检索结果-内蒙古大学图书馆

中国应用生理学杂志 2013年第2期29卷 182-186,192页

作者：李先伟杜洁李元建皖南医学院药理学教研室安徽芜湖241002 中南大学药学院药理学系湖南长沙410078

目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)对低氧性肺动脉高压(PAH)大鼠肺动脉胶原沉积的影响,以探讨CGRP对低氧性PAH血管重构的作用及机制。方法:大鼠适应性喂养一周,随机分为3组:常氧组、低氧组及低氧+辣椒素组。低氧诱导PAH大鼠模型。低氧+... 详细信息

目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)对低氧性肺动脉高压(PAH)大鼠肺动脉胶原沉积的影响,以探讨CGRP对低氧性PAH血管重构的作用及机制。方法:大鼠适应性喂养一周,随机分为3组:常氧组、低氧组及低氧+辣椒素组。低氧诱导PAH大鼠模型。低氧+辣椒素组低氧前4 d大鼠皮下注射辣椒素(50 mg/(kg.d)),耗竭内源性CGRP。低氧(3%O2)刺激大鼠原代肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖,BrdU法检测细胞增殖。Rea-l time PCR和(或)Western blot检测CGRP、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、collagenⅠ、collagenⅢmRNA和(或)蛋白表达。结果:与常氧组相比,低氧组右心室收缩压(RVSP)、平均肺动脉压(mPAP)及肺动脉collagenⅠ、collagenⅢ和p-ERK1/2的表达明显升高,而血浆CGRP含量及肺组织CGRP的表达明显降低。HE和Masson染色结果显示低氧组大鼠肺血管中膜增厚,肺动脉胶原沉积明显增多。而用辣椒素预先耗竭内源性CGRP后能够加重低氧诱导的上述改变。同时低氧能够促进PASMCs的增殖,显著上调p-ERK1/2、collagenⅠ及collagenⅢ的表达。外源性CGRP可剂量依赖性的抑制低氧诱导的细胞增殖,明显抑制p-ERK1/2、CollagenⅠ及CollagenⅢ的表达,而CGRP的这些作用可以被CGRP阻断剂CGRP8-37所取消。结论:CGRP能够抑制低氧诱导的PAH血管重构,其机制可能与抑制ERK1/2的磷酸化,降低肺动脉胶原异常沉积有关。

关键词：降钙素基因相关肽肺动脉高压肺动脉平滑肌细胞胶原细胞外信号调节蛋白激酶1 2

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热休克蛋白抑制过氧化氢所致C_2C_(12)细胞凋亡的机制

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中南大学学报（医学版） 2004年第1期29卷 6-10页

作者：肖卫民蒋碧梅石永忠刘梅冬唐道林肖献忠中南大学湘雅医学院病理生理学教研室长沙410078

目的 :探讨热休克蛋白抑制活性氧所致C2 C12 细胞凋亡的分子机制。方法 :采用热休克对体外培养的C2 C12 细胞进行预处理 ,以诱导热休克蛋白的表达 ;Hoechst332 5 8染色观察过氧化氢 (H2 O2 )所致的C2 C12 细胞凋亡 ;凋亡蛋白酶活性检测... 详细信息

目的 :探讨热休克蛋白抑制活性氧所致C2 C12 细胞凋亡的分子机制。方法 :采用热休克对体外培养的C2 C12 细胞进行预处理 ,以诱导热休克蛋白的表达 ;Hoechst332 5 8染色观察过氧化氢 (H2 O2 )所致的C2 C12 细胞凋亡 ;凋亡蛋白酶活性检测试剂盒和Western blotting检测凋亡蛋白酶 3,8,9的活性 ;细胞组分分离后Western blotting检测细胞色素C的释放。结果 :热休克预处理导致C2 C12 细胞热休克蛋白 70 ,αB 晶状体蛋白表达明显增加 ,同时显著抑制过氧化氢所致细胞色素C从线粒体释放 ,抑制凋亡蛋白酶 3,8,9活化及随后的C2 C12 细胞凋亡。结论 :热休克蛋白通过干预线粒体信号通路与死亡受体通路的活化抑制过氧化氢导致的C2 C12 细胞凋亡。

关键词：热休克蛋白过氧化氢 C2C12细胞细胞凋亡线粒体信号通路心血管疾病凋亡蛋白酶

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P-MAPK,cyclinD1和p53蛋白有骨肉瘤中的表达及其相关性

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湖南医科大学学报 2001年第4期26卷 325-327页

