检索结果-内蒙古大学图书馆

利用Label-free技术筛选MC3T3-E1细胞中miR-381-3p介导的靶蛋白和差异蛋白生物学功能分析

中国骨质疏松杂志 2022年第2期28卷 192-198页

作者：陈锦成朱国涛秦晓飞陈彦丞罗骏余博飞吴宜璟徐杰福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建福州350122 福建省立医院骨二科福建医科大学福建福州350001

目的比较小鼠前成骨细胞(MC3T3-E1)实验组(MC3-E1-in)与对照组(MC3-E1-NC-in)的蛋白质组学差异水平,以初步探究miR-381-3p所介导的靶蛋白和相关信号通路以及差异蛋白生物学功能分析。方法通过细胞慢病毒转染构建实验模型,分为实验组与... 详细信息

目的比较小鼠前成骨细胞(MC3T3-E1)实验组(MC3-E1-in)与对照组(MC3-E1-NC-in)的蛋白质组学差异水平,以初步探究miR-381-3p所介导的靶蛋白和相关信号通路以及差异蛋白生物学功能分析。方法通过细胞慢病毒转染构建实验模型,分为实验组与对照组;实时荧光定量PCR验证miR-381-3p在细胞中的转染效率;收集细胞样品并采用非标记定量蛋白质组学技术进行鉴定、筛选与分析;进行组间比较得到差异蛋白(differentially expressed proteins,DEPs)表达结果,绘制火山图与表达聚类分析图以及功能富集分析差异蛋白质谱,重点分析基因本体论(geneontology,GO)富集结果、KEGG富集结果以及string-db软件预测可能的蛋白质-蛋白质相互作用结果,并对差异显著的蛋白质进行生物信息学整合分析。结果共鉴定到4764种差异表达蛋白,其中527种差异显著并具有统计学意义,表达上调的有357种,有170种则是表达下调;GO富集结果分析显示差异蛋白主要参与生物过程的跨膜转运、蛋白水解、细胞内蛋白质转运,还参与了细胞骨架、内质网、线粒体的分子功能过程以及参与钙离子结合、蛋白激酶活性、RNA结合等细胞组分过程。结论己糖激酶2、驱动蛋白样蛋白22、cAMP调节的磷酸化蛋白19和脂滴包被蛋白2等差异蛋白可能参miR-381-3p调控肌肉-骨骼系统代谢疾病的发生发展过程。

关键词：肌少-骨质疏松症 MC3T3-E1细胞样品非标记定量蛋白质组学生物信息学分析

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膝骨性关节炎女性患者初学太极云手动作的下肢生物力学特征

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医用生物力学 2025年第2期40卷 351-357页

作者：林紫玲熊凤侯美金马晔刘本科陈博王芗斌福建中医药大学康复医学院福州350122 福建省中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福州350122 南昌大学第一附属医院康复科南昌330000 福建中医药大学康复产业研究院福州350122 宁波大学体育学院大健康研究院浙江宁波315211 同济大学附属养志康复医院物理治疗科上海200003 福州市第二人民医院康复科福州350122

目的观察膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者和健康人群在练习太极云手初学阶段的下肢动态稳定性和运动学、动力学特征差异。方法招募30名太极初学者,包括15名KOA患者和15名健康对照组,在太极拳专家的指导下进行2 h太极云手练习... 详细信息

目的观察膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者和健康人群在练习太极云手初学阶段的下肢动态稳定性和运动学、动力学特征差异。方法招募30名太极初学者,包括15名KOA患者和15名健康对照组,在太极拳专家的指导下进行2 h太极云手练习。采用运动捕捉系统和三维测力台,采集并计算云手运动过程中左侧下肢的动态稳定性指标以及运动学和动力学指标。结果与健康对照组相比,KOA患者在云手动作中表现出更小的内外侧倾斜角,踝关节背屈角度的均值和峰值均减少,髋关节内收角度峰值减少,而膝关节屈曲峰值力矩增大(P<0.05)。结论KOA患者采用了适应性的姿势策略以维持太极云手运动中的横向稳定性,但在运动初学阶段应建议采用综合训练方案以减少下肢屈曲时的关节负荷。

关键词：膝关节骨关节炎太极云手动态稳定性运动学动力学

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太极拳练习伴膝关节疼痛者下肢生物力学表现的三维运动分析

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中国组织工程研究 2023年第4期27卷 520-526页

