检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业科学 2014年第1期42卷 26-29页

作者：刘志祥曾超珍周永青谭晓风中南林业科技大学生命科学与技术学院湖南长沙410004 经济林育种与栽培国家林业局重点实验室 / 中南林业科技大学林学院湖南长沙410004

为阐明杨树MIR156基因家族的进化过程和功能分化,研究了杨树MIR156基因家族的扩张模式、倍增时间、系统发育、表达方式、启动子元件和靶基因。结果表明:杨树MIR156基因家族主要通过染色体大片段重复实现扩张,而串联重复对此没有贡献;不... 详细信息

为阐明杨树MIR156基因家族的进化过程和功能分化,研究了杨树MIR156基因家族的扩张模式、倍增时间、系统发育、表达方式、启动子元件和靶基因。结果表明:杨树MIR156基因家族主要通过染色体大片段重复实现扩张,而串联重复对此没有贡献;不同家族成员表达方式已分化,其中ptc-MIR156g/h/i/j表达活性最高;家族成员启动子顺式作用元件存在差异;杨树MIR156的靶基因包括29个SBP结构域蛋白质,由于成熟序列存在差异,家族成员调控的靶基因也表现出差异。说明杨树MIR156基因家族成员的功能已经分化,在杨树中可能形成了复杂的调控网络。

关键词：杨树 MIR156基因家族分子进化功能分化

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利用油茶油体蛋白系统表达金属硫蛋白的载体构建

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经济林研究 2014年第4期32卷 33-37页

作者：曾艳玲曾晓峰谭晓风张党权中南林业科技大学经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林培育与利用湖南省协同创新中心湖南长沙410004

利用油体蛋白表达系统生产活性蛋白,是一种利用生物反应器生产高纯度无污染活性肽的新方法。为给后期油茶油体蛋白表达系统的开发应用提供依据,分别以油茶油体蛋白基因和油茶金属硫蛋白基因为模板设计引物,PCR扩增获得CDS片段,通过酶切... 详细信息

利用油体蛋白表达系统生产活性蛋白,是一种利用生物反应器生产高纯度无污染活性肽的新方法。为给后期油茶油体蛋白表达系统的开发应用提供依据,分别以油茶油体蛋白基因和油茶金属硫蛋白基因为模板设计引物,PCR扩增获得CDS片段,通过酶切连接构建p ET30a重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),成功表达,在此基础上将两者二次重组,成功构建油茶油体蛋白金属硫基因表达载体。

关键词：油茶油体蛋白表达载体构建

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油茶脂酰辅酶A硫酯酶基因的克隆与表达分析

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植物生理学报 2014年第12期50卷 1845-1856页

作者：谭晓风王建勇龙洪旭曾艳玲梅芳芳刘凯陈鸿鹏中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004 华中师范大学生命科学学院武汉430079 广西林业科学研究院南宁530001 国家林业局桉树研究开发中心广东湛江524022

脂酰辅酶A硫酯酶是催化脂酰Co A水解成自由脂肪酸(FFA)和辅酶A(Co ASH)的一类酶,它通过维持胞内脂酰Co A、FFA和Co ASH等的水平来参与生命体内的生理过程。本研究以国审油茶品种‘华硕’种子为材料,在已构建的转录组和表达谱数据库的基... 详细信息

脂酰辅酶A硫酯酶是催化脂酰Co A水解成自由脂肪酸(FFA)和辅酶A(Co ASH)的一类酶,它通过维持胞内脂酰Co A、FFA和Co ASH等的水平来参与生命体内的生理过程。本研究以国审油茶品种‘华硕’种子为材料,在已构建的转录组和表达谱数据库的基础之上,采用RACE技术,分离和克隆到一个油茶脂酰Co A硫酯酶基因的全长c DNA序列,命名为Co ACOT(Gen Bank登录号KJ910339)。该基因c DNA全长为1 588 bp,含有1 164 bp的开放读码框,编码387个氨基酸;基因编码的蛋白Co ACOT具有c NMP结合域保守序列"VVREGEAGDGVYFIWDG"和C端的保守三联肽"SKL",属于过氧化物酶体蛋白。成功构建了表达载体,其中,原核表达载体在宿主细胞BL21(DE3)上成功诱导表达,获得分子量约为44 k Da的目的蛋白。荧光定量PCR分析表明,Co ACOT基因在种子不同的发育期均有表达,种子膨大期最低,经油脂合成期上调表达之后,Co ACOT基因的相对表达量维持在一个相对稳定的较高水平。结果显示Co ACOT基因可能调控着油茶种子的油脂合成。

