检索结果-内蒙古大学图书馆

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2010年第7期38卷 161-166页

作者：李慧玉刘桂丰刘菲菲王珊东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150040

【目的】构建NaCl胁迫下柽柳根部cDNA文库,在盐胁迫下检测柽柳水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)基因的表达,探讨AQPs与柽柳耐盐性的关系。【方法】以0.4mol/LNaCl胁迫处理的刚毛柽柳(Tamarix hispida)根部组织为试材,分别构建未经盐胁迫及胁... 详细信息

【目的】构建NaCl胁迫下柽柳根部cDNA文库,在盐胁迫下检测柽柳水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)基因的表达,探讨AQPs与柽柳耐盐性的关系。【方法】以0.4mol/LNaCl胁迫处理的刚毛柽柳(Tamarix hispida)根部组织为试材,分别构建未经盐胁迫及胁迫24,48h的cDNA文库,并测定文库滴度。对从文库中获得的EST序列进行拼接,获得刚毛柽柳AQP(ThAQP)的单一序列,对其进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR方法,研究ThAQP基因在盐胁迫后的刚毛柽柳根和叶中的表达情况。【结果】构建的NaCl胁迫0,24,48h3个文库的初始滴度分别为1.0×106,1.4×106和1.2×106pfu/mL,插入片段的平均长度分别为0.8,0.9和0.85kb,平均重组率为98.2%。文库克隆随机测序获得了刚毛柽柳的7条ThAQP基因单一序列,这7条ThAQP基因分别与水通道蛋白的4个亚家族成员基因具有很高的同源性。在根和叶中,这7条ThAQP基因表达对盐胁迫的响应不同,在根部ThAQP1～ThAQP4相对表达量增多,而其他基因的相对表达量变化不明显;在叶部,ThAQP7在胁迫24h时相对表达量出现小幅度上升,而其他6条ThAQP的相对表达量则明显下降。【结论】ThAQP基因可能与柽柳抵御盐胁迫有关。

关键词：柽柳 cDNA文库 NaCl胁迫水通道蛋白

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不同发育时期水曲柳种子的形态生理变化及其层积处理后的萌发效应

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植物生理学通讯 2010年第2期46卷 125-130页

作者：张鹏沈海龙东北林业大学林学院林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040

探讨不同发育时期水曲柳种子的外部形态和生理变化及其层积处理后的萌发效应结果表明:水曲柳开花120d后为成熟脱水阶段,开花110d后种子的胚长和胚乳干重趋于稳定,花后110～120d期间种子胚干重趋于稳定;花后70～100d采集的种子不耐层积,... 详细信息

探讨不同发育时期水曲柳种子的外部形态和生理变化及其层积处理后的萌发效应结果表明:水曲柳开花120d后为成熟脱水阶段,开花110d后种子的胚长和胚乳干重趋于稳定,花后110～120d期间种子胚干重趋于稳定;花后70～100d采集的种子不耐层积,层积处理后逐渐死亡,花后110d采集的种子经层积处理后可以萌发;110d后采集的水曲柳种子经暖温(20℃)16周+低温(5℃)12周的层积处理后,其休眠破除的效果较好,适当延长暖温层积时间有利于提高种子萌发率。

关键词：水曲柳种子发育形态生理变化萌发能力

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烟草内源铁蛋白NtFer1和NtFer2的相互作用

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植物生理学通讯 2010年第8期46卷 824-828页

作者：周博如吴丽丽丁宝健姜廷波东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040

以2个烟草铁蛋白基因全长序列(NtFer1和NtFer2,GenBank登录号:AY083924和AY141105)为基础,利用细菌双杂交系统分析不同烟草铁蛋白亚基之间及相同铁蛋白亚基之间的互作关系,并利用Northern杂交分析2个铁蛋白基因的特异表达。结果表明,铁... 详细信息

