检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学遗传学杂志 2005年第3期22卷 261-264页

作者：刘晓蓉单祥年 Friedl W Uhlhaas S Propping P 王亚平南京大学医学院医学遗传学教研室 210093 东南大学基础医学院遗传研究中心德国波恩大学人类遗传学研究所

目的探索有效的突变检测技术,系统分析家族性腺瘤样息肉病(familialadenomatouspolyposis,FAP)相关基因结肠腺瘤病(adenomatouspolyposiscoli,APC)基因的胚系突变,及其与疾病表型的关系。方法从22例临床确诊的FAP患者,外周静脉血中提取... 详细信息

目的探索有效的突变检测技术,系统分析家族性腺瘤样息肉病(familialadenomatouspolyposis,FAP)相关基因结肠腺瘤病(adenomatouspolyposiscoli,APC)基因的胚系突变,及其与疾病表型的关系。方法从22例临床确诊的FAP患者,外周静脉血中提取基因组DNA。变性高效液相色谱、蛋白截短检测、测序技术结合应用进行全基因分析。根据患者临床资料,进行基因型表型分析。结果22例FAP患者中13例检出APC基因胚系突变,均为无义或移码突变。基因型-表型关系的初步分析表明,在基因5′端或3′端发生突变的患者临床症状较轻,在基因中段发生突变的患者临床症状典型或严重。结论本研究中所采用的技术体系可敏感、高效地检出APC基因突变,APC基因的突变型与FAP患者的临床表型存在关联,所采用的技术体系适用于FAP症状出现前的基因诊断。

关键词：家族性疾病腺瘤样息肉病 APC基因胚系突变基因诊断

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HSV-TK/GCV自杀基因系统对人胰腺癌细胞的作用

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江苏医药 2004年第7期30卷 498-501页

作者：王静鲁晓瑄张丽珊陈道桢李淑锋东南大学基础医学院遗传中心南京210009

目的　运用自杀基因系统HSV TK/GCV治疗人胰腺癌细胞SW1990的实验研究 ,并证实旁观者效应。方法　通过脂质体介导的基因转移方法将含有单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (her pessimplexvirusthymidinekinasegene ,HSV TK)的复制缺陷型逆转录... 详细信息

目的　运用自杀基因系统HSV TK/GCV治疗人胰腺癌细胞SW1990的实验研究 ,并证实旁观者效应。方法　通过脂质体介导的基因转移方法将含有单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (her pessimplexvirusthymidinekinasegene ,HSV TK)的复制缺陷型逆转录病毒载体GINaTK导入包装细胞PA317,然后利用细胞产生的假病毒颗粒感染人胰腺癌细胞系SW 1990细胞。在SW 1990 /TK细胞培养物中加入抗病毒前药GCV ,观察GCV对该细胞的杀伤作用及旁观者效应。结果　实验表明GCV对SW1990 /TK有显著的抑制及杀灭作用 ,同时表现出强烈的旁观者效应。结论　HSV TK/GCV自杀基因系统对胰腺癌细胞有生长抑制及杀伤作用。

关键词： HSV-TK GCV 自杀基因基因系统胰腺癌癌细胞细胞培养

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基于神经网络学习算法的胃电信号时频分析

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中国生物医学工程学报 1997年第3期16卷 244-252页

作者：王智顺李文化何振亚杨德治陈建德东南大学无线电工程系南京铁道医学院基础医学部美国俄克拉荷马城医学研究中心

本文提出了基于神经网络学习算法的一种新的胃电信号自适应时频分析方法。与传统的短时富里叶变换（ＳＴＦＴ）和Ｗｉｇｎｅｒ分布相比，本方法有如下优点：１、为更好地跟踪胃电信号的变化，提取其时频特征，我们首先引入调制性基函数... 详细信息

本文提出了基于神经网络学习算法的一种新的胃电信号自适应时频分析方法。与传统的短时富里叶变换（ＳＴＦＴ）和Ｗｉｇｎｅｒ分布相比，本方法有如下优点：１、为更好地跟踪胃电信号的变化，提取其时频特征，我们首先引入调制性基函数作为窗口函数。这种窗口函数包含位移参量、尺度参量和中心频率参量，通过调节这些参量可改变窗口函数的中心位置。窗口形状和中心频率大小，因而保证与分析信号保持最佳匹配；２、由于胃电信号的非稳态和非线性，胃电信号时频参量的变化是非线性的。我们应用神经网络这种最佳非线性估计器来学习这些参量，既可获得较高的估计精度，又有较高的自适应性；３、所提出的方法不仅比ＳＴＦＴ和Ｗｉｇｎｅｒ分布有更高的分辨率，而且其时频能量分布图是清晰的，没有交叉项干扰。