作者：胡建中冯德云程瑞雪李康华中南大学湘雅医学院骨科长沙410008 中南大学湘雅医学院病理学教研室长沙410078

目的 :检测p MAPK ,cyclinD1和p5 3蛋白在骨肉瘤中的表达 ,并探讨其相关性。方法 :选用骨肉瘤标本5 8例 ,骨样骨瘤标本 14例 ,用SP免疫组织化学法检测标本中p MAPK ,cyclinD1和p5 3的表达情况 ,然后分析其相关性。结果 :5 8例骨肉瘤中p ... 详细信息

目的 :检测p MAPK ,cyclinD1和p5 3蛋白在骨肉瘤中的表达 ,并探讨其相关性。方法 :选用骨肉瘤标本5 8例 ,骨样骨瘤标本 14例 ,用SP免疫组织化学法检测标本中p MAPK ,cyclinD1和p5 3的表达情况 ,然后分析其相关性。结果 :5 8例骨肉瘤中p MAPK ,cyclinD1和p5 3蛋白的阳性表达率分别为 2 1 4% (3/ 14) ,2 1 4% (3/ 14)和 7 1% (1/14) ;三者的阳性表达率和阳性强度均以骨肉瘤中为高 (P <0 0 1) ;骨肉瘤中p MAPK与cyclinD1表达呈明显相关 (P<0 0 1) ,而与p5 3蛋白表达无明显相关性 (P >0 0 5 )。结论 :①MAPK磷酸化可能是cyclinD1激活原因之一 ,并在骨肉瘤发生中起重要作用。p5 3基因突变在骨肉瘤发生中可能不是通过MAPK信号转递通路起作用。②免疫组织化学检测法检测p MAPK可作为临床骨肉瘤与良性骨肿瘤诊断及鉴别诊断的辅助指标之一。

关键词：骨肉瘤骨样骨瘤丝裂素活化蛋白激酶细胞周期素D1 p53基因信号传导 P-MAPK cyclin D1

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急性淋巴细胞性白血病患儿血清高迁移率族蛋白1检测及其诱导白血病细胞分泌肿瘤坏死因子α的实验研究

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中华儿科杂志 2007年第5期45卷 329-333页

作者：康睿唐道林曹励之俞燕张国元肖献忠中南大学湘雅医院儿科长沙410008 中南大学湘雅医学院病理生理学教研室和休克研究室

目的探讨血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平与儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)发病的关系;研究 HMGB1对白血病细胞分泌肿瘤坏死因子 d(TNF-α)的影响及其与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的关系。方法采用 Western blot 方法检测正常、A... 详细信息

目的探讨血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平与儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)发病的关系;研究 HMGB1对白血病细胞分泌肿瘤坏死因子 d(TNF-α)的影响及其与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的关系。方法采用 Western blot 方法检测正常、ALL 患儿初治期、完全缓解期各15例血清 HMGB1水平;制备 HMGB1重组蛋白刺激人 K562白血病细胞损伤模型,采用ELISA 和 Western blot 方法检测 HMGB1对 TNF-α分泌及其 p38、c-Jun 氨基末端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶(ERK)MAPK 信号通路活化的影响;采用 ELISA 方法检测 MAPK 抑制剂对 HMGB1所致TNF-α分泌的影响。结果初治 ALL 患者血清 HMGB1[(43.78±4.62)μg/L]显著高于正常对照组[(0.60±O.48)μg/L,P<0.01]和缓解组[(0.89±0.62)μg/L,P<0.01],正常对照组与缓解组比较差异无统计学意义(P>0.05);HMGB1以时效和量效依赖性方式诱导 K562细胞分泌 TNF-α并且促进了 p38、JNK、ERK 蛋白发生磷酸化;p38抑制剂(sB203580)、JNK 抑制剂(SP600125)和 MEK 抑制剂(PD98059)抑制了 HMGB1诱导 K562细胞 TNF-α的分泌。结论血清 HMGB1水平与儿童 ALL 发病、发展密切相关;HMGB1通过活化 MAPK 信号通路促进白血病细胞分泌 TNF-α参与肿瘤细胞免疫调节。

关键词： HMGB蛋白质类肿瘤坏死因子有丝分裂素激活蛋白激酶类白血病淋巴细胞急性 K562细胞儿童

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巴戟天醇提取物促大鼠缺血心肌治疗性血管生成的实验研究

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中国药理学通报 2010年第3期26卷 367-371页

作者：杨景柯冯国清于爽胡香杰中南大学湘雅二医院血液科湖南长沙410011 郑州大学基础医学院药理学教研室河南郑州450052

目的探讨巴戟天糖链(MOO)对急性心肌梗死(AMI)大鼠缺血心肌治疗性血管生成的影响及其机制。方法♂Wistar大鼠,结扎冠状动脉左前降支,成功制成AMI模型40只,随机分为MOO小、中、大剂量组、麝香保心丸组及模型组,每组8只。另取10只建立假... 详细信息

