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植物遗传资源学报 2017年第3期18卷 520-529页

作者：江南张琳谭晓风谭慧张靖国湖南工业大学包装与材料工程学院株洲412007 中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室/经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004 湖北省农业科学院果树茶叶研究所武汉430064

梨品种S基因型鉴定对梨栽培中授粉品种选择和遗传育种都具有重要意义。本研究利用梨S-RNase基因荧光标记的特异引物PCR扩增获得梨品种荧光标记的cDNA特异产物;进一步完善梨S-RNase基因cDNA芯片,以被检测梨品种cDNA特异序列与梨S-RNase基... 详细信息

梨品种S基因型鉴定对梨栽培中授粉品种选择和遗传育种都具有重要意义。本研究利用梨S-RNase基因荧光标记的特异引物PCR扩增获得梨品种荧光标记的cDNA特异产物;进一步完善梨S-RNase基因cDNA芯片,以被检测梨品种cDNA特异序列与梨S-RNase基因cDNA芯片杂交检测不同梨品种S基因型,并发现新的S-RNase基因。结果表明:利用梨S-RNase基因cDNA芯片鉴定了泸定王皮梨、兴山24号、弥渡百合等35个未知S基因型梨品种,确定了各品种的S基因型。结合PCRRFLP及DNA克隆和测序等技术,发现了7个新的S-RNase基因资源,获得了新S-RNase基因序列。序列分析表明各新S-RNase基因均具有S-RNase基因特异区域序列的典型特征;进化分析显示7个新S-RNase基因主要属于蔷薇科苹果亚科S-RNase类群,且存在种间和属间比种内和属内进化关系更近的现象。7个新的S基因分别命名为:PpS_(53)(Pyrus pyrifolia S53)、PpS_(54)、PpS_(55)、PpS_(56)、PpS_(57)、PpS_(58)和PpS_(59),GenBank登录号分别为:KX581753、KX581754、KX581755、KX581756、KX581757、KX581751和KX581752。

关键词：梨 S-RNase基因 cDNA芯片 S基因型进化分析

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梨自交不亲和基因cDNA芯片制备及对部分砂梨品种S基因型的鉴定

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园艺学报 2015年第12期42卷 2341-2352页

作者：江南谭晓风张琳张靖国胡红菊湖南工业大学包装与材料工程学院湖南株洲412007 中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004 湖北省农业科学院果树茶叶研究所武汉430064

利用东方梨中已鉴定的52个S等位基因HV区c DNA序列作为靶基因序列设计探针,制备梨S基因c DNA检测芯片,每张芯片上含有240个位点55个c DNA探针,包含所有序列完善的S基因HV区特异的c DNA序列。以被检测品种雌蕊c DNA为模板,采用Cy3荧光修... 详细信息

利用东方梨中已鉴定的52个S等位基因HV区c DNA序列作为靶基因序列设计探针,制备梨S基因c DNA检测芯片,每张芯片上含有240个位点55个c DNA探针,包含所有序列完善的S基因HV区特异的c DNA序列。以被检测品种雌蕊c DNA为模板,采用Cy3荧光修饰引物经S基因特异PCR扩增标记被检测品种的c DNA序列,并与芯片杂交以检测不同品种的S基因型。结果表明:利用c DNA检测芯片与‘丽江黄酸梨’、‘秀玉’、‘弥渡玉梨’、‘白面梨’和‘德胜香’等已知S基因型品种杂交,杂交结果显示与S基因寡核苷酸芯片检测信号一致,与各品种已知S基因型相符合。利用c DNA芯片和进一步完善的S基因寡核苷酸芯片并行检测鉴定了‘文山红梨’等24个未知S基因型的砂梨品种,获得各品种的S基因型。梨S基因c DNA芯片的构建进一步完善了梨S基因检测平台。

关键词：梨自交不亲和 S基因型 c DNA芯片寡核苷酸芯片

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油茶丙二酰单酰CoA:ACP转酰基酶基因的克隆与原核表达