以2个烟草铁蛋白基因全长序列(NtFer1和NtFer2,GenBank登录号:AY083924和AY141105)为基础,利用细菌双杂交系统分析不同烟草铁蛋白亚基之间及相同铁蛋白亚基之间的互作关系,并利用Northern杂交分析2个铁蛋白基因的特异表达。结果表明,铁蛋白基因NtFer1和NtFer2在叶片中均有表达,同时2种亚基之间存在很强的互作关系,说明在叶片中组成铁蛋白的24个亚基可能有3种类型,或来自单一的NtFer1亚基,或来自单一的NtFer2亚基,也可能来源于不同的铁蛋白亚基。在烟草根部组织中只有铁蛋白NtFer1基因大量表达,而NtFer2基因的表达非常微弱,所以根部的铁蛋白大分子可能由单一的铁蛋白NtFer1亚基聚合而成的。

关键词：烟草铁蛋白蛋白质互作基因表达

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团花树木葡聚糖转葡糖苷酶cDNA克隆及序列分析

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北京林业大学学报 2010年第5期32卷 45-49页

作者：李伟李娜陈晓阳北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室林木育种国家工程实验室华南农业大学林学院

以团花树形成层组织中大量表达的RNA为材料,通过反转录、保守区域PCR、3′RACE和染色体步移等技术获得了团花树AcXET的全长cDNA序列,共1396bp。核苷酸序列分析表明:该序列含有1个960bp的开放阅读框,编码1个由320个氨基酸组成的蛋白质。... 详细信息

以团花树形成层组织中大量表达的RNA为材料,通过反转录、保守区域PCR、3′RACE和染色体步移等技术获得了团花树AcXET的全长cDNA序列,共1396bp。核苷酸序列分析表明:该序列含有1个960bp的开放阅读框,编码1个由320个氨基酸组成的蛋白质。该基因编码蛋白与已报道的其他植物的XET蛋白有较高的同源性,且含有XET的活性催化位点EIDFE。

关键词：团花树 AcXET cDNA克隆序列分析

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农杆菌介导的烟草瞬时表达试验条件优化

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东北林业大学学报 2010年第9期38卷 110-112页

作者：吴英杰姜波张岩李彦邦贺琳王玉成林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

以烟草叶片为试材,用转入植物表达载体pBI121的根癌农杆菌EHA105进行遗传转化。通过分析菌液不同浓度、侵染时间、乙酰丁香酮浓度及共培养时间对GUS基因表达的影响,研究其瞬时表达的最佳条件。结果显示:用OD600值为0.6的农杆菌侵染6min... 详细信息

以烟草叶片为试材,用转入植物表达载体pBI121的根癌农杆菌EHA105进行遗传转化。通过分析菌液不同浓度、侵染时间、乙酰丁香酮浓度及共培养时间对GUS基因表达的影响,研究其瞬时表达的最佳条件。结果显示:用OD600值为0.6的农杆菌侵染6min,在培养基中添加120μmol.L-1的乙酰丁香酮,共培养2d,能够得到高效的GUS基因瞬时表达。

关键词：烟草农杆菌转化 GUS基因瞬时表达

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柽柳eIF1A基因耐重金属CdCl_2胁迫能力分析

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东北林业大学学报 2010年第2期38卷 4-5,8页

作者：姚启超高彩球姜静王玉成刘桂丰林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

通过实时荧光RT-PCR技术研究了CdCl2胁迫下不同时间点柽柳根、茎、叶中eIF1A基因的表达模式,结果表明:该基因受CdCl2胁迫诱导明显,可能参与柽柳的CdCl2胁迫应答。进一步对转柽柳eIF1A基因的T2代烟草进行CdCl2胁迫,测定各转基因株系及野... 详细信息

通过实时荧光RT-PCR技术研究了CdCl2胁迫下不同时间点柽柳根、茎、叶中eIF1A基因的表达模式,结果表明:该基因受CdCl2胁迫诱导明显,可能参与柽柳的CdCl2胁迫应答。进一步对转柽柳eIF1A基因的T2代烟草进行CdCl2胁迫,测定各转基因株系及野生型烟草的MDA、POD、SOD、可溶性蛋白含量等各项抗逆生理指标,结果表明柽柳eIF1A基因具有提高烟草的耐CdCl2胁迫的能力。

