检索结果-内蒙古大学图书馆

核农学报 2014年第5期28卷 749-756页

作者：李赟郭倩王君田菊康向阳北京林业大学生物科学与技术学院/林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 北京林业大学林学院北京100083

为推动银白杨倍性育种进展,利用秋水仙碱溶液注射处理,对银白杨花粉染色体加倍技术进行了研究,并通过常规压片及间接免疫荧光技术观察了秋水仙碱处理对小孢子母细胞染色体行为和微管骨架分布的影响。结果表明:(1)施加秋水仙碱处理可诱... 详细信息

为推动银白杨倍性育种进展,利用秋水仙碱溶液注射处理,对银白杨花粉染色体加倍技术进行了研究,并通过常规压片及间接免疫荧光技术观察了秋水仙碱处理对小孢子母细胞染色体行为和微管骨架分布的影响。结果表明:(1)施加秋水仙碱处理可诱导银白杨花粉染色体加倍,在小孢子母细胞减数分裂细线末期-粗线期施加0.5%秋水仙碱溶液注射处理7次,可获得最高达82.23%的2n花粉。由于注射处理5次与7次诱导效果差异不显著,从节约成本和降低毒害考虑,在实际应用中以0.5%秋水仙碱溶液注射处理5次为宜;(2)秋水仙碱处理导致银白杨小孢子母细胞减数分裂过程染色体行为异常,包括双线期细胞核仁数目增多、微核形成,终变期染色体紧贴核仁,中期I染色体发生极度收缩聚集成团;(3)受秋水仙碱影响,银白杨小孢子母细胞细胞质微管骨架分布发生紊乱。粗线期小孢子母细胞内微管骨架不再呈网状均匀分布于细胞质,而是聚集呈短带状,从而失去对染色体行为的控制。

关键词：银白杨花粉染色体加倍秋水仙碱染色体行为微管骨架

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花曲柳愈伤组织悬浮培养及秦皮甲素积累研究

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中国农学通报 2014年第1期30卷 42-47页

作者：刘孚婧詹亚光东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 东北林业大学林学院林木遗传育种与生物技术国家重点实验室哈尔滨150040

为建立花曲柳的愈伤组织诱导、增殖与悬浮培养体系,采用WPM为基本培养基,选取休眠芽刚萌发的叶片及叶柄为外植体,采用均匀试验设计研究不同浓度及配比的生长调节剂对花曲柳愈伤组织的形成和增殖的影响。1.8 mg/L NAA和0.1 mg/L TDZ的生... 详细信息

为建立花曲柳的愈伤组织诱导、增殖与悬浮培养体系,采用WPM为基本培养基,选取休眠芽刚萌发的叶片及叶柄为外植体,采用均匀试验设计研究不同浓度及配比的生长调节剂对花曲柳愈伤组织的形成和增殖的影响。1.8 mg/L NAA和0.1 mg/L TDZ的生长调节剂组合适合形成绿色、松散的愈伤组织,1.2 mg/L NAA和0.07 mg/L TDZ的组合适合形成增殖迅速的悬浮愈伤组织团。花曲柳愈伤组织诱导的最佳培养基为WPM+1.5 mg/L NAA+0.1 mg/L TDZ;增殖的最佳培养基为WPM+1.874 mg/L NAA+0.127 mg/L TDZ;愈伤组织悬浮培养基为1/2WPM+1.2 mg/L NAA+0.07 mg/L TDZ,秦皮甲素最大积累量出现在悬浮培养的第9天,最高可达0.800 mg/g。

关键词：花曲柳愈伤组织悬浮培养生长特性秦皮甲素

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简易-高盐沉淀法提取云南松针叶DNA的条件优化

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安徽农业科学 2014年第15期42卷 4564-4565,4568页

作者：袁晓慧段安安许玉兰刘惠民西南林业大学林学院云南昆明650224 北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083

[目的]优化简易-高盐沉淀法提取云南松针叶DNA的条件。[方法]采用正交试验设计,对简易-高盐沉淀法提取云南松针叶基因组DNA的提取条件进行优化,然后用浓度1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量,并用微量紫外分光光度计检测DNA溶液的纯度和浓度,... 详细信息