关键词：油茶脂酰辅酶A硫酯酶克隆表达分析载体构建

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杜仲MVA途径相关基因全长cDNA序列特征研究

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中南林业科技大学学报 2014年第1期34卷 94-102页

作者：王淋乌云塔娜刘慧敏叶生晶杜红岩中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学林学院湖南长沙410004 中国林业科学研究院经济林研发中心河南郑州450003

杜仲幼果和成熟果转录组测序的基础上,分离鉴定了幼果和成熟果MVA途径ACOT、HMGS、HMGR基因全长cDNA序列,并对基因的核苷酸序列及其相应氨基酸序列的组成成分、跨膜结构域、疏水性/亲水性、蛋白质二、三级结构、分子系统进化等进行分析... 详细信息

杜仲幼果和成熟果转录组测序的基础上,分离鉴定了幼果和成熟果MVA途径ACOT、HMGS、HMGR基因全长cDNA序列,并对基因的核苷酸序列及其相应氨基酸序列的组成成分、跨膜结构域、疏水性/亲水性、蛋白质二、三级结构、分子系统进化等进行分析。EuACOT基因全长cDNA为1 248 bp,编码416个氨基酸,属于稳定疏水性蛋白,无明显的跨膜区,在进化上分属于不同的分类群,与烟草和番茄的ACOT蛋白间的亲缘关系最为接近;EuHMGS基因全长cDNA为1 356 bp,编码452个氨基酸,属于不稳定的疏水性蛋白,无明显的跨膜区,在进化上分属于不同的分类群,与茶树的HMGS蛋白间的亲缘关系最为接近;EuHMGR基因全长cDNA为1 770 bp,编码590个氨基酸,属于不稳定的疏水性蛋白,有两个较明显的跨膜区,在进化上分属于不同的分类群,与杜仲的HMGR蛋白间的亲缘关系最为接近;以上三个蛋白的二级结构均是以α-螺旋和螺环结构为主的混合型结构。

关键词：杜仲萜类物质 MVA途径序列分析生物信息学

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大花红山茶4个变异类型开花生物学特性

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江西农业大学学报 2014年第6期36卷 1284-1289页

作者：王耀辉高超李葵王碧芳谭露曼怀化市林业科学研究所湖南怀化418000 中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室/经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004

为开展大花红山茶（ Camellia magniflora Chang）杂交育种及物种保护工作，以大花红山茶的4个变异类型为材料，通过田间观察开花物候期并结合花器特征分析、花粉活力、花粉／胚珠比和杂交指数等指标测定，研究大花红山茶变异类型的开... 详细信息

为开展大花红山茶（ Camellia magniflora Chang）杂交育种及物种保护工作，以大花红山茶的4个变异类型为材料，通过田间观察开花物候期并结合花器特征分析、花粉活力、花粉／胚珠比和杂交指数等指标测定，研究大花红山茶变异类型的开花生物学特性。结果表明：（1）4个类型的开花物候期不一致，类型1开花最早，类型2花期最长为73 d，类型3花期最短为48 d，类型4开花最晚；（2）类型1花冠最大，花瓣浅粉色，雄蕊数量多达182枚。类型2、类型3和类型4花瓣颜色逐渐加深，雄蕊数量相差不大但均较类型1少。4个类型的花柱数量均为3个，花瓣数量均为5～7枚；（3）4个类型的新鲜花粉在10％蔗糖＋1％琼脂的培养基上萌发率均大于46％，活力较高，雄配子可育；（4） P／O值法和OCI值法表明4个类型的繁育系统为异交型，需要传粉者。大花红山茶变异的类型中存在雄蕊瓣化现象。

