检索结果-内蒙古大学图书馆

中国修复重建外科杂志 2021年第2期35卷 227-233页

作者：查康康田广招杨振孙志强刘舒云郭全义解放军医学院北京100853 中国人民解放军总医院第一医学中心骨科研究所骨科再生医学北京市重点实验室全军骨科战创伤重点实验室北京100853 南开大学医学院天津300071

目的总结CD146在MSCs中的表达情况及作用。方法广泛查阅国内外CD146相关研究文献,对其在MSCs中的表达情况及作用进行总结分析。结果CD146是一种介导细胞间或细胞与细胞外基质间黏附的跨膜蛋白,表达于多种MSCs表面。越来越多研究表明,CD1... 详细信息

目的总结CD146在MSCs中的表达情况及作用。方法广泛查阅国内外CD146相关研究文献,对其在MSCs中的表达情况及作用进行总结分析。结果CD146是一种介导细胞间或细胞与细胞外基质间黏附的跨膜蛋白,表达于多种MSCs表面。越来越多研究表明,CD146+MSCs比CD146-MSCs或未分选MSCs具有更加优良的细胞特性,如更强的增殖、分化、迁移和免疫调节等能力。应用CD146+MSCs治疗特定疾病也获得了更佳效果。CD146还参与介导多种细胞信号通路,但其在MSCs中是否发挥同样的作用还需进一步实验证明。结论利用CD146+MSCs进行组织和器官损伤修复将有利于提高MSCs的治疗效果。

关键词： CD146 MSCs 异质性干细胞亚群再生

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组织工程关节软骨梯度仿生支架的研究进展

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中华骨科杂志 2021年第6期41卷 386-397页

作者：付力伟李品学高仓健李浩杨振赵天元陈威廖志垚曹福洋眭翔刘舒云郭全义中国人民解放军总医院第一医学中心骨科研究所骨科再生医学北京市重点实验室全军骨科战创伤重点实验室北京10085 南开大学医学院天津300071 郑州大学第一附属医院骨科 450052

由于良好的机械性能和生物相容性,组织工程支架已经成为修复和再生关节软骨缺损的重要方法。随着组织工程技术的不断发展,过去十年已经开发和测试了许多支架的制备和形成方法,但是理想再生支架的制备一直存在争议。关节软骨作为人体关... 详细信息

由于良好的机械性能和生物相容性,组织工程支架已经成为修复和再生关节软骨缺损的重要方法。随着组织工程技术的不断发展,过去十年已经开发和测试了许多支架的制备和形成方法,但是理想再生支架的制备一直存在争议。关节软骨作为人体关节内的承重组织,其基质结构和细胞组成呈带状,并且从软骨表层至软骨下骨存在着几个平滑的自然梯度,包括细胞表型和数量、特异性的生长因子、基质的组成、纤维的排列、力学性能、营养和氧气的消耗量等均有较为明显的不同。因此,在再生支架的设计中有必要通过重现这些梯度来原位再生关节软骨。最近的文献报道已经有许多新型的梯度仿生支架用于模拟天然关节软骨的自然梯度,这些支架在结构上呈现出不同的机械、物理、化学或者生物梯度,并且取得了不错的修复效果。通过检索关于梯度支架治疗关节软骨缺损的相关文献,首先对天然关节软骨组织的结构、生物化学、生物力学、营养代谢等梯度特性进行研究和总结,然后对目前关节软骨梯度支架的最新设计和构建进行了归类,其次从材料构成(如水凝胶、纳米材料等)以及制备工艺(如静电纺丝、3D打印等)进一步加深对梯度支架的认识,最后讨论了梯度仿生支架在软骨原位组织工程技术中的前景和挑战,为梯度支架成功用于临床转化提供理论基础。

关键词：组织工程技术人体关节软骨下骨关节软骨仿生支架自然梯度生物力学 3D打印

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异种红细胞联合膜式氧合灌注装置对人断肢离体机械灌注效果观察

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中华移植杂志（电子版） 2023年第3期17卷 152-157页

