检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业科学 2017年第9期45卷 5-10页

作者：奚琦许志茹王琪曲春浦杨成君刘关君东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学林学院黑龙江哈尔滨150040

铜(Cu)是植物生长发育所必需的微量元素,参与光合作用、呼吸作用及木质素合成等多个生物学过程。铜离子具有氧化还原特性,低铜或者过量铜都会对植物造成伤害,因此植物在长期进化过程中产生了一套完整的铜稳态调控体系,其中miRNA在此体... 详细信息

铜(Cu)是植物生长发育所必需的微量元素,参与光合作用、呼吸作用及木质素合成等多个生物学过程。铜离子具有氧化还原特性,低铜或者过量铜都会对植物造成伤害,因此植物在长期进化过程中产生了一套完整的铜稳态调控体系,其中miRNA在此体系中扮演着重要的角色。介绍了mi R397、mi R398、mi R408、mi R857、mi R1444等5种Cu-miRNAs,它们的靶基因编码了植物细胞中非常重要的4大类含铜蛋白——漆酶、超氧化物歧化酶、质体蓝素和多酚氧化酶。在铜胁迫条件下,miRNA通过调控靶基因的表达优化铜离子的分配,既保证了铜的正常供应,又避免了铜毒害。

关键词：铜稳态 Cu—miRNAs 铜胁迫研究进展

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水曲柳FmSOC1基因烟草中遗传转化

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西北林学院学报 2017年第5期32卷 98-103页

作者：齐凤慧陈思齐付德山孟祥宇詹亚光东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040

为研究水曲柳SOC1基因对植物开花的调控功能,将水曲柳SOC1基因通过农杆菌介导法转入模式植物烟草中。利用PCR及Southern杂交法检测,结果有10株被确定为转基因植株。利用RT-PCR法对5株转基因烟草进一步分析表明,SOC1基因在3株烟草中表达... 详细信息

为研究水曲柳SOC1基因对植物开花的调控功能,将水曲柳SOC1基因通过农杆菌介导法转入模式植物烟草中。利用PCR及Southern杂交法检测,结果有10株被确定为转基因植株。利用RT-PCR法对5株转基因烟草进一步分析表明,SOC1基因在3株烟草中表达。表型分析表明,转基因烟草植株生长较快,叶片窄小,开花时间提前。

关键词：水曲柳 SOC1 烟草遗传转化

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刚毛柽柳RING型E3泛素连接酶基因的克隆及表达分析

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中国科技论文在线精品论文 2017年第21期10卷 2347-2356页

作者：张玉张悦张春蕊王超东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨 150040

E3泛素连接酶是一个种类复杂的蛋白质家族,在对植物生长发育和逆境胁迫的响应等方面起重要的调节作用.通过对刚毛柽柳的转录组数据进行分析,鉴定获得一个E3泛素连接酶基因(ThE3).ThE3基因cDNA全长2499 bp,包含1275 bp开放阅读框(open re... 详细信息

E3泛素连接酶是一个种类复杂的蛋白质家族,在对植物生长发育和逆境胁迫的响应等方面起重要的调节作用.通过对刚毛柽柳的转录组数据进行分析,鉴定获得一个E3泛素连接酶基因(ThE3).ThE3基因cDNA全长2499 bp,包含1275 bp开放阅读框(open reading frame,ORF),编码424个氨基酸,编码蛋白分子量45.8 ku,理论等电点(isoelectric point,pI)为8.30.疏水性分析预测RING型E3泛素连接酶具有较强的亲水性,无信号肽及跨膜区,亚细胞定位于细胞核上.氨基酸多序列比对结果显示,ThE3与荷花的RING-finger类型E3泛素连接酶蛋白序列相似性最高,为76％,且具有RING-finger结构域,初步确定该基因为刚毛柽柳RING-finger类型E3泛素连接酶基因.实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)分析表明,ThE3表达受盐和干旱胁迫诱导,预示ThE3可能在刚毛柽柳适应高盐和干旱环境中发挥重要作用.

