作者：娄明罗昊玉牟芳李辉王宁农业农村部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

胰岛素作为机体所必需的激素,在动物糖脂代谢、蛋白合成、生长发育、性状形成等生理过程中发挥重要作用。鸡存在天然的胰岛素抵抗,但其发生机制尚不清楚。本文综述了鸡肝脏、肌肉和脂肪组织胰岛素通路的研究进展,提出了鸡胰岛素信号通... 详细信息

胰岛素作为机体所必需的激素,在动物糖脂代谢、蛋白合成、生长发育、性状形成等生理过程中发挥重要作用。鸡存在天然的胰岛素抵抗,但其发生机制尚不清楚。本文综述了鸡肝脏、肌肉和脂肪组织胰岛素通路的研究进展,提出了鸡胰岛素信号通路和胰岛素抵抗的未来研究方向,以期为深入探究人类胰岛素抵抗以及鸡肉品质遗传改良提供新思路。

关键词：鸡胰岛素信号通路胰岛素抵抗肝脏肌肉脂肪组织

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大规模平行报告基因测定:一种分析基因表达调控的新技术

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遗传 2023年第10期45卷 859-873页

作者：袁萌李辉王守志农业农村部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

大规模平行报告基因测定(massively parallel reporter assay,MPRA)是一种可以同时研究基因组数千个调控元件活性的高通量分析方法。该方法在传统的荧光素酶报告基因载体上引入一段具有唯一标识的条形码,通过二代测序技术对转染前的DNA... 详细信息

大规模平行报告基因测定(massively parallel reporter assay,MPRA)是一种可以同时研究基因组数千个调控元件活性的高通量分析方法。该方法在传统的荧光素酶报告基因载体上引入一段具有唯一标识的条形码,通过二代测序技术对转染前的DNA条形码和转染后的mRNA条形码进行测序,用mRNA和DNA条形码读数的比值来分析顺式调控元件的活性。自MPRA提出以来,已被广泛应用于基因组顺式调控元件和功能性变异的鉴定、转录后调控对表型的影响等方面的研究。本文对MPRA的发展历程、基本原理、实验流程、统计分析方法以及在顺式调控元件和转录后调控方面的应用进行了综述,并对其发展前景进行了展望,以期为相关领域研究人员了解与应用MPRA提供有益参考。

关键词：大规模平行报告基因测定基因表达调控顺式调控元件转录后调控

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林甸鸡腹部脂肪组织发育规律探究

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东北农业大学学报 2024年第2期55卷 41-48页

作者：刘捷周迅韩雪周世杰李玉茂栾鹏李辉王宇祥冷丽农业农村部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

肉鸡生产过程中腹脂过度沉积会造成生产效率下降等一系列问题。林甸鸡作为优质地方鸡种之一,产蛋、产肉性能优良,肉质鲜美,深受大众喜爱。为探究林甸鸡腹部脂肪组织发育规律,测定林甸鸡3~22周龄体重及腹脂重,观察并统计腹部脂肪细胞大... 详细信息

肉鸡生产过程中腹脂过度沉积会造成生产效率下降等一系列问题。林甸鸡作为优质地方鸡种之一,产蛋、产肉性能优良,肉质鲜美,深受大众喜爱。为探究林甸鸡腹部脂肪组织发育规律,测定林甸鸡3~22周龄体重及腹脂重,观察并统计腹部脂肪细胞大小和数量,分析脂肪细胞特性与腹脂沉积之间关系。结果表明,林甸鸡在3~22周龄体重持续增长,腹脂重先升后降再升,腹脂率先降后升;3~10周龄脂肪细胞以增生为主,10~14周龄脂肪细胞以增大占优,19周龄后脂肪细胞增大和增生同时进行,但以增大为主。研究初步确定腹脂重与脂肪细胞特性回归模型,发现脂肪细胞体积对腹脂重的影响最大。试验结果为选育优质特色林甸鸡新品系提供理论参考。

关键词：林甸鸡腹脂脂肪细胞发育规律

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鸡PPARγ基因转录本5的两个上游开放阅读框功能分析

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东北农业大学学报 2023年第1期54卷 70-78页

作者：王宁娄钰琦褚衍凯黄佳新徐海冬罗昊玉娄明牟芳农业农村部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

前期研究发现,鸡PPARγ基因转录本5(c PPARγ5)的5’非翻译区(5’untranslated region,5’UTR)存在两个上游开放阅读框(uORF1和uORF2)。为揭示这两个uORFs在鸡PPARγ基因表达转录后调控作用,试验使用报告基因、定点突变、q RT-PCR和West... 详细信息

前期研究发现,鸡PPARγ基因转录本5(c PPARγ5)的5’非翻译区(5’untranslated region,5’UTR)存在两个上游开放阅读框(uORF1和uORF2)。为揭示这两个uORFs在鸡PPARγ基因表达转录后调控作用,试验使用报告基因、定点突变、q RT-PCR和Western blot等技术,分析两个uORFs对报告基因活性及PPARγmRNA和蛋白表达的影响。结果表明,与野生型相比,uORF1和uORF2分别突变和同时突变均显著促进报告基因活性及PPARγm RNA和蛋白表达(P<0.05)。mRNA稳定性分析发现,两个uORFs突变对报告基因mRNA稳定性无显著影响。启动子活性分析发现,c PPARγ的5’UTR区具有启动子活性。研究结果表明,cPPARγ5的两个u ORFs抑制其翻译。

