检索结果-内蒙古大学图书馆

南京林业大学学报(自然科学版) 2023年第1期47卷 199-208页

作者：王阳王伟姜静顾宸瑞杨蕴力林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学)

【目的】根际土壤细菌及真菌群落组成不仅受植物种类及植物生长时期等影响，外源基因的导入也可改变根际微生物群落组成。通过基因工程技术获得的转betA或转TaLEA基因小黑杨(populus simonii x ***)能够提高甜菜碱或晚期胚胎富集蛋白的... 详细信息

【目的】根际土壤细菌及真菌群落组成不仅受植物种类及植物生长时期等影响，外源基因的导入也可改变根际微生物群落组成。通过基因工程技术获得的转betA或转TaLEA基因小黑杨(populus simonii x ***)能够提高甜菜碱或晚期胚胎富集蛋白的含量，进而增强转基因植物的抗旱耐盐性，PsnWRKY70是胁迫应答信号转导网络中的负调控因子，WRKY70干扰表达小黑杨的耐盐性显著高于对照株系。在明确了转betA、转TaLEA、转WRKY70小黑杨抗旱耐盐性的同时，开展转基因小黑杨根际土壤细菌、真菌群落组成分析，为其环境生态安全性评价提供参考。【方法】以2年生转TaLEA、betA、WRKY70基因小黑杨及对照野生型(WT)小黑杨根际土壤为试材，利用Illumina-Miseq高通量测序平台对根际土壤微生物进行16S rRNA和ITS测序分析，对根际土壤细菌和真菌群落丰富度和多样性变化、结构差异性、群落组成进行分析，了解转基因活动对小黑杨根际土壤微生物组成的影响。【结果】Alpha多样性分析显示，针对根际细菌群落组成，转betA小黑杨的Simpson指数显著低于WT小黑杨，而转WRKY70小黑杨观察物种数、Shannon及Simpson指数均显著低于WT小黑杨。针对根际真菌群落组成，3种转基因小黑杨的各项Alpha指数均显著低于WT小黑杨。韦恩图、主成分分析和聚类热图结果显示，在与WT小黑杨根际土壤细菌和真菌群落结构相似性上，转TaLEA小黑杨与WT小黑杨的群落差异较小，转betA小黑杨与转WRKY70小黑杨的群落组成更接近。基于属水平上的组成和丰度分析显示，转基因小黑杨根际土壤中，产黄杆菌属(Rhodanobacter)、芽单胞菌属(Gemmatimonas)等有益细菌相对丰度均有不同程度提高；而有益菌根真菌丝盖伞属(Inocybe)丰度在转TaLEA、转betA小黑杨中显著高于另外两个样品，小球孢盘菌属(Sphaerosporella)、粘滑菇属(Hebeloma)、蜡蘑属(Laccaria)丰度仅在转TaLEA小黑杨中显著提高；相反，亚隔孢壳属(Didymella)和背芽突霉属(Cadophora)等致病真菌丰度较WT小黑杨的降低85%以上。【结论】这些结果表明转基因活动可能利于植物生长并提升其抗逆性，但这些有益微生物是否发挥了重要作用并在实际环境中长期存在，仍需开展更多研究。

关键词：转基因小黑杨根际细菌真菌群落变异

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新疆核桃焦叶症发生规律及其影响因子

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林业科学 2025年第3期61卷 169-181页

作者：白永超王卫雄李宝鑫杨静雅王祺周荣飞牛犇裴东林木遗传育种全国重点实验室、国家林业和草原局林木培育重点实验室、中国林业科学研究院林业研究所北京100091 东北林业大学林木遗传育种全国重点实验室哈尔滨150040 东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 喀什地区林果产业工作站喀什844000

【目的】了解新疆核桃焦叶症发生现状与分布特征,探究其发生规律及其与微生物组和叶片矿质元素的关联,以明确焦叶症的关键促发因子,为其监测、预报及防控提供科学依据。【方法】以南疆核桃主栽区17个县(市)291个样点的核桃园为研究对象... 详细信息