作者：李雅萍刘红高真陈晓琳黄武杰江征福建中医药大学康复医学院福建省福州市350122 福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建省福州市350122 福建中医药大学第一临床医学院福建省福州市350122 深圳市儿童医院康复科广东省深圳市518038

背景:太极拳练习出现膝关节疼痛者不在少数,而目前关于太极拳练习伴膝关节疼痛者行拳特征的生物力学研究较少。目的:运用三维运动分析系统比较太极拳练习伴膝关节疼痛者与健康练习者在太极拳习练时下肢生物力学的差异。方法:选择太极拳... 详细信息

背景:太极拳练习出现膝关节疼痛者不在少数,而目前关于太极拳练习伴膝关节疼痛者行拳特征的生物力学研究较少。目的:运用三维运动分析系统比较太极拳练习伴膝关节疼痛者与健康练习者在太极拳习练时下肢生物力学的差异。方法:选择太极拳练习伴膝关节疼痛者6例为试验组,健康练习者6例为对照组。采用三维运动分析系统,记录两组受试者进行“搂膝拗步”时的运动学和动力学,比较在地面反作用力特征时刻下的动作特征。地面反作用力特征时刻包括左、右搂膝拗步推进期波峰时刻(T1、T5),右搂膝拗步后坐转向期波谷时刻(T2),右搂膝拗步单足支撑期第一、第二波峰时刻(T3、T4)。结果与结论:①运动学参数:两组的步长、步宽和质心高度的差异无显著性意义(P>0.05);与对照组相比,试验组在T1和T5时,后支撑腿髋外展角度更大(P<0.05);T2、T3的左膝关节及T5的右膝关节内收(P<0.05);在T2和T4的右膝关节外展角度更小(P<0.05);②动力学参数:与对照组相比,试验组在T3、T4和T5的垂直轴地面反作用力更小(P<0.05);在T1和T5的前支撑腿髋后伸力矩更小(P<0.05);在T5的前支撑腿伴更小的髋外旋力矩(P<0.05);在T1时左膝关节的总支撑力矩贡献度更大(P<0.01);③结果表明,相对于健康练习者,练习时伴膝关节疼痛者减少了对地面的作用力;两组训练者运动学动力学的不同主要集中在髋关节和膝关节,伴膝关节疼痛练习者的膝关节呈较大的内收,且弓步推进期的前支撑腿表现出髋关节伸展旋转不足、膝关节总支撑力矩贡献度更大;伴膝关节疼痛的训练者进行太极拳再训练时,需考虑从练习者髋关节和膝关节的运动模式进行调整。

关键词：太极拳搂膝拗步膝关节疼痛关节角度关节力矩生物力学

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化湿补肾法对膝骨关节炎大鼠软骨修复机制的研究

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北京中医药大学学报 2021年第2期44卷 152-158页

作者：葛海雅张应生卢文亚耿秋东秦鋑育刘东波王和鸣李楠福建中医药大学中医学院福建350122 中医骨伤及运动康复教育部重点实验室

目的探讨化湿补肾法治疗膝骨关节炎(KOA)的机制。方法将48只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、化湿定痛汤组、龟鹿二仙胶组、化湿补肾法组,采用木瓜蛋白酶关节腔注射建立膝骨关节炎模型,造模成功后各组大鼠灌胃相应药物,化湿定痛汤... 详细信息

目的探讨化湿补肾法治疗膝骨关节炎(KOA)的机制。方法将48只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、化湿定痛汤组、龟鹿二仙胶组、化湿补肾法组,采用木瓜蛋白酶关节腔注射建立膝骨关节炎模型,造模成功后各组大鼠灌胃相应药物,化湿定痛汤组灌胃化湿定痛汤4.68 g/(kg·d),龟鹿二仙胶组灌胃龟鹿二仙胶汤2.7 g/(kg·d),化湿补肾法组灌胃化湿补肾法中药7.38 g/(kg·d),连续灌胃28 d,于第28天对大鼠进行取材,取右侧股骨行HE染色观察软骨形态,取右侧胫骨平台滑膜、关节液用ELISA检测前列腺素-2(PGE-2)、环氧化和酶-2(COX-2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,取右胫骨平台软骨用qPCR检测p38、p53、Ⅱ型胶原的表达。结果 HE染色形态结果表明化湿补肾法组、龟鹿二仙胶组、化湿定痛汤组均优于模型组。与龟鹿二仙胶组相比,化湿补肾法组PGE-2、COX-2、IL-1β、TNF-α表达量下降(P<0.05),软骨的p38、p53表达降低(P<0.05),Ⅱ型胶原表达升高(P<0.05)。结论化湿补肾法可有效减轻滑膜和关节液中炎症因子表达,增加软骨细胞合成代谢,抑制软骨细胞凋亡,从而促进关节软骨的修复,延缓KOA的进程。

