检索结果-内蒙古大学图书馆

东北林业大学学报 2018年第2期46卷 12-16,39页

作者：刘海妹陈韵琳李成浩林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

DREB/CBF转录因子响应植物干旱、高盐和低温等非生物胁迫应答是通过特异结合DRE/CRT顺式作用元件。利用RT-PCR技术从毛果杨克隆PtrDREB28转录因子基因,用基因枪法对其进行亚细胞定位分析,结果表明其定位在细胞核中;利用农杆菌介导法对... 详细信息

DREB/CBF转录因子响应植物干旱、高盐和低温等非生物胁迫应答是通过特异结合DRE/CRT顺式作用元件。利用RT-PCR技术从毛果杨克隆PtrDREB28转录因子基因,用基因枪法对其进行亚细胞定位分析,结果表明其定位在细胞核中;利用农杆菌介导法对野生型大青杨进行遗传转化,并对转基因株系进行抗逆性分析,结果显示经高盐胁迫处理的转基因株系的耐受性明显高于野生型植株;通过测定和比较经盐胁迫处理后转基因株系和野生型植株的丙二醛质量摩尔浓度和相对电导率,发现转基因株系的丙二醛质量摩尔浓度和相对电导率均显著低于野生型植株,表明PtrDREB28基因的过表达可以显著提高杨树耐盐性,由此推测PtrDREB28转录因子可能参与杨树逆境胁迫应答过程。

关键词： PtrDREB28基因转录因子大青杨转基因非生物胁迫

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毛果杨PtrMYB161基因在木质部发育中的表达调控

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东北林业大学学报 2018年第8期46卷 20-24,73页

作者：刘欣颖刘宝光王志凤刘慧子李伟姜立泉林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

木材形成是一个复杂的发育过程包括维管形成层分化形成次生木质部以及木质部中细胞壁的加厚等,其中MYB家族转录因子在此过程中发挥着重要调控作用。通过RNA-seq对毛果杨(Populus trichocarpa)基因组中的MYB基因表达模式分析,结果发现Ptr... 详细信息

木材形成是一个复杂的发育过程包括维管形成层分化形成次生木质部以及木质部中细胞壁的加厚等,其中MYB家族转录因子在此过程中发挥着重要调控作用。通过RNA-seq对毛果杨(Populus trichocarpa)基因组中的MYB基因表达模式分析,结果发现PtrMYB161基因在木质部特异表达,并且主要在纤维细胞中特异表达。为解析该基因在木质部发育中的表达调控功能,构建35S::PtrMYB161植物表达载体并进行毛果杨遗传转化,共获得6个PtrMYB161过表达转基因株系。RT-PCR结果表明,在过表达转基因株系中PtrMYB161基因的表达丰度增加500~5 000倍。表型和组织形态学分析表明,表达丰度增加最多的L5株系表现出明显的植株矮小、叶片面积小、茎节短、茎直径小、木质部面积减小及纤维细胞数量降低等特征,表明PtrMYB161基因参与调控毛果杨木质部发育等过程并起着至关重要的作用。

关键词：毛果杨 PtrMYB161 遗传转化木质部发育

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白桦BpMYB21基因的克隆及其表达模式分析

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南京林业大学学报(自然科学版) 2018年第4期42卷 119-126页

作者：孙璐杨杰王思瑶李欣李影徐志强詹亚光尹静东北林业大学生命科学学院东北林业大学林木遗传育种与生物技术国家重点实验室

【目的】研究了白桦（Betula platyphylla Suk.）MYB基因功能,分析其在茉莉酸（Me JA）和水杨酸（SA）诱导下的表达特性。【方法】以白桦为试材,通过RT-PCR等方法克隆得到1条白桦MYB转录因子家族基因序列,运用生物信息学方法,分析其蛋... 详细信息