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林业科学 2015年第3期51卷 148-154页

作者：王建勇谭晓风陈鸿鹏曾艳玲龙洪旭梅芳芳刘凯中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004 国家林业局桉树研究开发中心湛江524022 华中师范大学生命科学学院武汉430079 广西林业科学研究院南宁530001

【目的】油茶种仁含油率较低且易遭逆性环境等的影响,这些都严重影响和制约了油茶产业的快速发展。丙二酰单酰Co A:ACP转酰酶是脂肪酸合成酶(FASⅡ)复合体的组成酶之一,在脂肪酸合成中起着装载作用,它的酶促反应产物丙二酰单酰ACP是脂... 详细信息

【目的】油茶种仁含油率较低且易遭逆性环境等的影响,这些都严重影响和制约了油茶产业的快速发展。丙二酰单酰Co A:ACP转酰酶是脂肪酸合成酶(FASⅡ)复合体的组成酶之一,在脂肪酸合成中起着装载作用,它的酶促反应产物丙二酰单酰ACP是脂肪酸合成关键组成部分。开展该基因的功能研究,能为油茶的分子遗传育种奠定基础。【方法】以油茶品种‘华硕’种子为材料,借助其种子转录组和表达谱数据库,通过RACE技术,克隆丙二酰单酰Co A:ACP转酰酶基因并对该基因进行生物信息学分析。利用常规的酶切连接技术构建基因的原核表达载体,并利用α酮戊二酸脱氢酶(KDH)偶联系统测定表达产物的酶活性。【结果】丙二酰单酰Co A:ACP转酰酶基因的全长c DNA 1 867 bp,含有1 131 bp的开放读码框,编码376个氨基酸,具有58个氨基酸长度的叶绿体转运肽,该基因被命名为Co MCAT(Gen Bank登录号KJ910337)。在malonyl-Co A结合位点和ACP结合位点上分别存在高度保守的基序"GQGXQ"和"GXSXG"。原核表达载体p ET30a-Co MCAT在BL21(DE3)细胞中被成功地诱导表达,目的重组蛋白分子量约为40 k Da。酶活性分析表明,重组蛋白Co MCAT的最佳催化温度为30℃,最佳p H为7.0,比酶活性约为2.384 U·μg-1。【结论】以本实验室构建的油茶转录组数据库为基础,首次克隆获得油茶MCAT基因的全长c DNA序列,构建其原核表达载体在宿主细胞BL21(DE3)中成功诱导表达目的蛋白,并对重组蛋白进行初步的酶活性分析。研究结果为今后进一步深入开展和揭示油茶MCAT基因在油脂合成的代谢过程中的作用奠定基础。

关键词：油茶丙二酰单酰CoA:ACP转酰酶基因克隆原核表达酶活性

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油茶脂肪酸β氧化多功能蛋白基因的克隆与原核表达

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分子植物育种 2016年第6期14卷 1410-1420页

作者：王建勇谭晓风曾艳玲龙洪旭陈鸿鹏刘凯梅芳芳中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004 国家林业局桉树研究开发中心湛江524022 广西林业科学研究院南宁530001 华中师范大学生命科学学院武汉430079

油茶是中国重要的木本食用油料树种,在油茶种子的发育过程中,涉及到一系列调控代谢过程的酶和基因,脂肪酸β氧化多功能蛋白(MFP)是β氧化系统上的一类酶,它完成催化β-氧化途径中的水合与脱氢过程。本研究以国审油茶品种‘华硕’种子为... 详细信息

