检索结果-内蒙古大学图书馆

东北林业大学学报 2021年第4期49卷 12-16,23页

作者：葛梦妍顾宸瑞陈坤王伟王楚刘桂丰汪广宇姜静林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040 黑龙江嘉懋园林建设股份有限公司

为了选出速生耐盐的转betA基因小黑杨优良株系,以盐碱地营建的13年生转betA基因小黑杨试验林为材料,开展生长适应性分析,结合5年生时该试验林优良株系选择结果,对早期评价进行验证。结果显示:参试株系树高、胸径、材积生长及保存率等性... 详细信息

为了选出速生耐盐的转betA基因小黑杨优良株系,以盐碱地营建的13年生转betA基因小黑杨试验林为材料,开展生长适应性分析,结合5年生时该试验林优良株系选择结果,对早期评价进行验证。结果显示:参试株系树高、胸径、材积生长及保存率等性状在株系间的差异均达到极显著水平(P<0.01),综合评价选出T01、T06和T08株系为优良株系,其中T01株系的树高、胸径和材积均值分别为11.03 m、11.76 cm和0.055 m3,较对照株系分别高16.42%、14.81%和48.67%。该试验林本次选择结果与5年生时的选择结果一致,说明转betA小黑杨在造林试验初期进行优良株系选择也准确可靠。参试株系分子检测显示,外源betA基因仍稳定整合于转betA小黑杨的基因组中,并且能够正常表达。入选的T01、T06和T08株系为生长量大、耐盐性强的优良株系,这些入选株系为后续转betA小黑杨的环境释放及生产性试验提供指导。

关键词：小黑杨 betA基因耐盐性优良株系

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红松查尔酮合成酶基因CHS密码子偏好性分析

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植物研究 2020年第3期40卷 447-457页

作者：李翔范作义王井源王淇李喜鹏王德秋孔令远曹森林孟庆刚赵曦阳林木遗传育种国家重点实验室东北林业大学林学院哈尔滨150040 吉林省临江林业局临江134600

查尔酮合成酶(Chalcone synthase,CHS)广泛存在于植物体内,是花色素形成过程中一种重要的酶,可以进一步催化生成黄酮类化合物。本研究采用Codon W和EMBOSS在线软件对红松查尔酮合成酶基因CHS的密码子使用偏好性进行分析,并与北美乔松等... 详细信息

查尔酮合成酶(Chalcone synthase,CHS)广泛存在于植物体内,是花色素形成过程中一种重要的酶,可以进一步催化生成黄酮类化合物。本研究采用Codon W和EMBOSS在线软件对红松查尔酮合成酶基因CHS的密码子使用偏好性进行分析,并与北美乔松等其他24种植物的CHS基因以及模式植物基因组进行比较,对认识红松CHS基因的密码子使用偏好性,为选择适宜的表达系统奠定了一定的基础。研究结果表明:红松CHS基因编码区的有效密码子数(ENC)和GC含量分别为48.92和0.548,C+G含量高于A+T含量,密码子偏好以A/T结尾;多数植物CHS基因的G+C含量高于A+T含量,且密码子更偏好C/G结尾;聚类分析表明,红松与马尾松和赤松的密码子使用偏好性的相似性较高;密码子使用频率研究发现,红松CHS遗传转化与异源表达较优的受体可能是大肠杆菌和拟南芥。

关键词：红松查尔酮合成酶密码子偏好性聚类分析

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ganA在路德维希肠杆菌杀松材线虫中的功能解析

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中国生物防治学报 2023年第5期39卷 1094-1103页

作者：王浩宇张弘弢张莹赵宇王传珍张丽霞王琦吴迪于翠芳李海勇王爽牛犇北京市颐和园管理处北京100091 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 烟台市森林资源监测保护服务中心烟台264000 中农绿康(北京)生物技术有限公司北京102101 中国农业大学植物病理学系北京100193 牡丹江师范学院牡丹江157000 青州市云驼风景区运行服务中心青州262500

生防微生物已被用于防控松材线虫病,但其杀线防病的分子机制尚不明确。本研究发现,经路德维希肠杆菌AA4处理后,松材线虫的校正死亡率达85%以上,菌株AA4能够显著减轻松树幼苗上松材线虫病的发生。为了探究AA4抑杀松材线虫的分子机制,本... 详细信息