【目的】研究了白桦（Betula platyphylla Suk.）MYB基因功能,分析其在茉莉酸（Me JA）和水杨酸（SA）诱导下的表达特性。【方法】以白桦为试材,通过RT-PCR等方法克隆得到1条白桦MYB转录因子家族基因序列,运用生物信息学方法,分析其蛋白质性质和亲缘关系,通过实时荧光定量PCR分析Me JA和SA诱导处理下该基因的表达特性及组织特异性。【结果】获得了1条新的白桦MYB转录因子家族基因,命名为BpMYB21,包含完整的开放阅读框,长度为1 014 bp,编码337个氨基酸。BpMYB 21蛋白与其他植物MYB氨基酸同源性为51%64%,其中与胡桃（Juglans regia）MYB30-Like的亲缘关系最近。BpMYB21在白桦根、茎、叶中均有表达,且在叶中的表达量高于茎和根,但差异不显著;与对照相比,100μmol/L Me JA和50 mg/L SA分别处理白桦苗6 h时,BpMYB21在茎和叶中的表达较高,处理12～48 h逐渐降低。【结论】BpMYB21为MYB转录因子家族新成员,与胡桃MYB基因亲缘关系较近。该基因响应激素诱导,推测其可能在白桦生长发育及在次生代谢过程发挥重要作用。

关键词：白桦 BpMYB21 基因克隆表达模式

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植物的铜稳态研究综述

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江苏农业科学 2019年第10期47卷 305-311页

作者：唐孟泉黄佳欢陈瑾元王琪许志茹东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040

微量元素在植物生长发育过程中是必不可少的,因此研究植物内各种微量元素的稳态具有重要意义。铜在光合作用、呼吸作用、乙烯感应、活性氧清除和细胞壁重塑中发挥重要作用。铜的运输是由一组进化上高度保守的转运蛋白和金属伴侣共同完... 详细信息

微量元素在植物生长发育过程中是必不可少的,因此研究植物内各种微量元素的稳态具有重要意义。铜在光合作用、呼吸作用、乙烯感应、活性氧清除和细胞壁重塑中发挥重要作用。铜的运输是由一组进化上高度保守的转运蛋白和金属伴侣共同完成的。由于根中转运蛋白的调控和高铜含量土壤非常稀缺,使得植物组织中的铜含量一般不会过高。然而,铜的利用率低会降低植物的生产能力。由于某些功能保守的基因的控制,植物会响应铜缺乏的外界环境。植物主要通过Ctr/COPT铜转运家族转运蛋白家族从细胞外吸收铜,之后由铜伴侣蛋白及P型ATP酶将铜运输到各细胞器中。铜在木质部的运输及铜从衰老叶片到嫩叶与生殖组织中进行的再分配都须要烟酰胺发挥作用。此外,铜的再分配过程须要黄色条纹状(yellow stripe-like,简称YSL)转运体及铜伴侣蛋白CCH的参与,其中CCH蛋白存在于植物的韧皮部。当铜供给不足时,植物中增加铜吸收的系统会被激活,并且使铜能更有效地被利用。一些参与铜调控的小分子RNA会下调某些不重要的铜蛋白的表达量。低铜条件下,主要的铜应答转录因子SPL7既可以激活参与铜吸收的基因的表达,又可以上调某些Cu-microRNAs的表达量。这种调节允许光合自养生物生长所需的最重要的含铜蛋白质(如质体蓝素)在一定的铜浓度范围内保持活性,这更有利于植物的生长。植物中铜过量会造成活性氧的快速积累,活性氧会破坏核酸、氧化蛋白并导致脂质过氧化,从而影响细胞的诸多功能,对细胞产生毒害。细胞内铜过量时会上调金属硫蛋白(metallothionein,简称MT)的表达以减少细胞质中游离铜离子的含量。主要阐述植物中铜稳态的作用及其研究进展,以及植物对铜的吸收与再分配过程,同时对铜在细胞内的传递及细胞内铜稳态的调控进行简单概述。并对大部分重要的含铜蛋白的研究进行简要描述。由于高等植物中铜蛋白的研究报道还较少,因此对植物中铜稳态的研究概述可以加强研究者对含铜蛋白质生物学功能的了解,同时也可以为进一步阐明植物吸收利用铜的分子机制提供依据。

关键词：铜稳态铜转运体铜伴侣蛋白 Cu-microRNAs 其他含铜蛋白

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水曲柳FmAG基因克隆及生物信息学分析

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分子植物育种 2018年第1期16卷 69-75页

作者：孟祥宇吴航伸付德山应佶杉孔德强詹亚光齐凤慧东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

AGAMOUS(AG)基因是调节植物开花的基因。本研究根据水曲柳转录组数据筛选出与开花相关基因,通过RT-PCR方法扩增,得到水曲柳AG基因序列,命名为Fm AG,并利用生物信息学手段对获得的序列进行结构及功能预测,结果表明,水曲柳AG基因编码区全... 详细信息

