检索结果-内蒙古大学图书馆

中南林业科技大学学报 2022年第4期42卷 76-82,92页

作者：陈晓琳刘洁莹宋艳琦周洁尘汪亮段翔李学信何苑皞中南林业科技大学南方人工林病虫害防治国家林业和草原局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学森林有害生物防控湖南省重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室湖南长沙410004 湘潭市林业科学研究所湖南湘潭411206

【目的】花榈木Ormosia henryi是我国特有的珍贵用材树种,但存在种子繁殖过程中幼苗移栽存活率低,生长缓慢,结瘤率低等问题。研制高效根瘤菌剂是解决这一难题的有效途径。结合湖南土壤有效磷含量低的特点,筛选同时具有固氮作用和解磷能... 详细信息

【目的】花榈木Ormosia henryi是我国特有的珍贵用材树种,但存在种子繁殖过程中幼苗移栽存活率低,生长缓慢,结瘤率低等问题。研制高效根瘤菌剂是解决这一难题的有效途径。结合湖南土壤有效磷含量低的特点,筛选同时具有固氮作用和解磷能力的花榈木根瘤菌,可增加根瘤菌的应用功能和范围,为开发兼具固氮、解磷作用的多功能高效根瘤菌剂提供优良菌株。【方法】采用Vincent JM分离方法,从花榈木根系中分离根瘤菌;利用透明圈法及钼锑抗比色方法测定根瘤菌的解磷能力;通过回接试验研究接种根瘤菌对花榈木幼苗生长的影响。【结果】从花榈木根系中分离到根瘤菌20株,具有解无机磷能力的菌株8株,具有解有机磷能力的菌株14株,菌株XT202016解无机磷和有机磷的透明圈直径均最大,无机磷溶磷量和有机磷溶磷量最高,分别为31.1±0.3、71.2±0.6 mg·L^(-1)。回接解磷根瘤菌后花榈木结瘤数量为8~39个之间,固氮酶活为0.04±0.02~2.54±0.06μmol·g^(-1)·h^(-1)之间。与对照相比,接种了解磷根瘤菌的花榈木幼苗株高、地径、植株干质量、叶绿素含量和氮含量分别增加了2.5%~92.5%、1.7%~22.5%、14.3%~35.0%、4.7%~40%、9.5%~53.3%。接种菌株XT202016的花榈木幼苗结瘤数量、固氮酶活、株高、地径、植株干质量和氮含量均最高。【结论】解磷根瘤菌XT202016具有较强的解磷能力,同时可明显提高花榈木苗木结瘤率、促进幼苗生长,具有进一步制作高效根瘤菌剂的潜力。

关键词：根瘤菌花榈木解磷固氮酶活苗木

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果生刺盘孢效应子CfCFEM21的结构分析与功能验证

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分子植物育种 2022年

作者：包安华刘君昂陈星州陈行钢周国英中南林业科技大学南方人工林病虫害防治国家林业局重点实验室森林有害生物防控湖南省重点实验室经济林培育与保护教育部重点实验室

果生刺盘孢(Colletotrichum fructicola)是导致油茶(Camellia oleifera)炭疽病的主要病原菌之一。病原菌侵染植物时会分泌效应子来促进侵染，已有的研究表明某些包含真菌胞外膜(common in fungal extracellular membrane， CFEM)结构域... 详细信息

果生刺盘孢(Colletotrichum fructicola)是导致油茶(Camellia oleifera)炭疽病的主要病原菌之一。病原菌侵染植物时会分泌效应子来促进侵染，已有的研究表明某些包含真菌胞外膜(common in fungal extracellular membrane， CFEM)结构域的蛋白为效应子，为了研究果生刺盘孢的致病机理，我们利用hmmsearch搜索CFEM结构域从果生刺盘孢中筛选出一个包含CFEM结构域的蛋白——CfCFEM21。生物信息学分析显示：CfCFEM21具有长度为17个氨基酸的N端信号肽、无跨膜结构域、不包含GPI锚定位点和其它定位序列、并且包含一个CFEM结构域、其CFEM结构域内预测形成4对二硫键，其结构域的三维建模与已知的Csa2的CFEM结构域建模类似，具有篮子状立体结构。此外，我们根据YTK12酵母分泌系统，验证了CfCFEM21的N端信号肽的分泌功能。在本氏烟(Nicotiana benthamiana)中瞬时表达CfCFEM21显示：CfCFEM21全长的表达并不导致本氏烟叶片的坏死，但可以同时抑制Bax/INF1引起的本氏烟叶片的坏死，CfCFEM21瞬时表达至本氏烟能显著促进辣椒疫霉(Phytophthora capsici)的侵染，表明CfCFEM21能促进病原菌的侵染。本研究为果生刺盘孢中CFEM效应子的功能和作用机制研究提供参考。

