检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中医基础医学杂志 2020年第5期26卷 601-604,665页

作者：翟取孙明杰崔海峰武乾石晓路中国中医科学院医学实验中心北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室北京100700

目的:探讨生脉散对糖尿病大鼠心功能和钙转运蛋白表达的影响。方法:高脂饲料喂养雄性SD大鼠4周后注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、曲美他嗪组和生脉散组,对照组全程以普通饲料喂养,以上各组灌胃给药12周并... 详细信息

目的:探讨生脉散对糖尿病大鼠心功能和钙转运蛋白表达的影响。方法:高脂饲料喂养雄性SD大鼠4周后注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、曲美他嗪组和生脉散组,对照组全程以普通饲料喂养,以上各组灌胃给药12周并监测大鼠体质量、血糖及动态超声心动,给药后第12周Western blot检测心肌组织钙转运相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,糖尿病模型大鼠第8周开始出现左心室射血分数(EF)及短轴缩短率(FS)降低,左室收缩功能降低;曲美他嗪组、生脉散组自给药第8周EF、FS增高,模型组PLB表达增高, SERCA2a、PLB Ser16+Thr17、NCX1蛋白表达降低;曲美他嗪、生脉散组给药12周后PLB Ser16+Thr17、SERCA2a、NCX1表达增加。结论:生脉散可以通过调节心脏钙转运蛋白增强肌浆网钙回摄,改善糖尿病大鼠心脏收缩功能,为临床防治糖尿病并发的心脏收缩功能损伤提供理论依据。

关键词：生脉散糖尿病心肌病钙转运蛋白心脏收缩

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三种TRACP染色法检测CIA大鼠关节切片中破骨细胞的比较

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临床与实验病理学杂志 2020年第11期36卷 1366-1368页

作者：徐慧慧刘红李艳潘静华王少君曹金凤赵宏艳中国中医科学院医学实验中心/中医药防治重大疾病基础研究北京市重点实验室北京100700

破骨细胞属于组织特异性的多核巨噬细胞,来源于骨髓造血单核巨噬细胞系,在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)及其继发的骨质疏松症的发生、发展中起重要作用。抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRACP)是破... 详细信息

破骨细胞属于组织特异性的多核巨噬细胞,来源于骨髓造血单核巨噬细胞系,在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)及其继发的骨质疏松症的发生、发展中起重要作用。抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRACP)是破骨细胞分化成熟的标志物,也与破骨细胞骨吸收功能密切相关[1-2]。应用TRACP染色检测破骨细胞分化及观察破骨细胞活性是实验室常用技术之一,TRACP染色方法较多,多采用酸性磷酸酶试剂盒检测。

关键词： TRACP染色破骨细胞关节炎组织切片

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基于HPLC和网络药理学方法的三化汤治疗脑缺血活性成分含量测定及作用靶点预测

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国际中医中药杂志 2021年第11期43卷 1109-1115页

作者：路颖慧黄颖孙明杰李雯洁北京中医药大学中药学院 102488 中国中医科学院医学实验中心中医药防治重大疾病基础研究北京市重点实验室北京100700

目的:结合HPLC和网络药理学方法对三化汤治疗脑缺血的活性成分进行含量测定,预测其发挥作用的潜在靶点。方法:采用HC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.05%磷酸水,梯度洗脱,流速1.0、0.8 ml/min;检测波长254 nm... 详细信息

