检索结果-内蒙古大学图书馆

Acta Genetica Sinica 2004年第4期31卷 395-402页

作者：施燕峰单祥年李健史庭燕郑爱玲东南大学基础医学院遗传中心南京210009

通过测定鹿科麂亚科中的小麂、赤麂和黑麂的线粒体全基因组 ,从而定位它们的控制区 ,并从GenBank获得鹿科另外 3个亚科 9种动物的线粒体控制区全序列。利用MEGA软件计算了各物种控制区序列的碱基组成、遗传距离和遗传相似度 ,通过比较... 详细信息

通过测定鹿科麂亚科中的小麂、赤麂和黑麂的线粒体全基因组 ,从而定位它们的控制区 ,并从GenBank获得鹿科另外 3个亚科 9种动物的线粒体控制区全序列。利用MEGA软件计算了各物种控制区序列的碱基组成、遗传距离和遗传相似度 ,通过比较序列同源性 ,以羊线粒体控制区序列为外群 ,构建NJ分子系统树 ,探讨了鹿科 4个亚科 12种动物的系统进化关系。序列分析表明 ,鹿科 12种动物控制区序列的碱基长度在 90 9～ 10 4 9bp之间 ,A +T含量约占 6 2 0 6 % ,其中 36 3个核苷酸位点存在变异 (约占34% )。系统进化关系结果表明 :(1)以线粒体控制区构建的鹿科 12种动物分子系统树基本与NCBI分类一致 ;(2 )美洲鹿亚科驼鹿属驼鹿在鹿科这 12种动物中处于最为原始的地位 ;(3)小麂比赤麂和黑麂更为原始 ;(4)獐亚科獐属的獐与美洲鹿亚科狍鹿属的狍鹿和美洲狍鹿聚为一支。

关键词：鹿科线粒体控制区系统发育

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小麂线粒体基因组全序列的测定和分析

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遗传 2004年第6期26卷 849-853页

作者：张晓梅单祥年施燕峰张海军李健郑爱玲东南大学基础医学院遗传中心南京210009

通过建立麂属动物小麂线粒体DNA文库、鸟枪法测序 ,获得了小麂线粒体基因组全序列并对其基因组成、蛋白质的编码序列、tRNA基因等结构作了详细分析 ,这也是国内有关哺乳动物线粒体基因组全序列的首次报道。与其他哺乳动物线粒体基因组... 详细信息

通过建立麂属动物小麂线粒体DNA文库、鸟枪法测序 ,获得了小麂线粒体基因组全序列并对其基因组成、蛋白质的编码序列、tRNA基因等结构作了详细分析 ,这也是国内有关哺乳动物线粒体基因组全序列的首次报道。与其他哺乳动物线粒体基因组全序列的比较研究发现 :全长为 16 35 4bp的小麂线粒体基因组同样编码 13种蛋白质、2种rRNA和 2 2种tRNA ,除了用于调控线粒体DNA复制和转录的D Loop区以外 ,小麂线粒体基因组各基因长度、位置与其他哺乳动物相似。

关键词：小麂线粒体基因组鸟枪法测序序列分析

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树状DNA原位杂交技术在子宫颈癌人乳头状瘤病毒DNA分型检测和细胞学定位中的应用

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中华妇产科杂志 2005年第1期40卷 53-54页

作者：史庭燕单祥年施燕峰赵苏瑛单云峰东南大学基础医学院遗传中心南京210009

人乳头状瘤病毒(human papilloma virus, HPV)是一种环状双链DNA病毒,其基因组大小为7.9 kb.目前,传统的细胞学和血清学方法诊断率较低,特异性欠佳.树状DNA杂交(DDH)技术是一种信号放大技术,它通过增加标记探针的拷贝数或标记物的信号... 详细信息

