检索结果-内蒙古大学图书馆

植物研究 2007年第3期27卷 293-296页

作者：张艳杨传平王玉成东北林业大学林学院林木遗传育种教研室

用木麻黄(Casuarina glauca)的金属硫蛋白基因(metallothionein 1)氨基酸序列对柽柳ESTs序列本地数据库进行tBlastn检索,获得了柽柳金属硫蛋白基因全长cDNA序列,去除polyA后该基因全长366 bp,其中5′非翻译区97 bp,3′非翻译区59 bp,开... 详细信息

用木麻黄(Casuarina glauca)的金属硫蛋白基因(metallothionein 1)氨基酸序列对柽柳ESTs序列本地数据库进行tBlastn检索,获得了柽柳金属硫蛋白基因全长cDNA序列,去除polyA后该基因全长366 bp,其中5′非翻译区97 bp,3′非翻译区59 bp,开放读码框(ORF)长210 bp,编码70个氨基酸组成的多肽,蛋白分子量为6.793 kD,理论等电点为4.99,含10个Cys,集中分布在肽链的N端和C端。Blast P同源性分析表明该基因与花生同源性最高,与小豆同源性最低。该基因的EST序列在GenBank登录(登录号:CV792539)。

关键词：柽柳金属硫蛋白基因克隆

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柽柳金属硫蛋白基因(MT2)的过量表达对烟草耐Cd^(2+)性的促进效应

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植物生理学通讯 2007年第4期43卷 693-696页

作者：张艳杨传平王玉成东北林业大学林学院林木遗传育种教研室

将在柽柳(Tamarix androssowii)中克隆的金属硫蛋白基因MT2(GenBank登录号:AY620987)构建到载体pROKII上。用农杆菌介导的叶盘法转化烟草‘龙江911’,获得了抗卡那霉素的转基因植株。PCR-Southern和Northern blot检测证明外源基因已整... 详细信息

将在柽柳(Tamarix androssowii)中克隆的金属硫蛋白基因MT2(GenBank登录号:AY620987)构建到载体pROKII上。用农杆菌介导的叶盘法转化烟草‘龙江911’,获得了抗卡那霉素的转基因植株。PCR-Southern和Northern blot检测证明外源基因已整合进烟草基因组并可正常表达。Cd2+抗性实验证明柽柳金属硫蛋白基因(MT2)的表达可提高转基因烟草的抗Cd2+性。

关键词：柽柳重金属金属硫蛋白烟草

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转柽柳金属硫蛋白基因(MT1)烟草的获得及对重金属镉的抗性分析

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农业生物技术学报 2007年第2期15卷 247-250页

作者：陈虹姜廷波丁宝建李凤娟李绍臣东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040新疆农业大学林学院东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室乌鲁木齐830052

将柽柳(***)金属硫蛋白基因(MT1)插入到植物表达载体pBI121,利用根癌农杆菌(Agrobactrium tumefaciens)介导法将MT1导入烟草(Nicotiana tobacum)基因组。对转基因T1植株的卡那霉素抗性分析表明,整合到烟草基因组的外源基因多为单拷贝基... 详细信息

将柽柳(***)金属硫蛋白基因(MT1)插入到植物表达载体pBI121,利用根癌农杆菌(Agrobactrium tumefaciens)介导法将MT1导入烟草(Nicotiana tobacum)基因组。对转基因T1植株的卡那霉素抗性分析表明,整合到烟草基因组的外源基因多为单拷贝基因,也有少数为多拷贝基因。对具有卡那霉素抗性的转基因植株进行PCR-Southern检测和Northern杂交分析表明,外源MT1基因已整合到烟草基因组,并且得到了正确表达。转基因植株对重金属镉的抗性比对照显著提高,表现为转基因植株的株高和鲜重均明显优于非转基因株系。

关键词：烟草柽柳金属硫蛋白重金属转基因

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富含多糖和次生代谢产物的白桦成熟叶中总RNA的提取

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植物生理学通讯 2007年第5期43卷 913-916页

作者：曾凡锁南楠詹亚光东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040

分别采用CTAB法、SDS法、异硫氰酸胍法和缓冲液冰浴-CTAB法从转基因白桦成熟叶中提取总RNA,并对琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱分析进行比较。结果表明,缓冲液冰浴-CTAB法提取的总RNA纯度高、完整性好且得率高.应用此法提取的总RNA能够满足RT... 详细信息

分别采用CTAB法、SDS法、异硫氰酸胍法和缓冲液冰浴-CTAB法从转基因白桦成熟叶中提取总RNA,并对琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱分析进行比较。结果表明,缓冲液冰浴-CTAB法提取的总RNA纯度高、完整性好且得率高.应用此法提取的总RNA能够满足RT-PCR和Northern杂交分析要求。