作者：杨博尧陈胜峰崔梦一贾志博宋翔宇王恺陈蕾佳彭熙为刘亚荣梁西孝许文静许猛彭江解放军医学院北京100853 解放军总医院第四医学中心骨科医学部研究所、北京市骨科再生医学重点实验室、中国人民解放军骨科战创伤重点实验室北京100048 解放军总医院第四医学中心骨科医学部骨科北京100048

目的探究使用异种洗涤红细胞灌注液对人断肢进行离体机械灌注保存的实验流程及可能性。方法收集来源于左下肢恶性肿瘤截肢患者断肢,肢体离断后置于4℃保温箱中转运至实验室。对断肢进行预处理,并将腘静脉、腘动脉插管后连接灌注系统,使... 详细信息

目的探究使用异种洗涤红细胞灌注液对人断肢进行离体机械灌注保存的实验流程及可能性。方法收集来源于左下肢恶性肿瘤截肢患者断肢,肢体离断后置于4℃保温箱中转运至实验室。对断肢进行预处理,并将腘静脉、腘动脉插管后连接灌注系统,使用4℃肝素等渗NaCl溶液对断肢进行灌洗,直至从静脉端流出澄清的等渗NaCl溶液。膜式氧合灌注系统包括:膜式氧合器、蠕动泵、制氧机、储液装置和监护仪。灌注过程中对灌注液电解质和细胞损伤标记物进行监测,同时进行血常规和断肢末端经皮动脉血氧饱和度(SpO_(2))检查;灌注结束后通过苏木精-伊红(HE)染色法进行组织学评价。结果断肢热缺血和冷缺血时间分别为138和65 min。灌注开始后,断肢颜色恢复红润,远端表浅静脉充盈。灌注开始后前6 h断肢末端SpO_(2)维持在98%~100%,最终因断肢末端SpO_(2)下降,灌注终止,灌注时长7 h。灌注开始时白细胞和血小板均处于较低水平,白细胞在灌注开始后有较明显的下降,在3 h后出现上升,最终与灌注开始时数值接近;灌注开始后前4 h内血小板水平较为平稳,4 h后出现较大幅度的上升;灌注过程中红细胞和血红蛋白均呈波动趋势。灌注开始后前6 h内K+浓度较为稳定,之后有较大幅度上升;Na+浓度在整个灌注期间基本维持在生理状态;乳酸脱氢酶和肌酸激酶均呈上升趋势。HE染色示断肢肌肉细胞在灌注过程中体积逐渐恢复后又持续变小,肌间血管可见血栓形成。结论初步验证利用基于异种红细胞对人断肢进行离体机械灌注的可行性,但其保存效果是否达到或接近生理状态并能维持功能,以及免疫排斥反应的程度仍需进一步论证。

关键词：异种红细胞机械灌注静态冷保存断肢移植

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脱细胞猪皮基质构建组织工程半月板支架

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中国组织工程研究 2021年第22期25卷 3473-3478页

作者：王皓陈明学李俊康罗旭江彭礼庆李获黄波田广招刘舒云眭翔黄靖香郭全义鲁晓波西南医科大学附属医院骨与关节外科四川省泸州市646000 中国人民解放军总医院骨科研究所骨科再生医学北京市重点实验室全军骨科战创伤重点实验室北京市100853 北京积水潭医院矫形骨科北京市100035

背景:半月板损伤的再生修复目前仍然是一个科学性难题,构建具有良好生物力学性能与细胞相容性的组织工程支架至关重要。目的:制备脱细胞猪皮基质支架,评价其生物力学性能和细胞相容性。方法:采用胰蛋白酶、Triton X-100、十二烷基磺酸... 详细信息