人乳头状瘤病毒(human papilloma virus, HPV)是一种环状双链DNA病毒,其基因组大小为7.9 kb.目前,传统的细胞学和血清学方法诊断率较低,特异性欠佳.树状DNA杂交(DDH)技术是一种信号放大技术,它通过增加标记探针的拷贝数或标记物的信号强度来提高敏感度[1],具有与PCR技术相似的高敏感性.本研究采用以4层单体组成的3DNA树状体作为靶序列探针载体的DDH技术,并结合原位杂交方法,对45例临床诊断为宫颈癌患者的癌组织分别进行HPV16、18DNA检测,并就提高杂交敏感性的方法学做进一步探讨,为临床推荐一个行之有效的新方法。

关键词：树状DNA原位杂交技术子宫颈癌人乳头状瘤病毒病毒DNA 细胞学定位

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核基因参与人类线粒体12S rRNA突变相关非综合征耳聋的临床表型

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分子细胞生物学报 2006年第1期39卷 39-45页

作者：赵苏瑛张海军徐春宏单云峰单祥年东南大学医学院遗传中心南京210009

人类线粒体DNA 12S rRNA A1555G突变可引起母系遗传性非综合征耳聋,并提高氨基糖甙类药物对该类耳聋的诱导作用。我们在江苏淮阴发现了一个非综合征耳聋大家系,家系个体发病呈典型的母系遗传特征,临床可表现为先天性耳聋、中年进行性耳... 详细信息

人类线粒体DNA 12S rRNA A1555G突变可引起母系遗传性非综合征耳聋,并提高氨基糖甙类药物对该类耳聋的诱导作用。我们在江苏淮阴发现了一个非综合征耳聋大家系,家系个体发病呈典型的母系遗传特征,临床可表现为先天性耳聋、中年进行性耳聋乃至完全正常的表型。对家系个体进行研究后发现A1555G突变是引起该家系耳聋的主要原因。我们用EB病毒转化的方法对该家系部分个体行建系工作后,对家系中17个个体的类淋巴母细胞进行分析,其中包括具有耳聋症状的个体7人(患者组),具有同质性A1555G突变但表型正常的个体6人(携带组),正常婚配对照 5人,与正常婚配对照相比,患者组与携带组在线粒体蛋白合成速率及在葡萄糖或半乳糖培养基中的生长速度出现了不同程度的下降,且突变细胞系中线粒体功能缺陷的严重程度与个体的临床表型相关．这些发现强有力地支持了核基因参与了该疾病临床表型的形成。

关键词：非综合征耳聋表型 12S rRNA 核基因

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HSV-TK/GCV自杀基因系统对人胰腺癌细胞的作用

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江苏医药 2004年第7期30卷 498-501页

作者：王静鲁晓瑄张丽珊陈道桢李淑锋东南大学基础医学院遗传中心南京210009

目的　运用自杀基因系统HSV TK/GCV治疗人胰腺癌细胞SW1990的实验研究 ,并证实旁观者效应。方法　通过脂质体介导的基因转移方法将含有单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (her pessimplexvirusthymidinekinasegene ,HSV TK)的复制缺陷型逆转录... 详细信息

目的　运用自杀基因系统HSV TK/GCV治疗人胰腺癌细胞SW1990的实验研究 ,并证实旁观者效应。方法　通过脂质体介导的基因转移方法将含有单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (her pessimplexvirusthymidinekinasegene ,HSV TK)的复制缺陷型逆转录病毒载体GINaTK导入包装细胞PA317,然后利用细胞产生的假病毒颗粒感染人胰腺癌细胞系SW 1990细胞。在SW 1990 /TK细胞培养物中加入抗病毒前药GCV ,观察GCV对该细胞的杀伤作用及旁观者效应。结果　实验表明GCV对SW1990 /TK有显著的抑制及杀灭作用 ,同时表现出强烈的旁观者效应。结论　HSV TK/GCV自杀基因系统对胰腺癌细胞有生长抑制及杀伤作用。

