检索结果-内蒙古大学图书馆

植物研究 2020年第5期40卷 760-767页

作者：李潺张翔郑兰常成龙刘彩霞郑密由香玲东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 四平市国有林总场石岭子落叶松国家良种基地四平136000 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

HD-Zip转录因子在光信号转导、非生物胁迫、叶片发育等方面发挥重要的作用,HB22转录因子是HD-ZipⅠ亚家族的成员之一。为研究PsnHB22基因的功能,从小黑杨(Populus simonii×***)cDNA中克隆PsnHB22基因并构建植物表达载体进行烟草(Ni... 详细信息

HD-Zip转录因子在光信号转导、非生物胁迫、叶片发育等方面发挥重要的作用,HB22转录因子是HD-ZipⅠ亚家族的成员之一。为研究PsnHB22基因的功能,从小黑杨(Populus simonii×***)cDNA中克隆PsnHB22基因并构建植物表达载体进行烟草(Nicotiana tabacum)的遗传转化,以获得该基因过量表达的转基因株系。对转基因株系进行PCR、qRT-PCR分子检测后观察表型,结果显示在营养生长时期,转基因烟草叶片窄小并且株高显著低于野生型对照。测定转基因烟草及野生型叶片的叶绿素含量,发现转基因烟草叶绿素含量显著高于野生型。由此推测PsnHB22基因在植株高生长、光合作用及叶片的形态建成等过程中起着重要的作用。

关键词：小黑杨 PsnHB22基因 HD-Zip转录因子烟草叶绿素含量

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植物Trihelix转录因子响应非生物胁迫的研究进展

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分子植物育种 2019年第10期17卷 3241-3246页

作者：卢惠君李子义贺子航王玉成及晓宇东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室

Trihelix转录因子家族因其特有的三螺旋结构域(螺旋-环-螺旋-环-螺旋)而命名,该结构域高度保守,能与GT元件特异性地结合,因此该家族又被称为GT因子家族。Trihelix转录因子家族分为GT-1、GT-2、GTγ、SH4和SIP1等5个亚家族。前期研究表明... 详细信息

Trihelix转录因子家族因其特有的三螺旋结构域(螺旋-环-螺旋-环-螺旋)而命名,该结构域高度保守,能与GT元件特异性地结合,因此该家族又被称为GT因子家族。Trihelix转录因子家族分为GT-1、GT-2、GTγ、SH4和SIP1等5个亚家族。前期研究表明Trihelix转录因子不仅调控光应答基因的表达,还参与植物生长发育的各个过程,同时受高盐、干旱、冷害和病害的强烈诱导,广泛参与植物对生物和非生物胁迫的应答反应。Trihelix转录因子通过与其他基因互作等方式调控下游靶基因的表达,从而响应生物和非生物胁迫。本综述对植物Trihelix转录因子的结构特征及生物学功能进行介绍,详细阐述Trihelix转录因子在草本和木本植物中响应非生物胁迫的最新研究进展,为深入探究Trihelix转录因子响应非生物胁迫的分子机制提供理论基础。

关键词： Trihelix 转录因子非生物胁迫结构特征生物学功能

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MYC2转录因子参与植物发育调控的研究进展

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植物生理学报 2019年第2期55卷 125-132页

作者：李罡李文龙许雪梅李成浩东北林业大学林学院林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 东北林业大学图书馆哈尔滨150040

MYC转录因子是bHLH家族中的重要成员,近几年研究表明MYC2转录因子是以茉莉酸为核心的激素调控网络中的关键组分,参与调控大量植物发育过程与多种抗逆过程,例如:花青素、酚酸等次生代谢产物合成;氧化、虫害等胁迫响应;植物器官发育调控;... 详细信息

MYC转录因子是bHLH家族中的重要成员,近几年研究表明MYC2转录因子是以茉莉酸为核心的激素调控网络中的关键组分,参与调控大量植物发育过程与多种抗逆过程,例如:花青素、酚酸等次生代谢产物合成;氧化、虫害等胁迫响应;植物器官发育调控;激素互作过程,包括茉莉酸-水杨酸、茉莉酸-乙烯、茉莉酸-脱落酸等。本文对MYC2转录因子的结构、与激素的互作关系以及在植物器官发育中的调控功能的最新研究进展进行了简要综述。

