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第二届中国林业学术大会——S9木本粮油产业化

作者：胡姣谭晓风张琳龙洪旭田晓明中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室

以油茶种子胚乳为实验材料,在试剂盒的基础上应用改良的CTAB法提取总RNA。针对油茶种子胚乳中富含多糖多酚的特点,改良后的CTAB法提取得到的RNA,条带整齐、清晰,并通过检测其纯度、得率以及RT-PCR后得出结论,使用改良后的CTAB法配合试... 详细信息

以油茶种子胚乳为实验材料,在试剂盒的基础上应用改良的CTAB法提取总RNA。针对油茶种子胚乳中富含多糖多酚的特点,改良后的CTAB法提取得到的RNA,条带整齐、清晰,并通过检测其纯度、得率以及RT-PCR后得出结论,使用改良后的CTAB法配合试剂盒提取RNA法操作简单,能够有效去除植物组织中多糖和多酚类等次生物质,从而得到高质量的RNA。

关键词：油茶 RNA提取改良CTAB法 RT-PCR

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火把梨及其后代育成品种的S基因型鉴定

火把梨及其后代育成品种的S基因型鉴定

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第二届中国林业学术大会-S9 木本粮油产业化

作者：张琳谭晓风胡姣龙洪旭袁德义李秀根中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室

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火把梨及其后代育成品种的S基因型鉴定

火把梨及其后代育成品种的S基因型鉴定

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第二届中国林业学术大会——S9 木本粮油产业化

作者：张琳谭晓风胡姣龙洪旭袁德义李秀根中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室

本研究以火把梨及其三个后代品种红酥脆、满天红及美人酥为实验材料,通过S-RNase基因的特异PCR扩增,产物通过1.5%的琼脂糖凝胶电泳分析,结果发现火把梨具有三条电泳条带,红酥脆、满天红与美人酥都只产生了两条电泳条带,然后通过对其PCR... 详细信息

本研究以火把梨及其三个后代品种红酥脆、满天红及美人酥为实验材料,通过S-RNase基因的特异PCR扩增,产物通过1.5%的琼脂糖凝胶电泳分析,结果发现火把梨具有三条电泳条带,红酥脆、满天红与美人酥都只产生了两条电泳条带,然后通过对其PCR产物进行回收、DNA序列测定及比对分析,其中火把梨的350bp左右的片段与S22的序列相似性最高,虽有多处碱基不同,但HV区的氨基酸表达相同。该基因片段无法被S22等位基因的限制性内切酶BssHⅡ切割,因此被鉴定为一个新的S基因,暂命名为S44-RNase(GeneBank登录号为EF643642)。最终确定火把梨S基因型为S12S26S44,红酥脆、满天红及美人酥基因型相同,为S4S12。本研究为梨树授粉品种的科学配置及杂交选育新品种提供了科学的指导。

关键词：火把梨自交不亲和性 S基因型

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植物乙酰辅酶A羧化酶基因的分子生物学研究进展

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经济林研究 2009年第2期27卷 111-117页

作者：蒋瑶谭晓风中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学林学院湖南长沙410004

乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)催化乙酰辅酶A生成的丙二酸单酰辅酶A,是脂肪酸合成和代谢中起重要作用的中间代谢物。植物中的ACCase有两种类型:同质型ACCase和异质型ACCase,其中由四个亚基组成的异质型ACCase与长链脂肪酸的合成有关,是脂肪... 详细信息

乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)催化乙酰辅酶A生成的丙二酸单酰辅酶A,是脂肪酸合成和代谢中起重要作用的中间代谢物。植物中的ACCase有两种类型:同质型ACCase和异质型ACCase,其中由四个亚基组成的异质型ACCase与长链脂肪酸的合成有关,是脂肪酸合成途径中的关键酶。本文对ACCase的类型、结构、功能进行了综述,并对ACCase基因的研究现状以及在基因工程方面的应用进行了探讨。

关键词：乙酰辅酶A羧化酶分子生物学基因工程

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油茶过氧化物酶基因家族的cDNA克隆与原核表达

油茶过氧化物酶基因家族的cDNA克隆与原核表达

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第二届中国林业学术大会——S9木本粮油产业化

作者：田晓明谭晓风罗茜郭静宜谷振军中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室

过氧化物酶（Peroxidase,POD）是植物保护酶系的重要保护酶之一。以油茶（Camellia oleifera）近成熟种子cDNA文库和EST文库为材料,根据已有序列信息设计基因特异性引物,通过5′RACE和3′RACE,获得了5个油茶POD基因的全长cDNA序列。核... 详细信息