关键词： HSV-TK GCV 自杀基因基因系统胰腺癌癌细胞细胞培养

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非综合征耳聋大家系永生细胞系的建立及几种EB病毒转化外周血淋巴细胞建系方法的探讨

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遗传 2005年第3期27卷 447-450页

作者：赵苏瑛张海军徐春宏单云峰单祥年史庭燕东南大学医学院遗传中心南京210009

永久保存珍贵的家系材料,是对该家系进行深入研究的基础,为此采用EB病毒(Epstein Barrvirus,EBV)转化淋巴细胞的方法对中国江苏淮阴地区非综合征耳聋大家系行建系工作。该家系患者呈典型的母系遗传特征,且研究发现患者中均具有线粒体DNA... 详细信息

永久保存珍贵的家系材料,是对该家系进行深入研究的基础,为此采用EB病毒(Epstein Barrvirus,EBV)转化淋巴细胞的方法对中国江苏淮阴地区非综合征耳聋大家系行建系工作。该家系患者呈典型的母系遗传特征,且研究发现患者中均具有线粒体DNA12SRNAA1555G突变,是迄今世界上最大的非综合征耳聋家系之一,在该家系的建系过程中使用了4种不同的方法。建系结果分别为:微量全血法1株,冻存全血法1株,冻存白细胞法14株及环孢霉素A(CyA)法36株,共计52株。文章就建系工作及这4种转化方法作一简单探讨。

关键词： EB病毒永生细胞系非综合征耳聋

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Computational analysis of genetic loci required for synapse structure and function and their corresponding microRNAs in C. elegans

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Neuroscience Bulletin 2006年第6期22卷 339-349页

作者：孙阳赵雅妮王大勇东南大学基础医学院遗传与发育系

Objective To elucidate the important functions of microRNAs （miRNAs） in regulating synaptic assembly and function, we performed a computational analysis for the genetic loci required for the synaptic structure and function and their corresponding miRNAs in C. elegans. Methods Total 198 genetic loci required for the synaptic structure and function were selected. Sequence alignment was combined with E value evaluation to investigate and identify the possible corresponding miRNAs. Results Total 163 genes among the 198 genetic loci selected have their possibly corresponding regulatory miRNA （s）, which covered most of the important genetic loci required for the synaptic structure and function. Moreover, only 22 genes among the analyzed 38 genetic loci encoding synaptic proteins have more possibility to under the control of non-coding RNA genes. In addition, the distribution of miRNAs along the 3＇ untranslated region （UTR） of these 22 genes exhibits different patterns. Condusion Here we provide the computational screen and analysis results for the genetic loci required for synaptic structure and function and their possible corresponding miRNAs. These data will be useful for the further attempt to systematically determine the roles of miRNAs in synaptic assembly and function regulation in worms.

关键词： miRNA synapse genetic loci C. elegans computational analysis

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Involvement of genes required for synaptic function in aging control in ***

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Neuroscience Bulletin 2007年第1期23卷 21-29页

作者：沈露露汪洋王大勇东南大学基础医学院遗传与发育系

Objective To identify new genes required for neurosecretory control of aging in C. elegans. Methods In view of the importance of nervous system in aging regulation, we performed the screen for genes involved in the aging regulation from genetic loci encoding synaptic proteins by lifespan assay and accumulation of lipofuscin autofluorescence. We further investigated the dauer formation phenotypes of their corresponding mutants and whether they were possibly up-regulated by the insulin-like signaling pathway. Results The genetic loci of unc-10, syd-2, hlb-1, dlk-1, mkk-4, scd- 2, snb-1, ric-4, nrx-1, unc-13, sbt-1 and unc-64 might be involved in the aging control. In addition, functions of unc-10, syd-2, hlb-1, dlk-1, mkk-4, scd-2, snb-1, ric-4 and nrx-1 in regulating aging may be opposite to those of unc-13, sbt-1 and unc-64. The intestinal autofluorescence assay further indicated that the identified long-lived and short-lived mutants were actually due to the suppressed or accelerated aging. Among the identified genes, syd-2, hlb-1, mkk-4, scd-2, snb-1, ric-4 and unc-64 were also involved in the control of dauer formation. Moreover, daf-2 mutation positively regulated the expression of syd-2 and hlb-1, and negatively regulated the expression of mkk-4, nrx-1, ric-4, sbt-1, rpm-1, unc-10, dlk- 1 and unc-13. The daf-16 mutation positively regulated the expression of syd-2 and hlb-1, and negatively regulated the expression of mkk-4, nrx-1, sbt-1, rpm-1, unc-10, dlk-1 and unc-13. Conclusion These data suggest the possibly important status of the synaptic transmission to the animal＇ s life-span control machinery, as well as the dauer formation control.