关键词：大花红山茶变异开花生物学繁育系统

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花期喷硼对板栗光合特性和结实率的影响

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经济林研究 2014年第2期32卷 58-61页

作者：王路红袁德义沈广宁田寿乐孙晓莉中南林业科技大学经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林培育与利用湖南省2011协同创新中心湖南长沙410004 山东果树研究所山东泰安271000

为了降低板栗空苞率，以‘燕红’板栗为试材，于花期喷施0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%5种不同质量分数的硼砂溶液，探讨硼对板栗叶片光合特性和结实率的影响。结果表明：在5个质量分数梯度的硼肥处理中，板栗叶片中叶绿素含量、光合速... 详细信息

为了降低板栗空苞率，以‘燕红’板栗为试材，于花期喷施0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%5种不同质量分数的硼砂溶液，探讨硼对板栗叶片光合特性和结实率的影响。结果表明：在5个质量分数梯度的硼肥处理中，板栗叶片中叶绿素含量、光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度和结实率等指标均随硼质量分数的增加呈先升高后降低的趋势；当喷施硼质量分数为0.3%时，各指标显著高于其它处理和对照。因此，花期喷施一定质量分数的（0.1%～0.3%）硼肥可显著提高‘燕红’板栗叶片的光合作用和结实率，以质量分数0.3%时为最优。

关键词：板栗硼光合特性结实率

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油茶总RNA的提取与内参基因的初选

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经济林研究 2014年第2期32卷 93-98页

作者：宋志波刘敏贾宝光田雷曾艳玲周俊琴谭晓风张琳中南林业科技大学经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林培育与利用湖南省2011协同创新中心湖南长沙410004 康涅狄格大学植物科学与园林建筑系美国康涅狄格州斯托尔斯06269

为得到高质量的油茶总RNA及稳定的内参基因,以油茶良种‘华硕’为试验材料,采用ambion试剂盒结合CTAB法进行总RNA提取。获得的总RNA完整性好,纯度高;从前期构建的油茶转录组数据中选取ACT(肌动蛋白基因)等14个基因作为候选内参基因,共设... 详细信息

为得到高质量的油茶总RNA及稳定的内参基因,以油茶良种‘华硕’为试验材料,采用ambion试剂盒结合CTAB法进行总RNA提取。获得的总RNA完整性好,纯度高;从前期构建的油茶转录组数据中选取ACT(肌动蛋白基因)等14个基因作为候选内参基因,共设计22对引物,通过RT-PCR反应体系的优化及琼脂糖凝胶电泳检测,快速筛选出了适合油茶不同组织(器官)的内参基因。ALB(清蛋白基因),EF1α(延伸因子基因),ETIF3H(启动因子基因),UBC2(泛素结合酶基因)可以作为油茶果实初选内参基因,EF1α可以作为油茶根、茎、花及果实内参基因,ETIF3H可以作为油茶根、茎、叶、花瓣的内参基因。

关键词：油茶 RNA提取内参基因逆转录PCR

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油桐花芽RNA提取方法的改良及油桐SOC1基因片段的克隆分析

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北方园艺 2014年第14期 82-85页

作者：罗敏孙颖陈显李建安熊利中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 大洪山风景名胜区管理委员会湖北随州431521

采用RNAiso-mate+改良CTAB法进行油桐花芽RNA的提取试验,用琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性,核酸蛋白质检测仪检测其纯度,研究提取油桐花芽高质量RNA的方法。结果表明:RNAiso-mate+改良CTAB方法提取的RNA质量好,条带清晰,亮度高,完整性及... 详细信息

