检索结果-内蒙古大学图书馆

采自栎树叶上的中国新记录属真菌—Tubakia

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菌物研究 2010年第1期8卷 23-25页

作者：刘雪峰刘秀嶶东北林业大学遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040

报道了采自辽宁省旅顺的辽东栎(Quercus liaotungensis)叶片上的椿启介菌属(Tubakia)为中国新记录属,并对该属及该属真菌干孢盾壳椿启介菌[Tubakia dryina(Sacc.)Sutton]进行了形态学描述。

关键词：干孢盾壳椿启介菌中国新记录种辽宁

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帽儿山实验林场白桦人工幼林适宜微立地研究

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森林工程 2010年第3期26卷 11-13,17页

作者：王鹏李国江王石磊张象君王庆成李开隆东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040 东北林业大学帽儿山实验林场黑龙江尚志150600

在相同立地上的不同类型的微立地环境中,测定白桦幼树生长指标和土壤含水率,并以邻近微环境外的4株白桦作为对照,分析微立地环境对白桦幼树生长的影响。研究结果表明:由伐根和倒木等粗大木质残体构成的微立地对白桦幼树的生长均产生明... 详细信息

在相同立地上的不同类型的微立地环境中,测定白桦幼树生长指标和土壤含水率,并以邻近微环境外的4株白桦作为对照,分析微立地环境对白桦幼树生长的影响。研究结果表明:由伐根和倒木等粗大木质残体构成的微立地对白桦幼树的生长均产生明显的促进作用。凸凹地形微立地对幼树生长的作用因所处立地条件而异,凸地形、凹地形分别在下坡位和上坡位有利于白桦幼树生长。灰烬堆微立地在上坡位不利于白桦的生长,中、下坡有利。白桦人工造林时,根据立地条件科学选择微立地作为栽植点可以有效改善幼林的生长表现。

关键词：白桦人工林生长微立地

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落叶松结实量对其针叶内次生性物质含量的影响

落叶松结实量对其针叶内次生性物质含量的影响

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第八届全国化学生态学学术研讨会

作者：张健严善春胡晓东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040

本研究以20年生落叶松种子园内的长白落叶松(***)和兴安落叶松(***)优良母树为研究对象,分析其针叶内抗虫相关次生性物质——单宁和酚酸类物质相对含量变化与其不同结实量的相互关系,探讨其结实期植株内资源分配的变化即营养的转移对林... 详细信息

本研究以20年生落叶松种子园内的长白落叶松(***)和兴安落叶松(***)优良母树为研究对象,分析其针叶内抗虫相关次生性物质——单宁和酚酸类物质相对含量变化与其不同结实量的相互关系,探讨其结实期植株内资源分配的变化即营养的转移对林木化学防御的影响.将结实量划分成4个等级,分别为：结实量较多(Ⅰ级)、结实量中等(Ⅱ级)、结实量较少(Ⅲ级)、无结实(Ⅳ级).分别用香草醛-盐酸法、高效液相色谱法分析两种落叶松在不同结实情况下针叶内单宁、酚酸类物质的含量变化规律.结果表明,单宁和酚酸含量均随结实量的减少而呈递增趋势,即：Ⅰ级＜Ⅱ级＜Ⅲ级＜Ⅳ级,但在两种落叶松之间无显著差异(P＞0.05).单宁含量在两种落叶松中都表现为Ⅲ级或Ⅳ级时较高,且与Ⅱ级或Ⅰ级时的单宁含量存在显著差异(P＜0.05),Ⅰ级、Ⅱ级与Ⅳ级差异极显著(PⅠ*Ⅳ Tannin＜0.0001,PⅡ*ⅣTannin＜0.0001).说明落叶松抗虫物质中单宁的多少与其结实量有直接的关系.共检测出苯甲酸、水杨酸、丁香酸、香草酸、咖啡酸、肉桂酸、苯乙酸、阿魏酸、绿原酸等9种酚酸类物质,结实越多针叶中酚酸类物质含量越少,其中对于苯甲酸和水杨酸含量的影响更敏感.