【目的】了解新疆核桃焦叶症发生现状与分布特征,探究其发生规律及其与微生物组和叶片矿质元素的关联,以明确焦叶症的关键促发因子,为其监测、预报及防控提供科学依据。【方法】以南疆核桃主栽区17个县(市)291个样点的核桃园为研究对象,实地调查焦叶症发生现状,并建立焦叶症发生率和严重度分级标准。通过分析健康和焦叶症叶际、根系和根际土壤微生物群落多样性,并开展叶部真菌致病性测定,以及利用线性回归分析探讨叶片矿质元素与焦叶症严重度的相关性。【结果】田间调查分析结果表明,核桃焦叶症始于一次新梢停长前后,至二次新梢萌发前达到高峰。病症初期表现为叶缘或叶尖枯黄(或焦枯),随后逐渐向叶芯蔓延。轻症时叶缘或叶尖焦枯,重症时整个叶片焦枯,整株受害严重。焦枯前未见叶片萎蔫,焦枯后少见落叶,无明显发病中心和传染性,根据发生率和严重度将其分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ共5个等级。微生物组分析结果表明,发生焦叶症的叶际、根系和根际土壤中显著富集了耐高盐胁迫的盐单胞菌属(Halomonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)及Haliangium属等细菌类群;叶际中显著富集了链格孢属(Alternaria)、炭疽菌属(Colletotrichum)以及未分类亚隔孢壳科(Unclassied-Didymellaceae)等类群。叶片致病性测定结果表明,这些显著富集的叶部真菌均不是引起焦叶症的主要生物因子。叶片生理特性分析结果表明,焦叶症的叶片中O_(2)^(−)和H_(2)O_(2)的含量显著增加,且叶片中Cl^(−)、Na元素、B元素含量随焦叶症严重度的加剧呈显著增加,而叶片中N、K、Fe元素含量呈显著降低趋势。【结论】新疆核桃焦叶症叶际、根系和根际土壤中显著富集了耐高盐胁迫的细菌群落。叶部真菌不是引起焦叶症的主要生物因子,而Cl^(−)、Na元素、B元素毒害和N、K、Fe元素亏缺可能是引起叶片焦枯的关键非生物因子。因此,核桃焦叶症可能是一种由非生物因子引起的生理性病害。

关键词：核桃焦叶症分级标准发生规律生理性病害

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小黑杨PsnZAT11基因的克隆及表达模式分析

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分子植物育种 2024年

作者：于莉婧樊高锋黄颖田震买明远刘焕臻东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室

为研究小黑杨(Populus simonii×***)中PsnZAT11基因的功能，以二倍体无性系小黑杨的cDNA为模板克隆出长度为540 bp的目的基因片段。通过生物信息学分析，发现其编码179个氨基酸，编码的蛋白质的分子量为20059.96，等电点(pI)9.06... 详细信息

为研究小黑杨(Populus simonii×***)中PsnZAT11基因的功能，以二倍体无性系小黑杨的cDNA为模板克隆出长度为540 bp的目的基因片段。通过生物信息学分析，发现其编码179个氨基酸，编码的蛋白质的分子量为20059.96，等电点(pI)9.06，且其为亲水性的不稳定蛋白质。它的二级结构由α-螺旋(20.67%)、β-折叠(1.12%)、延伸带(13.41%)和随机卷曲(64.80%)组成，无信号肽，也无跨膜结构。通过构建系统进化树，发现小黑杨PsnZAT11蛋白与毛白杨(***)、银白杨(***)、毛果杨(***)亲缘关系较近。通过亚细胞定位，显示该转录因子定位于细胞核中。通过实时荧光定量PCR，发现在盐胁迫下，PsnZAT11基因表达量均呈上升状态，并且在根中表达量最高，茎中次之，叶中最少。综上表明PsnZAT11基因可能与植物应答盐胁迫相关。本研究为PsnZAT11基因的生物学功能的研究提供科学依据，为植物转录因子抗逆性育种提供理论基础。