关键词：白桦成熟叶片 RNA提取

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利用染色体步移PCR检测辐射松的单核苷酸多态性

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西北植物学报 2007年第8期27卷 1571-1576页

作者：李伟李慧陈晓阳 WU Harry 北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 华南农业大学林学院广州200064 CSIRO Forestryand Forest Products Division

用染色体步移技术(chromosome walking)的基本原理以辐射松(Pinus radiata)肌动蛋白基因(actin)为例,利用获得的EST序列设计定向引物,向上游和下游进行了染色体序列的步移.获得了包括启动子、5′端非编码区和编码区及3′端非编码区辐射... 详细信息

用染色体步移技术(chromosome walking)的基本原理以辐射松(Pinus radiata)肌动蛋白基因(actin)为例,利用获得的EST序列设计定向引物,向上游和下游进行了染色体序列的步移.获得了包括启动子、5′端非编码区和编码区及3′端非编码区辐射松肌动蛋白基因基因组序列2154 bp.通过对200株不同辐射松个体进行PCR扩增及测序,共获得了21个SNPs,其中启动子区域3个,编码区15个,3′端非编码区4个.实验结果为今后染色体步移技术在基因非编码区SNP的检测提供了理论与技术参考.

关键词：染色体步移 PCR 辐射松单核苷酸多态性

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牡丹组织培养研究进展

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核农学报 2007年第2期21卷 156-159,147页

作者：赵鑫詹立平邹学忠东北林业大学林学院/黑龙江省林木遗传育种重点实验室黑龙江哈尔滨150040 辽宁中医药大学职业技术学院辽宁沈阳110101 辽宁林业职业技术学院辽宁沈阳110101

本文从牡丹组织培养对品种、外植体的选择、基本培养基类型、生长调节物质选择和组培苗的移栽等方面论述了牡丹组织培养的研究现状。牡丹的组织培养中,外植体多采用胚、腋芽、顶芽、茎尖、幼叶、叶柄和土芽(地下芽)等,并且培养经过低温... 详细信息

本文从牡丹组织培养对品种、外植体的选择、基本培养基类型、生长调节物质选择和组培苗的移栽等方面论述了牡丹组织培养的研究现状。牡丹的组织培养中,外植体多采用胚、腋芽、顶芽、茎尖、幼叶、叶柄和土芽(地下芽)等,并且培养经过低温诱导后的鳞芽,可显著提高萌发率;在愈伤组织诱导试验中,选择分化程度较低的材料(如土芽),容易脱分化,获得愈伤组织;在牡丹的增殖培养中,6-BA起到了不可或缺的作用;生根培养中常使用的生长调节物质有IBA、NAA和IAA。此外,还探讨了牡丹组织培养研究中存在的问题,以及未来的研究和发展方向。

关键词：牡丹组织培养外植体培养基生根

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多因素对秋水仙素诱导多倍体效率的影响

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安徽农业科学 2007年第31期35卷 9863-9866,9875页

作者：常青云朱莉思曹鑫刘本翠张志毅北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点开放实验室北京100083 北京林业大学林学院北京100083 湖北省兴山县林业科学研究所湖北兴山443700

[目的]明确各因素对秋水仙素诱导效率的影响。[方法]通过正交试验,研究秋水仙素浓度、紫外线辐射单次时长及频数、温降单次时长及频数对秋水仙素诱导刺槐多倍体效率的影响。[结果]紫外辐射时长对秋水仙素诱导效率的影响最显著,80 s时膨... 详细信息

[目的]明确各因素对秋水仙素诱导效率的影响。[方法]通过正交试验,研究秋水仙素浓度、紫外线辐射单次时长及频数、温降单次时长及频数对秋水仙素诱导刺槐多倍体效率的影响。[结果]紫外辐射时长对秋水仙素诱导效率的影响最显著,80 s时膨大率最高,其次是浓度。各浓度组间膨大率呈周期性变化,随浓度增加整体略有上升。辐射频数和温降频数对膨大率的影响较小,分别以2、1次最好。温降时长以5 min最佳。不同辐射时长和不同辐射时间点的诱导效果有明显差异。单纯的紫外辐射不能诱导根尖膨大细胞加倍,不能降低秋水仙素的最低有效诱导浓度。单次剂量2 min出现抑制效果,4 min出现明显的生长抑制,8 min生长停止。[结论]最优组合是0.3%秋水仙素,辐射40 s共2次,温度骤降5 min共1次。

关键词：正交实验秋水仙素倍性鉴定紫外辐射多倍体育种

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甜杨抗冻转录因子ICE1基因的in silico克隆及其分析

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分子植物育种 2007年第3期5卷 424-430页

作者：林元震张志毅刘纯鑫郭海朱保庆陈晓阳华南农业大学林学院广州510642 北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 水利部水土保持植物中心北京100038