目的:结合HPLC和网络药理学方法对三化汤治疗脑缺血的活性成分进行含量测定,预测其发挥作用的潜在靶点。方法:采用HC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.05%磷酸水,梯度洗脱,流速1.0、0.8 ml/min;检测波长254 nm,柱温30℃,进样量10μl。运用TCMIP V 2.0平台检索大黄酸、大黄素、大黄酚、橙皮苷、厚朴酚和羌活醇6种成分作用靶点,以Cerebral ischemia为关键词,检索GeneCards、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、疗效药靶数据库(TTD)、Disgenet数据库,筛选6种活性成分治疗脑缺血潜在靶点,构建蛋白质相互作用网络和疾病-成分-靶点-通路整合网络。结果:三化汤中6种活性成分大黄酸、大黄素、大黄酚、橙皮苷、厚朴酚和羌活醇线性范围分别为0.0804~0.8040μg、0.0153~0.3820μg、0.0418~0.6264μg、0.3126~3.9080μg、0.0379~0.5688μg、0.0453~1.3596μg,相关系数均大于0.9990。经测定7份样品中上述6个成分含量范围分别为0.887~0.971 mg/g、0.094~0.101 mg/g、0.110~0.119 mg/g、1.494~1.669 mg/g、0.126~0.145 mg/g、0.153~0.167 mg/g。网络药理学分析发现,TNF、TP53、MAPK14、JUN、IL1B、MYC、ESR1、ICAM1、PTGS2、PPARG为三化汤中6种活性成分治疗脑缺血的核心靶点。结论:建立了三化汤治疗脑缺血6种活性成分质量控制方法,该方法样品处理简便,色谱条件简单,结果准确。明确了三化汤中6种活性成分治疗脑缺血的10个潜在靶点,为进一步研究其作用机制奠定基础。

关键词：三化汤脑缺血网络药理学靶点含量测定质量控制

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人参-三七-川芎提取物对糖尿病小鼠心肌纤维化的保护作用

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中国实验方剂学杂志 2020年第8期26卷 30-37页

作者：胡艳红王雪方靖漪杨静修成奎王佳丽刘奕清雷燕中国中医科学院医学实验中心北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室北京100700 广东药科大学中医药研究院广东省代谢性疾病中西医结合研究中心广州510006

目的:从心肌纤维化程度及心肌组织中胶原蛋白Ⅰ型(CollagenⅠ),胶原蛋白Ⅲ型(CollagenⅢ)及转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达,探讨人参-三七-川芎提取物(GNC)对糖尿病小鼠心肌纤维化的保护作用。方法:建立链脲佐菌素(STZ)联合高脂饲料... 详细信息

目的:从心肌纤维化程度及心肌组织中胶原蛋白Ⅰ型(CollagenⅠ),胶原蛋白Ⅲ型(CollagenⅢ)及转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达,探讨人参-三七-川芎提取物(GNC)对糖尿病小鼠心肌纤维化的保护作用。方法:建立链脲佐菌素(STZ)联合高脂饲料诱导糖尿病小鼠模型,另设正常组,糖尿病小鼠按照随机数字表法分为模型组,GNC低、高剂量组(0.819,1.638 g·kg^-1)及二甲双胍组(150 mg·kg^-1)。各组均灌胃给药,正常组给与等剂量的去离子水,1次/d,连续9周。胶原纤维染色(Masson三色染色法)观察小鼠心肌间质纤维化程度,并用Image-pro plus 6.0分析软件计算胶原密度比值;免疫组化检测小鼠心肌组织CollagenⅠ,CollagenⅢ及TGF-β1蛋白表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心肌组织内CollagenⅠ,CollagenⅢ和TGF-β1的蛋白表达电泳及灰度值水平。结果:Masson实验结果显示,与正常组比较,模型组小鼠心肌细胞肥大、变形,心肌间质尤其是在微血管周围,有大量蓝染的胶原纤维沉积,相互连接交织成网状(P<0.01);与模型组比较,GNC低、高剂量组和二甲双胍组小鼠心肌细胞排列紊乱明显改善,心肌间质蓝染的胶原纤维也较模型组明显减少(P<0.05)。免疫组化和Western blot结果显示:与正常组比较,模型组小鼠心肌组织CollagenⅠ,CollagenⅢ和TGF-β1阳性表达,蛋白表达含量明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组蛋白阳性表达均降低,蛋白表达含量趋于正常(P<0.05,P<0.01)。结论:STZ联合高脂饲料能够诱导糖尿病小鼠心肌纤维化,诱导CollagenⅠ,CollagenⅢ和TGF-β1蛋白高表达。人参-三七-川芎提取物可通过调节CollagenⅠ,CollagenⅢ和TGF-β1蛋白表达,改善糖尿病小鼠心肌纤维化。

关键词：糖尿病心肌纤维化链脲佐菌素人参-三七-川芎提取物胶原蛋白Ⅰ型(CollagenⅠ) 胶原蛋白Ⅲ型(CollagenⅢ) 转化生长因子-β1(TGF-β1)