关键词：小黑杨 ZAT转录因子盐胁迫

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转BpGLK裂叶桦生长变异、根际土壤酶活性及微生物群落组成

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林业科学 2022年第12期58卷 21-31页

作者：曹俐王阳杨蕴力郑雨王伟刘桂丰姜静东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

【目的】通过研究转BpGLK裂叶桦根际土壤理化性质、酶活性及微生物群落组成特征,为后续转BpGLK裂叶桦的环境安全性评价及产业化提供理论依据。【方法】以2年生的转BpGLK裂叶桦(RE1~RE5)为研究对象,检测外源基因稳定性;测定其生长特性、... 详细信息

【目的】通过研究转BpGLK裂叶桦根际土壤理化性质、酶活性及微生物群落组成特征,为后续转BpGLK裂叶桦的环境安全性评价及产业化提供理论依据。【方法】以2年生的转BpGLK裂叶桦(RE1~RE5)为研究对象,检测外源基因稳定性;测定其生长特性、根际土壤理化性质及土壤酶活性;利用高通量测序技术分析根际土壤微生物群落组成特征。【结果】转BpGLK株系中的外源Bar基因及BpGLK干扰片段仍然整合于其基因组中,在生长方面,RE株系高于或显著高于WT株系(RE3例外)。RE株系的土壤pH值、有机碳、全氮、速效氮含量低于或显著低于WT株系;而速效磷、全钾及速效钾含量显著高于WT株系(RE1例外)(P<0.05);RE株系的土壤脲酶、蔗糖酶活性均低于或显著低于WT株系,而中性蛋白酶活性则显著高于WT株系。微生物群落丰富度指数及多样性指数分析显示,在细菌方面:RE株系与WT株系间无显著差异;而真菌的丰富度高于或显著高于WT株系,多样性则与WT株系差异不显著;RE株系的Saccharimonadales、酸热菌属等8个菌属显著高于WT株系,而Candidatus_Solibacter等4个菌属则显著低于WT株系;真菌群落中棉革菌属是RE株系根际土壤的优势类群。【结论】2年生的转BpGLK裂叶桦生长表现优于野生型,尚未发现转基因活动对根际土壤理化性质、土壤酶活性及微生物群落组成产生不利影响。

关键词：桦树转基因根际土壤酶活性土壤微生物群落

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白城小黑杨遗传转化体系建立及其应用

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植物研究 2023年第5期43卷 667-678页

作者：何旭高源张群野周晨光李伟李爽东北林业大学林木遗传育种全国重点实验室哈尔滨150040

以白城小黑杨(Populus simonii×***‘Baicheng’)组培苗茎段为外植体,MS为基本培养基,通过调节不同植物生长激素6-BA、NAA、TDZ和IBA浓度诱导其离体再生。基于组织培养系统,经过卡那霉素浓度筛选、侵染时间确定,最终建立适用于白... 详细信息

以白城小黑杨(Populus simonii×***‘Baicheng’)组培苗茎段为外植体,MS为基本培养基,通过调节不同植物生长激素6-BA、NAA、TDZ和IBA浓度诱导其离体再生。基于组织培养系统,经过卡那霉素浓度筛选、侵染时间确定,最终建立适用于白城小黑杨的农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化体系。利用该系统成功创制了杨树应拉木形成关键调控基因LBD39(Lateral Organ Boundaries Domain)的过量表达转基因植株。结果表明:白城小黑杨组织培养体系包括不定芽分化诱导、抽茎诱导、生根诱导3个阶段,不定芽分化诱导最适培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)6-BA+0.1 mg·L^(-1)NAA+0.001 mg·L^(-1)TDZ,分化率92.6%;抽茎诱导最适培养基为MS+0.2 mg·L^(-1)6-BA+0.05 mg·L^(-1)NAA,抽茎增值系数6.5;生根诱导最适培养基为1/2 MS+0.4 mg·L^(-1)IBA,生根率100%。遗传转化最适卡那霉素质量浓度为30 mg·L^(-1)、最佳侵染时间为20 min,经30 d不定芽诱导、15~30 d抽茎诱导、25 d生根诱导即可成功获得转基因植株,GUS基因的转化效率为2%。应用此遗传转化体系,对杨树应拉木关键调控基因LBD39进行了过表达植株创制,最终获得5株过表达植株,转化效率为3.3%。