ICE1基因编码类似MYC的bHLH转录因子,可特异地结合到CBF3启动子的MYC作用元件并诱导CBF/DREB1下游基因的转录表达。本文采用电子克隆的方法,以拟南芥ICE1蛋白序列为信息探针,利用杨树EST数据库和毛果杨基因组序列拼接的结果,设计引物并... 详细信息

ICE1基因编码类似MYC的bHLH转录因子,可特异地结合到CBF3启动子的MYC作用元件并诱导CBF/DREB1下游基因的转录表达。本文采用电子克隆的方法,以拟南芥ICE1蛋白序列为信息探针,利用杨树EST数据库和毛果杨基因组序列拼接的结果,设计引物并通过RT-PCR从甜杨克隆了杨树的第一个ICE1基因。其cDNA长1706bp,含有完整的开放阅读框,可编码543个氨基酸的MYC类蛋白。编码蛋白序列含有bHLH区,核定位信号(NLS)区,富S区和转膜区各1个。Blast分析表明,cDNA序列及其推导的氨基酸序列均与拟南芥和芥菜的ICE1存在着较高的同源性,说明所获得的cDNA可能是甜杨ICE1基因(PsICE1,DQ481236)。通过网络服务器平台进行PsICE1的功能预测,结果显示PsICE1含有bHLH保守功能域,具有多个磷酸化位点和跨膜区域。另外,ICE1的电子表达谱分析结果发现,ICE1几乎可在植物中整株表达,在多种组织和不同发育过程均表达,这也在一定程度上说明了ICE1是组成型表达,以及ICE1可能在植物的生长发育中也起着重要作用。

关键词： PsICE1 in silico克隆甜杨转录因子抗冻性

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白桦不同部位及种源间白桦酯醇含量的差异分析

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林产化学与工业 2007年第4期27卷 103-106页

作者：范桂枝詹亚光王博邱磊刘桂丰王会仁东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150040

以白桦为研究材料，在白桦酯醇提取方法的选择下，采用高效液相色谱仪（HPLC）分析了白桦不同部位和种源间白桦酯醇含量的变化。结果表明：索氏提取和超声波醇提的白桦酯醇含量较高，分别为240．25和239．57mg／g，而回流法和氯仿浸提... 详细信息

以白桦为研究材料，在白桦酯醇提取方法的选择下，采用高效液相色谱仪（HPLC）分析了白桦不同部位和种源间白桦酯醇含量的变化。结果表明：索氏提取和超声波醇提的白桦酯醇含量较高，分别为240．25和239．57mg／g，而回流法和氯仿浸提的白桦酯醇含量稍低，为207.88和194．09mg／g。白桦酯醇在白桦不同部位的含量分布差异显著，依次分别为：外皮〉枝皮〉内皮〉芽〉叶〉根〉花粉；13种8年生白桦种源树皮内白桦酯醇的含量为132．45—257．11mg／g，且种源间差异呈极显著水平。进一步分析可得，同龄树种的生长状况对白桦酯醇的含量影响不显著；而白桦酯醇的含量不仅受自身种源及遗传背景的影响，同时也受到其所处地理位置和气候因素的影响，即属于基因与环境互作的表现性状。

关键词：白桦白桦酯醇提取方法不同部位种源

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运用基因组和EST数据库进行电子克隆分离杨树功能基因的策略

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分子植物育种 2007年第4期5卷 583-587页

作者：林元震张志毅林善枝张谦刘纯鑫郭海北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 华南农业大学林学院广州510642 水利部水土保持植物中心北京100038

杨树是重要的造林绿化树种,也是主要的工业用材树种,还是高大林木的模式树种。进行杨树功能基因的挖掘、克隆和功能的研究,是当前杨树基因组学的首要任务之一,不仅可为杨树品种改良和基因资源的有效利用奠定基础,而且对探讨林木的生理... 详细信息

杨树是重要的造林绿化树种,也是主要的工业用材树种,还是高大林木的模式树种。进行杨树功能基因的挖掘、克隆和功能的研究,是当前杨树基因组学的首要任务之一,不仅可为杨树品种改良和基因资源的有效利用奠定基础,而且对探讨林木的生理及遗传特性分子机制也具有重要的理论意义。电子克隆是近年来伴随着基因组计划和EST计划发展起来的基因克隆新方法,具有成本低、速度快、技术要求低和针对性强等优点。丰富的杨树EST数据和公布的杨树基因组序列框架图,使得利用电子克隆技术开展杨树功能基因的分离和鉴定已经成为可能。本文阐述了电子克隆分离杨树功能基因的基本方法、相关的生物信息资源,并讨论了电子克隆技术存在的问题和未来发展。

关键词：杨树功能基因基因组和EST数据库电子克隆

来源：评论

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