关键词：分子生物学刚毛柽柳 RING型E3泛素连接酶基因克隆基因表达

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刚毛柽柳ThGAI基因的克隆和序列分析

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中国科技论文在线精品论文 2017年第15期10卷 1679-1687页

作者：张悦张玉张春蕊王超东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨 150040

通过对刚毛柽柳转录组的分析,克隆获得了一条柽柳DELLA家族蛋白基因,命名为ThGAI.序列分析结果表明,ThGAI基因全长cDNA为2901 bp,包括1980 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),推测ThGAI基因编码659个氨基酸,编码蛋白相对分子质量... 详细信息

通过对刚毛柽柳转录组的分析,克隆获得了一条柽柳DELLA家族蛋白基因,命名为ThGAI.序列分析结果表明,ThGAI基因全长cDNA为2901 bp,包括1980 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),推测ThGAI基因编码659个氨基酸,编码蛋白相对分子质量为71.99 ku,等电点为5.58.通过生物信息学分析发现,ThGAI基因编码蛋白具有DELLA蛋白特有的结构域;氨基酸多序列比对和系统进化树分析发现,ThGAI基因编码氨基酸序列与其他已知植物DELLA蛋白有较高的同源性,属于DELLA亚家族成员,并具有TVHYNP结构域、POLY S/T/V结构域、核定位NLS、VHVID结构域、亮氨酸结构域及GRAS结构域,且与玉米ZmGAI亲缘性最近.实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)分析表明,ThGAI表达受NaCl和聚乙二醇(PEG)诱导,暗示赤霉素(gibberellins,GA)可能参与了刚毛柽柳的非生物胁迫响应过程.

关键词：分子生物学刚毛柽柳 ThGAI基因 DELLA蛋白表达分析

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白桦4CL基因启动子克隆及表达分析

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中国农学通报 2017年第5期33卷 29-34页

作者：李萌哈努拉.塔斯肯陈卓田智丽王超东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

为研究4-香豆酸辅酶A连接酶基因(4CL)在白桦木质素合成代谢过程中的组织特异性表达,利用染色体步移法克隆其启动子,用该启动子定向置换pBI121载体的35S启动子,构建重组载体P_(4CL)::GUS。利用瞬时转化法将重组载体转入白桦实生苗茎后进... 详细信息

为研究4-香豆酸辅酶A连接酶基因(4CL)在白桦木质素合成代谢过程中的组织特异性表达,利用染色体步移法克隆其启动子,用该启动子定向置换pBI121载体的35S启动子,构建重组载体P_(4CL)::GUS。利用瞬时转化法将重组载体转入白桦实生苗茎后进行GUS染色。结果显示:获得了4CL基因编码区起始密码子上游长1344 bp的启动子序列,该启动子除分布有TATA-box、CAAT-box等基本的转录起始元件外,还存在多个顺式作用元件序列位点,包括35S启动子作用元件ASF,参与脱落酸响应的顺式作用元件ABRE,参与茉莉酸甲酯响应的顺式调控元件CGTCA-motif,以及光反应元件G-Box、ACE、4CL-CMA2b等;启动子表达分析结果显示经过瞬时侵染的白桦茎段被染成蓝色。以上结果表明克隆获得的4CL基因启动子具有启动子表达活性,其可能参与了白桦木质部的发育。

关键词：白桦 4CL基因启动子瞬时表达

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胡桃楸成花相关LFY同源基因的克隆和序列分析

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分子植物育种 2017年第7期15卷 2550-2555页

作者：张丽杰宋佳兴王斯彤陆秀君沈海龙沈阳农业大学林学院沈阳110866 辽宁省固沙造林研究所阜新123000 东北林业大学林学院林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

通过对胡桃楸成花相关LFY基因进行研究,对缩短胡桃楸童期,促进其提早开花结实有着极为重要的意义。采取PCR扩增技术,在NCBI数据库中进行搜索,查找到与目的基因有关联的同源序列;并根据这些有关联的序列来进行引物设计,扩增目的基因全长... 详细信息