关键词： MYC2转录因子器官激素互作发育

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杨树PtrRHH 94突变体创制及功能初步分析

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江苏农业科学 2020年第22期48卷 44-49页

作者：沈红梅程玉祥东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040

RING-H2家族基因参与植物的多个生物学过程,PtrRHH 94是毛果杨木质化组织内高丰度表达的RING-H2基因。为了探究PtrRHH94基因的功能,选择3组PtrRHH 94待编辑靶位点,构建相应的Cas9/gRNA编辑载体,将其遗传转化毛果杨,得到10株转基因幼苗。... 详细信息

RING-H2家族基因参与植物的多个生物学过程,PtrRHH 94是毛果杨木质化组织内高丰度表达的RING-H2基因。为了探究PtrRHH94基因的功能,选择3组PtrRHH 94待编辑靶位点,构建相应的Cas9/gRNA编辑载体,将其遗传转化毛果杨,得到10株转基因幼苗。DNA测序结果显示,7株转基因幼苗体内的PtrRHH 94位点被编辑突变,3株植株被鉴定为PtrRHH 94敲除突变体。与野生型毛果杨幼树相比,PtrRHH94突变体幼树株高增加,茎节数也增多。此外,PtrRHH94突变体木材的纤维长度与野生型相比没有显著差异,表明PtrRHH 94参与了毛果杨茎生长的调控。

关键词：毛果杨 PtrRHH94 突变体 Cas9/gRNA编辑载体

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小黑杨PnCCH10基因的克隆、功能初步鉴定及遗传转化

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植物生理学报 2019年第11期55卷 1625-1637页

作者：黄佳欢刘关君陈瑾元张双王琪许志茹东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

铜伴侣蛋白是细胞内结合并转运铜离子的低分子量蛋白质,在维持细胞铜稳态过程中发挥重要作用。CCH具有羧基末端伸长区,是植物细胞特有的铜伴侣蛋白。本研究通过RT-PCR方法克隆了小黑杨PnCCH10基因(登录号为MF977410)。序列分析表明,PnCC... 详细信息

铜伴侣蛋白是细胞内结合并转运铜离子的低分子量蛋白质,在维持细胞铜稳态过程中发挥重要作用。CCH具有羧基末端伸长区,是植物细胞特有的铜伴侣蛋白。本研究通过RT-PCR方法克隆了小黑杨PnCCH10基因(登录号为MF977410)。序列分析表明,PnCCH10基因的开放阅读框为492 bp,编码的亲水性蛋白质含有163个氨基酸残基,分子量为18.7 kDa。PnCCH10蛋白的氨基端含有保守的MXCXXC铜离子结合基序且能够形成βαββαβ二级结构;PnCCH10与毛果杨PtCCH10蛋白的氨基酸序列同源性为99%,二者的进化关系最近。qRT-PCR鉴定结果显示,应答缺铜和高浓度铜离子胁迫,PnCCH10在小黑杨不同组织中的表达模式发生变化。酵母功能互补试验结果表明,PnCCH10具有抗氧化和铜伴侣功能。遗传转化后获得了过量表达PnCCH10基因的小黑杨转基因株系,且1、2、3、5、6、7和13号转基因株系的叶片和根中PnCCH10基因的表达量显著高于野生型植株。

关键词：小黑杨 CCH 基因克隆表达模式功能互补验证遗传转化

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水曲柳2个PLT转录因子基因的克隆及表达分析

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植物研究 2019年第1期39卷 139-147页

作者：丁一巍詹亚光张佳薇何利明东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040

为初步探究水曲柳根发育中PLT转录因子的基因功能及遗传调控机理,以水曲柳转录组数据为基础,参考拟南芥AtPLT2和AtPLT3基因序列,通过PCR技术从水曲柳中克隆了两个PLT转录因子基因,通过同源比对将它们命名为FmPLT2和FmPLT3,分别编码532和... 详细信息