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人参-三七-川芎提取物对高糖诱导小鼠血管老化后α-SMA和Runx2蛋白表达的影响

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中国实验方剂学杂志 2020年第8期26卷 21-29页

作者：胡艳红方靖漪王雪杨静修成奎王佳丽刘奕清雷燕中国中医科学院医学实验中心北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室北京100700 广东药科大学中医药研究院广东省代谢性疾病中西医结合研究中心广州510006

目的:为了研究人参-三七-川芎提取物(GNC)对高糖诱导小鼠血管老化后α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达的调控作用,阐明GNC延缓血管老化的保护作用机制。方法:C57BL/6小鼠,130只,雄性,随机分为正常组和高糖... 详细信息

目的:为了研究人参-三七-川芎提取物(GNC)对高糖诱导小鼠血管老化后α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达的调控作用,阐明GNC延缓血管老化的保护作用机制。方法:C57BL/6小鼠,130只,雄性,随机分为正常组和高糖组。高糖组腹腔注射链脲佐菌素(STZ),造模成功后,喂食高脂饲料7个月,之后再次随机分为模型组,GNC低、高剂量组(0.819,1.638 g·kg^-1)及二甲双胍组(150 mg·kg^-1)。灌胃给药,每天1次,连续9周。取材前7 d,新购一批4周龄雄性C57BL/6小鼠正常喂养1周,为青年组。观察小鼠一般情况,实验结束后分别用苏木素-伊红(HE)染色结合透射电镜(TEM)观察小鼠颈总动脉形态学变化,马松(Masson)染色观察小鼠颈总动脉纤维化,免疫组化检测小鼠颈总动脉中基质金属蛋白酶-2(MMP-2),周期蛋白依赖激酶抑制因子2A(p16),周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21),α-SMA与Runx2蛋白表达。结果:HE,TEM,Masson 3个实验结果显示:与青年组比较,正常组小鼠颈总动脉中内外膜厚度、超微结构和血管壁中胶原和弹性纤维的相对含量几乎无变化;与正常组比较,模型组小鼠颈总动脉内膜不光滑,内皮细胞几乎完全脱落,胞质裂解,内弹性膜变薄、断裂、甚至脱离,可见增生的胶原纤维潜入中膜,中外膜增生明显且排列紊乱(P<0.01),血管平滑肌细胞变形、突起、分叉增多、甚至碎裂,并可见局灶性坏死,细胞内空泡和溶酶体等大量增多,并可见明显的自噬泡。血管壁中外膜胶原和弹性纤维的相对含量增加明显(P<0.01);与模型组比较,各给药组以上病理情况均有所改善(P<0.01)。免疫组化结果显示:与正常组比较,模型组小鼠颈总动脉MMP-2,p16,p21,Runx2高表达(P<0.01),α-SMA低表达(P<0.01);与模型组比较,各给药组各蛋白表达趋于正常(P<0.05,P<0.01)。结论:高糖能够诱导小鼠颈总动脉血管老化,改变α-SMA,Runx2蛋白表达。GNC可通过调节α-SMA,Runx2蛋白表达,延缓血管老化。

关键词：血管老化 α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) runt相关转录因子-2(Runx2) 高糖人参-三七-川芎提取物颈总动脉

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人参三七川芎提取物对高糖高脂诱导血管衰老小鼠肠道菌群的影响

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中国中药杂志 2020年第12期45卷 2938-2946页

作者：王佳丽修成奎杨静王雪胡艳红方靖漪雷燕中国中医科学院医学实验中心中医药防治重大疾病基础研究北京市重点实验室北京100700 广东药科大学中医药研究院广东省代谢性疾病中西医结合研究中心广东广州510006

观察血管衰老小鼠肠道菌群的变化,探究血管衰老与肠道菌群的关系及人参三七川芎提取物对血管衰老小鼠肠道菌群的影响。以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合喂养高脂饲料诱导小鼠血管衰老模型,生化法检测血清胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密... 详细信息