关键词：兴安落叶松长白落叶松结实量次生性物质植物抗性

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毛白杨病程相关蛋白基因的克隆与分析

毛白杨病程相关蛋白基因的克隆与分析

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第九届中国林业青年学术年会

作者：雷杨林善枝郑会全刘文凤安新民张志毅北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

病程相关蛋白（Pathogenesis related proteins,PRs/PRP）是植物在发病或病理相关环境下诱导产生并积累的一类蛋白质的总称,它们组成了植物抗病免疫反应的一道重要防线。杨树作为木本模式植物,其抗病研究一直是林木抗逆性育种研究热点... 详细信息

病程相关蛋白（Pathogenesis related proteins,PRs/PRP）是植物在发病或病理相关环境下诱导产生并积累的一类蛋白质的总称,它们组成了植物抗病免疫反应的一道重要防线。杨树作为木本模式植物,其抗病研究一直是林木抗逆性育种研究热点。毛白杨（Populus tomentosa Carr.）是我国特有的白杨派乡土树种,具有分布广、速生、抗逆性强、材质优良等特性,克隆获得毛白杨病程相关蛋白基因并对其结构与功能以及表达模式进行分析显然具有重要的理论意义与应用价值。因此,本研究以毛白杨为试材,首先分离获得了3个编码病程相关蛋白,分别命名为PtPR-1、PtPR-5与PtPR-10。其中,PtPR-1基因（GenBank Accession ***589199）具有一个大小为486-bp的开放阅读框,编码了一个含有161个氨基酸的前体蛋白,该蛋白含有3个α螺旋以及4个β折叠结构;而PtPR-5基因（GenBank Accession ***589200）包含的开放阅读框大小为678-bp,编码了一个225氨基酸前体蛋白序列。生物信息学分析结果表明,PtPR-5蛋白具有17个卷曲和6个β折叠亚结构。另外,PtPR-10基因（GenBank Accesion ***589201）开放阅读框为483-bp,编码了一个160氨基酸的蛋白,蛋白主体结构为7个β折叠,2个α螺旋以及1个二硫键。为分析PtPR-1、PtPR-5与PtPR-10基因的诱导表达特性及其时间模式,本研究首先对毛白杨植株分别进行SA与MeJA诱导处理,并提取叶片组织总RNA,同时采用qRT-PCR定量分析了PR-1、PR-5和PR-10基因的表达以及在SA与MeJA诱导处理0-48h的表达模式。结果表明,在SA诱导下,PR-1表达水平先是缓慢增长,而后迅速升高约200倍:PR-5的表达呈先高后低再正常的波动特点;而PR-10表达量呈先升高后缓慢递减趋势。而MeJA处理下,PR-1表达量表现为升高-下降-升高的特点:PR-5的表达先下调后恢复正常:在MeJA诱导下,PR-10表达水平不断升高,这与PR-1受SA诱导表达模式相似。这些结果说明,病程相关蛋白PtPR-1、PtPR-5和PtPR-10对SA和MeJA信号途径均有响应,暗示了病程相关蛋白作为防卫反应效应基因,与抗病信号通路密不可分。上述研究结果为进一步分析毛白杨病程相关蛋白的功能及毛白杨抗病改良提供了重要基础。

关键词：毛白杨病程相关蛋白基因诱导处理 qRT-PCR

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河北杨脱水素（Phdhn1）基因的克隆与表达分析

河北杨脱水素（Phdhn1）基因的克隆与表达分析

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第九届中国林业青年学术年会

作者：任媛媛王泽亮张志毅北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

脱水素（Dehydrin）属于LEA D-II蛋白家族,在植物受到干旱、低温和高盐等引起脱水的胁迫条件下能够诱导表达,可以部分替代水分子,保持细胞液处于溶解状态,从而避免细胞结构的塌陷,稳定和保护蛋白质的结构及功能,起到了分子伴侣和亲水性... 详细信息