背景:半月板损伤的再生修复目前仍然是一个科学性难题,构建具有良好生物力学性能与细胞相容性的组织工程支架至关重要。目的:制备脱细胞猪皮基质支架,评价其生物力学性能和细胞相容性。方法:采用胰蛋白酶、Triton X-100、十二烷基磺酸钠组合对猪皮进行脱细胞处理,获得脱细胞猪皮基质,采用DAPI染色观察脱细胞效果,扫描电镜观察其微观结构。通过组织学染色、胶原和糖胺多糖定量及生物力学检测对比脱细胞猪皮基质与天然半月板的差异。将第3代骨髓间充质干细胞接种于脱细胞猪皮基质上,培养3 d后分别进行扫描电镜、死/活细胞染色和鬼笔环肽染色观察。结果与结论:①DAPI染色显示,脱细胞猪皮基质无细胞核结构;扫描电镜显示,脱细胞猪皮基质表面较为粗糙,表面纤维呈拓扑学结构;②组织学染色显示,天然半月板组织含有丰富的细胞外基质,半月板细胞在基质中均匀分布,胶原纤维致密且排列规则,胶原成分主要以Ⅰ型胶原纤维为主,含有糖胺多糖成分;脱细胞猪皮基质无细胞核,呈疏松的纤维条索状,有较多的孔隙结构,胶原成分主要以Ⅰ型胶原纤维为主,含有糖胺多糖成分;③脱细胞猪皮基质的胶原含量、拉伸弹性模量与天然半月板比较差异无显著性意义(P>0.05),糖胺多糖含量、压缩弹性模量低于天然半月板(P<0.05),并且脱细胞猪皮基质的生物力学性能足够承受膝关节的负荷、保持支架的完整;④扫描电镜显示,骨髓间充质干细胞黏附分布在猪皮基质的孔隙结构中,细胞呈椭圆形,聚集生长;⑤死/活细胞染色显示,脱细胞猪皮基质上的骨髓间充质干细胞具有较高的活性(94.0±3.8)%;⑥鬼笔环肽/DAPI染色显示,骨髓间充质干细胞在脱细胞猪皮基质上呈现出很好的铺展状;⑦结果表明,脱细胞猪皮基质与天然半月板具有类似的胶原成分,呈现出良好的生物力学性能和细胞相容性,有利于细胞的黏附和生长。

关键词：半月板组织工程脱细胞支架猪皮基质胶原细胞外基质

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脱细胞软骨细胞外基质对小鼠巨噬细胞系表型的调控

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中国组织工程研究 2021年第10期25卷 1512-1516页

作者：李珺琦田广招陈明学王皓刘舒云眭翔黄靖香李明郭全义长治医学院基础医学部山西省长治市046000 中国人民解放军总医院第一医学中心骨科研究所骨科再生医学北京市重点实验室全军骨科战创伤重点实验室北京市100853 长治医学院解剖教研室山西省长治市046000

背景:前期研究证实脱细胞软骨细胞外基质可有效促进关节软骨缺损修复再生,具有良好的修复效果,但是其促再生机制尚未阐明。目的:探究猪来源脱细胞软骨细胞外基质支架对小鼠巨噬细胞系表型极化的调控。方法:以猪膝关节软骨为原料,通过湿... 详细信息

背景:前期研究证实脱细胞软骨细胞外基质可有效促进关节软骨缺损修复再生,具有良好的修复效果,但是其促再生机制尚未阐明。目的:探究猪来源脱细胞软骨细胞外基质支架对小鼠巨噬细胞系表型极化的调控。方法:以猪膝关节软骨为原料,通过湿法粉碎、差速离心、冷冻干燥的方法制备脱细胞软骨细胞外基质支架。将小鼠RAW264.7巨噬细胞系接种于脱细胞软骨细胞外基质支架,构建细胞-支架复合物,体外极化诱导4 d,采用扫描电镜观察细胞黏附情况,死/活细胞染色观察细胞生长情况,免疫荧光染色观察M1型巨噬细胞特征性表面标志物CD86和M2型巨噬细胞特征性表面标志物CD206的表达,进而明确极化诱导情况。结果与结论:①扫描电镜显示,复合物中的巨噬细胞为原来的圆形或类圆形,沿着支架的管状排列,广泛分布在支架表面及内部结构中;②死/活细胞染色显示,支架上附着的大部分细胞为活细胞,仅有极少数死细胞;③免疫荧光染色显示,复合物中的M2型巨噬细胞标志物CD206呈80%的高阳性表达,M1型巨噬细胞标志物CD86的阳性表达甚少;④结果表明,猪来源脱细胞软骨细胞外基质支架可诱导极化M0型巨噬细胞为修复性M2型巨噬细胞。