观察血管衰老小鼠肠道菌群的变化,探究血管衰老与肠道菌群的关系及人参三七川芎提取物对血管衰老小鼠肠道菌群的影响。以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合喂养高脂饲料诱导小鼠血管衰老模型,生化法检测血清胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及血糖(GLU),HE染色法检测小鼠胸主动脉形态,Western blot法检测小鼠胸主动脉周期蛋白依赖激酶抑制因子2A(p16)、周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)蛋白表达。用Illumina MiSeq高通量测序技术检测小鼠肠道菌群16S rDNA基因,探索各组小鼠肠道菌群的变化。结果显示,中药低、高剂量组小鼠GLU水平降低,但各项血脂指标变化不明显,而二甲双胍能够明显下调小鼠GLU(P<0.01)、CHO和LDL-C水平(P<0.05),给药各组血管内膜损伤不明显,中膜少量增生,p16和p21蛋白表达明显下降(P<0.05)。各组小鼠肠道菌群在门水平上均由厚壁菌门(Firmicutes,F)和拟杆菌门(Bacteroidetes,B)组成为主,但是B/F比值有差异,与青年组和对照组相比,模型组B/F比值显著降低(P<0.01);与模型组相比,中药高剂量组和二甲双胍组B/F比值显著升高(P<0.05)。各组小鼠肠道中都存在优势菌群和差异菌群。结果表明,人参三七川芎提取物可以通过升高B/F比值,改善肠道菌群结构,营造良好的肠道环境,为其降低血糖血脂,延缓血管衰老提供新的可能通路。

关键词：血管衰老高糖高脂人参三七川芎提取物肠道菌群

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益气活血方治疗糖尿病血管病变的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2020年第8期26卷 1-12页

作者：胡艳红杨静修成奎王雪方靖漪王佳丽刘奕清刘逸南雷燕中国中医科学院医学实验中心北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室北京100700 广东药科大学中医药研究院广东省代谢性疾病中西医结合研究中心广州510006

糖尿病(DM)是以高血糖为特征的一种慢性代谢性疾病,其主要并发症如糖尿病血管病变现已严重影响患者的生活质量,成为患者致死、致残的重要原因。糖尿病血管病变基础的病理变化为大血管病变和微血管病变:大血管病变主要累及胸主动脉、冠... 详细信息

糖尿病(DM)是以高血糖为特征的一种慢性代谢性疾病,其主要并发症如糖尿病血管病变现已严重影响患者的生活质量,成为患者致死、致残的重要原因。糖尿病血管病变基础的病理变化为大血管病变和微血管病变:大血管病变主要累及胸主动脉、冠状动脉、颈动脉、脑动脉和周围血管等大血管,临床常见疾病是冠心病、脑卒中、周围神经性病变、下肢动脉硬化等;微血管病变主要累及心、脑、肾等微血管。现今社会各种新型口服降糖药和胰岛素在临床不断涌现,并广泛应用于临床。但中医药疗效稳定,副作用小,并可改善糖代谢、改善脂质代谢、改善胰岛素抵抗、改善氧化应激、改善炎症因子表达、改善血管内皮损伤、改善微循环障碍、改善纤溶系统和凝血系统平衡、改善中医证候等,在防治糖尿病血管病变等方面也得到大家广泛认可和应用。中医学对糖尿病血管病变病因、病机、治法也有深刻的理解和认识,因此本文就中医学对糖尿病血管病变的认识及近3年来采用益气活血方治疗糖尿病血管病变的作用机制综述如下。

关键词：益气活血方糖尿病血管病变当归补血汤丹蛭降糖胶囊益气活血通络汤气虚血瘀

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人参-三七-川芎提取物延缓高糖诱导的小鼠血管钙化的机制

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中国实验方剂学杂志 2020年第8期26卷 13-20页

作者：胡艳红杨静修成奎王雪方靖漪王佳丽刘奕清雷燕中国中医科学院医学实验中心北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室北京100700 广东药科大学中医药研究院广东省代谢性疾病中西医结合研究中心广州510006

目的:从小鼠颈总动脉、胸主动脉中骨桥蛋白(OPN)和平滑肌22α蛋白(SM22α)表达及血管钙盐沉积程度,探讨人参-三七-川芎提取物对高糖诱导的小鼠血管钙化的保护作用。方法:130只雄性C57BL/6小鼠先随机分为正常组和高糖组。高糖组腹腔注射... 详细信息

