检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2004年第3期84卷 189-193页

作者：徐宝艳王宇明邓国宏黄燕萍钟履华刘国栋谭朝霞范燚丁世涛中国人民解放军第三军医大学西南医院全军感染病研究所重庆400038

目的　以 2 0对HBV感染孪生子和感染高危孪生子为研究对象 ,初步研究宿主遗传因素与乙型肝炎临床表型的关系。方法　采用人基因组短串联重复序列 (shorttandemrepeates ,STR)多态性扫描技术进行孪生子卵型鉴定 ,同时进行HAV、HBV、HCV、... 详细信息

目的　以 2 0对HBV感染孪生子和感染高危孪生子为研究对象 ,初步研究宿主遗传因素与乙型肝炎临床表型的关系。方法　采用人基因组短串联重复序列 (shorttandemrepeates ,STR)多态性扫描技术进行孪生子卵型鉴定 ,同时进行HAV、HBV、HCV、HDV、HEV等肝炎标志物检测 ,HBVDNA荧光定量检测及肝功能 (ALT ,AST ,TBil)检测。对临床指标数据进行Fisher′s精确检验 ,在单卵孪生子 (monozygotictwins ,MZ)组、双卵孪生子 (dizygotictwins ,DZ)组、对照 (control)组之间进行比较。结果　单卵孪生子组、双卵孪生子组与对照组两两之间 ,其感染率、HBsAg阳性率、HBeAg阳性率、无症状携带者 (AsC)比率及清除病毒比率差异无显著意义 (P >0 0 5 )。在同病率、疾病表型一致率、血清学模式相同者比率的比较中发现单卵孪生子组与双卵孪生子组之间及单卵孪生子组与对照组之间差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ,而双卵孪生子组与对照组之间差异无显著意义 (P >0 0 5 )。另外研究亦发现疾病表型一致率可能与患者年龄及是否进行抗病毒治疗等相关。对于HBV感染高危孪生子 ,出生后立即进行HBIg注射或疫苗接种 ,可阻断HBV感染。结论　单卵孪生子组其同病率、疾病表型一致率、血清学模式相同者比率显著高于双卵孪生子组以及对照组。

关键词：乙型肝炎病毒遗传因素易感因素孪生子基因表型

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miR-138对人胃腺癌细胞SGC-7901增殖的影响

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中国肿瘤临床 2011年第13期38卷 755-758页

作者：陈陵梁光萍邹利全高军张方征游斌熊晓峰中国人民解放军第三二四医院消化内科重庆市400020 中国人民解放军第三军医大学西南医院烧伤研究所

目的:探讨microRNA-138(miR-138)对人胃癌SCC-7901细胞株增殖能力的影响及可能的机制。方法:采用阳离子脂质体Lipofectamine2000将miR-138 RNA转染人胃癌SGC-7901细胞株,采用荧光实时定量PCR检测miR-138表达丰度;采用流式细胞术检测转... 详细信息

目的:探讨microRNA-138(miR-138)对人胃癌SCC-7901细胞株增殖能力的影响及可能的机制。方法:采用阳离子脂质体Lipofectamine2000将miR-138 RNA转染人胃癌SGC-7901细胞株,采用荧光实时定量PCR检测miR-138表达丰度;采用流式细胞术检测转染后的细胞周期;采用MTT法检测细胞生长曲线;采用Western blotting检测人端的端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白的表达。结果:转染miR-138 RNA后,SGC-7901细胞内miR-138表达丰度升高,细胞增殖能力受到显著抑制,同时hTERT蛋白表达水平下调。结论:miR-138可抑制人SCC-7901细胞的增殖能力,机制可能是通过抑制靶基因hTERT蛋白的表达。

关键词：胃癌微RNAs 转染人端粒酶逆转录酶

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microRNA与原发性肝细胞癌发生机制相关性的研究进展

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世界华人消化杂志 2009年第12期17卷 1218-1223页