[目的]优化简易-高盐沉淀法提取云南松针叶DNA的条件。[方法]采用正交试验设计,对简易-高盐沉淀法提取云南松针叶基因组DNA的提取条件进行优化,然后用浓度1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量,并用微量紫外分光光度计检测DNA溶液的纯度和浓度,以定性和定量检测为指标,得出简易-高盐沉淀法提取云南松针叶基因组DNA的最佳处理组合。[结果]最佳处理组合为:水浴温度为70℃,V氯仿∶V异戊醇=25∶1,离心时间为8 min,NaCl浓度为2.2 mol/L。[结论]该结果可为开展云南松分子生物学的研究奠定基础。

关键词：云南松(Pinus yunnanensis) 正交试验简易-高盐沉淀法

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拟南芥转录因子WRKY18在花粉发育中的功能分析

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电子显微学报 2014年第2期33卷 156-162页

作者：荀志丽李雪萍张丹丹陆海刘頔北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083 河南科技大学林学院河南洛阳471003

WRKY蛋白是近年来在植物中发现的一类转录因子家族,本研究从拟南芥中克隆得到转录因子WRKY18的DNA序列,利用荧光体式显微镜观察酵母单杂交菌落,确定了该转录因子与DNA序列TTGACT结合。分别通过半定量、实时荧光定量PCR技术检测其在不同... 详细信息

WRKY蛋白是近年来在植物中发现的一类转录因子家族,本研究从拟南芥中克隆得到转录因子WRKY18的DNA序列,利用荧光体式显微镜观察酵母单杂交菌落,确定了该转录因子与DNA序列TTGACT结合。分别通过半定量、实时荧光定量PCR技术检测其在不同组织及花药发育不同时期的表达,发现该转录因子为组成型表达。该基因在成熟拟南芥根、茎、叶、花的各个组织中均有表达,而在花药发育的9、10时期表达量显著高于其它时期。分别使用扫描电子显微镜和光学显微镜观察比较突变体与野生型植株的花粉形态差异和花粉萌发情况,发现WRKY18对拟南芥花粉发育有重要影响,WRKY18缺失造成拟南芥花粉外形异常、花粉萌发率降低。本研究对进一步分析转录因子WRKY18在拟南芥花粉发育过程中的表达与调控作用具有一定的基础意义。

关键词：拟南芥转录因子 WRKY18 表达分析花粉发育

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转TaLEA小黑杨矮化突变体的鉴定及侧翼序列分析

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北京林业大学学报 2013年第1期35卷 45-52页

作者：刘玲刘福妹陈肃林琳李慧玉刘桂丰姜静东北林业大学林学院生物技术与林木遗传育种国家重点实验室

以转TaLEA11个株系及野生型对照小黑杨为试材,通过生长性状、叶片解剖结构比较发现,在叶面积、气孔密度、叶片厚度等方面转基因XL11株系明显低于其他参试株系;角质层厚度、栅海比,气孔大小等方面XL11株系显著高于其他参试株系。进而以X... 详细信息

以转TaLEA11个株系及野生型对照小黑杨为试材,通过生长性状、叶片解剖结构比较发现,在叶面积、气孔密度、叶片厚度等方面转基因XL11株系明显低于其他参试株系;角质层厚度、栅海比,气孔大小等方面XL11株系显著高于其他参试株系。进而以XL11株系为材料,采用TAIL-PCR方法克隆插入位点的旁侧序列得到AP2/PthRAV(XM_002311402.1)。荧光定量分析发现AP2/PthRAV的相对表达量在XL11株系中显著高于其他转基因株系及野生型平均值的7.78倍,初步认为该株系在生长及叶片解剖结构等性状的改变,可能与AP2/PthRAV上调表达有关。

关键词：转TaLEA小黑杨矮化突变株 AP2 PthRAV

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外源铁蛋白基因NtFer1对粳稻生理影响的研究

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安徽农业科学 2014年第23期42卷 7718-7722页

作者：唐鑫华张磊姜廷波杨传平高红秀邹德堂东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040 东北农业大学农学院黑龙江哈尔滨150030