关键词：白城小黑杨组织培养遗传转化 LBD39

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基于BLUP-GGE双标图的白桦子代多地点速生性及稳定性分析

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北京林业大学学报 2024年第10期46卷 53-62页

作者：文浩雨张杰李慧玉高彩球王超张庆祝姜静刘桂丰东北林业大学林木遗传育种全国重点实验室黑龙江哈尔滨150040

【目的】通过白桦子代多地点试验,分析其速生性和稳定性,筛选出优良家系,为种子园的改建和重建提供科学依据。【方法】以3个试验点的8年生白桦半同胞家系子代试验林为研究对象,调查其树高、胸径、材积、通直度、保存率性状,采用R语言中... 详细信息

【目的】通过白桦子代多地点试验,分析其速生性和稳定性,筛选出优良家系,为种子园的改建和重建提供科学依据。【方法】以3个试验点的8年生白桦半同胞家系子代试验林为研究对象,调查其树高、胸径、材积、通直度、保存率性状,采用R语言中的ASReml-R4.0软件包,拟合具有异质方差的混合线性模型,通过最佳线性无偏预测法(BLUP)获得不同试验点各家系的综合育种值,并结合GGE双标图对各参试点和家系进行综合评价及选择。【结果】(1)以地点为固定效应的混合线性模型分析中,白桦半同胞家系子代的5个性状在地点间、家系间、以及地点×家系的互作间的差异均达到显著水平(P<0.05,Z ratio>1.5)。(2)基于各家系综合育种值的GGE双标图显示,尚志试验点的区分度和代表性均最优,庆安和尚志试验点的相关性最强,永吉与尚志试验点几乎不相关、与庆安试验点负相关。(3)16号和15号白桦家系的速生性最优,4号和32号白桦家系的稳定性最强。基于各家系速生性和稳定性的综合性状排序,按20%的入选率共选出16号、40号、15号和38号4个优良家系。【结论】白桦半同胞家系在不同试验地点的生长表现存在显著差异,同一试验地点内不同家系之间的生长表现也存在差异。基因型(家系)与环境(地点)的交互作用对白桦的生长有显著影响。依据各家系速生性及稳定性综合性状,选出16号、40号、15号和38号为白桦半同胞优良家系。

关键词：白桦线性混合模型育种值 GGE双标图优良家系选择

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LBD12转录因子调控毛果杨木材形成研究

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南京林业大学学报(自然科学版) 2024年第1期48卷 29-38页

作者：高源孙佳彤周晨光姜立泉李伟李爽林木遗传育种全国重点实验室(东北林业大学) 辽宁省森林经营研究所

【目的】创制毛果杨(Populus trichocarpa)LBD12(lateral organ boundaries domain 12)转录因子的过量表达植株，分析表型特征，初步探究PtrLBD12转录因子在毛果杨木材形成中的生物功能。【方法】基于前期的研究，筛选出了木材形成关键... 详细信息