生防微生物已被用于防控松材线虫病,但其杀线防病的分子机制尚不明确。本研究发现,经路德维希肠杆菌AA4处理后,松材线虫的校正死亡率达85%以上,菌株AA4能够显著减轻松树幼苗上松材线虫病的发生。为了探究AA4抑杀松材线虫的分子机制,本研究采用DNA同源重组技术,构建了菌株AA4 β-半乳糖苷酶基因ganA的敲除突变体,并对ganA在AA4抑杀线虫中的功能进行了解析。研究结果表明,敲除ganA后,突变体菌株抑杀松材线虫与防治松材线虫病的效果均显著降低,菌株的运动性与其在线虫上的定殖能力亦显著减弱。此外,与野生型菌株相比,gan A敲除突变体菌株限制线虫运动的能力显著减弱。因此,gan A可能通过调控AA4定殖松材线虫与限制线虫运动的能力,在AA4抑杀松材线虫中发挥重要功能。

关键词：基因ganA 路德维希肠杆菌松材线虫杀线活性定殖

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水曲柳中MYBL2基因表达特征分析

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广西植物 2021年第6期41卷 997-1003页

作者：韩丹宇于磊韩朝君张振峰张旭刘璋詹亚光东北林业大学生命科学学院哈尔滨150036 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150036 黑龙江省大海林林业局黑龙江牡丹江157000

MYB转录因子家族是植物中最大的转录因子家族之一,参与植物生长、繁殖和代谢的各个时期,能通过多种方式参与植物抗逆生长。该文在水曲柳中克隆FmMYBL2基因,利用生物信息学分析其结构和表达特征,并构建FmMYBL2蛋白的系统进化树。对水曲... 详细信息

MYB转录因子家族是植物中最大的转录因子家族之一,参与植物生长、繁殖和代谢的各个时期,能通过多种方式参与植物抗逆生长。该文在水曲柳中克隆FmMYBL2基因,利用生物信息学分析其结构和表达特征,并构建FmMYBL2蛋白的系统进化树。对水曲柳幼苗进行低温胁迫、盐胁迫处理以及激素分子诱导处理(包括ABA、IAA、GA 3、JA、SA)。分别在0、1、3、6、12、24、48 h取样,利用实时荧光定量PCR对上述处理样品中FmMYBL2基因进行定量分析,并分析了FmMYBL2的时空表达特征。结果表明:(1)克隆得到的FmMYBL2基因全长为762 bp,编码253个氨基酸。(2)FmMYBL2蛋白是亲水性蛋白,氨基酸序列比对表明其与棉花同源关系较近。(3)荧光定量分析表明,FmMYBL2基因响应低温胁迫和盐胁迫,同时ABA、IAA、GA 3、JA、SA共同调控该基因表达。(4)在低温处理1 h、盐胁迫48 h时,虽然FmMYBL2基因表达量最高,激素诱导后表达量持续波动,但其能在短时间内迅速响应。(5)FmMYBL2基因在根、芽、花、种子中均有表达,雄花中的表达量最高。该研究结果为深入研究MYBL2基因功能和水曲柳抗逆生长的调控奠定基础。

关键词：水曲柳 MYBL2转录因子基因克隆抗逆生物信息学分析

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白桦BpSAUR24-like基因启动子克隆及表达特性分析

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辽宁农业科学 2023年第3期 1-7页

作者：刘超逸郭成颜斌惠建平于洪波赤峰学院化学与生命科学学院内蒙古赤峰024005 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040 喀喇沁旗旺业甸实验林场内蒙古赤峰024005

Small auxin-up RNA(SAUR)基因作为生长素的早期响应基因之一,其在植物顶钩发育、细胞扩增及生长素转运等多方面发挥作用。研究白桦中BpSAUR24-like基因启动子中顺式作用元件、组织表达特性及对不同激素的应答反应,可为进一步探究BpSAUR... 详细信息