[目的]验证铁蛋白基因的功能,提高转基因粳稻的含铁量和转基因粳稻对盐胁迫和生物胁迫的抗性。[方法]利用农杆菌介导法将烟草铁蛋白基因NtFer1导入粳稻基因组。[结果]对T0、T1代卡那霉素抗性植株PCR、Southern杂交、Northern杂交和RT-PC... 详细信息

[目的]验证铁蛋白基因的功能,提高转基因粳稻的含铁量和转基因粳稻对盐胁迫和生物胁迫的抗性。[方法]利用农杆菌介导法将烟草铁蛋白基因NtFer1导入粳稻基因组。[结果]对T0、T1代卡那霉素抗性植株PCR、Southern杂交、Northern杂交和RT-PCR检测分析表明,外源基因已整合到粳稻基因组中,并能够稳定遗传表达。转基因粳稻超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性和叶绿素相对含量高于对照,丙二醛(MDA)含量低于对照,其根、叶片和糙米中铁含量均高于对照。接种稻瘟病病菌后转基因植株叶瘟指数低于对照。[结论]转入外源铁蛋白基因NtFer1能够提高粳稻的含铁量和转基因粳稻对盐胁迫和生物胁迫的抗性。

关键词：铁蛋白转基因粳稻稻瘟病

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小黑杨PnsGA20ox1基因的克隆及功能分析

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第6期37卷 11-16页

作者：张力杰张凯旋魏志刚东北林业大学林学院林木遗传育种国家重点实验室

根据与小黑杨(Populus simonii×***)亲缘关系较近的几个物种的赤霉素氧化酶基因(GA20ox)保守区设计兼并引物,克隆出小黑杨GA20ox基因片段;利用RACE技术得到其全长为1 678 bp的cDNA序列,进行蛋白质预测,发现其编码385个氨基酸,分子... 详细信息

根据与小黑杨(Populus simonii×***)亲缘关系较近的几个物种的赤霉素氧化酶基因(GA20ox)保守区设计兼并引物,克隆出小黑杨GA20ox基因片段;利用RACE技术得到其全长为1 678 bp的cDNA序列,进行蛋白质预测,发现其编码385个氨基酸,分子质量为44.04 ku,理论等电点为5.97,核酸序列与毛果杨GA20ox1同源性高达99%,将其命名为PnsGA20ox1。荧光定量PCR分析发现,GA20ox1基因在小黑杨各个组织中均表达,其中在成熟木质部中表达量最高,在节间组织中表达量最低。转PnsGA20ox1基因烟草分析表明,过表达PnsGA20ox1基因的烟草综纤维素含量和纤维长度比对照组均有不同程度的提高,而木质素含量与对照无明显差异。

关键词：小黑杨 PnsGA20ox1 实时荧光定量PCR 纤维素木质素

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外源NO对花楸树胚胎萌发和幼苗发育初期活性氧积累的影响

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林业科学 2013年第6期49卷 60-67页

作者：杨玲王佳男边磊沈海龙东北林业大学林学院林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

以花楸树成熟合子胚胎为材料,利用室内培养皿发芽法研究外源NO供体(SNP)、NO合成抑制剂(PTIO)、脱落酸(ABA)以及乙烯受体抑制剂(NBD)对花楸树胚胎萌发和幼苗发育初期活性氧(ROS)积累的影响。结果表明:光照条件下SNP预处理可减弱PTIO或AB... 详细信息

以花楸树成熟合子胚胎为材料,利用室内培养皿发芽法研究外源NO供体(SNP)、NO合成抑制剂(PTIO)、脱落酸(ABA)以及乙烯受体抑制剂(NBD)对花楸树胚胎萌发和幼苗发育初期活性氧(ROS)积累的影响。结果表明:光照条件下SNP预处理可减弱PTIO或ABA对胚胎萌发的抑制作用,但不能减弱NBD处理对胚胎萌发的抑制作用。SNP预处理显著增加幼苗叶片中叶绿素含量,但这种增加效应不能被PTIO解除。PTIO抑制SNP预处理引起的幼苗叶片中过氧化氢(H2O2)含量和超氧阴离子含量的增加。SNP预处理解除PTIO对根部超氧阴离子含量的抑制作用。研究结果为阐明胚胎萌发过程中反应氮调节的(NO依赖型)休眠解除和ROS积累的关系奠定基础。