脱水素（Dehydrin）属于LEA D-II蛋白家族,在植物受到干旱、低温和高盐等引起脱水的胁迫条件下能够诱导表达,可以部分替代水分子,保持细胞液处于溶解状态,从而避免细胞结构的塌陷,稳定和保护蛋白质的结构及功能,起到了分子伴侣和亲水性溶质的作用。河北杨（Populus hopeiensis Hu et Chow）属于杨柳科杨属白杨派山杨亚派,是我国特有树种,广泛分布于西北、华北各省区,其根系发达,生长较快,适于生长在高寒多风地区,特别是其耐寒、耐干旱、耐瘠薄的特性,使之成为黄土高原半干旱地区少有的能够上山栽植、生长稳定、可以成材的乔木树种,在水土保持、林业生产和经营中占有重要地位。因此,开展河北杨抗逆基因的分离与鉴定研究,将有助于推进杨树乃至林木的抗性育种工作。本研究以干旱处理的河北杨为试验材料,在前期获得的一个河北杨脱水素TDF（Transcript derived fragment）片段的基础上,根据相应的毛果杨基因组序列与杨树EST序列设计引物,从河北杨中克隆获得了一个脱水素全长基因。测序结果表明该基因全长为856bp,包含一个681bp的完整的开放读码框,共编码227个氨基酸。在NCBI数据库中比对后发现所得到的河北杨基因序列与杨属植物中的*** *** Taebaek-1 dhn基因[EF639400.1]、***基因[EF639405.1]、*** dhn1基因[AJ300524.4]等脱水素基因都具有95%以上的序列一致性,故将其命名为Phdhn1基因。Phdhnl氨基酸序列包括两个重复的富含赖氨酸残基的K片段和由7个连续的丝氨酸残基组成的S片段,属于脱水素家族中典型的SKn型脱水素。K片段位于C端,它能形成双亲性的a-螺旋,是脱水素的重要功能结构,可以防止蛋白质和膜的变性:而S片段,有证据表明它的磷酸化可以使脱水素在信号肽的引导下进入细胞核,与脱水素的运转和定位有关。半定量RT-PCR分析表明Phdhnl基因在不同胁迫条件下表达有差异,其中低温、干旱及ABA处理能够诱导基因的表达。在干旱和ABA胁迫条件下该基因的表达呈现先上升后下降的趋势,分别在失水率为30%时和ABA处理2h时表达量最高;在低温胁迫下表达呈先下降再上升后下降的趋势,在处理1h时表达最低,在处理5h时表达量达到高峰,而在高温与NaCl胁迫条件下,基因转录水平基本保持不变,说明Phdhnl基因很可能参与了河北杨低温、干旱胁迫耐受性表达过程及依赖于ABA的胁迫信号转导途径。为了进一步研究Phdhnl基因的功能,通过农杆菌介导的叶盘转化法,获得了多个转基因烟草株系,转Phdhnl基因对烟草基因表达、生理生化状态及表型的影响正在进一步鉴定中。

关键词：河北杨脱水素胁迫处理 RT-PCR

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白杨杂交胚胎挽救及子代遗传变异分析

白杨杂交胚胎挽救及子代遗传变异分析

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第九届中国林业青年学术年会

作者：马开峰张志毅赵曦阳江锡兵薄文浩宋跃朋北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

林木杂交育种是创新林木种质、获取目的性状（如提高生长量、改良木材质量、增强抗逆性等）以及研究林木进化等理论的重要方法和手段。白杨派（Leuce Duby）树种在我国分布广泛,其中毛白杨、河北杨、响叶杨等为我国特有树种。在我国白... 详细信息