为初步探究水曲柳根发育中PLT转录因子的基因功能及遗传调控机理,以水曲柳转录组数据为基础,参考拟南芥AtPLT2和AtPLT3基因序列,通过PCR技术从水曲柳中克隆了两个PLT转录因子基因,通过同源比对将它们命名为FmPLT2和FmPLT3,分别编码532和497个氨基酸残基。生物信息学分析表明,其相对分子质量分别为59和55kDa,等电点分别为5.98和5.79,均为亲水性不稳定蛋白,均含有2个AP2保守结构域。系统进化分析结果显示,其与同属木犀科的油橄榄OePLT2和OeOLT3转录因子的同源性最高,亲缘关系最近。亚细胞定位预测显示,FmPLT2和FmPLT3蛋白都主要集中于细胞核中。通过qRT-PCR技术分析FmPLT2和FmPLT3在不同组织部位及生根期间的表达情况,结果表明:FmPLT2和FmPLT3具有相似的组织特异性表达,在根中表达含量均最高,在叶中的表达含量均最低;FmPLT2在生根期间的表达量变化极为显著,21天时的表达量是0天时的32倍,但FmPLT3的表达量变化并不显著,表明FmPLT2不仅在根发育中起重要作用,还可能参与细胞增殖和生长等多个发育途径。

关键词：水曲柳 PLT转录因子基因克隆表达分析根发育

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水曲柳FmWRKY44基因克隆及表达分析

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植物研究 2019年第4期39卷 529-538页

作者：李新宇何利明詹亚光东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

克隆水曲柳FmWRKY44基因,探究其在非生物胁迫和激素胁迫中的作用。利用水曲柳干旱转录组序列设计特异引物,克隆FmWRKY44基因的完整ORF序列,并对该序列及其编码产物进行生物信息学分析,采用qRT-PCR技术分析FmWRKY44表达模式。克隆了一个... 详细信息

克隆水曲柳FmWRKY44基因,探究其在非生物胁迫和激素胁迫中的作用。利用水曲柳干旱转录组序列设计特异引物,克隆FmWRKY44基因的完整ORF序列,并对该序列及其编码产物进行生物信息学分析,采用qRT-PCR技术分析FmWRKY44表达模式。克隆了一个水曲柳WKRY基因,编码区长1383bp,编码460氨基酸。对其编码蛋白分析发现其为稳定亲水蛋白,亚细胞定位预测主要在细胞核,进行保守域及同源性分析分析,属于WRKYⅠ类家族,命名为FmWRKY44。qRT-PCR分析发现,FmWRKY44在种子中高度表达,并不同程度响应低温、高温、盐和干旱4种非生物胁迫。同时发现FmWRKY44与NAA、ABA、GA3、JA植物激素响应,水曲柳FmWRKY44基因积极响应低温、高温胁迫。

关键词：水曲柳 WRKY基因基因克隆表达分析

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杨树重金属相关异戊二烯化植物蛋白(HIPPs)基因的鉴定及表达分析

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植物研究 2019年第6期39卷 935-946页

作者：王琪许志茹陈瑾元张双黄佳欢刘关君东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040

金属伴侣在植物的生理活动中发挥关键作用,负责结合金属离子并将其转运至靶蛋白以维持细胞的金属离子稳态。目前关于HIPP(heavy metal-associated isoprenylated plant protein)金属伴侣蛋白的特性和功能分析多集中于模式植物拟南芥。... 详细信息

金属伴侣在植物的生理活动中发挥关键作用,负责结合金属离子并将其转运至靶蛋白以维持细胞的金属离子稳态。目前关于HIPP(heavy metal-associated isoprenylated plant protein)金属伴侣蛋白的特性和功能分析多集中于模式植物拟南芥。本研究在毛果杨(Populus trichocarpa)中鉴定了14个PtHIPPs蛋白,均具有两个保守的金属离子结合基序MXCXXC,氨基末端可以形成βαββαβ二级结构,羧基末端具有保守的异戊二烯化基序;一些PtHIPPs还具有赖氨酸和/或甘氨酸富集区。根据基因结构、蛋白质的保守基序和进化树分析,PtHIPPs蛋白可分为3个亚组。PlantGenIE的组织特异性表达数据及荧光定量PCR鉴定结果显示,毛果杨PtHIPPs基因及小黑杨(Populus simonii×Populus nigra)PnHIPPs基因具有特定的组织表达特异性且存在差异。此外,利用缺铜及过量铜离子处理小黑杨植株不同时间后,不同组织部位中PnHIPPs基因的表达模式发生改变。本研究为鉴定木本模式植物杨树HIPPs蛋白在维持铜离子稳态过程中发挥的作用提供了参考依据。