AGAMOUS(AG)基因是调节植物开花的基因。本研究根据水曲柳转录组数据筛选出与开花相关基因,通过RT-PCR方法扩增,得到水曲柳AG基因序列,命名为Fm AG,并利用生物信息学手段对获得的序列进行结构及功能预测,结果表明,水曲柳AG基因编码区全长726 bp;蛋白质分子量为27 913.51,具有典型的MADS-box结构域和K-结构域,是一个无信号肽、无跨膜区、亲水性、不稳定蛋白,二级结构由148个α-螺旋组成,系统进化树分析显示该蛋白与Fraxinus nigra、Fraxinus pennsylvanica的AG同源蛋白亲缘关系最近,进一步确定所获得的序列为AG基因。本研究为今后通过基因调控分子育种和促进水曲柳优树种源有性繁殖奠定基础。

关键词：水曲柳 AG 基因克隆生物信息学

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水曲柳花发育相关FmFT基因克隆、表达及生物信息学分析

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分子植物育种 2018年第5期16卷 1454-1460页

作者：冯璐王业何利明朱珠詹亚光冯昌寅李新宇刘颖东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

FT(FLOWERING LOCUS T)基因是植物多个开花途径的整合因子,在花发育中起重要作用。以水曲柳雌雄花发育转录组中FT序列为基础,通过PCR扩增获得该基因全长,命名为FmFT。其开放阅读框(ORF)为525 bp,编码174个氨基酸。生物信息学分析结果表... 详细信息

FT(FLOWERING LOCUS T)基因是植物多个开花途径的整合因子,在花发育中起重要作用。以水曲柳雌雄花发育转录组中FT序列为基础,通过PCR扩增获得该基因全长,命名为FmFT。其开放阅读框(ORF)为525 bp,编码174个氨基酸。生物信息学分析结果表明,其相对分子质量为19 795.2,等电点为5.90,是亲水性不稳定酸性蛋白;无跨膜区域,全部位于膜外;有1个PEBP保守结构域。同源比对结果显示,水曲柳FT基因编码的氨基酸序列与20个物种的FT蛋白序列同源性在83%~88%之间,与苹果(Malus domestica)同源性最高,为88%。系统进化结果显示,水曲柳FT蛋白单独聚为一类,与其他物种亲缘关系均较远。FmFT在水曲柳不同发育时期的雌雄花中的表达结果表明,在减数分裂时期和成熟孢子时期,雌雄花之间表达量差异显著。在雄花中,在减数分裂时期表达量达到最大值;在雌花中,表达量持续升高,在成熟胚囊时期达到最高值,是孢原细胞-大孢子母细胞时期的35.97倍,表明FmFT不仅在水曲柳雌雄花的发育中起着重要作用,且功能不同。

关键词：水曲柳 FmFT 花发育生物信息学分析基因表达

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水曲柳S6K基因的生物信息学及胁迫和激素下的表达分析

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植物研究 2018年第5期38卷 714-724页

作者：孙泓赵兴堂刘璋杨凯王颖詹亚光东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

以所获取的水曲柳FmS6K基因(FmS6K1和FmS6K2)为对象,解析其核苷酸序列及其所编码蛋白质的基本信息,探索非生物胁迫和植物激素条件下基因的表达特征。结果表明,FmS6K1和FmS6K2基因长度分别为1 583和1 796 bp,分别编码480和483个氨基酸,... 详细信息

以所获取的水曲柳FmS6K基因(FmS6K1和FmS6K2)为对象,解析其核苷酸序列及其所编码蛋白质的基本信息,探索非生物胁迫和植物激素条件下基因的表达特征。结果表明,FmS6K1和FmS6K2基因长度分别为1 583和1 796 bp,分别编码480和483个氨基酸,二者均含有完整的开放阅读框。FmS6K1为两性蛋白,FmS6K2是亲水蛋白,二者均不含有信号肽。低温(4℃)和盐(NaCl)胁迫均影响FmS6K1和FmS6K2基因的表达,水曲柳根、茎、叶中的FmS6K1和FmS6K2基因对盐更加敏感,FmS6K2基因比FmS6K1基因对低温和盐胁迫的响应更为敏感;外源ABA、GA和IAA均能够影响FmS6K1和FmS6K2基因的表达,FmS6K1在水曲柳根、茎、叶中对外源的IAA响应更大;水曲柳根茎叶中FmS6K2基因均对外源ABA处理有显著上调应答,对外源GA的响应主要在根中,但对IAA的应答主要在茎和叶片中。上述结果表明FmS6K基因在调控植物生长发育和适应逆境胁迫方面扮演重要角色。