林木杂交育种是创新林木种质、获取目的性状（如提高生长量、改良木材质量、增强抗逆性等）以及研究林木进化等理论的重要方法和手段。白杨派（Leuce Duby）树种在我国分布广泛,其中毛白杨、河北杨、响叶杨等为我国特有树种。在我国白杨杂交育种工作中,学者们利用丰富的种质资源广泛开展了种内、种间杂交试验,选育出很多优良品种。但同时人们发现,白杨派某些种杂交不亲和、幼胚败育严重,人工杂交困难,获得杂种子代效率较低,甚至不能获得杂交子代。随着组织培养技术的发展,采用胚胎挽救技术可阻止杂交幼胚的败育从而获得子代,目前已在柿树杂交育种、葡萄三倍体育种、花卉杂交育种等方面发挥了一定的作用。

关键词：白杨胚胎挽救发芽率成苗率

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RNAi技术沉默PtDrl01基因对毛白杨病程相关蛋白基因表达的影响

RNAi技术沉默PtDrl01基因对毛白杨病程相关蛋白基因表达的影响

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第九届中国林业青年学术年会

作者：刘文凤张谦郑会全雷杨林善枝安新民张志毅北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

抗病(R)基因是植物抗病免疫系统中的关键组成部分,该类基因编码蛋白通常包含了保守的功能结构域如核苷酸结合位点(Nucleotide binding site,NBS)和富含亮氨酸重复(Ieucine rich repeat,LRR)序列,因此也统称为NBS-LRR R蛋白。NBS-LRR R... 详细信息

抗病(R)基因是植物抗病免疫系统中的关键组成部分,该类基因编码蛋白通常包含了保守的功能结构域如核苷酸结合位点(Nucleotide binding site,NBS)和富含亮氨酸重复(Ieucine rich repeat,LRR)序列,因此也统称为NBS-LRR R蛋白。NBS-LRR R蛋白编码基因占据了约全部抗病基因数目的75%,组成了抗病基因中的最大家族,而这些抗病基因的作用对象也几乎囊括了所有的病原物包括病毒、细菌、真菌、线虫甚至昆虫等,对该类基因的表达及其在植物抗病免疫调控系统中的作用进行研究具有重要意义。杨树是木本植物的模式植物,其抗病性研究一直是林木抗逆性研究的热点;而毛白杨(Populus tomentosa Cart)是我国特有的白杨派(Section Leuce)乡土树种,具有分布广、速生、材质优良及抗逆性强等特点,对毛白杨NBS-LRR类抗病基因的表达及其功能进行研究显然具有重要的理论意义与应用价值。本实验室前期已从三倍体毛白杨[(***×***)×***]抗病无性系中首先分离获得一个NBS-LRR类抗病基因序列(编码了一个NLS-TIR-NBS-LRR蛋白)即PtDrl01(GenBank Accession ***157840),并证明该基因在转化烟草中具有抗烟草花叶病毒能力。为进一步分析PtDrl01基因的抗病免疫调控功能,本研究首次构建了PtDrl0l基因的RNAi载体pBI121-PtDr101-RNAi,进而采用基因枪法将pBl121-PtDr101-RNAi质粒转化到毛白杨叶片,并诱导获得抗卡那霉素候选转化芽,经生根诱导最终获得系列候选转化植株。以卡那霉素抗性植株基因组总DNA为模板,对CaMV 35S启动子及NP7II基因作双序列PCR鉴定,共筛选获得5个转基因无性系。在此基础上,运用qRT-PCR技术对转化植株PtDrl01基因的表达作定量分析发现,RNAi序列在转基因毛白杨中对PtDrl01基因的表达抑制率均高于50%;其中,值得注意的是,转基因无性系Z3 PtDrl01基因表达抑制率达到了100%,这表明RNAi序列在转基因毛白杨中能够对PtDrl01基因的表达起有效的抑制甚至沉默的作用。对沉默了PtDrl01基因表达的Z3植株,本研究利用qRT-PCR技术定量分析了毛白杨病程相关蛋白基因(PtPR-1、PtPR-5和PtPR-10)的表达,结果发现检测的病程相关蛋白基因其表达均明显低于对照非转化植株,而其中PtPR-10的表达量在转化植株中甚至减少为7倍以上。这说明,PtDrl01基因的表达在毛白杨中影响了病程相关蛋白基因的表达水平,而这也暗示了PtDrl01基因可能通过调控病程相关蛋白基因的表达水平,进而提高植株抗病反应能力。上述研究结果为进一步分析毛白杨PtDrl01基因的表达及功能提供了重要基础。