关键词：胃电图神经网络时频分析子波变换

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人源抗戊型肝炎病毒单克隆抗体的获得与鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第3期24卷 198-201页

作者：张建琼魏华鲁晓萱鲍海逊孟继鸿谢维东南大学医学院遗传学研究中心东南大学医学院微生物与免疫学教研室

目的　获得人源中和性抗戊型肝炎病毒 (HEV)单克隆基因工程抗体。方法　采用五轮筛选法 (逐轮降低抗原包被量 ,严格洗脱条件 ) ,以固相化的 4种含中和抗原表位的HEV代表株ORF2重组混合抗原淘筛本室构建的HEV患者外周血源的噬菌体抗体库... 详细信息

目的　获得人源中和性抗戊型肝炎病毒 (HEV)单克隆基因工程抗体。方法　采用五轮筛选法 (逐轮降低抗原包被量 ,严格洗脱条件 ) ,以固相化的 4种含中和抗原表位的HEV代表株ORF2重组混合抗原淘筛本室构建的HEV患者外周血源的噬菌体抗体库。获得有特异结合活性的噬菌体抗体 ,酶切鉴定抗体基因插入。切去噬菌粒上衣壳蛋白gⅢ基因构建表达载体 ,在大肠杆菌中可溶性表达抗HEV抗体Fab段 ,ELISA、Westernblot检测抗体免疫学活性 ;测序分析抗体基因。结果　筛选出 4株与含中和抗原表位的HEV代表株ORF2重组混合抗原特异结合而与BSA、HBsAg无交叉结合反应的噬菌体抗体 ,可能为中和抗体。切去gⅢ基因 ,在大肠杆菌中表达可溶性抗体Fab段 ,表达量在细菌培养液上清和细菌裂解液中差异无显著性。可溶性抗体与含中和抗原表位的HEVORF2重组混合抗原有特异结合活性 ,与BSA、HBsAg无交叉结合反应。Westernblot显示在相对分子质量 (Mr)略大于 4 5× 10 3 处有一明显条带 ,与Mr4 8× 10 3 的Fab大小一致。DNA测序分析表明 ,Fab段VH 属于IgGVH3基因家族 ,VL 属于Vκ1基因家族。结论　利用噬菌体抗体库技术成功获得抗HEV的人源单克隆抗体。

关键词：戊型肝炎病毒单克隆抗体鉴定免疫学活性外周血

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抗ARL-1单克隆抗体的制备及初步应用

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第1期21卷 60-63页

作者：单军张建琼金俊飞马达鲍海逊缪凤琴谢维东南大学医学院遗传学研究中心江苏南京210009

　目的: 制备抗醛糖还原酶相似蛋白(aldosereductaselikeprotein, ARL- 1)的单克隆抗体 (mAb)并进行初步应用。方法: 用纯化的ARL- GST蛋白免疫BALB/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备mAb。间接ELISA法、Westernblot及免疫组织化学染色法, 对mA... 详细信息

　目的: 制备抗醛糖还原酶相似蛋白(aldosereductaselikeprotein, ARL- 1)的单克隆抗体 (mAb)并进行初步应用。方法: 用纯化的ARL- GST蛋白免疫BALB/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备mAb。间接ELISA法、Westernblot及免疫组织化学染色法, 对mAb进行鉴定及初步应用。结果: 获得 1株可稳定分泌抗ARL -1蛋白mAb的杂交瘤细胞系。mAb的Ig亚类为IgG2b, 轻链属于κ型。腹水mAb的效价为: 1∶4. 096×105。Westernblot的结果表明, ARL 1蛋白在被检测的肝癌组织中呈高表达, 而在相应的癌旁组织中不表达。免疫组织化学染色的结果表明, ARL -1蛋白在肝癌组织中呈高表达且主要定位在胞质内。结论: 成功地制备 1株抗ARL -1蛋白的mAb。初步应用的结果表明, ARL- 1蛋白在肝癌组织中呈高表达, 为进一步研究ARL -1蛋白的功能, 以及其与肝癌的确切关系奠定了基础。