目的探讨巴戟天糖链(MOO)对急性心肌梗死(AMI)大鼠缺血心肌治疗性血管生成的影响及其机制。方法♂Wistar大鼠,结扎冠状动脉左前降支,成功制成AMI模型40只,随机分为MOO小、中、大剂量组、麝香保心丸组及模型组,每组8只。另取10只建立假手术组。药物治疗组分别灌胃给予巴戟天醇提物水溶性部分(0.7、1.4、***-1.d-1)及麝香保心丸悬浊液(***-1.d-1),其余两组灌胃给予等量蒸馏水。连续灌胃6wk后处死大鼠,心肌取材,应用免疫组织化学法检测大鼠缺血心肌Ⅷ因子及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growthfactor,bFGF)蛋白表达情况;计算微血管密度(microvessecdensity,MVD),用图像分析软件测定VEGF及bFGF表达灰度值,并进行半定量分析。结果与模型组相比,MOO中、大剂量组能增加缺血心肌MVD及VEGF、bFGF灰度值(P<0.05),但作用弱于麝香保心丸组(P<0.05);MOO3个剂量组之间MVD差异均有显著性(P<0.05);MOO3个剂量组之间VEGF灰度值差异均有显著性(P<0.05);MOO中、大剂量组bFGF灰度值与小剂量组相比差异有显著性(P<0.05)。结论MOO可促进AMI后大鼠缺血心肌的血管生成,其机制可能与上调缺血心肌VEGF、bFGF蛋白的表达有关。

关键词：巴戟天糖链血管生成心肌梗死大鼠血管内皮细胞生长因子碱性成纤维细胞生长因子

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参附注射液对肺组织表面活性物质合成的影响

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湖南医科大学学报 2003年第2期28卷 137-140页

作者：罗自强冯丹丹岳少杰张长青孙秀泓中南大学湘雅医学院生理学教研室长沙410078 中南大学湘雅医院儿科教研室长沙410008

目的 :探讨参附注射液对肺表面活性物质合成 (PS)的影响。方法 :采用无血清成年大鼠肺组织培养 ,液体闪烁计数测定肺组织 [3H]胆碱掺入量 ,化学定磷法及薄层层析法测定总磷脂 (TPL)及磷脂酰胆碱 (PC)。结果 :参附注射液以剂量依赖方式... 详细信息

目的 :探讨参附注射液对肺表面活性物质合成 (PS)的影响。方法 :采用无血清成年大鼠肺组织培养 ,液体闪烁计数测定肺组织 [3H]胆碱掺入量 ,化学定磷法及薄层层析法测定总磷脂 (TPL)及磷脂酰胆碱 (PC)。结果 :参附注射液以剂量依赖方式促进肺组织 [3H]胆碱的掺入 ,并提高肺组织总磷脂、PC的含量及PC/TPL比值 ,该效应可被蛋白激酶C(PKC)抑制剂H7和钙调蛋白抑制剂W7阻断。人参总皂甙及单体Rb1,Rg1均可促进 [3H]胆碱的掺入。结论 :参附注射液可以促进PS的合成 ,其效应有赖于PKC及钙调蛋白的介导 ,人参皂甙是参附注射液促PS合成的有效成分之一。

关键词：参附注射液肺组织表面活性物质合成影响人参皂甙脂酰胆碱

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小鼠子宫珠蛋白结合蛋白的生物信息学分析及其多克隆抗体制备

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生理学报 2013年第2期65卷 217-223页

作者：李晨刘伟汉建忠冯丹丹刘惠君罗自强中南大学湘雅医学院生理学系长沙410078 长治医学院生理学教研室长治046000

本文旨在制备小鼠子宫珠蛋白结合蛋白(mouse uteroglo binbinding protein,mUGBP)多克隆抗体,为后续研究工作奠定基础。通过生物信息学分析方法预测mUGBP蛋白的跨膜结构、理化特性、疏水性等因素,设计出两段多肽,分别与匙孔戚血蓝蛋白(k... 详细信息

本文旨在制备小鼠子宫珠蛋白结合蛋白(mouse uteroglo binbinding protein,mUGBP)多克隆抗体,为后续研究工作奠定基础。通过生物信息学分析方法预测mUGBP蛋白的跨膜结构、理化特性、疏水性等因素,设计出两段多肽,分别与匙孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)交联后免疫新西兰兔,结果显示其中一个含13个氨基酸残基的多肽序列(221st～233rd)可用作抗原免疫动物,并成功获得高效价的抗mUGBP多克隆抗体。通过ELISA法检测其效价为1:108,亲和层析纯化后Westernblot检测抗体特异性,并将制备的抗体应用于免疫印迹及人和小鼠肺组织免疫组织化学和免疫荧光检测,结果显示本研究制备的抗体具有特异性,且用该抗体成功在人和小鼠气道上皮细胞和肺血管内皮细胞检测到UGBP蛋白表达。结果表明,本研究通过生物信息学方法成功预测了抗原表位,并据此预测成功制备了高效价、高特异性的抗mUGBP多克隆抗体。