关键词：花楸树胚胎萌发一氧化氮脱落酸乙烯

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水曲柳嫩枝扦插繁殖技术的研究

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安徽农业科学 2014年第36期42卷 12942-12944页

作者：侯丹许新李莉夏德安东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040 中国农业大学农学与生物技术学院北京100083

[目的]探究水曲柳嫩枝扦插繁殖技术,提高水曲柳嫩枝的扦插成活率.[方法]通过完全随机区组设计研究水曲柳嫩枝扦插繁殖技术.[结果]水曲柳插穗的生根率存在明显的年龄效应,插稳母树的年龄愈大,生根率愈低.扦插最佳时期在6月下旬,具体的扦... 详细信息

[目的]探究水曲柳嫩枝扦插繁殖技术,提高水曲柳嫩枝的扦插成活率.[方法]通过完全随机区组设计研究水曲柳嫩枝扦插繁殖技术.[结果]水曲柳插穗的生根率存在明显的年龄效应,插稳母树的年龄愈大,生根率愈低.扦插最佳时期在6月下旬,具体的扦插最适期应视当地当年的气候状况和插穗木质化程度而定.促进插穗生根的最佳激素处理方法是吲哚丁酸200 mg/kg处理2h.切制插穗的方法是接穗长8～10 cm,保留复叶上靠近枝条的1～2个叶片,插穗基部平切或者斜切.防止插穗腐烂的方法是适时掌握采条时间、在保证插穗叶片不萎蔫的前提下尽可能少浇水、给插床和插穗消毒.[结论]为水曲柳在育种和生产研究方面应用扦插繁殖奠定了基础.

关键词：水曲柳扦插繁殖生根率

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白桦植株中三萜前体及不同三萜分支产物积累特征

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中草药 2013年第24期44卷 3534-3539页

作者：苏欣尹静孙建广詹亚光马泓思王艳梁甜东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学林学院林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040

目的以三年生白桦为试材，研究白桦植株中三萜合成前体及其三萜组分积累变化，并对白桦植株中三萜组分积累消长特征进行分析。方法利用高效液相色谱仪及紫外分光光度计对白桦枝皮和叶进行总三萜、白桦脂醇和黄酮等8种成分检测。结果 ... 详细信息

目的以三年生白桦为试材，研究白桦植株中三萜合成前体及其三萜组分积累变化，并对白桦植株中三萜组分积累消长特征进行分析。方法利用高效液相色谱仪及紫外分光光度计对白桦枝皮和叶进行总三萜、白桦脂醇和黄酮等8种成分检测。结果白桦植株枝皮和叶中三萜物质各组分积累特征显著不同。在生长季节（5～9月）枝皮中2, 3-氧化角鲨烯、白桦脂酸、白桦脂醇、齐墩果酸、达玛烯二醇、固醇及总三萜积累高峰基本为7～9月，其中2, 3-氧化角鲨烯量较低，最高为0.067 mg/g（7月），白桦脂酸量达8.34 mg/g，而齐墩果酸量高达37.51 mg/g（9月）；达玛烯二醇量最高为14.18 mg/g，总三萜量达168.17 mg/g（7月）。叶中总三萜量为8月份较高，达126.11 mg/g，而2, 3-氧化角鲨烯、白桦脂醇和齐墩果酸量均极低，甚至未能检测到。枝皮和叶片中黄酮积累高峰分别为5月和8月，其中2个月份质量分数分别为53.02 mg/g和58.49 mg/g。消长分析表明，白桦枝皮和叶中三萜组分积累与总三萜积累规律不相吻合，枝皮总三萜、达玛烯二醇、齐墩果酸、白桦脂酸呈S型曲线，白桦脂醇积累呈倒“V”曲线，且黄酮积累与总三萜积累趋势相反。叶中总三萜和黄酮物质积累趋势相近，达玛烯二醇和2, 3-氧化角鲨烯积累趋势相近。结论明确了三年生白桦枝条和叶片中三萜及黄酮物质积累、分布特征，为白桦枝条皮和叶中三萜资源的挖掘、可持续利用及代谢调控奠定了基础。

关键词：白桦次生代谢总三萜黄酮类达玛烯二醇齐墩果酸白桦脂酸积累特征

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