目的:基于靶点模块组效关系,探究丹红注射液(DHI)治疗慢性稳定型心绞痛(SAP)的疗效驱动机制,以此阐明DHI的药理作用。方法:该研究根据前期临床试验获得的西雅图心绞痛问卷(SAQ)评分中的心绞痛频率数值(AF),划分DHI治疗前后的疗效组别,以治疗前和治疗后第30天最佳疗效组患者的转录组数据为数据来源,采用加权基因共表达网络(WGCNA)分析,构建共表达网络,划分网络模块,并与临床特征进行关联;此外,通过Zsummary识别药效应答模块,将Z值<0的模块确定为药效应答模块;其次,采用网络密度、中心性、聚类系数等网络拓扑指标在网络层次、模块层次分别探究DHI疗效的网络模块动态变化;通过Personalized network control algorithm(PNC)算法筛选驱动基因;最后,采用大鼠H9C2细胞建立缺氧/复氧(H/R)模型对驱动基因进行实验验证,证实DHI治疗慢性SAP的潜在疗效靶点,为DHI治疗慢性SAP的药理机制提供科学依据。结果:DHI治疗慢性SAP的最佳疗效组中包含19个模块;分别与基线(Day0)和治疗30 d后相比,得到12个药效应答模块;通过网络和模块等不同层次的网络指标变化,证实了DHI治疗SAP后网络呈现聚合状态;最终,采用H9C2细胞缺氧/复氧模型验证了驱动基因Klotho和成纤维细胞生长因子22(FGF22)在DHI治疗SAP中的关键作用。结论:该研究基于临床转录组数据,确定了DHI治疗SAP的靶点模块组效关系,为DHI治疗SAP的疗效驱动机制提供了科学依据。
目的由Hedgehog信号通路探讨补肾方药左归丸对卵巢切除所致骨质疏松症(osteoporosis,OP)大鼠的作用机理。方法选用雌性SD大鼠,随机分为空白对照组、假手术组、造模组。造模组切除双侧卵巢,假手术组不切除卵巢,仅切除卵巢周围少量脂肪组织。12周后,将造模组随机分为卵巢切除组(OVX组)、阳性对照组和左归丸组。阳性对照组灌服戊酸雌二醇混悬液,左归丸组灌服左归丸水煎液,OVX组灌服等体积纯水,给药13周后取材。通过Micro-CT检测各组骨密度(bone mineral density,BMD),免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测各组胫骨骨髓基质细胞中Ihh、Ptch、Smo、Gli1、OPG、RANKL的蛋白表达。结果假手术组骨密度(bone mineral density,BMD)高于OVX组、阳性对照组、左归丸组,且OVX组BMD较阳性对照组、左归丸组更低;OVX组Hedgehog信号通路关键因子Ihh、Ptch、Smo、GLi1蛋白表达水平以及RANKL/OPG比值较假手术组明显增高;阳性对照组和左归丸组Ihh、Ptch、Smo、GLi1蛋白表达水平及RANKL/OPG比值均低于OVX组,但仍高于假手术组。结论左归丸可抑制卵巢切除所致的Hedgehog信号通路异常活跃,使其关键因子Ihh、Ptch、Smo、GLi1蛋白表达水平明显降低;进而降低RANKL/OPG比值,抑制破骨细胞(osteoclast,OC)活性,减少骨量流失。
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