检索结果-内蒙古大学图书馆

光谱学与光谱分析 2019年第1期39卷 286-291页

作者：邹锋张旭辉袁德义朱周俊谭露曼刘冬明中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004

为探讨锥栗不同授粉组合果实中矿质元素是否也存在花粉直感效应,应用全自动间断化学分析仪和原子吸收光谱法测定了"华栗1号"、"华栗2号"、"华栗3号"和"黄榛"四个锥栗主栽品种自交、异交以及自... 详细信息

为探讨锥栗不同授粉组合果实中矿质元素是否也存在花粉直感效应,应用全自动间断化学分析仪和原子吸收光谱法测定了"华栗1号"、"华栗2号"、"华栗3号"和"黄榛"四个锥栗主栽品种自交、异交以及自然授粉的子代坚果中主要矿质元素的含量。结果表明,锥栗不同授粉组合坚果的N,P,K,Ca,Mg,Fe,Zn和Mn八种矿质元素含量差异较为显著,其矿质元素具有明显的花粉直感效应,尤其是铁、锌元素受花粉直感作用的影响较大,"华栗2号"×"黄榛"授粉组合果实铁、锌元素含量最高,分别为162.13和41.79μg·g^(-1);"黄榛"×"华栗1号"授粉组合果实中Mn元素含量最高为165.67μg·g^(-1),为锰微肥的利用提供了参考;通过主成分分析,评价出19个组合中在矿质元素方面表现最优的授粉组合为"华栗2号"×"黄榛"。该研究结果可为锥栗生产上合理配置授粉树和改善果实品质提供科学的依据。

关键词：全自动间断化学分析仪原子吸收光谱法锥栗花粉直感矿质元素主成分分析

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油桐叶肉细胞原生质体分离及瞬时转化体系的建立

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林业科学 2018年第1期54卷 46-53页

作者：谷战英杨若楠陈昊中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004

【目的】探索油桐叶肉细胞原生质体分离的最适条件,建立油桐原生质体的遗传转化体系,使在油桐体内研究自身基因的功能成为可能。【方法】以油桐成熟叶片和组培苗幼叶为材料,通过酶解法成功分离得到油桐叶肉细胞的原生质体并确定最适分... 详细信息

【目的】探索油桐叶肉细胞原生质体分离的最适条件,建立油桐原生质体的遗传转化体系,使在油桐体内研究自身基因的功能成为可能。【方法】以油桐成熟叶片和组培苗幼叶为材料,通过酶解法成功分离得到油桐叶肉细胞的原生质体并确定最适分离条件。在此基础上,以获得的原生质体为受体系统,建立PEG介导的油桐原生质体基因转化方法。【结果】原生质体分离结果表明,酶解时间对原生质体产量和活性的影响最大,其次是纤维素酶浓度,而离析酶浓度和甘露醇浓度对原生质体产量和活性的影响较小。以成熟叶片为材料分离原生质体的最适条件为纤维素酶浓度1.5%、离析酶浓度1%、甘露醇浓度0.6 mol·L-1、酶解时间12 h,以组培苗幼叶为材料分离原生质体的最适条件为纤维素酶浓度2%、离析酶浓度1%、甘露醇浓度0.7 mol·L-1、酶解时间6 h。为了建立油桐原生质体的瞬时转化体系,通过PEG介导法将拟南芥MGT6基因导入到油桐原生质体中,结果发现MGT6蛋白定位于原生质体质膜,与之前报道的研究结果一致,这表明本研究建立的油桐原生质体转化方法可成功将外源基因导入油桐原生质体并使其表达。【结论】建立油桐成熟叶片和组培苗幼叶叶肉细胞原生质体的高效分离方法,综合考虑取材的便利性和对后续原生质体培养的影响,建议以组培苗幼叶为材料分离原生质体,分离条件为纤维素酶浓度2%、离析酶浓度1%、甘露醇浓度0.7 mol·L-1、酶解时间6 h。在分离得到油桐叶肉细胞原生质体的基础上,本研究建立的PEG介导的原生质体遗传转化方法能以油桐叶肉细胞原生质体为受体,高效地将外源基因导入其中并使外源基因表达。本研究结果不仅可促进油桐基础研究的发展,在通过细胞融合和基因工程手段进行油桐种质创新方面也具有重要意义。