关键词：毛白杨 PtDrl01基因 RNAi技术 qRT-PCR

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杨树花发育关键基因的RNAi、DNM载体转化毛白杨的研究

杨树花发育关键基因的RNAi、DNM载体转化毛白杨的研究

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第九届中国林业青年学术年会

作者：曹冠琳安新民于来薄文浩王静澄张志毅北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

毛白杨（Populus tomentosa Carr.）是优良的绿化和用材树种,但是毛白杨雌株花期产生大量飞絮,给生产生活带来诸多不便。LFY是花分生组织特征基因,控制花启动,毛果杨PTLF（***）在花序中表达量最高;AP1既为花分生组织特征基因,同时又控... 详细信息

毛白杨（Populus tomentosa Carr.）是优良的绿化和用材树种,但是毛白杨雌株花期产生大量飞絮,给生产生活带来诸多不便。LFY是花分生组织特征基因,控制花启动,毛果杨PTLF（***）在花序中表达量最高;AP1既为花分生组织特征基因,同时又控制花萼和花瓣的发育,PTAP1在美洲山杨（***）花发育初期的形成层中开始表达,并在以后的发育过程中继续表达;PTAG1/2基因为花器官特异性基因,它们在毛果杨雄蕊和心皮内表达。为抑制毛白杨开花,解决飞絮污染环境的问题,本研究利用农杆菌介导的叶盘转化法将这些杨树花发育关键基因的RNAi载体PTAG-IR、PTAP1-IR、PTAP1:PTAG-IR、PTLF:PTAG-IR,以及dominant negative mutation（DNM）载体En35S::AP1-M2::E9s转化毛白杨雌性无性系TC1521。经PCR检测,转基因毛白杨阳性株系数目分别为PTAG-IR5株,PTAP1-IR 4株,PTAP1:PTAG-IR6株,PTLF:PTAG-IR 7株,En35S::AP1-M2::E9 7株。转基因毛白杨移栽后的苗期观察发现,PTAG-IR,PTAP1:PTAG-IR,PTLF:PTAG-IR的转基因株系高度低于野生型对照,而PTAP1-IR转基因毛白杨高度与野生型接近。

关键词：毛白杨花发育基因 RNAi DNM

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毛白杨不同倍性花粉DNA的荧光观察及定量分折

毛白杨不同倍性花粉DNA的荧光观察及定量分折

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第九届中国林业青年学术年会

作者：曹媛张志毅荆艳萍北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

毛白杨（Populus tomentosa Carr.）是我国特有的白杨派重要的绿化和用材乡土树种。研究发现,二倍体毛白杨中存在天然2n花粉以及由于减数分裂异常或染色体异常而产生的非整倍数败育花粉。这种现象一方面与天然三倍体毛白杨的形成联系紧... 详细信息