关键词：果生刺盘孢效应子真菌胞外膜

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油茶果生刺盘孢CFEM15互作蛋白的筛选及其生物信息学分析

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分子植物育种 2022年

作者：莫秀丽刘君昂陈行钢谭倩周国英中南林业科技大学南方人工林病虫害防治国家林业局重点实验室森林有害生物防控湖南省重点实验室经济林培育与保护教育部重点实验室

真菌胞外膜(common in several fungal extracellular membrane， CFEM)结构域是真菌特有的结构域，其通常编码60个氨基酸，包含8个间隔的半胱氨酸的蛋白质结构域，其特征在于将其与已知的富含半胱氨酸的结构域区分开。已有的相关研究... 详细信息

真菌胞外膜(common in several fungal extracellular membrane， CFEM)结构域是真菌特有的结构域，其通常编码60个氨基酸，包含8个间隔的半胱氨酸的蛋白质结构域，其特征在于将其与已知的富含半胱氨酸的结构域区分开。已有的相关研究表明，CFEM蛋白在附着胞的形成与发育、维持细胞壁完整性及耐受性、维持胞内游离铁的稳定、细胞与细胞之间的信号转导、生物膜的形成、诱导植物细胞坏死及致病性等过程中发挥重要作用。而有关油茶果生刺盘孢(Colletotrichum fructicola)中CFEM效应子的致病机制尚未明确。本研究采用同源重组的克隆方式构建了CFEM15的诱饵载体pGBKT7-CFEM15，通过酵母(Saccharomyces cerevisiae)双杂交系统筛选油茶cDNA文库，共得到1种CFEM15互作蛋白，并利用小规模杂交回转验证对互作真实性进行了验证。通过生物信息学分析鉴定了1种CFEM15互作蛋白为L-天冬酰胺2样酶。本研究结果为进一步研究油茶CfCFEM15所参与信号通路及其生物功能提供理论依据。

关键词：果生刺盘孢 CFEM15 酵母双杂交互作蛋白

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丝裂原活化蛋白激酶基因CfMKK1调控果生炭疽菌的生长发育和致病力

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微生物学报 2021年第1期61卷 141-151页

作者：肖宇李河南方人工林病虫害防控国家林草局重点实验室森林有害生物防控湖南省重点实验室经济林培育与保护教育部重点实验室中南林业科技大学湖南长沙410004

【目的】由果生炭疽菌引起的炭疽病是油茶的主要病害,造成油茶产量下降。本文研究果生炭疽菌中丝裂原活化蛋白激酶CfMkk1的生物学功能,旨在为解析油茶炭疽病菌的致病机理提供依据。【方法】根据同源重组原理构建CfMKK1基因敲除载体片段... 详细信息

【目的】由果生炭疽菌引起的炭疽病是油茶的主要病害,造成油茶产量下降。本文研究果生炭疽菌中丝裂原活化蛋白激酶CfMkk1的生物学功能,旨在为解析油茶炭疽病菌的致病机理提供依据。【方法】根据同源重组原理构建CfMKK1基因敲除载体片段,采用PEG介导法将载体导入原生质体中筛选获得突变体菌株DCfmkk1;PCR扩增果生炭疽菌含有启动子的CfMKK1基因回补片段,构建回补载体pYF11::CfMKK1;采用PEG介导法把回补载体转化至突变体的原生质体中,荧光筛选回补菌株ΔCfmkk1-C。测定野生型菌株、突变体菌株DCfmkk1及基因回补菌株ΔCfmkk1-C在营养生长、附着胞形成、胁迫应答和致病力等生物学表型。【结果】与野生型和回补菌株相比,CfMKK1基因敲除突变体ΔCfmkk1菌丝生长速率明显减缓;在含刚果红的PDA培养基上菌丝生长受到明显抑制,无法穿透玻璃纸,丧失了侵染寄主的能力;而且无法形成附着胞。【结论】研究结果表明CfMKK1基因参与调控油茶果生炭疽菌的生长发育、附着胞形成、致病力以及响应外界胁迫过程。

关键词：油茶果生炭疽菌丝裂原活化蛋白激酶 CfMkk1 致病力

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果生炭疽菌转录因子CfHac1的BRLZ结构域生物学功能研究