关键词：油桐原生质体制备遗传转化亚细胞定位

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油茶种子EST文库构建及主要表达基因的分析

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林业科学 2006年第1期42卷 43-48页

作者：谭晓风胡芳名谢禄山石明旺张党权乌云塔娜中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室

为研究油茶种子在油脂转化高峰期的基因表达并分离克隆与油脂合成等有关的重要基因,以油茶优良无性系湘林1号和湘林4号近成熟种子为材料构建cDNA文库;随机挑取2327个克隆进行3′端测序构建EST文库。将数据完整并无X、N的1979条cDNA序列... 详细信息

为研究油茶种子在油脂转化高峰期的基因表达并分离克隆与油脂合成等有关的重要基因,以油茶优良无性系湘林1号和湘林4号近成熟种子为材料构建cDNA文库;随机挑取2327个克隆进行3′端测序构建EST文库。将数据完整并无X、N的1979条cDNA序列与NCBI核酸数据库的非冗余序列进行同源性比较,确认763条cDNA序列与核酸数据库中其他物种的DNA序列具有很高或较高的同源性,可确认266种基因;有1216个克隆序列为未知功能的基因序列。各类基因表现出不同的表达丰度,其中贮藏蛋白基因、与基因表达调控相关的基因、抗逆相关基因、种子成熟和胚胎发育相关的基因等为高丰度表达,与脂肪酸代谢相关的基因等为中丰度表达,另外还有大量的其他基因和未知功能基因在种子中表达。各类基因表达的数量和趋势与种子接近发育成熟阶段相吻合。

关键词：油茶 cDNA EST 文库表达基因

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可见分光光度法测定碱胁迫中合欢幼苗的生理指标

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光谱学与光谱分析 2008年第2期28卷 418-421页

作者：周建张琳袁德义齐安国河南科技学院园林学院河南新乡453003 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室湖南长沙410004

为检测合欢幼苗的抗碱胁迫能力,文章试验利用可见分光光度法测定了碱胁迫下合欢幼苗体内的丙二醛、可溶性糖、脯氨酸含量及POD、SOD活性,分析这些生理指标在不同处理浓度、不同处理时间下的变化规律,探求碱胁迫下合欢幼苗的抗逆生理机... 详细信息

为检测合欢幼苗的抗碱胁迫能力,文章试验利用可见分光光度法测定了碱胁迫下合欢幼苗体内的丙二醛、可溶性糖、脯氨酸含量及POD、SOD活性,分析这些生理指标在不同处理浓度、不同处理时间下的变化规律,探求碱胁迫下合欢幼苗的抗逆生理机制。随着Na2CO3处理浓度的增加,幼苗叶片中MDA和可溶性糖含量,均呈递增趋势,当处理浓度低于75mmol.L-1,两者含量变化较平缓,而浓度高于75mmol.L-1时,则含量急剧增加,各处理间差异显著;脯氨酸含量也呈递增趋势,当处理浓度低于100mmol.L-1,变化较平缓,浓度高于100mmol.L-1时,含量则急剧增加,各处理间差异显著;SOD和POD活性变化趋势一致,都呈单峰曲线变化,但两者活性最大值所对应的处理浓度不同,分别为50和75mmol.L-1。此外,随着胁迫时间的延长,同一浓度处理的丙二醛含量逐步增加,而脯氨酸、可溶性糖含量、SOD、POD活性变化较复杂,无明显规律性。

关键词：碱胁迫合欢幼苗生理指标可见分光光度法

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‘晚大新高’梨授粉及受精过程的显微动态研究

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西北植物学报 2006年第7期26卷 1363-1368页

作者：段经华赵思东袁德义张琳梁文斌中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004

应用荧光显微法和石蜡切片解剖法对晚大新高梨授粉受精过程进行了系统观察研究.结果表明:晚大新高梨自花授粉不结实;异花最佳授粉品种为黄花,其次为翠冠和丰水.与选用黄花为异花授粉品种相比,自花和异花的授粉受精过程存在明显差异,自... 详细信息