关键词：鸡 PPARγ基因 5’非翻译区上游开放阅读框翻译抑制

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lncRNA1926和lncRNA3223在肉鸡胚胎肝细胞脂肪代谢中的功能研究

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东北农业大学学报 2023年第8期54卷 17-26页

作者：李辉张惠莉王有栋程博涵冷丽栾鹏李玉茂白雪农业农村部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

RNA-Seq分析发现LOC107051926(命名为lncRNA1926)和LOC112533223(命名为lncRNA3223)在肉鸡胚胎肝脏组织脂肪代谢过程发挥重要作用,但其具体功能尚不清楚。采用油红O染色、GPO-PAP和RT-qPCR方法对lncRNA1926和lncRNA3223作功能研究。结果表明,敲低lncRNA1926或lncRNA3223后,显著降低胚胎原代肝细胞中脂滴沉积和甘油三酯含量;lncRNA1926是脂肪酸合成(ACC、FAS)、甘油三酯合成(GPAT)、脂肪酸降解(CPT1)相关基因正调控因子;lncRNA3223是脂肪酸合成(ACC、FAS)、甘油三酯合成(GPAT、DGAT和MOGAT2)相关基因正调控因子。敲低lncRNA1926或lncRNA3233,通过抑制脂肪酸合成和甘油三酯合成相关基因表达降低甘油三酯含量,从而降低胚胎原代肝细胞中脂滴沉积。研究结果有助于增进对鸡肝脏脂肪代谢分子调控的理解,为肉鸡体脂性状遗传改良提供理论依据。

关键词：肉鸡 lncRNA 脂肪代谢胚胎原代肝细胞

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鸡Fsp27对前脂肪细胞中大脂滴形成的影响

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东北农业大学学报 2023年第12期54卷 52-59页

作者：王宇祥王鑫雨庞永佳邹亦冲刘捷曹志平李辉农业农村部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

Fsp27是CIDE(Cell-death-inducing DNA-fragmentation-factor-like effector)蛋白家族一员。研究表明,在哺乳动物脂肪细胞中,Fsp27富集于脂滴表面并聚集在脂滴与脂滴的接触位点(LD-LD contact site,LDCS),促进脂滴之间融合进而形成更大的脂滴。为探究Fsp27对鸡前脂肪细胞中脂滴融合的作用,利用过表达和荧光染色技术,通过比较脂滴大小的4个指标:脂滴大小分布、平均脂滴直径、单细胞内含大脂滴(直径大于2.5μm)数量,含大脂滴细胞数占总细胞数百分比,发现过表达Fsp27组中的脂滴大小、分布等特征均与对照组有显著差异。结果表明,Fsp27对大脂滴形成的影响在鸡前脂肪细胞分化的24和48 h最为显著(P<0.05),说明与哺乳动物类似,鸡Fsp27对前脂肪细胞中大脂滴形成同样发挥促进作用。

关键词：鸡脂滴 Fsp27 荧光染色

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鸡NRG4基因组及转录本结构分析

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遗传 2023年第5期45卷 447-458页

作者：高智慧黄佳新罗昊玉徐海冬娄明宁博林邢晓旭牟芳李辉王宁农业农村部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

神经调节蛋白4(neuregulin 4,NRG4)是一个重要的脂肪细胞因子,在维持哺乳动物能量平衡、调节糖脂代谢和预防非酒精性脂肪性肝病中起着非常重要的作用。目前,人NRG4基因的基因组结构、转录异构体和蛋白异构体等已有深入的研究。本实验室... 详细信息

神经调节蛋白4(neuregulin 4,NRG4)是一个重要的脂肪细胞因子,在维持哺乳动物能量平衡、调节糖脂代谢和预防非酒精性脂肪性肝病中起着非常重要的作用。目前,人NRG4基因的基因组结构、转录异构体和蛋白异构体等已有深入的研究。本实验室前期研究显示,鸡脂肪组织也表达NRG4,但是目前有关鸡NRG4(chicken NRG4,cNRG4)基因的基因组结构、转录异构体和蛋白异构体尚不清楚。为此,本研究采用RACE(rapid-amplification of cDNA ends)和RT-PCR(reverse transcription-PCR)等技术,系统开展了cNRG4基因的基因组和转录本的结构分析。结果发现,cNRG4基因编码区很小,但该基因却非常复杂,存在选择性转录起始位点、选择性拼接、内含子滞留、隐匿外显子和选择性多聚腺苷酸化,这导致cNRG4基因产生4种不同的5ʹUTR异构体(cNRG4 A、cNRG4 B、cNRG4 C和cNRG4 D)和6种不同的3ʹUTR异构体(cNRG4 a、cNRG4 b、cNRG4 c、cNRG4 d、cNRG4 e和cNRG4 f)。基因组结构分析发现,cNRG4基因跨越基因组21,969 bp(Chr.10:3,490,314~3,512,282),由11个外显子和10个内含子构成。与NCBI数据库中的cNRG4基因mRNA序列(NM_001030544.4)相比,本研究发现了cNRG4基因的2个新外显子和1个隐匿外显子。生物信息学分析、RT-PCR、克隆和测序分析发现,cNRG4基因能编码3种蛋白异构体(cNRG4-1、cNRG4-2和cNRG4-3)。本研究为进一步开展cNRG4基因的功能和调控研究奠定了基础。