作者：陈文生中国人民解放军第三军医大学西南医院全军消化病研究所重庆市400038

MicroRNA(miRNA)是一类长约19-22个核苷酸的内源性非编码的小分子RNA,通过对靶基因转录后水平的负性调控作用,从而降低靶基因的表达水平.近年研究发现miRNA参与调节肿瘤细胞的增殖、分化和凋亡等多个生物学过程,其突变、缺失或表达水平... 详细信息

MicroRNA(miRNA)是一类长约19-22个核苷酸的内源性非编码的小分子RNA,通过对靶基因转录后水平的负性调控作用,从而降低靶基因的表达水平.近年研究发现miRNA参与调节肿瘤细胞的增殖、分化和凋亡等多个生物学过程,其突变、缺失或表达水平的异常与人类肿瘤发生发展密切相关.本文就miRNA和人原发性肝细胞癌发生的相关性研究的最新进展作一综述.

关键词：小分子RNA 肝细胞癌肿瘤人类

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乙型肝炎的宿主遗传易感性的研究进展及前景

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世界华人消化杂志 2005年第8期13卷 1002-1007页

作者：晏泽辉邓国宏王宇明中国人民解放军第三军医大学西南医院全军感染病研究所重庆市400038

乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界范围的严重公共卫生问题之一,宿主对HBV感染的遗传易感性在HBV感染发病和疾病进展方面都发挥重要作用.研究乙型肝炎的宿主遗传易感性具有十分重要的意义.本文综述了近年来在乙型肝炎的宿主遗传易感性方面的... 详细信息

乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界范围的严重公共卫生问题之一,宿主对HBV感染的遗传易感性在HBV感染发病和疾病进展方面都发挥重要作用.研究乙型肝炎的宿主遗传易感性具有十分重要的意义.本文综述了近年来在乙型肝炎的宿主遗传易感性方面的研究进展,重点介绍了人类白细胞抗原(HLA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、白介素10(IL-10)、干扰素γ诱导的蛋白10(IP-10)、雌激素受体α(ESR1)、甘露糖结合蛋白(MBP)、维生素D受体(VDR)等基因的多态性与HBV感染的关系.同时就乙型肝炎的宿主遗传易感性方面的研究前景作一展望.

关键词：乙型肝炎宿主遗传易感性研究进展肿瘤坏死因子α 干扰素γ 白介素10

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鼠特异性Fas抗体对人鼠嵌合肝中人肝细胞增殖的促进作用

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世界华人消化杂志 2008年第16期16卷 1734-1740页

作者：蒋黎李俊刚兰林王宇明刘国栋中国人民解放军第三军医大学西南医院全军感染病研究所重庆市400038

目的:探讨人胎肝细胞移植联合使用JO2抗体的策略,促进人胎肝细胞在小鼠肝内存活和增殖.方法:裸鼠经脾移植1×106人胎肝细胞,移植后第1天ipJO2抗体,剂量为0.2mg/kg,1次/wk,持续12wk为实验组,裸鼠经人胎肝细胞移植后未给予JO2抗体为... 详细信息

目的:探讨人胎肝细胞移植联合使用JO2抗体的策略,促进人胎肝细胞在小鼠肝内存活和增殖.方法:裸鼠经脾移植1×106人胎肝细胞,移植后第1天ipJO2抗体,剂量为0.2mg/kg,1次/wk,持续12wk为实验组,裸鼠经人胎肝细胞移植后未给予JO2抗体为对照组,建立人鼠嵌合肝动物模型.采用HE染色、原位末端标记方法(TUNEL染色)观察未经人胎肝细胞移植而给予JO2抗体24h后处死的裸鼠肝脏组织.免疫组化、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时相点实验组和对照组嵌合肝中肝组织人白蛋白、特异人增殖细胞核抗原(PCNA)和人白蛋白mRNA表达.结果:未经人胎肝细胞移植而给予JO2抗体的裸鼠病理组织切片发现肝组织出血、坏死和细胞凋亡.实验组和对照组裸鼠均能存活至24wk.移植后嵌合鼠肝组织表达人白蛋白和人PCNA阳性细胞的时间:实验组2-20wk,对照组2-12wk;白蛋白mRNA表达:实验组4-16wk,对照组4-8wk;实验组与对照组移植后8、12wkPCNA表达差异有显著性(25.7%±8.5%vs13.4%±7.8%,29.4%±5.0%vs8.5%±2.3%,均P<0.05).结论:人肝细胞异种移植于裸鼠体内能够存活,经小剂量JO2抗体ip裸鼠,使人鼠嵌合肝中人肝细胞得以增殖,存活时间延长.