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北京林业大学学报 2021年第9期43卷 70-76页

作者：李司政姚权李河南方人工林病虫害防控国家林草局重点实验室森林有害生物防控湖南省重点实验室经济林培育与保护教育部重点实验室中南林业科技大学湖南长沙410004

【目的】炭疽病是油茶的主要病害,导致巨大的经济损失。果生炭疽菌是油茶炭疽病优势致病菌。对果生炭疽菌的转录因子CfHac1的结构域进行分析,为进一步解析转录因子CfHac1调控病菌致病的分子机制奠定基础,对挖掘油茶炭疽病防控新途径具... 详细信息

【目的】炭疽病是油茶的主要病害,导致巨大的经济损失。果生炭疽菌是油茶炭疽病优势致病菌。对果生炭疽菌的转录因子CfHac1的结构域进行分析,为进一步解析转录因子CfHac1调控病菌致病的分子机制奠定基础,对挖掘油茶炭疽病防控新途径具有重要的理论意义。【方法】采用点突变技术构建转录因子CfHac1结构域缺失载体,通过PEG介导法将该回补载体转化至CfHAC1基因完全缺失突变体的原生质体中,通过博来霉素抗性和荧光筛选获得结构域缺失回补菌株,进一步研究BRLZ结构域在果生炭疽菌中的生物学功能。【结果】结果发现转录因子CfHac1含有一个碱性亮氨酸拉链结构域(BRLZ),该结构域包含58个氨基酸残基;与野生型菌株和完全互补菌株相比,BRLZ结构域缺失突变株ΔCfhac1^(ΔBRLZ)生长速率显著降低,分生孢子产量显著减少,不能形成附着胞,对内质网压力胁迫更敏感,丧失对油茶叶的致病力,其表型与ΔCfhac1突变体一致。【结论】上述结果表明,BRLZ是转录因子CfHac1重要的结构域,对CfHac1在果生炭疽菌中行使正常的生物学功能具有重要的调控作用。

关键词：油茶炭疽病果生炭疽菌 CfHac1 BRLZ结构域致病力

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自噬相关蛋白CfAtg8在果生刺盘孢中的功能分析

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菌物学报 2021年第3期40卷 592-602页

作者：郭源李河周国英刘君昂张盛培中南林业科技大学南方人工林病虫害防控国家林草局重点实验室森林有害生物防控湖南省重点实验室经济林培育与保护教育部重点实验室湖南长沙410004

油茶炭疽病是由刺盘孢属Colletotrichum真菌引起的重要病害,在中国各油茶产区均有发生,严重威胁茶油的产量与品质。前期发现果生刺盘孢Colletotrichum fructicola是油茶炭疽病的优势致病菌,自噬相关蛋白Atg8在果生刺盘孢中的生物学功能... 详细信息

油茶炭疽病是由刺盘孢属Colletotrichum真菌引起的重要病害,在中国各油茶产区均有发生,严重威胁茶油的产量与品质。前期发现果生刺盘孢Colletotrichum fructicola是油茶炭疽病的优势致病菌,自噬相关蛋白Atg8在果生刺盘孢中的生物学功能尚不清楚。本研究根据同源重组的原理及PEG介导的原生质体转化方法,获得了CfATG8基因敲除突变体及其互补菌株。进一步通过生物学表型分析,发现突变体生长减慢、产孢量减少、附着胞形成率降低、对细胞壁完整性胁迫耐受性降低,并且丧失对油茶的致病性。上述结果表明,CfAtg8参与调控果生刺盘孢的营养生长、无性繁殖、附着胞形成、对外界胁迫应答及致病过程。

关键词：油茶果生刺盘孢细胞自噬自噬相关蛋白CfAtg8 致病性

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降香黄檀内生细菌多样性研究

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中南林业科技大学学报 2021年第10期41卷 156-164页

作者：蓝柏成刘君昂肖柏周国英中南林业科技大学南方人工林病虫害防控国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学森林有害生物防控湖南省重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室湖南长沙410004

【目的】降香黄檀是我国濒危树种,降香黄檀的高效培育一直是国内外研究的热点问题。本研究旨在为合理利用降香黄檀内生细菌资源提供科学依据,因此对降香黄檀内生细菌的群落结构及多样性进行探讨。【方法】采用高通量测序技术分析降香黄... 详细信息

