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植物研究 2015年第3期35卷 412-417页

作者：崔志远刘桂丰李博郭海沣卫星杓王超东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

为了研究不同施肥处理对白桦材性性状的影响,选用了4种不同施肥配方(N肥、K肥、P肥、全营养元素肥料)连续3年处理白桦实生植株,分别测定了其生长性状,木质素、纤维素含量,木材密度,微纤丝角,导管和纤维形态的变化等。结果表明:施加N肥... 详细信息

为了研究不同施肥处理对白桦材性性状的影响,选用了4种不同施肥配方(N肥、K肥、P肥、全营养元素肥料)连续3年处理白桦实生植株,分别测定了其生长性状,木质素、纤维素含量,木材密度,微纤丝角,导管和纤维形态的变化等。结果表明:施加N肥和全营养元素肥料的白桦相对于对照组(不施加肥料)的生长性状变化显著,胸径分别是对照组的1.6和1.9倍,冠幅分别是对照组的1.4和1.5倍,纤维素含量分别增加8.7%、14.3%,木质素含量差别不明显,单位横截面积内导管数量增加,导管弦径变小,纤维长宽显著减小,长宽比没有明显变化;而施加P肥后相对于对照组木材密度增加5%,微纤丝角降低5.4%。因此合理施加N肥可以一定程度提高白桦木材造纸性能,合理施加P肥可有效提高木材的机械强度。

关键词：白桦(Betula platyphylla) 施肥纤维素导管纤维形态

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白桦开花抑制因子BpFLC与BpSVP蛋白互作的结构域筛选与互作验证

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植物研究 2015年第6期35卷 866-872,882页

作者：臧丽娜郑唐春代丽娟刘彩霞曲冠证东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

为深入研究白桦开花抑制因子FLC与SVP的相互作用的分子机理。从重组质粒pGBKT7-BpFLC、pGBKT7-BpSVP分别克隆出6个BpFLC截短体（BpFLC1～6）和6个BpSVP截短体（BpSVP1～6），分别编码MI、MIK、K、IKC、KC和C域。在酵母Y2HGold菌中，分... 详细信息

为深入研究白桦开花抑制因子FLC与SVP的相互作用的分子机理。从重组质粒pGBKT7-BpFLC、pGBKT7-BpSVP分别克隆出6个BpFLC截短体（BpFLC1～6）和6个BpSVP截短体（BpSVP1～6），分别编码MI、MIK、K、IKC、KC和C域。在酵母Y2HGold菌中，分别共转诱饵质粒pGBKT7-BpFLC1～6×pGADT7-BpSVP及pGBKT7-BpFLC×pGADT7-BpSVP1～6。酵母转化子Y2HGold[pGBKT7-BpFLC2～5×pGADT7-BpSVP]，可在选择性固体培养基TDO、QTO／A上生长，并在QDO／A／X上长出蓝色菌落，表明BpSVP能与截短体蛋白BpFLC2～5异源结合。此外酵母Y2HGold[pGBKT7-BpFLC×pGADT7-BpSVP2～5]也能同时激活报告基因AUR1-C、HIS3、ADE2、MEL1。进一步研究发现：Y2HGold[pGBKT7-BpFLC3×pGADT7-BpSVP3]存在相互作用，表明BpFLC的K域与BpSVP的K域能够异源结合，是介导BpFLC与BpVP蛋白互作的关键结构域。

关键词：白桦 BpFLC BpSVP 酵母双杂交截短体蛋白互作

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毛果杨HDA901基因的克隆和表达分析

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西北植物学报 2015年第3期35卷 434-439页

作者：吕世博毛昱力姜廷波马旭俊东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

该实验克隆了毛果杨组蛋白去乙酰化酶基因HDA901的编码序列,并进行生物信息学、亚细胞定位和盐胁迫表达分析。序列分析表明,HDA901开放阅读框为1 245bp,编码1个由414个氨基酸残基组成的蛋白质,等电点为5.77;毛果杨HDA901与其他植物同源... 详细信息

该实验克隆了毛果杨组蛋白去乙酰化酶基因HDA901的编码序列,并进行生物信息学、亚细胞定位和盐胁迫表达分析。序列分析表明,HDA901开放阅读框为1 245bp,编码1个由414个氨基酸残基组成的蛋白质,等电点为5.77;毛果杨HDA901与其他植物同源蛋白具有一段保守序列,在进化上与拟南芥AtHDA14亲缘关系较近。启动子分析表明,毛果杨HDA901基因启动子序列包含ACE、ABRE、HSE和TC-rich repeats等多个与逆境相关的顺式作用元件。亚细胞定位分析表明,毛果杨HDA901蛋白在细胞核和细胞质中无分布,可能位于线粒体或穿梭于线粒体和叶绿体之间。实时荧光定量PCR结果显示,毛果杨HDA901基因表达受盐胁迫调节,在盐胁迫下,根和茎中HDA901基因表达受抑制;叶中HDA901基因表达受诱导。研究表明,毛果杨HDA901基因参与盐胁迫应答反应。