关键词：子宫珠蛋白小鼠抗体生物信息学

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小剂量阿司匹林与培哚普利合用对兔血中前列环素、血栓素A_2和去甲肾上腺素的影响

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湖南医科大学学报 2002年第3期27卷 224-226页

作者：庄汉屏李兢方云祥中南大学湘雅医院老年病科长沙410008 中南大学湘雅医学院药理教研室长沙410078

目的 :检测小剂量阿司匹林 (ASA)与血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)在单用或合用时兔血中前列环素(PGI2 )、血栓素A2 (TXA2 )和去甲肾上腺素 (NE)浓度的变化 ,探讨它们合用时相互作用的关系。方法 :将 4 0只健康新西兰兔随机分成 4组 ,... 详细信息

目的 :检测小剂量阿司匹林 (ASA)与血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)在单用或合用时兔血中前列环素(PGI2 )、血栓素A2 (TXA2 )和去甲肾上腺素 (NE)浓度的变化 ,探讨它们合用时相互作用的关系。方法 :将 4 0只健康新西兰兔随机分成 4组 ,于连续投药 4周前后分别心脏穿刺取血 ,放射免疫法检测PGI2 和TXA2 ,高效液相色谱法检测NE。结果 :不论是单用还是合用 ,ACEI均使PGI2 浓度增高 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,小剂量ASA则降低TXA2 的浓度 (P<0 .0 5 ,P <0 .0 5 ) ;ASA与ACEI合用组的PGI2 TXA2 明显升高 (P <0 .0 1) ,血清NE浓度明显下降 (P <0 .0 0 1)。结论 :小剂量ASA和ACEI单用时对兔血清NE浓度无明显影响 ,合用时PGI2 TXA2 比值上升 ,血清NE浓度下降 ,故二者有协同作用。

关键词：阿司匹林培哚普利前列环素血栓素A2 去甲肾上腺素心血管疾病动物实验

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培养细胞免疫组化方法的改进

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细胞生物学杂志 2003年第1期25卷 63-64页

作者：郑晖肖德胜蒋海鹰中南大学湘雅医学院病理学教研室长沙410078

本文介绍了一种培养细胞免疫组织化学的方法,即利用琼脂糖预包埋培养细胞,制成富含细胞的琼脂块,再按一般组织块处理程序制成石蜡切片,进行免疫组织化学检测,获得了较满意的结果,并解决了培养细胞进行免疫组织化学检测的某些问题。

关键词：培养细胞免疫组化改进方法学

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肝细胞癌发生中丙型肝炎病毒NS_3蛋白对诱导型一氧化氮合酶表达的影响

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湖南医科大学学报 2001年第3期26卷 192-194页

作者：冯德云程瑞雪郑晖蒋海鹰沈明中南大学湘雅医学院病理学教研室长沙410078

目的 :研究肝细胞癌 (HCC)及其癌旁肝组织 (PCLT)中丙型肝炎病毒 (HCV)NS3 蛋白对诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA表达的影响 ,以探讨其在HCC发生中的作用。方法 :利用SP免疫组化和原位杂交技术检测 5 2例HBV(- )的HCC及其PCLT中HCVNS3 ... 详细信息

目的 :研究肝细胞癌 (HCC)及其癌旁肝组织 (PCLT)中丙型肝炎病毒 (HCV)NS3 蛋白对诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA表达的影响 ,以探讨其在HCC发生中的作用。方法 :利用SP免疫组化和原位杂交技术检测 5 2例HBV(- )的HCC及其PCLT中HCVNS3 蛋白和iNOSmRNA的表达 ,并比较两者的相关性。结果 :HCC中HCVNS3 蛋白的阳性率 (4 6 .2 % )和信号强度明显低于PCLT(6 7.3% ) ,且其表达强度与癌细胞分化程度相关 (P <0 .0 1) ;iNOSmRNA的阳性率 (80 .8% )与PCLT中者无差别 (90 .4% ,P <0 .0 1) ,但其阳性信号强度明显低于PCLT(P <0 .0 5 )。PCLT中HCVNS3 蛋白表达愈高iNOSmRNA的信号强度愈强 (P <0 .0 1) ,特别是在有些病例中两者的定位和信号形态几乎一致。结论 :HCVNS3

关键词：肝肿瘤丙型肝炎病毒一氧化氮合酶一氧化氮 HCV

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