采用RNAiso-mate+改良CTAB法进行油桐花芽RNA的提取试验,用琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性,核酸蛋白质检测仪检测其纯度,研究提取油桐花芽高质量RNA的方法。结果表明:RNAiso-mate+改良CTAB方法提取的RNA质量好,条带清晰,亮度高,完整性及纯度较好,A260/A280比值为1.97、1.93,得率176.9、154.2μg/mL。在提取到的高质量RNA基础上,采用RT-PCR方法成功克隆了油桐SOC1基因片段,长度为611bp,含起始密码子,编码203个氨基酸;序列分析表明油桐SOC1基因与蓖麻、杨树、大豆的SOC1基因相似度分别为85%、84%、78%,进化树分析得出油桐SOC1基因与北美木兰SOC1基因亲缘关系较近。

关键词：油桐花芽 RNA提取 SOC1基因

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杜仲EuHMGS基因鉴定及生物信息学分析

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经济林研究 2014年第1期32卷 13-20页

作者：王淋乌云塔娜叶生晶中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学林学院湖南长沙410004 中国林业科学研究院经济林研究开发中心河南郑州450003 国家林业局杜仲工程技术研究中心河南郑州450003 国家林业局中南林业调查规划设计院湖南长沙410014

杜仲橡胶是具有橡塑二重性的优异高分子聚异戊二烯材料。3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶(HMGS)是萜类物质合成MVA途径中重要的中间体。为了揭示EuHMGS对聚异戊二烯的分子调控机制的重要作用,对杜仲HMGS基因进行全面的生物信息学分析。... 详细信息

杜仲橡胶是具有橡塑二重性的优异高分子聚异戊二烯材料。3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶(HMGS)是萜类物质合成MVA途径中重要的中间体。为了揭示EuHMGS对聚异戊二烯的分子调控机制的重要作用,对杜仲HMGS基因进行全面的生物信息学分析。杜仲HMGS基因编码452个氨基酸残基,属于不稳定的疏水性蛋白质。进化关系分析结果表明,杜仲HMGS基因与双子叶植物葡萄和拟南芥的HMGS基因亲缘关系较为接近;杜仲HMGS基因组中含有有11个外显子,10个内含子;其启动子序列中含有大量脱落酸(ABRE)、水杨酸(TCA-element)、乙烯(ERE)等顺式作用元件。

关键词：杜仲 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶序列分析

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杜仲甲羟戊酸激酶(EuMK)基因鉴定及生物信息学分析

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经济林研究 2014年第1期32卷 6-12页

作者：乌云塔娜王淋叶生晶中国林业科学研究院经济林研究开发中心河南郑州450003 国家林业局杜仲工程技术研究中心河南郑州450003 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学林学院湖南长沙410004 国家林业局中南林业调查规划设计院湖南长沙410014

甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase,MK)是萜类化合物生物合成甲羟戊酸(mevalonate pathway,MVA)途径的限速酶之一。为了探明EuMK对杜仲胶生物合成的调控机制,对EuMK所编码蛋白质氨基酸序列的理化性质、跨膜结构域、疏水性/亲水性、蛋白质... 详细信息

甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase,MK)是萜类化合物生物合成甲羟戊酸(mevalonate pathway,MVA)途径的限速酶之一。为了探明EuMK对杜仲胶生物合成的调控机制,对EuMK所编码蛋白质氨基酸序列的理化性质、跨膜结构域、疏水性/亲水性、蛋白质二、三级结构、结构保守域以及基因组内含子和外显子结构特征等进行了全面的生物信息学分析,结果发现EuMK蛋白质序列均存在3个与甲羟戊酸底物结合及催化反应有关的保守结构域;EuMK的氨基酸组成中性的疏水性蛋白居多数,属于稳定的疏水性蛋白;无明显的跨膜结构,均在膜外;二级结构为混合型结构的蛋白质。EuMK均含有4个外显子,3个内含子;EuMK基因家族启动子顺式作用元件潜在功能的预测分析发现,含有大量基本顺式作用元件TATAbox,CAATbox,还含有光(AE-box、CGT-motif、Box 4、G-box)、生长素(ERE、ABRE、TCA-element)响应等多个顺式调控元件。

关键词：杜仲甲羟戊酸激酶反式聚异戊二烯生物信息学

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