关键词：毛果杨组蛋白去乙酰化酶克隆盐胁迫基因表达

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中国林木种子园建设与管理技术探讨

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西部林业科学 2016年第2期45卷 46-51页

作者：夏辉赵国辉司冬晶尹绍鹏李莹郑密赵曦阳东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040 吉林省四平林木种子园吉林四平136000

从建园时种子园园址选择、优良亲本的选择、优良无性系或家系选择和配置以及种子园经营管理等几个方面探讨中国种子园发展现状,深入分析种子园建设与管理存在的重要问题,提出今后研究中应关注以下几个方面:种子园亲本和园址选择的重要性... 详细信息

从建园时种子园园址选择、优良亲本的选择、优良无性系或家系选择和配置以及种子园经营管理等几个方面探讨中国种子园发展现状,深入分析种子园建设与管理存在的重要问题,提出今后研究中应关注以下几个方面:种子园亲本和园址选择的重要性;优良家系或无性系配置应同时兼顾遗传多样性与遗传增益;种子园经营管理中应树立良种价值观,注重种子产量和品质的保障;种子园发展中应重视分子育种与常规育种的有效结合。

关键词：种子园亲本选择遗传增益遗传多样性经营管理

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毛果杨PGR5基因转南林895杨的分子鉴定及表达量

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东北林业大学学报 2015年第11期43卷 6-8页

作者：王丽娜李开隆林木遗传育种国家级重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

采用农杆菌介导法将毛果杨（Populus trichocarpa）PGR5基因转化南林895杨,经潮霉素抗性基因筛选并对转基因植株进行了分子检测和表达量分析。普通PCR检测结果显示,有12株检测到阳性信号,表明该基因已整合到南林895杨基因组中;经RT-PCR... 详细信息

采用农杆菌介导法将毛果杨（Populus trichocarpa）PGR5基因转化南林895杨,经潮霉素抗性基因筛选并对转基因植株进行了分子检测和表达量分析。普通PCR检测结果显示,有12株检测到阳性信号,表明该基因已整合到南林895杨基因组中;经RT-PCR检测,该12株转化子在目的基因处有阳性条带,表明该基因在转录水平表达;实时荧光定量PCR检测结果显示,12株阳性苗的表达量为野生型的2-20倍。

关键词： PGR5 分子检测实时荧光定量PCR 转基因杨树

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一种简易高效提取多种植物纯净DNA的方法

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植物研究 2015年第3期35卷 457-461页

作者：丁浩郑唐春梁德洋曲冠证东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

植物组织中次生代谢产物较多,要从中快速提取高质量的DNA比较困难。本文利用一种改良的CTAB法,通过在裂解后直接添加RNase A去除RNA污染,然后再经过一系列的抽提、沉淀、洗涤,获得纯净的DNA。经用琼脂糖凝胶电泳及核酸检测仪检测总DNA... 详细信息

植物组织中次生代谢产物较多,要从中快速提取高质量的DNA比较困难。本文利用一种改良的CTAB法,通过在裂解后直接添加RNase A去除RNA污染,然后再经过一系列的抽提、沉淀、洗涤,获得纯净的DNA。经用琼脂糖凝胶电泳及核酸检测仪检测总DNA的纯度、浓度及质量。以提取的DNA为模版,PCR能够获得清晰的目的条带。结果表明通过该法可以简易、快速、高通量的提取多种植物的纯净DNA,为后续的分子生物学分析奠定了技术基础。

关键词：植物方法改良 DNA提取 PCR

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ThMYB3和ThDof2对ThVHAc1基因表达的调控

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北京林业大学学报 2015年第12期37卷 1-6页

作者：杨桂燕赵震赵玉琳张凤娇高彩球东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室西北农林科技大学林学院

ThVHAc1基因能响应干旱、盐、重金属等胁迫诱导,该基因能有效提高转ThVHAc1基因酵母的多种抗逆能力。为进一步研究ThVHAc1基因的抗逆调控机理,本研究利用酵母单杂交技术钓取ThVHAc1可能的上游调控因子,并利用基因枪瞬时共转化技术进行... 详细信息