关键词： ARL-1蛋白单克隆抗体免疫组化染色

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小麂Sry基因的克隆和测序

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遗传 2003年第3期25卷 299-301页

作者：鲁晓瑄张悦单祥年东南大学医学院遗传学研究中心南京210009

应用人的性别决定基因SRY(Sex determiningRegionYgene,SRY)中HMG框内的一对引物,对小麂细胞株的基因组DNA进行PCR扩增,得到雄性小麂细胞的220bp扩增产物,而在雌性小麂细胞中未发现扩增产物。将雄性小麂细胞的220bp扩增产物通过T-A互补... 详细信息

应用人的性别决定基因SRY(Sex determiningRegionYgene,SRY)中HMG框内的一对引物,对小麂细胞株的基因组DNA进行PCR扩增,得到雄性小麂细胞的220bp扩增产物,而在雌性小麂细胞中未发现扩增产物。将雄性小麂细胞的220bp扩增产物通过T-A互补法克隆到质粒pGEM-T载体中,筛选阳性克隆进行DNA测序。测序结果表明小麂Sry基因保守序列与人的SRY基因保守区相同碱基的比值为152/184,达到82.6%。提示小麂Sry基因与人的SRY基因存在着较高的同源性,说明SRY基因在进化过程中高度保守。

关键词： SRY基因性别决定小麂克隆 DNA 人同源性序列分析

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大肠癌中胰岛素样生长因子2基因的印迹状态和表达

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中华医学遗传学杂志 2003年第1期20卷 31-34页

作者：张锋锐何小兵杨玉华谢维东南大学医学院遗传学研究中心病理与病理生理学系

目的　研究胰岛素样生长因子 2 (insulin- like growth factor2 ,IGF2 )基因的印迹状态和表达与大肠癌的关系 ,为研究大肠癌的发生机理提供线索。方法　用逆转录 -聚合酶链反应半定量检测 IGF2的表达量 ,比较其在大肠癌及癌旁组织中有... 详细信息

目的　研究胰岛素样生长因子 2 (insulin- like growth factor2 ,IGF2 )基因的印迹状态和表达与大肠癌的关系 ,为研究大肠癌的发生机理提供线索。方法　用逆转录 -聚合酶链反应半定量检测 IGF2的表达量 ,比较其在大肠癌及癌旁组织中有无差异 ,用限制性片段长度多态检测 IGF2的印迹状态 ,分析印迹状态、表达量与大肠癌的关系。结果　 82 .4 % (2 8/ 34)大肠癌有 IGF2的表达增加 ,IGF2的表达量在肿瘤组织与癌旁组织中差异有显著性 (P<0 .0 1,t=3.0 1)。IGF2在 87.5 % (14 / 16 )大肠癌组织中发生了印迹丢失 ,但其相对应的癌旁组织也有 71.4 % (10 / 14 )存在 IGF2的印迹丢失。结论　IGF2的表达增加是大肠癌发生的相关因素 ,IGF2的印迹丢失可能是大肠癌发生的前期表现。

关键词：大肠癌胰岛素样生长因子2 基因组印迹基因表达

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121例淋巴增殖性疾病的流式细胞学免疫表型分析

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癌症 2004年第8期23卷 955-957页

作者：孙雪梅陈军浩许景艳章宜芬谢品浩范洵楠谢维东南大学基础医学院遗传学研究中心江苏南京210009 南京大学医学院附属鼓楼医院血液科江苏南京210008

背景与目的多参数流式细胞免疫表型分析可提供有力的技术支持,以提高淋巴增殖性疾病诊断的准确率。我们采用流式细胞仪对121例临床怀疑淋巴瘤患者的135份淋巴结、血液、骨髓和脑脊液标本的免疫表型进行分析,观察其在提高诊断准确率和诊... 详细信息

背景与目的多参数流式细胞免疫表型分析可提供有力的技术支持,以提高淋巴增殖性疾病诊断的准确率。我们采用流式细胞仪对121例临床怀疑淋巴瘤患者的135份淋巴结、血液、骨髓和脑脊液标本的免疫表型进行分析,观察其在提高诊断准确率和诊断效率方面的作用。方法所有标本均进行常规形态学、病理学和免疫组化检测,行WHO标准分型;同时对采集的标本制备单个细胞悬液,行多参数流式细胞学检测。比较常规检测和加用流式细胞学免疫表型分析对检测结果的影响。结果①淋巴结常规病理中3例误诊或按照WHO标准无法分型的病例,经流式检测诊断明确。②97例外周血和骨髓标本,FAB分类诊断明确的88例,均按照新的WHO分类标准重新分型;FAB分类中诊断未明的有9例,经流式细胞仪进一步分析,仅有一例按照WHO标准仍未能明确诊断。③脑脊液标本多参数免疫标志,有助于中枢神经系统白血病/淋巴瘤的诊断。结论流式细胞仪免疫表型检测可用于淋巴增殖性疾病的诊断和鉴别诊断,以及微小残留病灶的检测,提高了诊断的准确率。