Small auxin-up RNA(SAUR)基因作为生长素的早期响应基因之一,其在植物顶钩发育、细胞扩增及生长素转运等多方面发挥作用。研究白桦中BpSAUR24-like基因启动子中顺式作用元件、组织表达特性及对不同激素的应答反应,可为进一步探究BpSAUR24-like基因功能奠定基础,也可为白桦分子设计育种提供理论依据。试验以白桦全基因组DNA为参考,预测BpSAUR24-like基因的上游1501 bp为启动子序列,利用PLACE在线软件对BpSAUR24-like基因启动子序列含有的顺式作用元件进行预测,构建BpSAUR24-like基因启动子融合GUS基因的植物表达载体进行拟南芥遗传转化,对转基因拟南芥进行GUS染色。以野生型白桦生根苗的顶芽、第一叶片、第二叶片、第三叶片、幼茎、成熟茎和根为材料,进行实时定量PCR,探究BpSAUR24-like基因组织表达特性。分别用IAA、ABA和GA3处理野生型白桦,探究BpSAUR24-like基因对不同激素的应答反应。结果表明,通过PCR成功克隆了BpSAUR24-like基因上游1501 bp启动子序列,顺式作用元件分析显示,Bp-SAUR24-like基因启动子区域含有众多不同类型的顺式作用元件,除包含TATA-box、CAAT-box和GATA-box等启动子核心序列外,还包含多种光响应、激素响应以及胁迫应答元件。转基因拟南芥GUS染色及对野生型白桦不同组织部位表达特性分析表明,BpSAUR24-like基因在拟南芥和白桦不同组织部位均有表达,但在白桦叶和茎的幼嫩组织中表达量较高,在第三叶和根中表达量较低。BpSAUR24-like基因对不同激素的早期响应也不同,在IAA和ABA处理下上调表达,在GA3处理下下调表达,其中BpSAUR24-like基因能够在IAA和GA3处理的早期做出响应。BpSAUR24-like基因可能通过多种激素调控路径参与白桦叶和茎幼嫩组织发育过程调控。

关键词：白桦启动子 BpSAUR24-like 表达特性

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刚毛柽柳NAC24基因的表达及抗逆功能分析

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林业科学 2019年第3期55卷 54-63页

作者：卢惠君李子义梁瀚予岳远志周天畅杨玉璋王玉成及晓宇东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

【目的】NAC类转录因子是植物特有的最大的转录因子家族之一,广泛参与植物的生长发育过程,并在植物响应盐、干旱等多种非生物胁迫的过程中发挥至关重要的调控作用。本研究拟从盐生木本植物刚毛柽柳中克隆获得一个NAC转录因子基因,研究... 详细信息

【目的】NAC类转录因子是植物特有的最大的转录因子家族之一,广泛参与植物的生长发育过程,并在植物响应盐、干旱等多种非生物胁迫的过程中发挥至关重要的调控作用。本研究拟从盐生木本植物刚毛柽柳中克隆获得一个NAC转录因子基因,研究该基因的耐盐、抗旱功能,以期为研究木本植物NAC转录因子的抗逆分子机制奠定理论基础。【方法】在刚毛柽柳NaHCO_3胁迫转录组数据库中筛选获得一个NAC转录因子基因,将其命名为ThNAC24(GenBank登陆号:KF031949)。利用生物信息学工具将其与其他9个物种的NAC蛋白进行多序列比对,与拟南芥105个NAC蛋白进行进化树分析。分别用300 mmol·L^(-1) NaCl和400 mmol·L^(-1)甘露醇对刚毛柽柳进行胁迫,在胁迫6、12、24和48 h后分别取刚毛柽柳根及叶组织。通过实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)技术分析盐、干旱胁迫下ThNAC24基因在不同胁迫时间点及不同组织的表达情况,初步鉴定其是否响应盐、干旱胁迫。为进一步研究ThNAC24基因的抗逆功能,分别构建植物过表达(pROKⅡ-ThNAC24)及抑制表达(pFGC5941-ThNAC24)载体。利用农杆菌介导的高效瞬时遗传转化体系获得ThNAC24基因瞬时过表达(OE)、抑制表达(IE)及对照(Control)刚毛柽柳植株。在盐、干旱胁迫下分析比较了ThNAC24基因瞬时过表达、抑制表达及对照刚毛柽柳植株的二氨基联苯胺(DAB)和氯化硝基四氮唑蓝(NBT)染色情况,过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,及电解质渗透率、失水率及丙二醛(MDA)含量,鉴定ThNAC24基因的耐盐、抗旱功能。【结果】ThNAC24基因的开放阅读框为1 023 bp,编码340个氨基酸。多序列比对结果显示ThNAC24在N端的氨基酸序列相似度比较高,具有NAC家族的序列特征;系统进化树分析结果显示ThNAC24与ANAC103和ANAC082的亲缘关系较近。qRT-PCR结果显示:盐胁迫下,ThNAC24基因上调表达,在根组织中胁迫12 h表达量最高,而叶组织中胁迫24 h的表达量最高;干旱胁迫下,ThNAC24基因上调表达,在根组织中胁迫6 h表达量最高,在叶组织中胁迫12 h的表达量最高。ThNAC24基因在刚毛柽柳根和叶组织中均有表达且响应盐和干旱胁迫。过表达ThNAC24基因显著降低了刚毛柽柳H_2O_2和超氧阴离子含量,增强了POD和SOD酶的活性,从而减少活性氧(ROS)的积累。过表达ThNAC24基因能够降低刚毛柽柳在逆境胁迫下的电解质渗透率、失水率及MDA的积累,从而保护细胞膜结构的完整性。【结论】刚毛柽柳ThNAC24基因能够响应盐、干旱胁迫,过表达ThNAC24基因植株通过增强POD和SOD活性,进而提高ROS清除能力,减少细胞受损或死亡,从而提高刚毛柽柳的耐盐及抗旱能力。