ThVHAc1基因能响应干旱、盐、重金属等胁迫诱导,该基因能有效提高转ThVHAc1基因酵母的多种抗逆能力。为进一步研究ThVHAc1基因的抗逆调控机理,本研究利用酵母单杂交技术钓取ThVHAc1可能的上游调控因子,并利用基因枪瞬时共转化技术进行初步验证。酵母单杂交结果显示,ThMYB3基因能识别ThVHAc1基因上游MYB顺式作用元件和含有MYB元件的启动子片段。ThDof2基因能识别ThVHAc1基因上游DOF顺式作用元件和含有DOF元件的启动子片段。但ThMYB3和ThDof2均不能识别突变后的元件及含对应突变元件的启动子片段。将ThMYB3和ThDof2分别构建成效应载体,各元件、突变元件、启动子片段及突变的启动子片段分别构建报告载体进行共表达验证。结果发现:效应载体ThMYB3和含MYB元件及含MYB元件的ThVHAc1启动子片段的报告载体,ThDof2和含DOF元件及含DOF元件的ThVHAc1启动子片段的报告载体瞬时共表达烟草叶片能观察到GUS染色,且GUS活性较高;而与相应突变元件及片段的共转化则观察不到烟草叶片的GUS染色,且GUS活性很低。说明只有非突变的元件和启动子片段才能与效应载体进行互作识别,激活GUS基因的表达,验证了酵母单杂交获得的上游调控基因的识别特异性。表明ThMYB3和ThDof2可能通过与相应启动子元件的结合调控ThVHAc1基因。

关键词：刚毛柽柳酵母单杂交 VHAc基因启动子调控因子

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柽柳中一种新型硫氧还蛋白H基因的克隆与鉴定（英文）

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植物研究 2015年第3期35卷 340-346,354页

作者：宋鑫董京祥李开隆李洪娇李慧玉东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 东北林业大学图书馆哈尔滨150040

硫氧还蛋白对维持生物体内稳定的氧化还原状态发挥着重要作用。为了研究硫氧还蛋白在非生物胁迫条件下的功能,我们从柽柳的cDNA文库中分离出来一条新的硫氧还蛋白cDNA序列,命名为ThTrx1。生物信息学分析表明,ThTrx1是硫氧还蛋白h亚家族... 详细信息

硫氧还蛋白对维持生物体内稳定的氧化还原状态发挥着重要作用。为了研究硫氧还蛋白在非生物胁迫条件下的功能,我们从柽柳的cDNA文库中分离出来一条新的硫氧还蛋白cDNA序列,命名为ThTrx1。生物信息学分析表明,ThTrx1是硫氧还蛋白h亚家族的一个新成员,属于h1亚族。我们采用实时定量RT-PCR的方法检测在不同非生物胁迫(NaCl,PEG,CdCl2,低温和ABA)下,ThTrx1基因在刚毛柽柳根和叶中的表达。结果表明,在NaCl,PEG,CdCl2和ABA处理条件下,ThTrx1在柽柳根和叶中的mRNA水平都是上调表达。而在低温胁迫下,ThTrx1下调表达。我们通过Thrx1基因在大肠杆菌中的表达来分析它对于细菌生长和耐受性的影响。结果表明,含重组质粒的大肠杆菌(pET32a-Trx1)与对照相比,对于盐,金属离子和干旱胁迫体现出更高的耐受性。我们的结果表明,该ThTrx1是参与非生物胁迫应答,并且受依赖ABA信号转导途径的调节。

关键词：硫氧还蛋白基因表达非生物胁迫应答刚毛柽柳

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光肩星天牛的防治技术研究

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林业科技 2016年第2期41卷 51-53页

作者：孙妍赵红盈王琪遇文婧刘欣黑龙江省林业科学院森林保护研究所哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040

通过对光肩星天牛的生物学特性、危害特点以及不同防治方法的总结和研究得出:对光肩星天牛的防治应采取综合手段,同时做到无虫时防虫,有虫时治虫。

关键词：光肩星天牛危害防治技术

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小黑杨花粉植株的获得及遗传转化

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福建林业科技 2016年第4期43卷 13-16页

作者：牛京萍刘轶由香玲林产工业规划设计院北京100010 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040

以小黑杨花药为外植体,进行花粉植株(即单倍体)的诱导及体系的优化。通过染色体压片及PCR方法进行检测,证明已获得了单倍体植株。同时,以pROKII为载体利用根癌农杆菌介导法对单倍体植株进行了遗传转化,分子检测结果表明,外源基因已成功... 详细信息

以小黑杨花药为外植体,进行花粉植株(即单倍体)的诱导及体系的优化。通过染色体压片及PCR方法进行检测,证明已获得了单倍体植株。同时,以pROKII为载体利用根癌农杆菌介导法对单倍体植株进行了遗传转化,分子检测结果表明,外源基因已成功整合入单倍体小黑杨中。本研究可为林木单倍体的诱导及遗传转化研究提供参考,也可为杨树及林木的育种方式提供新思路。

关键词：小黑杨花粉植株单倍体遗传转化

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