关键词： aging neurotransmission synapse dauer formation insulin pathway C. elegans

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戊型肝炎病毒第Ⅳ基因型毒株中和抗原表位的鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第12期26卷 1096-1101页

作者：张红梅孟继鸿戴星赵宇单祥年东南大学医学院病原生物学与免疫学系南京东南大学医学院遗传中心210009 东南大学附属中大医院东南大学医学院遗传中心

目的确定在我国新发现的戊型肝炎病毒(HEV)第Ⅳ基因型毒株的中和抗原表位特征及其与世界各地其他基因型HEV毒株中和抗原表位的异同。方法制备HEV第Ⅳ基因型ORF2重组衣壳蛋白p166Chn及其单克隆抗体(McAb),采用体外中和试验鉴定McAb的中... 详细信息

目的确定在我国新发现的戊型肝炎病毒(HEV)第Ⅳ基因型毒株的中和抗原表位特征及其与世界各地其他基因型HEV毒株中和抗原表位的异同。方法制备HEV第Ⅳ基因型ORF2重组衣壳蛋白p166Chn及其单克隆抗体(McAb),采用体外中和试验鉴定McAb的中和活性;通过间接ELISA和免疫印迹法测定中和性McAb与不同基因型HEV ORF2编码蛋白p166的免疫反应性,并结合相加ELISA确定p166Chn中和抗原表位的分布和性质。结果获得6株稳定分泌抗-p166Chn McAb的杂交瘤细胞株,所得McAb能在体外中和HEV中国毒株(第Ⅳ基因型)对PLC／PRF／5细胞的感染性,并与来源于HEV 4种不同基因型代表株的7种p166重组蛋白(p166Chn、p166Bur、p166Mor、p166Pak、p166Mex、p166Us和p166Nz)均能发生阳性反应,抗体间的相加ELISA结果为阴性,表明6株McAb识别p166上的同一个中和抗原表位。结论在我国新发现的HEV第Ⅳ基因型毒株与分布在世界各地的其他基因型毒株具有共同的中和抗原表位。

关键词：戊型肝炎病毒中和抗原表位单克隆抗体基因型

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Screening for genetic loci affecting the active zone formation in C. elegans

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Neuroscience Bulletin 2006年第5期22卷 301-304页

作者：王大勇汪洋东南大学基础医学院遗传与发育系

Objective To screen and identify genetic loci affecting the active zone formation in C. elegans. Methods A SYD-2：：GFP reporter was constructed and used as an active zone marker for forward genetic screen to identify genetic loci affecting the active zone formation. Results Eight isolated mutant alleles were characterized from 15,000 haploid genomes. The SYD-2：：GFP phenotypes of these mutants are mainly reflected as the changes of number, morphology, distribution of puncta and the gaps appearance. Some mutants also exhibit visible behavioral or physical phenotypes, and aldicarb resistant or sensitive phenotypes. Conclusion These mutants provide the opportunity for further systematic research on the active zone formation and the neurotransmission.

关键词： genetic screen active zone formation synapse defective protein 2 forward genetics C. elegans

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