通过对胡桃楸成花相关LFY基因进行研究,对缩短胡桃楸童期,促进其提早开花结实有着极为重要的意义。采取PCR扩增技术,在NCBI数据库中进行搜索,查找到与目的基因有关联的同源序列;并根据这些有关联的序列来进行引物设计,扩增目的基因全长。克隆LFY基因cDNA序列全长为1 297 bp,其中CDS序列长1 158 bp,编码385个氨基酸。NCBI数据库Blast比对表明胡桃楸LFY同源基因与其他物种的LFY同源基因同源性均在80%以上。将胡桃楸LFY同源基因命名为JmLFY(GenBank登录号:KX364241)。通过BioEdit软件和ProtParam ExPASy在线软件分析胡桃楸JmLFY蛋白质分子式为C_(1878)H_(2962)N_(566)O_(578)S_(13),分子量为43 134.4 Da;理论等电点pI值为6.78;不稳定指数为39.92,属于不稳定蛋白质。该研究为进一步探索LFY基因对胡桃楸成花的影响提供依据。

关键词：胡桃楸 cDNA全长序列分析

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紫叶白桦组培苗叶片花青素含量影响因素分析

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森林工程 2017年第2期33卷 33-40,44页

作者：杨玲刘虹男张冬严沈海龙东北林业大学林学院林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

以紫叶白桦为试材,测定离体快繁过程中组培苗叶片花青素含量及其与叶绿素、类黄酮、类胡萝卜素和总酚等物质含量的比例关系,分析环境因素对组培苗叶片颜色和花青素含量的影响。结果表明:增殖阶段的WPM培养基有利于花青素的合成。随着培... 详细信息

以紫叶白桦为试材,测定离体快繁过程中组培苗叶片花青素含量及其与叶绿素、类黄酮、类胡萝卜素和总酚等物质含量的比例关系,分析环境因素对组培苗叶片颜色和花青素含量的影响。结果表明:增殖阶段的WPM培养基有利于花青素的合成。随着培养基中激素浓度增加,花青素合成被抑制,这种抑制作用没有激素种类差异。培养基中缺乏蔗糖会减少花青素积累。较低pH值和温度以及延长光照时间对花青素积累有促进作用。强光照可增加组培微枝和再生植株叶片中花青素含量,但降低了叶绿素的含量和比例。随着花青素比例减小,类黄酮和总酚含量减小,叶绿素比例增加,类胡萝卜素比例增加。研究结果为培育紫叶白桦优质观赏苗木提供了理论指导和参考依据。

关键词：紫叶白桦离体快繁花青素叶绿素

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二维码在林木种子园信息化管理中的应用

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基因组学与应用生物学 2017年第4期36卷 1629-1633页

作者：赵国辉夏辉孙晓阳张莹赵昕李树春赵曦阳王福维吉林省四平市林木种子园四平136000 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 吉林省林木种苗管理站长春130000

利用二维码制作简单、成本低廉、信息存储容量大、容错性强、安全性高、识别速度快等优点,本研究将其应用于林木种子园各功能区信息化管理建设中。根据种子园各功能区的特点,在不同的功能区采用二维码记录不同的信息,更利于管理和区分,... 详细信息

利用二维码制作简单、成本低廉、信息存储容量大、容错性强、安全性高、识别速度快等优点,本研究将其应用于林木种子园各功能区信息化管理建设中。根据种子园各功能区的特点,在不同的功能区采用二维码记录不同的信息,更利于管理和区分,进而提升种子园科技管理含量,提高种子园管理效率,使种子园管理更加规范、迅捷、系统和全面。并且利用二维码技术,更有利于种源追溯和管理,进而提升良种的价值。本研究有助于今后林木种子园长远的发展和未来信息化管理的建设,同时也将为林木领域信息化管理提供新思路。

关键词：林木种子园功能区二维码信息管理

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酵母双杂交筛选与小黑杨PsnWRKY70相互作用的蛋白质

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北京林业大学学报 2016年第2期38卷 44-51页

作者：赵慧王遂姜静刘桂丰东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室

小黑杨PsnWRKY70是能够响应盐胁迫的转录因子。为了进一步探究该转录因子在参与盐胁迫应答途径中与哪些蛋白质之间存在相互作用关系,本研究以140 mmol/L Na Cl溶液处理过的小黑杨叶片为材料,利用热稳定核酸酶(DSN)构建了均一化的pGADT7-... 详细信息