关键词： S6K基因生物信息学信号诱导水曲柳基因表达

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长白落叶松形成层差异表达的miRNA

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东北林业大学学报 2018年第6期46卷 14-18页

作者：魏佳玉张素芳刘紫怡张海胤付粱晨杨树云张磊林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

以长白落叶松粗生长初期和盛期的形成层为样品构建miRNA文库,共发现49个差异表达的miRNA,差异miRNA的GO分析表明其主要参与了细胞组分、分子功能和生物学过程中共计23个类别。COG数据库分类注释表明所有靶基因涉及8类过程。转录,复制等... 详细信息

以长白落叶松粗生长初期和盛期的形成层为样品构建miRNA文库,共发现49个差异表达的miRNA,差异miRNA的GO分析表明其主要参与了细胞组分、分子功能和生物学过程中共计23个类别。COG数据库分类注释表明所有靶基因涉及8类过程。转录,复制等途径得到注释到miRNA靶基因表达量相对较高,说明测序样品正处于旺盛的生长发育期,和实际情况样品相符。

关键词：长白落叶松 miRNA 形成层差异表达

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水曲柳松散愈伤组织的悬浮培养和超低温保存

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分子植物育种 2018年第16期16卷 5376-5385页

作者：梁雪张佳薇赵兴堂何利明康雪詹亚光东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

以成熟水曲柳胚的三个不同部位作为外植体,利用四种不同类型培养基研究对水曲柳松散愈伤组织诱导产生的不同影响,选出适合诱导松散型和胚性愈伤组织的外植体与培养基组合,进一步探讨悬浮培养以及超低温保存的适宜条件,为水曲柳高效微繁... 详细信息

以成熟水曲柳胚的三个不同部位作为外植体,利用四种不同类型培养基研究对水曲柳松散愈伤组织诱导产生的不同影响,选出适合诱导松散型和胚性愈伤组织的外植体与培养基组合,进一步探讨悬浮培养以及超低温保存的适宜条件,为水曲柳高效微繁打下基础。主要结果如下:(1)选出较为适宜诱导松散型愈伤组织培养基是WPM+1 mg/L NAA+0.8 mg/L 6-BA+1 g/L CH+20 g/L蔗糖+5.3 g/L琼脂。(2)水曲柳悬浮培养体系的建立确定悬浮培养的培养条件为:接种量为25 mL液体培养基中加入1.5 g愈伤组织,转速120 r/min、蔗糖浓度2%,细胞15 d后增殖1.41倍;悬浮组织直径在约2 mm时易于保持松散型细胞悬浮状态。(3)超低温冷冻保存,在-196℃条件下进行愈伤组织冷冻保存,保护剂采用30%甘油+15%乙二醇+15%DMSO+0.4 mol/L蔗糖时,解冻条件为40℃、暗培养,细胞生命力最高保持在83.3%,其中愈伤组织恢复生长率为3.0%。

关键词：水曲柳松散型愈伤组织组织培养悬浮培养超低温冷冻保存

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ThZFP1蛋白特异性结合的DNA顺式作用元件

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东北林业大学学报 2018年第12期46卷 35-38页

作者：段肖肖余振强臧丹丹张丹丹陈韵如王衷涵牛亦龙王玉成林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

锌指蛋白(ZFP)是一类通过结合锌离子折叠成手指结构域的蛋白,在植物逆境胁迫中起重要作用。Th ZFP1需要结合一定的DNA序列来调控基因的表达,为了确定Th ZFP1结合的元件序列,利用自己开发的TFCentered Y1H技术,鉴定了Th ZFP1蛋白识别的... 详细信息

锌指蛋白(ZFP)是一类通过结合锌离子折叠成手指结构域的蛋白,在植物逆境胁迫中起重要作用。Th ZFP1需要结合一定的DNA序列来调控基因的表达,为了确定Th ZFP1结合的元件序列,利用自己开发的TFCentered Y1H技术,鉴定了Th ZFP1蛋白识别的核心序列,分别为DOF和ARR1AT。并进一步在植物体内验证了Th ZFP1蛋白与DOF和ARR1AT元件的互作。结果表明,Th ZFP1蛋白能够特异性地识别DOF和ARR1AT顺式作用元件来调控相关基因的表达。

关键词： Th ZFP1 DNA随机文库蛋白质-DNA互作基因枪 GUS酶活测定

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