关键词：刚毛柽柳 NAC转录因子基因表达耐盐抗旱

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水曲柳不同外植体胚性愈伤组织诱导及植株再生

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吉林林业科技 2023年第2期52卷 10-18页

作者：吴晓微魏骋胡兴国孙海涛杨玲林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学林学院黑龙江哈尔滨150040 重庆市林业规划设计院重庆401147 吉林省长白山森工集团汪清林业分公司吉林延边133200

本研究以水曲柳不同外植体(无菌苗叶片和下胚轴、未成熟合子胚、成熟和未成熟合子胚子叶)为材料,在胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖、体胚形成、体胚萌发生根培养基上诱导分化。结果表明,附加了5.0 mg·L^(-1)NAA和2.0 mg·... 详细信息

本研究以水曲柳不同外植体(无菌苗叶片和下胚轴、未成熟合子胚、成熟和未成熟合子胚子叶)为材料,在胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖、体胚形成、体胚萌发生根培养基上诱导分化。结果表明,附加了5.0 mg·L^(-1)NAA和2.0 mg·L^(-1)6-BA的激素配比的MS 1/2培养基,为诱导水曲柳胚性愈伤组织最适培养基;在5种不同的外植体中,成熟和未成熟合子胚子叶更适合作为诱导胚性愈伤组织的外植体;在诱导胚性愈伤组织中,成熟合子胚子叶诱导率为11.7%,未成熟合子胚子叶诱导率为9.7%;胚性愈伤组织在继代培养过程中,WPM为最佳基础培养基,附加0.1 mg·L^(-1)6-BA和0.15 mg·L^(-1)2,4-D的激素配比,胚性愈伤组织的增殖系数可达到1.54。在体胚成熟过程中,MS 1/2培养基内添加1.0 mg·L^(-1)ABA时,体胚的诱导率最高,达到55%。在生根萌发的WPM基础培养基中附加1.0 mg·L^(-1)IBA和1.0 mg·L^(-1)IAA的激素配比,生根率达到36.11%,植株再生率为13.89%。体胚苗最终驯化移栽成功,获得各项生长指标均正常的完整再生植株。

关键词：水曲柳体胚发生外植体愈伤组织诱导植株再生

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基于正交试验的白桦扦插生根影响因素优化

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江西农业学报 2021年第4期33卷 59-63页

作者：李政纶陈坤姜静东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040

以4年生的白桦家系半木质化嫩枝为插条,采用3因素5水平正交试验设计,研究了激素种类、激素浓度、激素处理时间对白桦扦插成活的影响,以期为基层生产单位提供切实可行的白桦无性繁殖技术,白桦良种的规模化生产奠定基础。结果表明:3因素... 详细信息