关键词：骨软骨再生细胞外基质巨噬细胞极化组织工程免疫

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不同交联密度甲基丙烯酰酯明胶/脱细胞半月板细胞外基质复合水凝胶的性能

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中国组织工程研究 2020年第16期24卷 2493-2499页

作者：周建田壮田沁玉罗旭江彭礼庆李坤眭翔黄靖香刘舒云郝利波郭全义姚琦首都医科大学附属北京世纪坛医院关节外科北京市100038 中国人民解放军总医院骨科研究所骨科再生医学北京市重点实验室全军骨科战创伤重点实验室北京市100853

背景:交联后的聚合物链对水凝胶的基本性质和细胞相容性存在显著影响,而交联密度可明显改变聚合物链的形成情况,有关交联密度对水凝胶性能影响的针对性研究较少。目的:制备一种细胞相容良好性的复合水凝胶,探究交联密度对该水凝胶性能... 详细信息

背景:交联后的聚合物链对水凝胶的基本性质和细胞相容性存在显著影响,而交联密度可明显改变聚合物链的形成情况,有关交联密度对水凝胶性能影响的针对性研究较少。目的:制备一种细胞相容良好性的复合水凝胶,探究交联密度对该水凝胶性能的影响。方法:配制甲基丙烯酰酯明胶溶液,然后加入脱细胞半月板细胞外基质溶液与LAP溶液,制备预凝胶溶液,采用蓝光对溶液进行交联,交联时间分别为10,30,60s,检测3种水凝胶的压缩弹性模量、溶胀倍率与降解性能。将半月板纤维软骨细胞加入预凝胶溶液中,采用蓝光对溶液进行交联,交联时间分别为10,30,60 s,检测培养对应时间的细胞活性、形态与聚集。结果与结论:①交联60 s水凝胶的压缩模明显高于交联10,30 s的水凝胶(P<0.05);②交联10 s水凝胶的溶胀倍率明显高于交联30,60 s的水凝胶(P<0.05),交联30,60 s的水凝胶的溶胀倍率比较差异无显著性意义(P>0.05);③随着交联时间的延长,水凝胶的降解时间延长,交联60 s的水凝胶需要80 min完全降解,交联10 s的水凝胶50 min就可以完全降解;④培养24h后,3组水凝胶中的细胞活性均在95%以上,各组之间无差异(P>0.05);⑤培养1 d时,3组水凝胶中的细胞均呈球形且均匀分布;4 d时,3组细胞均开始伸展,交联10 s水凝胶中有较小的细胞团;7 d时,3组细胞树突状伸展更为明显,其中交联10 s水凝胶中形成了较为明显的细胞团;⑥培养1,7,14 d时,交联10 s水凝胶中的细胞活性均在85%以上。培养1 d时,交联10 s水凝胶中的细胞呈球形分布,且分布均匀;培养28 d时,细胞呈树突状伸展,并聚集形成网状结构;⑦结果表明,甲基丙烯酰酯明胶/脱细胞半月板细胞外基质复合水凝胶的性能可通过调整交联密度进行优化。

关键词：水凝胶甲基丙烯酰酯明胶脱细胞外基质性能交联密度细胞相容性光交联半月板

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超临界二氧化碳萃取的猪松质骨

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中国组织工程研究 2020年第10期24卷 1508-1514页

作者：罗旭江鲜海彭礼庆沈师张彬高超王振勇眭翔黄靖香韩刚刘舒云郭全义鲁晓波西南医科大学附属医院骨与关节外科四川省泸州市646000 中国人民解放军总医院骨科研究所骨科再生医学北京市重点实验室全军骨科战创伤重点实验室北京市100853

背景:近年来国外使用超临界流体进行生物材料处理的研究较多,但是超临界流体应用于骨组织清洗的研究少见,国内相关报道更少。目的:评估超临界二氧化碳萃取技术处理猪股骨松质骨的有效性及对骨生物学性能的影响。方法:分别制备超临界二... 详细信息