【目的】创制毛果杨(Populus trichocarpa)LBD12(lateral organ boundaries domain 12)转录因子的过量表达植株，分析表型特征，初步探究PtrLBD12转录因子在毛果杨木材形成中的生物功能。【方法】基于前期的研究，筛选出了木材形成关键调控因子PtrbHLH186调控的下游转录因子PtrLBD12,通过基因克隆获得PtrLBD12基因；创制PtrLBD12过量表达毛果杨植株，测定并统计生长30、60、90 d毛果杨野生型和过表达植株的生长指标；对生长120 d的转基因及野生型植株各茎节进行石蜡切片、化学染色观察及不同细胞类型的统计分析；通过定量PCR测定过表达PtrLBD12基因对22个木质素单体合成酶基因表达水平的影响。【结果】获得毛果杨PtrLBD12过表达植株；与野生型相比，转基因植株的株高、地径等生长指标水平明显降低；纤维和导管细胞的数量显著增多，导管细胞的孔径减小，形成层细胞的形态结构无明显变化；木质素沉积水平增加，木质化程度增强；PtrLBD12的过量表达促进了木质素合成酶基因的表达。【结论】LBD12转录因子在毛果杨木材形成过程中发挥重要的调控作用，可调节木质素单体合成酶基因的表达，改变木质素沉积方式。此外，该基因也可以改变木质部细胞形态结构，影响植株生长发育。

关键词：毛果杨木材形成遗传转化转录因子 PtrLBD12

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黑龙江省东部山区西伯利亚红松种源引种试验初步评价

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北京林业大学学报 2023年第1期45卷 70-77页

作者：计家宝宋淑媛李开隆刘桂丰东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040

【目的】西伯利亚红松是材果兼优的珍贵树种,主要分布于俄罗斯境内的寒温带地区,种内变异丰富。开展不同种源引种试验,选出优良种源,为后期的大规模引种造林提供依据。【方法】依据该树种的种源区划,在主要种源区的7个采种点采集种子,... 详细信息

【目的】西伯利亚红松是材果兼优的珍贵树种,主要分布于俄罗斯境内的寒温带地区,种内变异丰富。开展不同种源引种试验,选出优良种源,为后期的大规模引种造林提供依据。【方法】依据该树种的种源区划,在主要种源区的7个采种点采集种子,育苗及造林按照完全随机区组试验设计。调查了7年生和9~18年生的树高,以及7、15和18年生的胸径,也调查了18年生时的保存率。针对调查的性状进行了种源间方差分析以及多重比较分析,估算了各性状的广义遗传力,开展了性状与造林地的温度、降水因子的相关性分析,进行了不同种源树高生长曲线模型拟合分析等。【结果】方差分析结果表明:各种源间生长性状的差异大都达到极显著水平,变异系数在17%~65%之间,大多在25%左右,树高性状变异系数基本呈现随着年龄增加而逐渐减小的趋势。各项性状的广义遗传力较高,大多数在70%以上。当年高生长量与造林地的温度、降水相关分析表明:造林地的温度是影响高生长的主要因子,较高的年均温、3月及7月均温,不但促进西伯利亚红松当年高生长,尤其明显促进第2年的生长。树高曲线模型拟合分析和多重比较分析均表明:在引进的各西伯利亚红松种源中,托木斯克种源、乌兰乌德种源表现突出,被确定为优良种源,其树高和胸径的遗传增益分别为6.73%和3.09%、4.68%和9.50%。【结论】西伯利亚红松种源间的生长性状存在明显变异,造林地的温度是影响高生长的主要因子,较高的温度不但对当年高生长有利,也明显促进第2年的高生长;基于各种源树高曲线及多重比较,选择托木斯克种源和乌兰乌德种源为优良种源。

关键词：西伯利亚红松引种种源试验优良种源选择

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簸箕柳×三蕊柳种特异性KASP标记开发及种间杂交子代鉴别

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林业科学 2024年第4期60卷 119-126页

作者：戴晓港魏铭辰林木遗传育种全国重点实验室、南方现代林业协同创新中心、林木遗传与生物技术教育部重点实验室、江苏省林木遗传和高效培育重点实验室、南京林业大学林学院南京210037

【目的】开发簸箕柳和三蕊柳种特异性KASP引物,为开展簸箕柳和三蕊柳杂交选育速生、抗虫新种质的真实性鉴定提供参考。【方法】利用簸箕柳和三蕊柳重测序数据,开展全基因组SNP位点分析,筛选出种特异性的SNP位点并设计KASP引物,利用SeqHu... 详细信息