关键词：柽柳 CdCl2胁迫 eIF1A基因实时定量RT-PCR 转基因

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白桦SRAP反应体系的建立与优化

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东北林业大学学报 2010年第9期38卷 1-3页

作者：张晓蕾张凯旋杨传平曲冠证刘桂丰魏志刚林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

以白桦(Betula platyphlla Suk)基因组DNA为模板,利用趋势面设计对白桦SRAP-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物P)在3个水平上进行优化试验,筛选出各反应因素的最佳水平,建立了白桦SRAP-PCR反应的最佳体系。该反应... 详细信息

以白桦(Betula platyphlla Suk)基因组DNA为模板,利用趋势面设计对白桦SRAP-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物P)在3个水平上进行优化试验,筛选出各反应因素的最佳水平,建立了白桦SRAP-PCR反应的最佳体系。该反应体系为20μL:0.21g/LDNA,1.5μL;25mmol/LMg2+,1.4μL;5U/μLTaq酶,0.25μL;2.5mmol/L,2μL;10μm/L引物,0.35μL。PCR反应程序为:94℃预变性5min,94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min,5个循环;94℃变性1min,50℃复性1min,72℃延伸1min,30个循环,72℃延伸7min。

关键词：白桦 SRAP标记趋势面设计

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刺五加体细胞胚发生研究进展

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植物生理学通讯 2010年第9期46卷 876-880页

作者：周晨光刘立琨赵波夏德安李成浩东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040

综述了国内外对刺五加体细胞胚发生研究的现状。分别对刺五加体细胞胚发生方式、体细胞胚发育相关生理生化变化(包括生长素极性运输、DNA甲基化和代谢途径调控)、体细胞胚生物反应器培养的研究现状进行了评述。

关键词：刺五加体细胞胚发生

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抑制性消减杂交技术研究Cd^(2+)胁迫下星星草基因表达

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东北林业大学学报 2010年第2期38卷 9-10,19页

作者：曲跃军杜人杰王雷吕澈妍吴丽丽姜廷波林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

通过对Cd2+胁迫下星星草抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)cDNA文库的分析,从正向和反向消减文库中筛选出33个特异表达的阳性克隆,26个镉胁迫诱导表达,7个为镉胁迫抑制表达。序列分析表明,有29个与数据库中有... 详细信息

通过对Cd2+胁迫下星星草抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)cDNA文库的分析,从正向和反向消减文库中筛选出33个特异表达的阳性克隆,26个镉胁迫诱导表达,7个为镉胁迫抑制表达。序列分析表明,有29个与数据库中有同源性,其中功能已知的25个,未知功能有4个,剩余4个为无同源序列的新基因。已知功能序列中,19个为胁迫后诱导表达,6个为胁迫后抑制表达,其中谷胱甘肽还原酶(GSR)基因、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)基因、细胞膜CP5蛋白基因和ABC家族蛋白基因等与星星草抗镉离子胁迫密切相关。

关键词：镉胁迫星星草抑制性消减杂交

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茉莉酸处理后兴安落叶松针叶cDNA文库的构建及其质量评价

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东北林业大学学报 2010年第6期38卷 20-21,56页

作者：金虎严善春刘关君林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

为研究兴安落叶松(Larix gmelinii)诱导抗虫性的分子机理,以茉莉酸诱导处理后的兴安落叶松针叶为材料,提取叶中总RNA合成cDNA,连接到质粒载体pDNR-LIB上,采用电穿孔法将重组质粒转化到DH5α中。经文库质量鉴定表明:文库库容为5×106... 详细信息

为研究兴安落叶松(Larix gmelinii)诱导抗虫性的分子机理,以茉莉酸诱导处理后的兴安落叶松针叶为材料,提取叶中总RNA合成cDNA,连接到质粒载体pDNR-LIB上,采用电穿孔法将重组质粒转化到DH5α中。经文库质量鉴定表明:文库库容为5×106,插入片段分布在0.5～2.0kb,平均大小约为1kb,重组率达到95%,表明已成功构建了高质量的茉莉酸诱导处理后兴安落叶松针叶全长cDNA文库。所建文库为进一步开展EST测序分析、抗虫基因克隆及功能基因组学研究奠定了基础。

关键词：茉莉酸兴安落叶松 cDNA文库

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