背景:近年来国外使用超临界流体进行生物材料处理的研究较多,但是超临界流体应用于骨组织清洗的研究少见,国内相关报道更少。目的:评估超临界二氧化碳萃取技术处理猪股骨松质骨的有效性及对骨生物学性能的影响。方法:分别制备超临界二氧化碳萃取前(对照组)及萃取后猪股骨骨块(实验组),检测两组骨密度、微观结构、最大抗压强度、弹性模量、骨组织组成成分、胶原含量与组织学分析。将骨髓间充质干细胞分别接种于两组骨块上,培养1 d后,扫描电镜观察材料骨小梁微孔结构及骨材料-细胞复合物中细胞黏附及生长情况。将两组骨块分别植入SD大鼠皮下,术后1,2,4周组织学观察皮下包埋炎症反应。动物实验方案已经解放军总医院伦理委员会批准。结果与结论:①两组材料孔径大小、骨密度、最大抗压强度、弹性模量、胶原含量比较差异均无显著性意义(P>0.05);②扫描电镜显示,对照组材料孔隙连通欠佳,有软组织残留;实验组材料孔隙相互连通、结构完整;③傅里叶红外光谱及X射线衍射分析显示,两组骨组织材料具有相似的吸收峰及衍射峰,热重分析显示超临界二氧化碳萃取可减少骨组织水分含量;④苏木精-伊红染色显示实验组骨无软组织残留,骨陷凹内细胞残留明显减少,对照组有软组织及细胞残留;天狼星红及改良Masson染色显示实验组骨胶原结构完整,胞质成分减少,对照组胞质成分残留明显;⑤扫描电镜显示,对照组骨无明显细胞黏附,实验组骨可见明显细胞黏附生长;⑥实验组骨组织植入皮下的血管周围炎症反应明显轻于对照组骨组织;⑦结果表明,超临界二氧化碳萃取技术是一种有效、环保的骨组织处理技术,在不影响其胶原结构及含量、力学性能的基础上,能够有效去除猪股骨松质骨细胞及软组织,保留骨孔隙结构完整,增加细胞黏附及生长,有效减低炎性排斥反应。

关键词：超临界二氧化碳同种异体骨猪松质骨骨缺损骨生物材料清洗脱脂脱细胞

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趋化剂介导的原位组织工程技术再生关节软骨的研究进展

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中华骨科杂志 2020年第17期40卷 1216-1226页

作者：杨振李浩曹福洋付力伟高仓健赵天元苑志国代永静眭翔刘舒云郭全义中国人民解放军总医院第一医学中心骨科研究所、骨科再生医学北京市重点实验室、全军骨科战创伤重点实验室 100853 南开大学医学院天津300071 郑州大学第一附属医院骨科 450052 上海交通大学医学院附属仁济医院骨与关节外科 200127 中国人民解放军总医院骨科北京100853

各种原因导致的关节软骨(articular cartilage,AC)损伤的治疗至今仍是临床一大难题;而软骨组织工程技术的出现为AC损伤治疗带来了新的希望。软骨组织工程技术可分为两类,即基于细胞的组织工程技术和无细胞的组织工程技术。虽然基于细胞... 详细信息

各种原因导致的关节软骨(articular cartilage,AC)损伤的治疗至今仍是临床一大难题;而软骨组织工程技术的出现为AC损伤治疗带来了新的希望。软骨组织工程技术可分为两类,即基于细胞的组织工程技术和无细胞的组织工程技术。虽然基于细胞的组织工程技术可以在一定程度上修复软骨损伤,但仍然具有细胞来源受限、成本高、疾病传播风险和操作程序复杂等缺陷;而无细胞的组织工程技术避免了这些缺点,为原位AC再生带来了希望。无细胞的组织工程技术主要是通过募集内源性干细胞/祖细胞(stem cells/progenitor cells,SCPCs)到达软骨损伤部位,并提供合适的再生微环境促进细胞的增殖和成软骨分化,进一步促进新生软骨组织成熟,因此也被称为细胞归巢的原位组织工程技术。成功地募集内源性SCPCs是原位软骨组织工程中的第一步。选择合适的趋化剂来实现内源性SCPCs的募集尤为重要。因此,通过简要介绍软骨损伤后趋化反应,系统综述传统趋化剂(如趋化因子、生长因子等)和新兴趋化剂(如功能性多肽、外泌体和核酸适配体等),评估趋化剂与递送装置之间的结合方式,讨论趋化剂介导的原位组织工程技术的前景与挑战,为基于内源性SCPCs归巢的原位组织工程技术的设计提供理论基础。