【目的】降香黄檀是我国濒危树种,降香黄檀的高效培育一直是国内外研究的热点问题。本研究旨在为合理利用降香黄檀内生细菌资源提供科学依据,因此对降香黄檀内生细菌的群落结构及多样性进行探讨。【方法】采用高通量测序技术分析降香黄檀内生细菌的群落结构及多样性,同时测定并分析了降香黄檀心材边材的理化性质,包括含水率、pH值、灰分含量、热水抽提物含量、钙元素含量、钾元素含量和镁元素含量。【结果】经过测序共获得301585条序列,有效序列平均长度为447.5 bp;得到4678个OTUs,分属24门51纲104目200科329属。在门的水平上,心材优势菌为变形菌门和蓝细菌门,边材优势菌为变形菌门。在属的平上,心材优势菌为肠杆菌属,边材优势菌为肠杆菌属和不动杆菌属。丰度指数、香侬指数和辛普森指数的结果显示降香黄檀心材内生细菌的多样性大于边材。降香黄檀的内生细菌无论是数量还是多样性,在心材和边材上都存在差异。研究发现降香黄檀心材和边材灰分含量、热水提取物、pH值、Ca含量和K含量都存在明显差异。【结论】降香黄檀内生细菌的群落结构及多样性,心材均大于边材;引起降香黄檀内生细菌群落结构差异的主要木材环境因子有灰分含量、热水提取物、pH值、Ca含量和K含量;降香黄檀的各项理化性质中对其内生细菌群落结构影响较大的是含水率和pH值,其中pH值影响最大。

关键词：降香黄檀内生细菌心材边材

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油茶内生拮抗细菌的筛选、鉴定及防效

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中国生物防治学报 2021年第3期37卷 575-583页

作者：尚笑男刘君昂冯福山周国英中南林业科技大学长沙410004 人工林病虫害防控国家林业局重点实验室/森林有害生物防控湖南省重点实验室/经济林培育与保护教育部重点实验室长沙410004

为筛选出对油茶炭疽菌有拮抗效果的生防菌株,以油茶健康叶为对象,平板对峙法筛选,利用形态和生理生化特征以及16S rDNA基因和gyrA基因序列对菌株进行鉴定,测定其抑菌活性,并将该菌株与枯草芽胞杆菌Y13复配进行林间防效试验。结果表明,... 详细信息

为筛选出对油茶炭疽菌有拮抗效果的生防菌株,以油茶健康叶为对象,平板对峙法筛选,利用形态和生理生化特征以及16S rDNA基因和gyrA基因序列对菌株进行鉴定,测定其抑菌活性,并将该菌株与枯草芽胞杆菌Y13复配进行林间防效试验。结果表明,对油茶炭疽病菌拮抗作用效果较强的内生菌株为HBMC-B05;菌落为乳白色,不透明,边缘不整齐,中间有凸起;分子鉴定结果显示菌株HBMC-B05为贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis,其对果生炭疽菌Collectotrichum fructicola,抑菌率可达到81.31%,对另外3种油茶炭疽病病原菌抑菌率可达到70%以上,对其他4种致病菌也有抑制作用;复合菌剂对油茶病害的田间防治效果达到59%以上。该菌株的抑菌具有广谱性,可为油茶病害的生物防治扩充菌种资源,具有广泛的应用前景。

关键词：油茶内生细菌分离鉴定抑菌活性林间防效

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2株拮抗生防菌对油茶炭疽病多种病原菌的抑菌活性及防效

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经济林研究 2021年第2期39卷 27-34页

作者：徐睿刘闯张潇月周国英刘君昂河南林业职业学院森林保护系河南洛阳471002 中南林业科技大学南方人工林病虫害防控国家林业局重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学森林有害生物防控湖南省重点实验室湖南长沙410004 中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室湖南长沙410004

【目的】精准防治油茶炭疽病,为开发油茶炭疽病生物防治菌剂,获取更加高效、安全的油茶炭疽病生物防治技术提供参考。【方法】以枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis YL13、球孢链霉菌球孢亚种Streptomyces globisporus *** F10为供试拮抗菌... 详细信息