过氧化物酶（Peroxidase,POD）是植物保护酶系的重要保护酶之一。以油茶（Camellia oleifera）近成熟种子cDNA文库和EST文库为材料,根据已有序列信息设计基因特异性引物,通过5′RACE和3′RACE,获得了5个油茶POD基因的全长cDNA序列。核苷酸序列分析结果表明,扩增得到的5个POD基因在编码区高度保守,而在5′UTR和3′UTR则存在显著差异。氨基酸序列分析结果显示,除POD2编码333个氨基酸外,其余四个均编码337个氨基酸。根据二级结构预测结果推测,油茶POD属于第Ⅲ类植物过氧化物酶超家族。以克隆到的POD5全长cDNA为模板,用含有特异酶切位点的P1、P2为引物,通过PCR方法将它构建到表达载体pET32a上并转化到大肠杆菌菌株BL21（DE3）中,获得相应的重组工程菌。经过37℃条件下的IPTG诱导,POD重组蛋白在BL21（DE3）菌株中得到表达。

关键词：油茶过氧化物酶 cDNA 基因克隆序列分析同源建模原核表达

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油茶种子胚乳总RNA提取方法研究及改良

油茶种子胚乳总RNA提取方法研究及改良

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第二届中国林业学术大会-S9 木本粮油产业化

作者：胡姣谭晓风张琳龙洪旭田晓明中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室

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植物肉桂酰辅酶A还原酶基因的结构功能及应用潜力

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经济林研究 2009年第1期27卷 7-12页

作者：李魏谭晓风陈鸿鹏中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学资源与环境学院湖南长沙410004

木质素的合成途径非常复杂,肉桂酰辅酶A还原酶(cinnamoyl-CoA reductase,CCR)是木质素合成特异途径的第1个关键酶,可催化3种羟基肉桂酸的辅酶A酯的还原反应,生成相应的肉桂醛。主要综述了肉桂酰辅酶A还原酶基因在木质素合成中的功能、... 详细信息

木质素的合成途径非常复杂,肉桂酰辅酶A还原酶(cinnamoyl-CoA reductase,CCR)是木质素合成特异途径的第1个关键酶,可催化3种羟基肉桂酸的辅酶A酯的还原反应,生成相应的肉桂醛。主要综述了肉桂酰辅酶A还原酶基因在木质素合成中的功能、基本结构方面的研究进展,并介绍了该基因在造纸林木改育、作物品质改良、植物抗病抗逆及生物质能等方面研究中的应用。

关键词：分子生物学木质素肉桂酰辅酶A还原酶功能结构应用潜力

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油茶过氧化物酶基因家族的cDNA克隆与原核表达

油茶过氧化物酶基因家族的cDNA克隆与原核表达

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第二届中国林业学术大会-S9 木本粮油产业化

作者：田晓明谭晓风罗茜郭静宜谷振军中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室

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菲油果光合生理特性研究

菲油果光合生理特性研究

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第二届中国林业学术大会-S9 木本粮油产业化

作者：袁德义向盛萍谭晓风张日清中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室

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银杏雌树成熟叶cDNA文库的构建

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中南林业科技大学学报 2009年第1期29卷 6-9,31页

作者：王义强谭晓风陈介南周小慧孙吉康中南林业科技大学经济林栽培育种国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学生物环境科学与技术研究所湖南长沙410004 中南林业科技大学生命科学与技术学院湖南长沙410004

银杏是第四纪冰川时期孑遗的现存地球最古老的植物，为我国特有的经济树种，银杏cDNA文库的构建有助于其分子生物学研究进一步深入．以湖南银杏梅核品种优良单株成熟叶为材料，经变性裂解液分解细胞，提取总RNA，Oligotex mRNA midi ki... 详细信息

银杏是第四纪冰川时期孑遗的现存地球最古老的植物，为我国特有的经济树种，银杏cDNA文库的构建有助于其分子生物学研究进一步深入．以湖南银杏梅核品种优良单株成熟叶为材料，经变性裂解液分解细胞，提取总RNA，Oligotex mRNA midi kit分离纯化出mRNA，用SuperScipt TM Ⅱ RnaseH2 Reverse Transcriptase将其反转录成cDNA，与EcoRI接头连接后插入pBluescript Ⅱ SK（＋）XR载体，电转化感受态细胞DH10B中，进行菌落PCR文库质量检测．结果表明：文库总库容量为8．12×10^5克隆子，重组率为90％，文库插入片段长度约为500～2000bp．构建的银杏雌树成熟叶cDNA文库符合标准，该文库为进一步构建银杏EST文库、筛选目的基因及基因芯片制备等提供了资源基础和有效工具．

关键词：经济林学 cDNA文库构建银杏雌树成熟叶

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