关键词：化湿补肾法化湿定痛汤龟鹿二仙胶膝骨关节炎大鼠

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荣筋拈痛方通过LncRNA H19/miR-675-3p促进软骨细胞增殖防治膝骨关节炎

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江西中医药 2025年第1期56卷 53-58页

作者：罗清清郑若曦戴雨婷吴广文付长龙陈俊中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福州350122 福建中医药大学中医学院福州350122 福建中医药大学中西医结合学院福州350122

目的:探究荣筋拈痛方通过调控LncRNA H19/miR-675-3p对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞基质代谢及增殖的影响。方法:30只大鼠分为空白血清组和荣筋拈痛方含药血清组,每组15只,分别给予等量生理盐水和荣筋拈痛方药液灌胃,制备空白血清和荣... 详细信息

目的:探究荣筋拈痛方通过调控LncRNA H19/miR-675-3p对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞基质代谢及增殖的影响。方法:30只大鼠分为空白血清组和荣筋拈痛方含药血清组,每组15只,分别给予等量生理盐水和荣筋拈痛方药液灌胃,制备空白血清和荣筋拈痛方含药血清。提取原代软骨细胞并采用Ⅱ型胶原免疫细胞化学法和甲苯胺蓝染色进行鉴定。采用IL-1β10 ng/mL干预24 h构建软骨细胞退变模型,分为空白组、模型组和荣筋拈痛方组。观察各组软骨细胞中lncRNA H19、miR-675-3p、CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA基因相对表达水平,CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA蛋白表达情况,EdU细胞增殖试剂盒检测各组软骨细胞增殖情况。结果:原代软骨细胞成簇生长,胞核清晰可辨,胞浆丰富,软骨细胞活力随传代次数的增加而下降。软骨细胞细胞外基质中的CollagenⅡ被染成棕黄色,苏木素将细胞核染成蓝色;甲苯胺蓝染色后细胞整体呈现蓝紫色。与空白组比较,模型组中LncRNA H19、miR-675-3p基因相对表达水平均下降(P<0.05);与模型组比较,荣筋拈痛方组LncRNA H19、miR-675-3p基因相对表达水平上升(P<0.05)。与空白组比较,模型组CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA基因和蛋白相对表达水平均下降(P<0.05);与模型组比较,荣筋拈痛方组CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA基因和蛋白相对表达水平均上升(P<0.05)。与空白组比较,模型组中软骨细胞EdU阳性细胞率降低(P<0.05);与模型组比较,荣筋拈痛方组EdU阳性细胞率上升(P<0.05)。结论:荣筋拈痛方可通过上调LncRNA H19/miR-675-3p促进CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA表达,抑制细胞外基质降解,促进软骨细胞增殖,起到治疗KOA的作用。

关键词：膝骨关节炎荣筋拈痛方 LncRNA H19 miR-675-3p 软骨细胞增殖

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基于LXRs/NF-κB信号通路对A型滑膜细胞的调控探讨壮骨健膝方的作用机制

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中国中西医结合杂志 2022年第9期42卷 1087-1094页

作者：陈鹏郭洁梅肖艳林震张英杰张鹏李保林苏友新福建中医药大学康复医学院福州350122 福建中医药大学中医学院福州350122 中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福州350122 福建卫生职业技术学院医学院福州350101

目的观察壮骨健膝方含药血清对脂多糖(LPS)诱导的兔A型滑膜细胞肝X受体(LXRs)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨壮骨健膝方治疗膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症的机制。方法制备壮骨健膝方含药血清并采用超高效液相色谱质谱联用技术(UPLC... 详细信息