目的:从小鼠颈总动脉、胸主动脉中骨桥蛋白(OPN)和平滑肌22α蛋白(SM22α)表达及血管钙盐沉积程度,探讨人参-三七-川芎提取物对高糖诱导的小鼠血管钙化的保护作用。方法:130只雄性C57BL/6小鼠先随机分为正常组和高糖组。高糖组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)后,高脂饮食连续喂养7个月,之后再次随机分为模型组、人参-三七-川芎提取物低、高剂量组(0.819,1.638 g·kg^-1)及二甲双胍组(150 mg·kg^-1)。每组灌胃给药,每天1次,连续9周,并监测血糖变化。给药结束前7 d,购进一批4周龄雄性C57BL/6小鼠,正常喂养1周,作为青年组。全部给药结束后,收集小鼠颈总动脉和胸主动脉组织。分别采用冯库萨(Von Kossa)染色判断小鼠颈总动脉、胸主动脉钙盐沉积程度,免疫组化检测小鼠颈总动脉、胸主动脉中OPN与SM22α蛋白表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定小鼠颈总动脉中OPN与SM22α蛋白表达情况。结果:与青年组比较,正常组小鼠血糖升高无统计学差异,颈总动脉、胸主动脉结构染色均匀,未见黑色颗粒状沉淀;与正常组比较,模型组血糖显著升高(P<0.01),血管中内膜弹性纤维内有大量棕黑色颗粒沉积,钙盐沉积程度明显;与模型组比较,各给药组血糖明显下降(P<0.05,P<0.01),血管钙盐沉积程度明显减轻。与青年组比较,正常组小鼠颈总动脉、胸主动脉中OPN蛋白和SM22α蛋白表达无显著改变;与正常组比较,模型组颈总动脉、胸主动脉中内膜OPN蛋白表达呈阳性,SM22α蛋白表达呈弱阳性,颈总动脉中OPN蛋白表达灰度值显著升高(P<0.01),SM22α蛋白表达灰度值显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组颈总动脉、胸主动脉中内膜OPN蛋白和SM22α蛋白表达显著改善,颈总动脉中OPN蛋白表达灰度值明显降低(P<0.05,P<0.01),SM22α蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论:高糖能够诱导小鼠颈总动脉、胸主动脉钙化,加速血管老化,这一形成过程可能与OPN与SM22α表达有关。人参-三七-川芎提取物可通过调节OPN与SM22α表达,减轻血管钙化,延缓血管老化。

关键词：血管钙化骨桥蛋白(OPN) 平滑肌22α蛋白(SM22α) 高糖人参-三七-川芎提取物血管老化

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从AMPK/mTOR通路探讨人参-三七-川芎提取物对糖尿病小鼠心脏老化的保护作用机制

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中国实验方剂学杂志 2020年第8期26卷 38-46页

作者：胡艳红修成奎杨静王雪方靖漪王佳丽刘奕清刘逸南雷燕中国中医科学院医学实验中心北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室北京100700 广东药科大学中医药研究院广东省代谢性疾病中西医结合研究中心广州510006

目的:从AMP激活的蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路的活化及心脏病理形态学变化、相关衰老蛋白的改变,探讨人参-三七-川芎提取物(GNC)对糖尿病小鼠心脏老化的保护作用机制。方法:C57BL/6雄性小鼠,SPF级,随机分为正常组... 详细信息