关键词：杨树 HIPPs蛋白生物信息学分析铜胁迫基因表达

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杨树天冬氨酸转氨酶基因家族鉴定及表达分析

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南方农业学报 2019年第3期50卷 506-514页

作者：王宇晨曲春浦刘关君东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

【目的】鉴定杨树天冬氨酸转氨酶(ASPAT)基因家族成员,并检测其组织表达特异性,为研究ASPAT在杨树初级氮素同化中的生物学功能提供参考依据。【方法】从杨树基因组数据库中筛选鉴定ASPAT基因家族成员,利用生物信息学软件分析各基因家族... 详细信息

【目的】鉴定杨树天冬氨酸转氨酶(ASPAT)基因家族成员,并检测其组织表达特异性,为研究ASPAT在杨树初级氮素同化中的生物学功能提供参考依据。【方法】从杨树基因组数据库中筛选鉴定ASPAT基因家族成员,利用生物信息学软件分析各基因家族成员序列和基因结构及编码蛋白的理化性质、亚细胞定位和保守基序等,并利用实时荧光定量PCR检测正常施氮处理(1 mmol/L NH4NO3)下其在杨树根、茎和叶中的组织表达特异性。【结果】从杨树基因组中共鉴定出9个ASPAT基因家族成员,包括7个真核型ASPAT(AAT)基因(PtASPAT1～PtASPAT7)和2个原核型ASPAT(PAT)基因(PtASPAT8～PtASPAT9),编码区(CDS)序列长度1215～1791 bp,编码的氨基酸数目304～480个,外显子数7～14个,编码蛋白的等电点5.66～8.99,相对分子质量33.11～53.31 kD,脂融指数76.36～93.54,分别定位于叶绿体、线粒体和胞质中,除PtASPAT6和PtASPAT7为不稳定蛋白,其他均为稳定蛋白。拟南芥和杨树的ASPAT蛋白可聚为两大类,Ⅰ类为AAT蛋白,包括PtASPAT1～PtASPAT7和AtASPAT1～AtASPAT5;Ⅱ类为PAT蛋白,包括PtASPAT8、PtASPAT9和拟南芥PAT(AtPAT)。PtASPAT1～PtASPAT6均含有5个保守基序,PtASPAT7缺少2个保守基序,PtASPAT8和PtASPAT9均仅含有1个与AtPAT相同的保守基序。9个杨树ASPAT蛋白均含有磷酸吡哆醛结合位点(SGTHNYSSK)、同源二聚体多肽结合位点(GAVAER)和催化残留活性位点(K)。正常氮素处理下,PtASPAT1基因在杨树根、茎和叶中表达量无明显差异;PtASPAT2～PtASPAT9基因在根部的表达量较在茎和叶中的高,尤其是PtASPAT4和PtASPAT8基因表达量较高。【结论】杨树ASPAT基因家族成员主要在根部表达,尤其是PtASPAT4和PtASPAT8基因在杨树根部的初级氮素同化中发挥重要作用。

关键词：杨树天冬氨酸转氨酶(ASPAT) 基因家族生物信息学基因表达

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杨树PtBBE9a基因异源过表达功能分析

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江苏农业科学 2020年第23期48卷 66-70页

作者：施天元程玉祥东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040

小檗碱桥酶(berberine bridge enzyme,简称BBE)是一类典型的黄素双共价氧化酶家族,参与植物生长发育的多个生物过程。PtBBE9a是笔者所在课题组前期从杨树发育木质部分离、鉴定的糖蛋白。PtBBE9a基因表达在杨树木质部呈现高丰度水平,并... 详细信息

小檗碱桥酶(berberine bridge enzyme,简称BBE)是一类典型的黄素双共价氧化酶家族,参与植物生长发育的多个生物过程。PtBBE9a是笔者所在课题组前期从杨树发育木质部分离、鉴定的糖蛋白。PtBBE9a基因表达在杨树木质部呈现高丰度水平,并且随着茎木质化程度的增强而升高。组织β-葡萄糖苷酸酶(GUS)活性染色结果显示,PtBBE9a启动子活性集中在ProPtBBE9a::GUS转基因拟南芥幼苗的顶端分生组织、成熟果荚皮及根组织。通过构建PtBBE9a-GFP过表达载体发现,PtBBE9a过表达拟南芥比野生型拟南芥早开花。进一步研究发现,转基因拟南芥的叶片数少于野生型拟南芥,而其茎木质素含量高于野生型拟南芥。推测PtBBE9a可能通过调控拟南芥生长发育周期而产生早花表型。

关键词：杨树 PtBBE9a基因异源过表达启动子转基因拟南芥 BBE

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