目的观察壮骨健膝方含药血清对脂多糖(LPS)诱导的兔A型滑膜细胞肝X受体(LXRs)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨壮骨健膝方治疗膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症的机制。方法制备壮骨健膝方含药血清并采用超高效液相色谱质谱联用技术(UPLC-MS/MS)进行质量控制(龙胆苦苷885 ng/mL、阿魏酸185 ng/mL)。将兔A型滑膜细胞随机分为空白组和LPS组,LPS组经LPS诱导后建立炎症细胞模型,模型鉴定成功后随机分为模型组、壮骨健膝方组、LXRα抑制剂组、核受体辅助抑制因子(N-CoR)抑制剂组,分别予以10%空白血清、10%含药血清、10%含药血清+LXRα抑制剂、10%含药血清+N-CoR抑制剂,空白组予10%空白血清干预。干预24 h后,收集各组细胞及上清液,Western Blot、RT-qPCR检测各组细胞中LXRα、N-CoR、P50、P65蛋白及m RNA的表达,ELISA检测各组上清液中IL-1β、TNF-α、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及MMP-13含量。结果与空白组比较,模型组P50、P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均升高(P<0.01),LXRα、N-CoR蛋白与mRNA表达下降(P<0.01)。与模型组比较,壮骨健膝方组P50和P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均降低(P<0.01),LXRα、N-CoR蛋白与mRNA表达升高(P<0.01);LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组P50、P65蛋白与mRNA表达及IL-1β、TNF-α、MMP-3、MMP-13含量均降低(P<0.01,P<0.05)。与壮骨健膝方组比较,LXRα抑制剂组及N-CoR抑制剂组LXRα、N-CoR蛋白及mRNA表达下降(P<0.01),P50、P65蛋白及mRNA表达升高(P<0.01,P<0.05),两组IL-1β、TNF-α、MMP-3及MMP-13含量升高(P<0.01,P<0.05)。结论壮骨健膝方可通过上调LXRα和N-CoR蛋白及mRNA表达,下调P50、P65蛋白及mRNA表达,从而抑制LXRs/NF-κB信号通路的传导,减少下游炎症相关指标IL-1β、TNF-α、MMP-3及MMP-13的分泌,最终达到控制膝骨关节炎滑膜炎症反应的作用。

关键词：壮骨健膝方 A型滑膜细胞 LXRs/NF-κB信号通路膝骨关节炎滑膜炎症

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基于《黄帝内经》探讨骨骼肌归属范畴

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北京中医药大学学报 2021年第6期44卷 491-495页

作者：赖宇阳李楠福建中医药大学中医学院福建350122 中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建350122

筋骨并重是中医骨伤科中指导诊治的重要理念。然而,时至今日,对于筋的解剖实质尚未达成共识,争议点之一就在对骨骼肌的归属认识上。因骨骼肌具有运动功能所以多被认为归属筋的范畴,但这就与《黄帝内经》"五体"中的肉相冲突了... 详细信息

筋骨并重是中医骨伤科中指导诊治的重要理念。然而,时至今日,对于筋的解剖实质尚未达成共识,争议点之一就在对骨骼肌的归属认识上。因骨骼肌具有运动功能所以多被认为归属筋的范畴,但这就与《黄帝内经》"五体"中的肉相冲突了。因此,首先以《黄帝内经》中关于肉与筋的生理、病理描述为依据;其次从疾病诊治上来探讨骨骼肌的归属问题;最后,提出骨骼肌可分属筋、肉范畴,其中骨骼肌的形态偏重肉的范畴,骨骼肌的运动功能偏重筋的范畴。希望此认识可作为筋骨理论的补充并应用于临床实践。

关键词：黄帝内经骨骼肌筋肉

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基于AMPK/mTOR/ULK-1信号通路探讨龟鹿二仙胶含药血清对白细胞介素-1β诱导的膝骨关节炎小鼠软骨细胞模型自噬和凋亡的影响及作用机制

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中医正骨 2024年

作者：沈默金郑珍萍吴伟欣杨美鑫顾富城耿秋东王和鸣李楠福建中医药大学中医学院中医骨伤及运动康复教育部重点实验室

目的:探讨龟鹿二仙胶含药血清对白细胞介素-1β诱导的膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）小鼠软骨细胞模型自噬和凋亡的影响及作用机制。方法:将10只SD大鼠随机分为龟鹿二仙胶含药血清制备组和空白血清制备组,分别给予龟鹿二仙胶药... 详细信息