油茶是中国重要的木本食用油料树种,在油茶种子的发育过程中,涉及到一系列调控代谢过程的酶和基因,脂肪酸β氧化多功能蛋白(MFP)是β氧化系统上的一类酶,它完成催化β-氧化途径中的水合与脱氢过程。本研究以国审油茶品种‘华硕’种子为材料,在已构建的转录组和表达谱数据库的基础之上,采用RACE技术,克隆到油茶脂肪酸β氧化多功能蛋白基因的cDNA全长序列,命名为CoMFP(Gen Bank登录号为KJ910342)。序列分析表明,该基因cDNA全长为2 541 bp,含有2 178 bp的开放读码框,编码725个氨基酸,分子量为79.033 3 kD,理论等电点pI为9.11,具有六个比较明显的跨膜区,不仅存有反式烯酰CoA水合酶(ECH)信号序列、3羟酰Co A脱氢酶(HCDH)信号序列、ECH基序和磷酸结合基序,也具有相当保守的盐桥、活性位点及五个亚结构域。成功地构建了原核表达载体并在宿主细胞BL21(DE3)上成功诱导表达,获得表观分子量约为79 kD的相应目的蛋白。

关键词：油茶多功能蛋白克隆载体构建原核表达

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油茶脂酰辅酶A脱氢酶基因的克隆与表达分析

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植物遗传资源学报 2015年第5期16卷 1080-1088页

作者：王建勇谭晓风梅芳芳曾艳玲龙洪旭刘凯陈鸿鹏中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室/经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004 华中师范大学生命科学学院武汉430079 广西林业科学研究院南宁530001 国家林业局桉树研究开发中心湛江524022

以国审油茶(Camellia oleifera)良种‘华硕’种子为材料,在已构建的转录组和表达谱数据库基础之上,采用RACE技术,克隆获得油茶脂酰辅酶A脱氢酶基因的全长c DNA序列,命名为Co ACAD(基因登录号KJ910338)。该基因c DNA全长为2702 bp,含有24... 详细信息

以国审油茶(Camellia oleifera)良种‘华硕’种子为材料,在已构建的转录组和表达谱数据库基础之上,采用RACE技术,克隆获得油茶脂酰辅酶A脱氢酶基因的全长c DNA序列,命名为Co ACAD(基因登录号KJ910338)。该基因c DNA全长为2702 bp,含有2487 bp的开放读码框,编码828个氨基酸,分子量为92.4113 k D,理论等电点p I为8.47,具有2个比较明显的跨膜区和酪氨酸蛋白激酶活性位点LVHGDFRIDNLVF,存在5个亚结构域;在Co ACAD基因c DNA全长序列的基础上构建表达载体,其中原核表达载体在宿主细胞BL21(DE3)中成功诱导表达,获得表观分子量约为93 k D的目的蛋白;实时荧光定量PCR分析表明,Co ACAD基因在果实膨大期和成熟期上调表达,预示着Co ACAD基因可能在种子发育过程中参与能量供应过程的调控。

关键词：油茶脂酰辅酶A脱氢酶克隆表达分析

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四数九里香种子自然萌发和离体萌发条件筛选

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经济林研究 2017年第3期35卷 93-101页

作者：蒋建林王森李畅郭红艳中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 江西环境工程职业学院江西赣州341000 中国林业科学研究院亚热带林业实验中心江西分宜336600

为提高四数九里香种子萌发率,研究了最佳浓硫酸处理种子的时间及不同激素处理对四数九里香种子自然萌发的影响,以完整种子和带胚子叶作为外植体,研究不同质量浓度的6-BA、NAA、IBA、GA3对外植体生长的影响,及不同质量浓度活性炭对外植... 详细信息

为提高四数九里香种子萌发率,研究了最佳浓硫酸处理种子的时间及不同激素处理对四数九里香种子自然萌发的影响,以完整种子和带胚子叶作为外植体,研究不同质量浓度的6-BA、NAA、IBA、GA3对外植体生长的影响,及不同质量浓度活性炭对外植体褐化的影响。结果表明,浓硫酸最佳处理时间为1 min;用200×10-6的IBA处理过的种子发芽率最高,达50%;其次是50×10^(-6)和150×10^(-6)的NAA,其萌发率均为45%;外植体在添加2.5 mg/L 6-BA、0.2 mg/L IBA、0.1 mg/L GA3或0.2 mg/L NAA的培养基上诱导率较高,活性炭为1.5 g/L时外植体褐化程度最低;四数九里香胚培养的最佳培养基为添加2.5 mg/L 6-BA、0.1 mg/L GA3、0.2mg/L NAA和1.5 g/L活性炭的MS培养基。