【目的】开发簸箕柳和三蕊柳种特异性KASP引物,为开展簸箕柳和三蕊柳杂交选育速生、抗虫新种质的真实性鉴定提供参考。【方法】利用簸箕柳和三蕊柳重测序数据,开展全基因组SNP位点分析,筛选出种特异性的SNP位点并设计KASP引物,利用SeqHunter2检测设计引物在簸箕柳中的通用性,并利用簸箕柳和三蕊柳自然群体材料对合成的引物进行实验验证,筛选出簸箕柳和三蕊柳种特异性KASP引物,并对它们的杂交子代进行真实性鉴别。【结果】将三蕊柳和簸箕柳重测序的数据比对到三蕊柳基因组,共获得个6598144个SNPs。经过筛选,最终在簸箕柳中检测到674144个和三蕊柳相比为纯合突变的位点。从每条染色体上随机选取100个位点用于KASP引物设计,在1900个SNPs位点中,750个SNP位点可以成功设计出KASP引物。从每条染色体上选取2组,共选取38组引物,通过SeqHunter2检测得到11组引物在簸箕柳中是通用的。利用簸箕柳和三蕊柳自然群体DNA对合成的10组通用引物进行种内保守和种间差异性检测,获得4组在簸箕柳、三蕊柳和种间杂交子代中聚类明显的引物。引物Stri08_82809、Stri14_11602、Stri14_12274和Stri17_10731在簸箕柳自然群体中分别扩增出纯合G/G、T/T、A/A和T/T位点,在三蕊柳自然群体分别扩增出纯合A/A、C/C、G/G和C/C位点,而在真实杂交子代中分别扩增出G/A、T/C、A/G和T/C杂合位点。利用上述4组引物对簸箕柳×三蕊柳的杂交子代进行鉴定,发现在31个杂交子代中,29个个体扩增出杂合位点,说明同时遗传了2个亲本的特征位点,为真实的种间杂交子代。有2个个体扩增的位点为纯合且和母本相同,说明这2个子代为簸箕柳花粉污染的子代。【结论】本研究获得了簸箕柳和三蕊柳种间特异性KASP标记4组,可以准确快速的开展簸箕柳和三蕊柳种间杂交子代的真实性鉴别,为进一步簸箕柳和三蕊柳种间杂交及回交创制抗虫新品种提供了技术支持。

关键词：簸箕柳三蕊柳种间杂交物种特异性KASP引物种间杂交分子鉴别

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84K杨HD2-型组蛋白去乙酰化酶基因的表达

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东北林业大学学报 2025年第4期53卷 1-11页

作者：马文晗张超马旭俊林木遗传育种全国重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

为了研究84K杨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)家族中HD2亚家族成员在逆境胁迫应答中的表达模式,从84K杨中克隆得到PagHDT901、PagHDT902和PagHDT903基因的cDNA编码序列。生物信息学分析表明,这3种蛋白属于亲水蛋白,都具有NPL结构域。亚细胞定... 详细信息

为了研究84K杨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)家族中HD2亚家族成员在逆境胁迫应答中的表达模式,从84K杨中克隆得到PagHDT901、PagHDT902和PagHDT903基因的cDNA编码序列。生物信息学分析表明,这3种蛋白属于亲水蛋白,都具有NPL结构域。亚细胞定位发现,这3种蛋白均定位在细胞核中。84K杨HD2亚家族基因的表达具有组织特异性,在叶片中表达量最高。设计干旱、盐、寒冷的模拟逆境,通过Real-time PCR方法,分析了84K杨HD2亚家族基因在不同逆境条件下的表达模式。研究结果表明,84K杨HD2亚家族基因积极响应逆境胁迫,推断该家族基因可能参与84K杨的抗逆防御调节过程。

关键词： 84K杨 HD2家族干旱胁迫盐胁迫冷胁迫

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