目的:探讨龟鹿二仙胶含药血清对白细胞介素-1β诱导的膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）小鼠软骨细胞模型自噬和凋亡的影响及作用机制。方法:将10只SD大鼠随机分为龟鹿二仙胶含药血清制备组和空白血清制备组,分别给予龟鹿二仙胶药液和生理盐水灌胃,连续灌胃1周后,采集腹主动脉血,制备龟鹿二仙胶含药血清和空白血清。取培养至第2代的C57BL/6小鼠膝关节软骨细胞,分为空白血清组、模型组、龟鹿二仙胶含药血清组。模型组、龟鹿二仙胶含药血清组加入终浓度为10 ng·mL-1的白细胞介素-1β,诱导培养24 h后,空白血清组、模型组加入10%空白血清,龟鹿二仙胶含药血清组加入10%龟鹿二仙胶含药血清,继续培养24 h。采用流式细胞分析仪检测各组软骨细胞凋亡率,采用电子显微镜观察各组软骨细胞自噬小体,分别采用实时定量PCR和蛋白质免疫印迹法检测AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）、UNC-51样激酶-1 （UNC-51-like kinase-1,ULK-1）、自噬相关蛋白5 （autophagy related protein 5,ATG5）、轻链蛋白3B（light chain 3B,LC3B）、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-13、趋化因子配体2（chemokine ligand 2,CCL2）的mRNA和蛋白表达水平。结果:（1）软骨细胞凋亡率检测结果。模型组软骨细胞凋亡率高于空白血清组（P=0.000）,龟鹿二仙胶含药血清组软骨细胞凋亡率低于模型组（P=0.000）。（2）软骨细胞自噬小体观察结果。空白血清组可见双层膜封闭的球状自噬小体,模型组自噬小体数量较空白血清组减少,龟鹿二仙胶含药血清组自噬小体数量较模型组增加。（3）软骨细胞自噬和凋亡相关基因mRNA和蛋白表达水平检测结果。模型组软骨细胞AMPK、ULK-1、ATG5、LC3B、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均低于空白血清组（P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.002,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000）,mTOR、Bax、MMP-13、CCL2的mRNA和蛋白表达水平均高于空白血清组（P=0.002,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.004,P=0.000,P=0.000,P=0.000）;龟鹿二仙胶含药血清组软骨细胞AMPK、ULK-1、ATG5、LC3B、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均高于模型组（P=0.000,P=0.003,P=0.001,P=0.001,P=0.001;P=0.020,P=0.002,P=0.000,P=0.008,P=0.004）,mTOR、Bax、MMP-13、CCL2的mRNA和蛋白表达水平均低于模型组（P=0.008,P=0.001,P=0.000,P=0.000;P=0.040,P=0.000,P=0.001,P=0.000）。结论:龟鹿二仙胶含药血清能够增强KOA软骨细胞自噬,抑制其凋亡与细胞外基质降解,且龟鹿二仙胶含药血清可能通过激活AMPK/mTOR/ULK-1信号通路发挥作用。

关键词：骨关节炎,膝龟鹿二仙胶软骨细胞自吞噬细胞凋亡信号传导 TOR丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶小鼠

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基于Wnt3a/β-catenin信号通路探讨针刀对膝骨关节炎兔股直肌纤维化的影响

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中华中医药杂志 2022年第1期37卷 136-140页

作者：刘晶林巧璇卢莉铭郭泽兴刘洪张良志赵红佳修忠标福建中医药大学附属人民医院福州350004 福建中医药大学中医学院福州350122 中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福州350122 福建省骨伤研究所福州350004

目的:观察针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔股直肌Wnt3a/β-catenin信号通路调控作用及纤维化的影响,探讨针刀治疗KOA的可能作用机制。方法:24只健康雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组,每组8只。改良Videman法左后肢伸直位石膏固... 详细信息