【目的】精准防治油茶炭疽病,为开发油茶炭疽病生物防治菌剂,获取更加高效、安全的油茶炭疽病生物防治技术提供参考。【方法】以枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis YL13、球孢链霉菌球孢亚种Streptomyces globisporus *** F10为供试拮抗菌,研究其发酵滤液对5种油茶炭疽菌(胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides、果生炭疽菌***、暹罗炭疽菌***、山茶炭疽菌***、哈锐炭疽菌***)生长的影响,测定其发酵滤液对优势炭疽菌胶孢炭疽菌和果生炭疽菌的效价,并在离体叶片上对油茶炭疽病进行防效研究。【结果】YL13发酵滤液对5种炭疽菌的抑制效果由强到弱依次为胶孢炭疽菌、暹罗炭疽菌、果生炭疽菌、哈锐炭疽菌、山茶炭疽菌,F10发酵滤液对5种炭疽菌的抑制效果由强到弱依次为胶孢炭疽菌、果生炭疽菌、哈锐炭疽菌、暹罗炭疽菌、山茶炭疽菌。2种发酵滤液对胶孢炭疽菌的抑制效果均为最佳,抑制率分别为83.46%、62.20%,对山茶炭疽菌的抑制率均为最低,分别为49.15%、30.99%。YL13发酵滤液对胶孢炭疽菌和果生炭疽菌的效价分别约为100、400倍,F10发酵滤液对胶孢炭疽菌、果生炭疽菌的效价均为40倍。当2种拮抗菌的发酵滤液稀释到一定浓度后,抑菌率均发生了不同程度的降低。随着稀释倍数的增大,YL13发酵滤液的抑菌活性降低速率远超过F10。在离体叶片上拮抗菌株对油茶炭疽病均有一定的防治效果,在接种YL13菌株2 d后再接种病原菌的预防效果最佳,达到了60%,F10对油茶炭疽病的预防和治疗均是拮抗菌与病原菌相隔1 d接种效果最佳,防治效果均达到了70%。【结论】2株生防菌对不同油茶炭疽病菌的拮抗效果存在一定的差异,但均具有明显的抑制作用。在离体叶片上,2种生防菌对油茶炭疽病均有良好的防治效果,可以用于生物防治药剂的开发。

关键词：油茶炭疽病拮抗菌抑菌活性防治效果

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调控油茶果生刺盘孢bZIP转录因子CfAp1的生物学功能

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林业科学 2020年第9期56卷 30-39页

作者：高亚兰何苑皋李河南方人工林病虫害防控国家林业和草原局重点实验室/森林有害生物防控湖南省重点实验室经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室/中南林业科技大学长沙410004

【目的】研究油茶炭疽病的主要流行致病菌果生刺盘孢菌b ZIP转录因子Cf Ap1的生物学功能,以期阐明果生刺盘孢菌致病的分子机制,为油茶炭疽病的防治提供理论依据。【方法】提取果生刺盘孢菌全基因组DNA,根据同源重组原理构建Cf AP1基因... 详细信息

【目的】研究油茶炭疽病的主要流行致病菌果生刺盘孢菌b ZIP转录因子Cf Ap1的生物学功能,以期阐明果生刺盘孢菌致病的分子机制,为油茶炭疽病的防治提供理论依据。【方法】提取果生刺盘孢菌全基因组DNA,根据同源重组原理构建Cf AP1基因敲除载体片段,采用PEG介导法把该片段转化至果生刺盘孢菌野生型菌株的原生质体中,验证筛选突变体菌株;PCR扩增果生刺盘孢菌含有启动子的Cf AP1基因回补片段,构建回补载体p YF11::Cf AP1;采用PEG介导法把回补载体p YF11::Cf AP1转化至果生刺盘孢菌突变体菌株的原生质体中,获得回补菌株ΔCfap1/AP1。测定野生型菌株、突变体菌株ΔCfap1-8及基因回补菌株ΔCfap1/AP1在生长发育、附着胞形成、外界胁迫和致病力等生物学表型。【结果】果生刺盘孢菌中具有1个与灰色大角间座壳(稻瘟菌) b ZIP转录因子MoAp1直系同源的基因,命名为Cf AP1;该基因全长1 804 bp,编码566个氨基酸,该蛋白含有1个碱性亮氨酸链(b ZIP)结构域、2个PAP1结构域和2个未知功能的结构域;与野生型和回补菌株相比,突变体ΔCfap1-8生长速率没有明显影响,但气生菌丝显著减少;通过测量产孢量,发现突变体ΔCfap1-8的分生孢子显著减少;ΔCfap1-8在含2.5、5 mmol·L-1H2O2和0.7 mol·L-1Na Cl的PDA平板上菌丝生长受到明显抑制;致病力测试结果表明,果生刺盘孢菌基因敲除突变体ΔCfap1-8对无伤和有伤油茶叶片的致病力下降明显,与野生型和回补菌株的致病力差异显著;突变体分生孢子产生附着胞数量减少且膨压降低。【结论】转录因子Cf Ap1参与调控油茶果生刺盘孢菌的生长发育、产孢、致病力以及响应外界氧压胁迫和渗透压胁迫过程。

关键词：油茶果生刺盘孢菌 bZIP转录因子 CfAp1 致病力

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