关键词：鸡 NRG4 基因组结构转录异构体蛋白异构体

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高、低脂系肉鸡睾丸组织形态和氧化应激水平比较分析

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东北农业大学学报 2023年第6期54卷 35-41,96页

作者：李辉李叶宁周思彤姜海煦程博涵农业农村部鸡遗传育种重点实验室哈尔滨150030 黑龙江普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

研究旨在比较高、低脂系肉鸡睾丸组织形态和氧化应激水平差异。以高、低脂系第24世代27和36周龄肉种公鸡为试验材料,利用HE染色观察睾丸组织中曲细精管生精上皮结构,根据曲细精管面积、生精上皮厚度及Johnsen评分评估睾丸生精功能;利用... 详细信息

研究旨在比较高、低脂系肉鸡睾丸组织形态和氧化应激水平差异。以高、低脂系第24世代27和36周龄肉种公鸡为试验材料,利用HE染色观察睾丸组织中曲细精管生精上皮结构,根据曲细精管面积、生精上皮厚度及Johnsen评分评估睾丸生精功能;利用试剂盒检测睾丸组织中氧化应激产物丙二醛含量及抗氧化酶(过氧化氢酶、总超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶)活性。结果表明,27和36周龄高脂系肉鸡腹脂重和腹脂率显著高于低脂系;36周龄高脂系肉鸡睾丸重和睾丸比率显著高于低脂系;27和36周龄高脂系肉鸡睾丸中生精细胞脱落且排列紊乱,曲细精管内出现“脂肪样空泡”,曲细精管面积、生精上皮厚度、Johnsen评分显著低于低脂系;27和36周龄高脂系肉鸡睾丸组织中过氧化氢酶和总超氧化物歧化酶活性显著低于低脂系,丙二醛含量显著高于低脂系。以上结果表明,高脂系肉种公鸡腹脂沉积过多可能导致睾丸氧化应激水平升高,引起曲细精管生精上皮结构受损和生精功能下降。

关键词：肉种公鸡腹脂沉积睾丸氧化应激生精功能

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烟酸通过降低氧化应激水平提高绵羊精子低温保存效果

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畜牧兽医学报 2023年第5期54卷 1979-1989页

作者：韩修远赵亮王闯亓美玉姚玉昌黑龙江普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030 黑龙江省农业科学院畜牧研究所哈尔滨150086

低温保存可有效延长精子体外保存时间,提高精液利用效率。但是长时间处于低温环境下会造成活性氧(reactive oxygen species,ROS)持续累积,诱发精子氧化应激,降低质膜完整性,造成精子活力下降。旨在研究绵羊精子4℃保存条件下,稀释液添... 详细信息

低温保存可有效延长精子体外保存时间,提高精液利用效率。但是长时间处于低温环境下会造成活性氧(reactive oxygen species,ROS)持续累积,诱发精子氧化应激,降低质膜完整性,造成精子活力下降。旨在研究绵羊精子4℃保存条件下,稀释液添加不同浓度烟酸(nicotinic acid,NA)对精子的保存效果,并探讨其作用机理。采集健康的成年德国美利奴种公羊精液(n=6),以基础稀释液中添加5、10、20 mmol·L^(-1)NA为保护剂,拟阐明NA对绵羊精子的保护作用。通过精子分析仪检测精子活力、运动性能,精子低渗膨胀试验检测质膜完整性,荧光染色检测精子中ROS水平、线粒体功能,试剂盒检测H_(2)O_(2)含量、抗氧化因子活性水平及ATP水平。结果表明:与10%BSA对照组相比较,添加NA处理后精子的存活时间可延长至120 h,其中10 mmol·L^(-1)NA NA处理后第72小时精子活力仍可达到70%以上;在NA处理后24~72 h时,绵羊精子可保持更高的活力、运动性能与及质膜完整性(P<0.05),而且降低了精子中的ROS水平(P<0.05)。在NA处理后第72小时,精子中H_(2)O_(2)含量显著低于10%BSA对照组(P<0.05),而精子中抗氧化因子(CAT、GSH-PX、T-SOD、T-AOC)活性水平、线粒体功能以及ATP水平均显著优于10%BSA对照组(P<0.05)。综上,在4℃保存条件下,绵羊精液低温稀释液中添加NA,可提高精子的活力、运动性能、质膜完整性和抗氧化能力,并改善精子线粒体功能和ATP生成,有效提升绵羊精子低温保存效果。

关键词：绵羊烟酸精子活力线粒体氧化应激

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