目的:观察针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔股直肌Wnt3a/β-catenin信号通路调控作用及纤维化的影响,探讨针刀治疗KOA的可能作用机制。方法:24只健康雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组,每组8只。改良Videman法左后肢伸直位石膏固定制动6周复制KOA模型,Lequesne MG膝关节级别评分、X线和MRI确认造模成功后,采用经筋理论指导下在股四头肌鹤顶次、髌外上、髌内上经筋病灶点上行针刀松解治疗,每周1次,共治疗4次。采用Masson染色观察股直肌纤维化改变,Real-time PCR和Western Blot检测股直肌Wnt3a、β-catenin、TGF-β、CTGF、ColⅠmRNA和蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组股直肌纤维化明显,胶原容积分数显著增加(P<0.05),Wnt3a、β-catenin、TGF-β、CTGF、ColⅠmRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,针刀组股直肌纤维化减轻,胶原容积分数显著减小(P<0.05),Wnt3a、β-catenin、TGF-β、CTGF、ColⅠmRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:基于经筋理论针刀松解股四头肌经筋病灶点能通过调节Wnt3a/β-catenin信号通路,减轻KOA兔股直肌纤维化程度,这可能是针刀治疗KOA的作用机制之一。

关键词：膝骨关节炎针刀经筋理论骨骼肌纤维化 Wnt3a/β-catenin信号通路机制

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荣筋拈痛方调控滑膜巨噬细胞极化治疗膝骨关节炎性滑膜炎的网络药理学分析及验证

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中药新药与临床药理 2025年第4期36卷 552-563页

作者：王如意张婷李璐陈楠郑若曦陈俊吴广文中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建福州350122 福建中医药大学中医学院福建福州350122

目的利用网络药理学分析预测荣筋拈痛方调控巨噬细胞M1型极化治疗膝骨关节炎性滑膜炎的有效成分、潜在作用靶点及核心信号通路,再通过体内外实验验证。方法从TCMSP数据库中筛选荣筋拈痛方的功能成分,检索STITCH、Open Targets Platform... 详细信息

目的利用网络药理学分析预测荣筋拈痛方调控巨噬细胞M1型极化治疗膝骨关节炎性滑膜炎的有效成分、潜在作用靶点及核心信号通路,再通过体内外实验验证。方法从TCMSP数据库中筛选荣筋拈痛方的功能成分,检索STITCH、Open Targets Platform和DrugBank数据库,通过基因芯片分析筛选荣筋拈痛方调控滑膜巨噬细胞极化治疗膝骨关节炎的潜在靶点和信号通路。运用免疫荧光、Western Blot和ELISA等方法进行体内外实验验证。结果荣筋拈痛方调控巨噬细胞极化治疗膝骨关节炎的潜在靶点共36个。PPI网络及基因富集分析表明荣筋拈痛方可能是通过抑制NF-κB信号通路调控巨噬细胞的极化,从而对膝骨关节炎性滑膜炎起治疗作用。动物实验中,HE结果显示,与空白组比较,模型组小鼠滑膜较空白组显著增厚、滑膜下细胞的浸润增加、血管翳的增生显著;与模型组比较,治疗组及对照组均有滑膜厚度变薄,滑膜内面浸润细胞减少及增生血管翳减少。ELISA结果显示,与空白组比较,模型组滑膜组织中TNF-α含量明显增加(P<0.01);与模型组比较,治疗组TNF-α含量显著下降(P<0.01)。Western Blot结果显示,与空白组比较,模型组p-NF-κB p65显著激活(P<0.01),治疗组可明显抑制p-NF-κB p65表达(P<0.05)。体外实验中,免疫荧光结果显示,与空白组比较,模型组的p-NF-κB p65、CD16/32蛋白表达明显增强;与模型组比较,治疗组和抑制剂组的p-NF-κB p65、CD16/32蛋白表达明显减弱。Western Blot结果显示,与空白组比较,模型组TNF-α蛋白表达增加(P<0.01);与模型组比较,治疗组及抑制剂组可降低M1型巨噬细胞中TNF-α蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组可显著激活巨噬细胞NF-κB p65磷酸化(P<0.01);治疗组与抑制剂组均对NF-κB p65总蛋白表达虽没有明显影响,但与模型组比较,治疗组(P<0.05)及抑制剂组(P<0.01)可明显降低巨噬细胞NF-κB p65的磷酸化。结论荣筋拈痛方可能通过NF-κB信号通路调控滑膜巨噬细胞极化治疗膝骨关节炎性滑膜炎。

关键词：膝骨关节炎滑膜炎巨噬细胞极化网络药理学荣筋拈痛方 R语言实验验证小鼠

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