应用荧光显微法和石蜡切片解剖法对晚大新高梨授粉受精过程进行了系统观察研究.结果表明:晚大新高梨自花授粉不结实;异花最佳授粉品种为黄花,其次为翠冠和丰水.与选用黄花为异花授粉品种相比,自花和异花的授粉受精过程存在明显差异,自花花粉在授粉后2 h开始萌发,8 h花粉管生长至离柱头约1/3处停止生长,顶端膨大呈球形,表现出自交不亲和性;异花花粉在授粉后1 h开始部分萌发,8 h花粉管生长至花柱中部,24 h到达花柱基部并进入子房,48 h进入胚囊,72 h完成双受精过程.

关键词：砂梨授粉荧光显微镜花粉管生长受精

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油茶脱水素样蛋白的基因克隆与序列分析及其生理功能预测

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西北植物学报 2008年第8期28卷 1541-1548页

作者：胡孝义谭晓风田晓明刘巧罗茜谢鹏曾艳玲中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004

以油茶EST文库为基础,采用5-′RACE技术,分离克隆了一个脱水素样基因的全长cDNA序列(GenBank接受号EU856537),同源分析表明其编码的208 aa的小分子蛋白(id号ACF72673)属于SK2型脱水素,命名为***2的肽链内2个类K-片段间富含苏氨酸,有别... 详细信息

以油茶EST文库为基础,采用5-′RACE技术,分离克隆了一个脱水素样基因的全长cDNA序列(GenBank接受号EU856537),同源分析表明其编码的208 aa的小分子蛋白(id号ACF72673)属于SK2型脱水素,命名为***2的肽链内2个类K-片段间富含苏氨酸,有别于脱水素一般性结构特点,并且同油茶种子中另一类脱水素一样也具有一个十分保守的基序(EDDGQAGRRKK),这可能有利于脱水素的磷酸化和亚细胞定位;采用多种方法预测其二级结构,表明CoDHN2为内在性无规则蛋白,但其中远离C端的一个类K-片段可形成两亲性α-螺旋.CoDHN2含有较多的组氨酸残基以及良好的可溶性,推测它可结合金属离子从而减少活性氧的来源并清除活性氧,并在生理脱水时充当缓冲液.结合其它物种脱水素的研究进展,认为CoDHN2极有可能在油茶油脂合成高峰期同正在发育的脂体结合而保护脂体免受活性氧危害,这为油茶种子细胞的脂体发育研究提出了一个新的方向.

关键词：油茶脱水素基因 cDNA文库 RACE 生理功能

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梨自交不亲和新基因S_(35)-RNase的克隆与表达分析

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园艺学报 2007年第3期34卷 751-754页

作者：杨谷良谭晓风中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室

通过RACE技术,从早酥梨花柱中分离到一个长度为681bp的自交不亲和基因,DNA序列分析表明,其开放读码框由227个氨基酸组成,具有S-RNase基因特有的保守组氨酸和半胱氨酸残基、高变区和保守区等特征序列,与己登录的S4-RNase基因DNA序列同源... 详细信息

通过RACE技术,从早酥梨花柱中分离到一个长度为681bp的自交不亲和基因,DNA序列分析表明,其开放读码框由227个氨基酸组成,具有S-RNase基因特有的保守组氨酸和半胱氨酸残基、高变区和保守区等特征序列,与己登录的S4-RNase基因DNA序列同源性最高,达94%,登录为一个新基因:S35-RNase,GenBank接收号为DQ224344。通过Northern杂交,发现该基因只在花柱中特异性表达,并且在大铃铛期的表达量比花前和花后3d的表达量都高。

关键词：梨 RACE 自交不亲和性 S35-RNase Northern杂交

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1个油茶Y_2SK_2型脱水素的全长cDNA克隆及生理功能的预测

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林业科学 2008年第10期44卷 55-62页

作者：胡孝义谭晓风张党权曾艳铃陈鸿鹏田晓明刘巧中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004

以构建的油茶EST文库为基础,采用电子克隆技术,分离克隆一个脱水素基因的全长cDNA序列,该基因的cDNA全长1406bp,含一个600bp的CDS,编码200aa的小分子蛋白。推测该基因编码蛋白的分子质量为21ku,等电点7,暂命名为CoDHNI。同源性分析发现... 详细信息