关键词：组织工程技术软骨损伤外泌体软骨组织工程核酸适配体关节软骨趋化因子趋化剂

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膝关节内干细胞/祖细胞在软骨再生中作用研究进展

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2021年第1期11卷 51-56页

作者：杨振李浩付力伟高仓健赵天元陈威廖志垚李品学李旭王福鑫田广招孙志强查康康曹福洋周建眭翔刘舒云郭全义中国人民解放军总医院第一医学中心骨科研究所骨科再生医学北京市重点实验室全军骨科战创伤重点实验室北京100853 南开大学医学院天津3000712 郑州大学第一附属医院骨科 450052

关节软骨(AC)由于缺乏血管、神经和淋巴,一旦损伤无法自我修复。虽然以外源性细胞为基础的治疗策略在一定程度上能够再生关节软骨,但仍然存在手术间隔长、供体有限、细胞体外培养易去分化和病原体传播等风险。成人膝关节存在许多类型干... 详细信息

关节软骨(AC)由于缺乏血管、神经和淋巴,一旦损伤无法自我修复。虽然以外源性细胞为基础的治疗策略在一定程度上能够再生关节软骨,但仍然存在手术间隔长、供体有限、细胞体外培养易去分化和病原体传播等风险。成人膝关节存在许多类型干细胞/祖细胞(SCPCs),当软骨损伤时,就会被动员,迁移到损伤部位,参与再生修复。因此,基于趋化内源性SCPCs到损伤部位的AC原位再生修复策略,充分利用机体自我修复潜力,同时避免了外源性细胞策略的缺点,已经成为研究的热点。本综述主要介绍膝关节内SCPCs类型、迁移路径以及其在软骨损伤修复中的作用。重点介绍内源性AC再生修复策略的研究现状,以期吸引更多的研究人员参与这一有前景的研究领域。

关键词：膝关节软骨损伤干细胞祖细胞再生

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藻酸钙复合自体软骨细胞修复羊膝关节负重区软骨缺损的实验研究

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中国矫形外科杂志 2019年第2期27卷 165-170页

作者：郝春香黄靖香眭翔韩春姬陈国庆张昌盛郭全义刘舒云中国人民解放军总医院麻醉科中国人民解放军总医院骨科研究所北京市再生医学重点实验室/全军战创伤重点实验室北京100853

[目的]以中国山羊为动物模型,观察藻酸钙复合自体软骨细胞修复膝关节负重区软骨缺损的可行性。[方法]取羊肩关节软骨,分离、培养软骨细胞,蕃红"O"、 Giemsa及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色对其进行鉴定。将自体软骨细胞与藻酸钙... 详细信息

[目的]以中国山羊为动物模型,观察藻酸钙复合自体软骨细胞修复膝关节负重区软骨缺损的可行性。[方法]取羊肩关节软骨,分离、培养软骨细胞,蕃红"O"、 Giemsa及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色对其进行鉴定。将自体软骨细胞与藻酸钙凝胶复合,修复山羊股骨髁负重区全层软骨缺损(直径6 mm),实验分为四组:(1)缺损旷置组:缺损内未植入任何组织;(2)骨膜覆盖组:自体骨膜覆盖缺损区;(3)藻酸钙+骨膜组:凝胶植入软骨缺损区,并用自体骨膜覆盖;(4)藻酸钙+细胞+骨膜组:藻酸钙复合自体软骨细胞植入软骨缺损区,自体骨膜覆盖;分别于手术后3、6个月取材,通过大体观察及组织学评分检测修复效果。[结果]软骨细胞复合物蕃红"O"、 Giemsa染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色结果均为阳性,将藻酸钙凝胶-软骨细胞复合物用于羊负重区关节面软骨缺损修复,从大体观察和组织学评分进行比较,发现各组均有不同程度的组织修复,藻酸钙+细胞+骨膜组效果最好,与其他组差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]藻酸钙凝胶-软骨细胞复合物结合自体骨膜覆盖,可较好修复山羊膝关节负重区软骨缺损。

关键词：软骨组织工程再生

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