关键词：四数九里香植物组织培养生长素活性炭褐化

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施用不同浓度的磷酸二氢钾对香椿生长及养分的影响

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经济林研究 2017年第2期35卷 161-165页

作者：谭瑞坤王承南李凡松朱加良中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林培育与利用湖南省协同创新中心湖南长沙410004 湖南省湘乡市湘之椿农作物有限公司湖南湘乡411400

为了提高木本蔬菜香椿的产量和质量,以湖南省湘乡市湘之椿农作物有限公司的矮化香椿为试验材料,施用不同浓度的磷酸二氢钾(KH_2PO_4)叶面肥,然后对香椿地径、老叶长度、小叶长度、小叶数量及叶片中的可溶性蛋白质、可溶性糖、氮(N)、磷... 详细信息

为了提高木本蔬菜香椿的产量和质量,以湖南省湘乡市湘之椿农作物有限公司的矮化香椿为试验材料,施用不同浓度的磷酸二氢钾(KH_2PO_4)叶面肥,然后对香椿地径、老叶长度、小叶长度、小叶数量及叶片中的可溶性蛋白质、可溶性糖、氮(N)、磷(P)、钾(K)等指标进行了测定与分析。结果表明:施用不同浓度的KH_2PO_4对香椿生长及营养成分促进作用明显,浓度在0.5%~1.5%之间的叶面肥处理均能显著提高香椿的地径、老叶长度、小叶长度和数量,各指标随施肥浓度的增加均呈先升后降的趋势,但当其浓度超过2.0%时,KH_2PO_4对香椿老叶生长有抑制作用;不同浓度的KH_2PO_4对于老叶叶片中的可溶性糖、可溶性蛋白、N、P、K含量的提高均有显著效果。综合分析认为,浓度为1.0%的KH_2PO_4对香椿老叶叶片营养成分含量的提升效果最佳;KH_2PO_4处理下的香椿叶片中的N、P、K均呈现出显著正相关,且彼此之间存在一定增效作用。

关键词：香椿磷酸二氢钾生长养分

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华中五味子两个不同野生雄株花粉特性研究

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经济林研究 2017年第1期35卷 91-96页

作者：郭红艳王森张自强武星彤李建强李红喜中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中国林业科学研究院亚热带林业实验中心江西分宜336600 河南省栾川县农业局河南洛阳471500 河南省栾川县林业局河南洛阳471500

华中五味子是重要的中药材。为给野生华中五味子的引种驯化和开发利用提供参考依据,采用电镜扫描技术、纤维素酶法、TTC法、琼脂固体培养法、授粉比较等试验手段,对河南省伏牛山地区华中五味子两个不同野生雄株的花粉形态、花粉量、花... 详细信息

华中五味子是重要的中药材。为给野生华中五味子的引种驯化和开发利用提供参考依据,采用电镜扫描技术、纤维素酶法、TTC法、琼脂固体培养法、授粉比较等试验手段,对河南省伏牛山地区华中五味子两个不同野生雄株的花粉形态、花粉量、花粉生活力、花粉离体萌发特征、授粉特性进行了研究。结果表明:华中五味子两个不同野生雄株的花粉均呈辐射对称状,其外壁均具网状雕纹,与雄株B花粉相比,雄株A花粉的萌发沟长、网眼小而网脊宽;雄株A的单药花粉量高于雄株B;两个雄株的花粉均在散粉24 h后失去活性,且其失去活性的趋势相似,但雄株A的花粉活力在其失活前始终强于雄株B的花粉活力;蔗糖浓度、硼酸浓度对华中五味子两个野生雄株花粉萌发率的影响均达到极显著水平;花粉萌发率,雄株A低于雄株B;雄株A花粉的最适萌发培养基为1%琼脂+0.015%硼酸+10%蔗糖,雄株B花粉的最适萌发培养基为1%琼脂+0.020%硼酸+15%蔗糖;雄株A、雄株B人工授粉的花朵结实率、心皮结实率均高于其自然授粉的结实率;花朵结实率,雄株A高于雄株B;而心皮结实率,雄株A低于雄株B。