以4年生的白桦家系半木质化嫩枝为插条,采用3因素5水平正交试验设计,研究了激素种类、激素浓度、激素处理时间对白桦扦插成活的影响,以期为基层生产单位提供切实可行的白桦无性繁殖技术,白桦良种的规模化生产奠定基础。结果表明:3因素中只有激素浓度对扦插生根率、根鲜重、生根数量的影响达到显著水平(P<0.05);而激素种类对上述生根指标的影响均未达到显著水平。极差分析显示,影响生根率、生根数量的各因素排序:激素浓度对根鲜重的影响占主导地位,其次是激素处理时间,最后是激素种类;影响扦插生根率的各因素最适组合为20 mg/L IBA处理0 h;影响根鲜重的各因素最适组合为20 mg/L IBA处理2 h,影响生根数量的各因素最适组合为50 mg/L IBA处理时间为2 h。综合上述结果,确定影响白桦扦插生根指标的各因素最适组合:采用20~50 mg/L IBA处理白桦插穗0~2 h,即可获得最佳的扦插效果。

关键词：嫩枝扦插生根率植物生长调节剂白桦

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白桦BpEIN3基因启动子克隆与表达特性

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东北林业大学学报 2020年第10期48卷 1-8页

作者：李晓媛李然红刘桂丰姜静林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040 牡丹江师范学院东北林业大学

EIN3基因是乙烯信号转导中重要的转录因子,在植物的衰老中发挥重要的作用。为研究EIN3基因在白桦中的表达特性,通过PCR方法克隆了2843 bp白桦BpEIN3基因的启动子区域片段,构建了pBpEIN3::CUS表达载体进行白桦转基因,获得1株pBpEIN3::CU... 详细信息

EIN3基因是乙烯信号转导中重要的转录因子,在植物的衰老中发挥重要的作用。为研究EIN3基因在白桦中的表达特性,通过PCR方法克隆了2843 bp白桦BpEIN3基因的启动子区域片段,构建了pBpEIN3::CUS表达载体进行白桦转基因,获得1株pBpEIN3::CUS白桦株系;并利用PLANCE在线软件对BpEIN3基因启动子片段的主要顺式作用元件进行的分析预测;同时分别用ET、IAA、MeJA、SA和GA处理转pBpEIN3::GUS白桦株系,通过实时定量PCR及GUS活性的检测分析该启动子的表达调控模式。结果表明,BpEIN3启动子包含着多种功能的调控顺式元件;且pBpEIN3::GUS对不同激素均有不同程度的响应,其中SA、GA响应最为明显,说明不同激素对BpEIN3基因的表达模式产生了影响。综上表明:所克隆的BpEIN3基因上游2843 bp的DNA片段具有启动子活性,且能驱动报告基因的有效表达,为后续基因功能的研究奠定基础。

关键词：白桦 BpEIN3 启动子表达特性基因功能

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BpERF1.1基因在低温下的表达特性及过表达载体构建

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分子植物育种 2021年第22期19卷 7473-7478页

作者：孟醒林昕樊晓亮钱庆杨欣欣黄海娇东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 河北雾灵山国家级自然保护区管理中心兴隆067300

分析白桦BpERF1.1基因不同组织部位以及低温胁迫后的表达模式,定位基因表达部位,并为获得转基因白桦做初步准备。通过实时荧光定量PRC技术测定BpERF1.1基因的相对表达量;利用基因枪法在洋葱表皮细胞瞬时表达35S::BpERF1.1-GFP,激光共聚... 详细信息

分析白桦BpERF1.1基因不同组织部位以及低温胁迫后的表达模式,定位基因表达部位,并为获得转基因白桦做初步准备。通过实时荧光定量PRC技术测定BpERF1.1基因的相对表达量;利用基因枪法在洋葱表皮细胞瞬时表达35S::BpERF1.1-GFP,激光共聚焦显微镜观察GFP发光情况,获得BpERF1.1基因表达产物的亚细胞定位信息;此外,利用双酶切法将BpERF1.1基因连接到pRokⅡ过表达载体,以及热激法转化到大肠杆菌感受态细胞中。BpERF1.1基因在叶片中相对表达量最高;低温胁迫后的24 h内,白桦BpERF1.1基因持续上调表达;BpERF1.1基因的表达产物定位在细胞核;pRokⅡ-BpERF1.1植物过表达载体菌液PCR的目的条带位置正确,测序结果BLAST比对后与序列吻合。白桦BpERF1.1基因主要表达部位在叶片,其可以响应低温逆境,且过表达载体pRokⅡ-BpERF1.1构建成功。

关键词：白桦 BpERF1.1 低温胁迫

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