毛白杨（Populus tomentosa Carr.）是我国特有的白杨派重要的绿化和用材乡土树种。研究发现,二倍体毛白杨中存在天然2n花粉以及由于减数分裂异常或染色体异常而产生的非整倍数败育花粉。这种现象一方面与天然三倍体毛白杨的形成联系紧密,另一方面影响毛白杨的育种工作的效率。花粉核DNA不仅是花粉倍性的指标物质,而且对整个花粉正常发育过程起着核心作用。正常成熟花粉通过不均等有丝分裂形成一个较大的营养细胞和一个较小的生殖细胞,然后生殖细胞进行一次均等有丝分裂形成两个生殖核。在花粉管萌发和伸长过程中,营养细胞率先移入花粉管向花粉管尖端方向移动,两个生殖核紧随其后,最终经由花粉管尖端排出。我们利用激光共聚焦荧光显微镜,在大量实验基础上克服荧光标记不易量化的困难,建立了相对稳定的DNA荧光相对定量经验分析体系。实验采用DAPI（4’,6-二脒基-2-苯基吲哚）对毛白杨小孢子及其体外萌发过程进行DNA荧光标记,统一花粉培养条件、染色条件（1ug/ml DAPI,5min）和制片细节,统一成片到上机观察前的存放条件和时间（-20℃C,1天）,统一激光共聚焦显微镜的可调节参数及条件（60x油镜,405nm激发光,ND40,固定扫描步距、增益值、扣除背景等）。将扫描得到的图片进行3D重构,再用闭合曲线勾画蓝色荧光的范围,得到范围内荧光量的各种参数值,最后分析统计得出相对荧光量（精确面积×平均荧光光强）。初步结果显示,我们所采用的无性系LM50中,2n花粉占花粉总量的比例约5-10%。自然单倍、2n花粉及不同大小的败育花粉其核DNA量的统计值与其直径大小在正常范围内成比例。同时,有发现个别花粉大小偏离正常值,但核DNA定量分析结果仍显示其为单倍性。异常的花粉通常呈现干瘪、皱缩、多核,或者体积极小无核,其DNA定量结果明显偏离平均值。在花粉体外萌发实验中,2n花粉占正常萌发花粉的比例更小。但在正常萌发的花粉中,单倍花粉的生殖核荧光总量与2n花粉的生殖核荧光总量统计值比接近1:2,两个生殖核荧光量统计值比接近1:1。此外,毛白杨单倍和2n花粉的营养细胞核及其胞质中均有一定量的荧光标记,并且强度与生殖核相比较弱,但营养细胞总的荧光量高于生殖细胞,胞质荧光背景较强且呈点状不均匀分布,而这些点状物是否全部为携带细胞质遗传物质的细胞器则有待进一步实验验证。以上结果暗示,进一步研究不同品种毛白杨的天然单倍性花粉、天然2n花粉与人工加倍2n花粉的胞质DNA具体分布并对其进行定量分析,可以为毛白杨三倍体育种工作和毛白杨细胞质遗传的机制提供理论依据。

关键词：激光共聚焦 2n花粉细胞质DNA 三倍体育种

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山葡萄果实发育过程中花色苷和非花色苷酚成分及其含量的变化

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植物生理学通讯 2010年第1期46卷 80-86页

作者：赵权王军段长青东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040 吉林农业科技学院中药学院吉林132101 中国农业大学食品科学与营养工程学院葡萄与葡萄酒研究中心北京100083

以‘双红’山葡萄果实为试材,采用HPLC-MS/MS技术,分析山葡萄果实发育过程中果皮中花色苷和非花色苷酚成分及其含量的变化。结果表明,转色期前果皮内没有花色苷积累,随着果实的成熟,花色苷含量逐渐增加,成熟期的含量最高;非花色苷酚自花... 详细信息

以‘双红’山葡萄果实为试材,采用HPLC-MS/MS技术,分析山葡萄果实发育过程中果皮中花色苷和非花色苷酚成分及其含量的变化。结果表明,转色期前果皮内没有花色苷积累,随着果实的成熟,花色苷含量逐渐增加,成熟期的含量最高;非花色苷酚自花后2周至成熟期间的含量变化呈下降趋势。在山葡萄果实发育过程中检测出花色苷10种,其中双糖苷5种、单糖苷5种;非花色苷酚类物质检测到14种,其中苯甲酸类2种、肉桂酸类3种、黄烷-3-醇类2种、黄酮醇类5种、白藜芦醇类2种。

关键词：山葡萄果皮花色苷非花色苷酚

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