小黑杨PsnWRKY70是能够响应盐胁迫的转录因子。为了进一步探究该转录因子在参与盐胁迫应答途径中与哪些蛋白质之间存在相互作用关系,本研究以140 mmol/L Na Cl溶液处理过的小黑杨叶片为材料,利用热稳定核酸酶(DSN)构建了均一化的pGADT7-DEST酵母双杂交cDNA文库,将PsnWRKY70基因亚克隆至pGBKT7载体,形成BD-WRKY重组质粒,并以之为诱饵蛋白表达载体筛选小黑杨酵母双杂交cDNA文库。经过2轮酵母双杂交筛选以及回转验证试验,初步选出了5种与PsnWRKY70相互作用的蛋白质。对所筛选出的5种蛋白质进行保守结构域分析发现:有2种预测蛋白(HP1和HP2,其中HP1包含ClpP结构域),1种环化酶相关蛋白(CAP1),1种包含RNA识别基序的蛋白(RRM)以及1种泛素样修饰蛋白酶(Ulp1);对CAP1、HP1、RRM、HP2和Ulp1的毛果杨同源基因编码区上游2 000 bp范围内的顺式作用元件进行分析发现:CAP1、HP1、RRM、HP2和Ulp1的毛果杨同源基因上游启动子区均富含能够特异性结合WRKY转录因子的W-box。采用GST-pull down技术验证CAP1、HP1、RRM、HP2、Ulp1蛋白全长与PsnWRKY70转录因子之间是否存在直接的相互作用关系,将等量的His-X(X:CAP1、HP1、RRM、HP2或Ulp1)融合蛋白分别上样于正常谷胱甘肽琼脂糖树脂以及结合了GST或GST-WRKY蛋白的谷胱甘肽琼脂糖树脂中,SDS-PAGE电泳分离互作蛋白,最终Western blot结果显示:在体外状态下,HP1、RRM和Ulp1蛋白能够直接与PsnWRKY70相互作用,而CAP1和HP2则不能直接与PsnWRKY70相互作用。

关键词：小黑杨 PsnWRKY70 盐胁迫 cDNA文库酵母双杂交相互作用

来源：评论

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转基因白桦杂种T_1代的生长发育及AP1基因的遗传分析

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北京林业大学学报 2016年第9期38卷 1-7页

作者：王朔黄海娇杨光姜静刘桂丰东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室

本文以3株野生型白桦为母本、3株35S∷Bp AP1转基因白桦及1株野生型白桦为父本进行杂交,调查杂种子代的生长发育、开花结实特性,分析外源AP1基因在T1代白桦中的遗传稳定性及分离规律。结果表明：Bp AP1基因的插入对转基因植株的花粉活... 详细信息

本文以3株野生型白桦为母本、3株35S∷Bp AP1转基因白桦及1株野生型白桦为父本进行杂交,调查杂种子代的生长发育、开花结实特性,分析外源AP1基因在T1代白桦中的遗传稳定性及分离规律。结果表明：Bp AP1基因的插入对转基因植株的花粉活力略有影响,Bp AP1基因可遗传给T1代的部分个体,遗传比例在36%~58%之间,经χ2检验,Bp AP1基因的分离比符合孟德尔分离定律;遗传了Bp AP1基因的白桦子代与父本一样仍然呈现出提前开花结实、明显矮化的特点,其1年生和2年生的高生长仅为野生型白桦杂种子代的44.19%和18.92%;T1代白桦存在2种完全不同的表型,据此能够简便快捷地判断出杂种子代是否携带有Bp AP1基因。该研究证明了外源AP1基因可以通过有性生殖的方式稳定地遗传给子代,获得的转基因白桦杂种子代能够提早开花结实,因此35S∷Bp AP1转基因白桦可作为研究白桦性状遗传规律的亲本材料。

关键词： BpAP1 生长发育遗传规律白桦

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