关键词：华中五味子花粉形态生活力萌发特征授粉特性

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高温处理对漆蜡皂化值的影响

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经济林研究 2016年第2期34卷 96-100页

作者：邵凤侠王森常双双李凡松晏巢叶霖毛克俭中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林培育与利用湖南省协同创新中心湖南长沙410004 中国林业科学研究院亚林中心江西分宜336600 平江县林业局湖南平江414500 中南林业科技大学芦头实验林场湖南平江410400

为给漆蜡的开发利用提供参考,采用真空高温加热方法,研究了6种高温处理对漆蜡皂化值的影响。结果表明：高温处理漆蜡的皂化值存在差异,但不显著;高温140℃,处理时间为4 h时,漆蜡的皂化值最小,为162.59 mg/g;高温130℃,处理时间为3 h的... 详细信息

为给漆蜡的开发利用提供参考,采用真空高温加热方法,研究了6种高温处理对漆蜡皂化值的影响。结果表明：高温处理漆蜡的皂化值存在差异,但不显著;高温140℃,处理时间为4 h时,漆蜡的皂化值最小,为162.59 mg/g;高温130℃,处理时间为3 h的条件下,漆蜡皂化值最大,为218.00 mg/g;其它几组高温处理下的漆蜡的皂化值均在162.59～218.00 mg/g之间;高温140℃处理漆蜡的皂化值整体相对于其它几组较小,变化范围为162.59～194.18 mg/g,但是整体波动较大,最大与最小值的差值为31.59 mg/g;高温150℃处理时,漆蜡皂化值相对于100、110、120和130℃较小,整体波动较小,变化范围为185.39～197.27 mg/g,最大与最小值的差值为11.88 mg/g。

关键词：漆蜡高温皂化值

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南方避雨栽培对‘金丝4号’枣裂果与营养品质的影响

南方避雨栽培对‘金丝4号’枣裂果与营养品质的影响

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第三届中国林业学术大会

作者：韩志强袁德义陈文涛陈莹玉中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室经济林培育与保护教育部重点实验室湖南长沙 410004

为研究南方避雨栽培对'金丝4号'枣裂果与果实营养品质的影响,以3年生'金丝4号'枣为试材,比较避雨栽培与露地栽培两种栽培方式下果实裂果与营养品质的差异,并对两种方式下的果实品质性状进行主成分分析.结果表明:(1)避... 详细信息

为研究南方避雨栽培对'金丝4号'枣裂果与果实营养品质的影响,以3年生'金丝4号'枣为试材,比较避雨栽培与露地栽培两种栽培方式下果实裂果与营养品质的差异,并对两种方式下的果实品质性状进行主成分分析.结果表明:(1)避雨栽培裂果率为5.9％,露地栽培裂果率为63.5％,前者较后者降低57.6％;(2)避雨栽培果实总酸、Vc、总糖、可溶性固形物、还原糖、可溶性糖的含量分别为0.34％,302.8mg·100g-1,17.86％,26.5％,2.32％,8.10％;露地栽培果实各相应指标依次为0.32％,262.5mg·100g-1,21.5％,27.5％,1.71％,5.56％;(3)避雨栽培果实中Ca、Fe、K、Zn、N、P的含量分别为1.548mg·g-1,0.206mg·g-1,7.136mg·g-1,0.0357mg·g-1,1.366 mg·g-1,4.733mg·g-1;露地栽培果实各相应指标依次为1.231mg·g-1,0.223mg·g-1,7.29mg·g-1,0.0597mg·g-1,1.935mg·g-1,5.196mg·g-1;(4)通过果实综合评价可知,避雨栽培果实品质较露地栽培明显提高.

关键词：枣避雨栽培技术露地栽培技术营养价值裂果品质

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