目的:从AMP激活的蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路的活化及心脏病理形态学变化、相关衰老蛋白的改变,探讨人参-三七-川芎提取物(GNC)对糖尿病小鼠心脏老化的保护作用机制。方法:C57BL/6雄性小鼠,SPF级,随机分为正常组和高糖组。高糖组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合喂食高脂饲料,造模成功后再次随机分为模型组,GNC低剂量组(0.819 g·kg^-1),GNC高剂量组(1.638 g·kg^-1)及二甲双胍组(150 mg·kg^-1)。每天1次,灌胃给药,连续9周,监测血糖变化。4周龄雄性C57BL/6小鼠正常喂养1周,为青年组。观察小鼠一般情况,苏木素-伊红(HE)染色结合透射电镜(TEM)观察小鼠心脏病理形态学变化,冯库萨(Von Kossa)染色判断小鼠心脏微血管钙盐沉积程度,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心脏组织中AMPK/mTOR信号通路活化状态,以及衰老相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2),抑癌基因p53(p53),磷酸化抑癌基因p53(p-p53)表达。结果:与正常组比较,模型组血糖显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组血糖明显下降(P<0.05,P<0.01)。HE,TEM,Von Kossa 3个病理形态学实验结果显示:与正常组比较,模型组小鼠心肌细胞肥大,心肌纤维排列紊乱、灶性溶解坏死,线粒体肿胀、变性、嵴断裂、空泡变,心脏微血管结构紊乱、染色不均匀、中内膜有大量钙盐沉积;与模型组比较,各给药组小鼠病理形态学变化均有不同程度的改善。与正常组比较,模型组MMP-2,p53和p-p53蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),p-肝激酶B1(LKB1)/LKB1,p-AMPK/AMPK蛋白明显降低(P<0.05,P<0.01),p-mTOR/mTOR,p-核糖体蛋白S6激酶p70S6K/p70S6k蛋白显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组MMP-2,p53和p-p53蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),p-LKB1/LKB1,p-AMPK/AMPK蛋白明显升高(P<0.05,P<0.01),p-mTOR/mTOR,p-p70S6k/p70S6k蛋白明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:STZ联合高脂饲料能够诱导小鼠心脏老化,GNC能够改善糖尿病小鼠心脏老化,其作用机制可能与调控AMPK/mTOR通路相关蛋白表达有关。

关键词： AMP激活的蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路糖尿病人参-三七-川芎提取物高糖心脏老化 p53 衰老

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大鼠血液和脑组织液中游离型青藤碱、川芎嗪、加巴喷丁、扑热息痛、普瑞巴林和阿米替林的微透析液取样及HPLC-MS/MS定量方法研究

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药学学报 2020年第9期55卷 2198-2206页

作者：李涛赵小亮高天乐焦玥高文雅刘洋张美玉王志国王丹巧中国中医科学院医学实验中心北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室北京100700 中国医学科学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室北京100050 中国中医科学院中药研究所北京100700

建立大鼠血液和脑组织液中游离型青藤碱、川芎嗪、加巴喷丁、扑热息痛、普瑞巴林和阿米替林的微透析液取样及HPLC-MS/MS检测方法。大鼠的颈静脉和脑纹状体植入微透析探针,分别以枸橼酸缓冲溶液和林格氏液为灌流液,以1.5μL·min^-1... 详细信息

建立大鼠血液和脑组织液中游离型青藤碱、川芎嗪、加巴喷丁、扑热息痛、普瑞巴林和阿米替林的微透析液取样及HPLC-MS/MS检测方法。大鼠的颈静脉和脑纹状体植入微透析探针,分别以枸橼酸缓冲溶液和林格氏液为灌流液,以1.5μL·min^-1的灌流速度,以20 min的间隔收集血液和脑组织液微透析液样品,连续收集至给药后24 h。液相色谱分离采用C18反相色谱柱(HSS T32.5μm,2.1 mm×50 mm),流动相为甲醇/水(含0.05‰甲酸),流速为0.3 m L·min^-1梯度洗脱;质谱检测采用电喷雾离子源,正离子模式,多反应监测方式。定量离子对青藤碱、川芎嗪、加巴喷丁、扑热息痛、普瑞巴林、阿米替林和内标纳洛酮分别为330/181、137/80、172/154、152/110、160/142、278/233和328/310。方法经选择性、线性范围、基质效应、准确度、精密度、稳定性和探针回收率等考察确证适合大鼠血液和脑组织液微透析液中以上药物的测定。计算的微透析探针体内回收率在19.38%~25.88%之间。以40~50 mg·kg^-1的剂量大鼠股静脉注射给药,测定的血液微透析液中峰浓度在0.2~10μg·m L^-1内;脑组织液微透析液峰浓度在0.1~6μg·m L^-1内,但各时间点浓度水平均低于血液微透析液。总之,该方法成功用于大鼠给药青藤碱、川芎嗪、加巴喷丁、扑热息痛、普瑞巴林和阿米替林的微透析液取样和游离型药物浓度定量研究。

关键词：青藤碱川芎嗪镇痛药微透析 HPLC-MS/MS

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