以构建的油茶EST文库为基础,采用电子克隆技术,分离克隆一个脱水素基因的全长cDNA序列,该基因的cDNA全长1406bp,含一个600bp的CDS,编码200aa的小分子蛋白。推测该基因编码蛋白的分子质量为21ku,等电点7,暂命名为CoDHNI。同源性分析发现该基因的编码蛋白具有2个Y-片段(DEYGNP),1个S-片段(SGSSSSSS),2个K-片段(KIKEKLPG),属于典型的Y2SK2型脱水素。经Blast比对,发现富含苏氨酸的Thr-区在各物种间变异显著,推测该区为油茶所特有,有利于在被保护的大分子表面形成水合层;同时还发现一个十分保守的基序:EDDGQGGRRKK,可能有利于脱水素的磷酸化和亚细胞定位。通过与柑桔和拟南芥的脱水素比较,提出CoDHNI有可能缓冲种子脱水胁迫响应时钙离子的瞬时增高,并可结合重金属离子,以减轻活性氧的危害。

关键词：油茶脱水素基因 cDNA文库 RACE 生理功能生物信息学

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油茶FAD2基因全长cDNA的克隆和序列分析

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林业科学 2008年第3期44卷 70-75页

作者：谭晓风陈鸿鹏张党权曾艳玲李魏蒋瑶谢禄山胡孝义胡芳名中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004

FAD2基因控制油酸转化为亚油酸,是油茶油脂合成代谢的关键酶基因。在构建的油茶EST文库基础上,采用5′RACE和交错延伸PCR技术获得了油茶FAD2基因的全长cDNA克隆。该基因序列长1682bp,开放阅读框为1149bp,编码382个氨基酸,并且具有FAD2... 详细信息

FAD2基因控制油酸转化为亚油酸,是油茶油脂合成代谢的关键酶基因。在构建的油茶EST文库基础上,采用5′RACE和交错延伸PCR技术获得了油茶FAD2基因的全长cDNA克隆。该基因序列长1682bp,开放阅读框为1149bp,编码382个氨基酸,并且具有FAD2特有的保守序列和相关特征。经过比对分析,发现油茶的FAD2基因与其他植物的FAD2基因具有较高的相似性。

关键词：油茶 EST文库 FAD2基因 RACE 交错延伸PCR 基因克隆

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油茶种子水通道蛋白CoPIP1-1的鉴定与分析

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林业科学 2008年第12期44卷 48-56页

作者：胡孝义谭晓风田晓明刘巧罗茜陈鸿鹏胡芳名中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室长沙410004

以构建的油茶cDNA文库为基础,采用交错延伸PCR技术,分离克隆到一个水通道蛋白基因的编码序列(coding sequence,CDS),它编码一个287aa的跨膜蛋白(GenBank蛋白质id:ACF39901)。该蛋白可能由2条基因(GenBank登录号:EU850810、EU850811)编码... 详细信息

以构建的油茶cDNA文库为基础,采用交错延伸PCR技术,分离克隆到一个水通道蛋白基因的编码序列(coding sequence,CDS),它编码一个287aa的跨膜蛋白(GenBank蛋白质id:ACF39901)。该蛋白可能由2条基因(GenBank登录号:EU850810、EU850811)编码,这2个基因具有相同的CDS和3′-UTR,但5′-UTR不同,其中之一多了2个小的插入片段。经对该蛋白的同源性比对和特征性基序分析,推测这个水通道蛋白属于质膜内在蛋白成员,定名为CoPIP1-1。通过同源建模,论证CoPIP1-1的水通道活性与通道口的(去)覆盖有关。N端与D环、B环的静电势作用导致了对通道口的(去)覆盖,并受磷酸化/质子化门控机制调控,质子化抑制通道活性,磷酸化则解除抑制。从同源建模的结果和细胞内的氧化状态推测该蛋白为组成型的低活性,这可能是油茶种子近成熟期脱水的成因之一。

关键词：油茶水通道蛋白基因 cDNA文库水通道活性生物信息学同源建模

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