关键词：非霍奇金淋巴瘤流式细胞学免疫表型诊断

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戊型肝炎病毒第4基因型中国株ORF2编码蛋白的抗原表位分析

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遗传 2007年第5期29卷 637-642页

作者：张红梅戴星孟继鸿赵宇单祥年东南大学医学院病原生物学和免疫学系南京210009 东南大学医学院附属中大医院皮肤科南京210009 东南大学医学院遗传学研究中心南京210009

以戊型肝炎病毒（HEV）第4基因型中国株ORF2编码蛋白p166Chn制备单克隆抗体（McAbs）,同时制备20个N端或C端逐渐截短的p166Chn截短蛋白,与7种不同基因型和亚型的p166蛋白一起,通过ELISA、免疫印迹（Western blot）以及竞争抑制实验对主... 详细信息

以戊型肝炎病毒（HEV）第4基因型中国株ORF2编码蛋白p166Chn制备单克隆抗体（McAbs）,同时制备20个N端或C端逐渐截短的p166Chn截短蛋白,与7种不同基因型和亚型的p166蛋白一起,通过ELISA、免疫印迹（Western blot）以及竞争抑制实验对主要存在于我国的HEV第4基因型毒株进行抗原表位分析。结果发现所制备的McAbs与p166Chn截短蛋白的免疫反应有两种类型,以1G10为代表的McAbs能与N端不短于aa477、C端不短于aa613的截短蛋白反应,其针对的抗原表位是构象依赖型表位,依赖于aa477-aa613肽链区段;而McAb2F11则能与N端不短于aa474、C端不短于aa617的截短蛋白反应,其针对的抗原表位也是构象表位,但需依赖于较长的肽链区段（aa474-aa617）。竞争抑制实验显示两类McAbs互不抑制,进一步证实了所发现的两个抗原表位在空间位置上的不同。更有意义的是,两类McAbs均能与其他不同HEV基因型和亚型来源的p166重组蛋白发生阳性反应,表明这两个抗原表位是HEV基因型共同性的,可以在世界各国分布的不同基因型HEV毒株中诱导交叉免疫。

关键词：戊型肝炎病毒单克隆抗体基因型表位

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基于宏基因组的青海农用沼气池微生物组成和功能分析

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农业机械学报 2020年第6期51卷 326-333页

作者：韩睿陈来生李全辉李屹钟启文朱德锐青海大学农林科学院青海省蔬菜遗传与生理重点实验室西宁810016 青海大学医学院基础医学研究中心西宁810016

以产气性能不同的青海农用沼气池为研究对象,利用宏基因组技术分析了全年温度最高和最低时期污泥样品的微生物组成和功能特征。物种注释显示发酵系统中蕴藏着丰富的微生物种群。在细菌类群中,拟杆菌门、厚壁菌门和变形菌门丰度最高,占... 详细信息

以产气性能不同的青海农用沼气池为研究对象,利用宏基因组技术分析了全年温度最高和最低时期污泥样品的微生物组成和功能特征。物种注释显示发酵系统中蕴藏着丰富的微生物种群。在细菌类群中,拟杆菌门、厚壁菌门和变形菌门丰度最高,占所有菌群相对丰度的72.37%~74.00%,参与关键的发酵作用。在4种样品中,互养菌门(相对丰度1.62%~4.73%)丰度偏低,与沼气产气的变化规律相一致,可能是沼气生产重要的功能类群。在属水平上,优势类群依次是海螺菌属(相对丰度6.75%)、梭菌属(相对丰度4.56%)、密螺旋体属(相对丰度3.60%)和假单胞菌属(相对丰度3.01%)。古菌类群中,产甲烷菌属(相对丰度25.41%~31.65%)是最优势类群,也是最主要的产气功能类群。功能注释表明,产气好比产气差的样品具有更多的有效基因,参与甲烷代谢相关路径的功能基因丰度更高。在样品中,甲烷代谢途径涉及的氢代谢营养型产甲烷菌参与CO2还原反应,所有代谢通路完整,且产气好的样品功能酶基因丰度趋高。研究结果表明,在青海农用沼气发酵系统中,甲烷产生的途径主要依赖于H2氧化/CO2还原的合成。

关键词：农用沼气池宏基因组微生物组成功能特征甲烷代谢青海省

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