关键词： Fas抗体人肝细胞移植人鼠嵌合肝增殖

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世界华人消化杂志 2007年第8期15卷 849-854页

作者：杨仕明汤旭东陈婷熊震陈陵蔡永国房殿春中国人民解放军第三军医大学西南医院全军消化病研究所重庆市400038

肝素酶(Hpa)是裂解硫酸乙酰肝素蛋白多糖的唯一酶类,能破坏细胞外基质及基底膜,参与肿瘤血管生成,与肿瘤的侵袭转移密切相关．目前的研究表明,Hpa在大多数中晚期肿瘤中都有表达,尤其在转移性肿瘤中强表达,而Hpa表达的下调可以抑制肿瘤... 详细信息

肝素酶(Hpa)是裂解硫酸乙酰肝素蛋白多糖的唯一酶类,能破坏细胞外基质及基底膜,参与肿瘤血管生成,与肿瘤的侵袭转移密切相关．目前的研究表明,Hpa在大多数中晚期肿瘤中都有表达,尤其在转移性肿瘤中强表达,而Hpa表达的下调可以抑制肿瘤细胞的转移,提示Hpa可以作为一种广谱的肿瘤转移相关抗原用于中晚期肿瘤的免疫治疗．Hpa疫苗的开发可望为中晚期肿瘤的治疗开辟新的途径．本文详细综述了Hpa的结构与功能、对肿瘤转移的促进作用及其机制、以及其作为肿瘤转移相关抗原用于中晚期肿瘤免疫治疗的可能性．

关键词：肝素酶肿瘤免疫治疗硫酸乙酰肝素蛋白多糖肿瘤转移相关抗原

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融合蛋白ICOSIg的三维结构模建的研究

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中国生物工程杂志 2005年第4期25卷 69-77页

作者：许雪青王丰白云王璞段文元姜曼黎万玲中国人民解放军第三军医大学医学遗传教研室重庆400038 中国人民解放军第三军医大学西南医院检验科重庆400038 中国人民解放军第三军医大学全军免疫学研究所重庆400038

目的:利用结构相似性的序列比对来模建ICOSIg的三维结构,分析其可能的结合位点,为改造ICOSIg的突变体,提高其结合活性提供理论基础。方法:利用生物信息学手段分析ICOS所属CD28家族各成员分子的结构域,通过基于结构相似的序列比对,以... 详细信息

目的:利用结构相似性的序列比对来模建ICOSIg的三维结构,分析其可能的结合位点,为改造ICOSIg的突变体,提高其结合活性提供理论基础。方法:利用生物信息学手段分析ICOS所属CD28家族各成员分子的结构域,通过基于结构相似的序列比对,以空间结构已经得到解析的 CTLA4为模板,利用同源模建的方法,模建ICOS膜外区的空间结构。进一步地以人IgG2和 CTLA4为模板,模建了ICOSIg全长的空间结构。在此基础上,结合氨基酸特性,分析其可能的功能位点。结果:FDPPPF及KTKGSGN基序可能是ICOSIg的功能结合位点。结论:模建了ICOSIg 的空间结构,分析了其可能结合位点,为突变ICOSIg提高其亲和力提供了线索。

关键词：融合蛋白 CTLA4 空间结构构模结合位点序列比对结构相似性生物信息学三维结构理论基础结合活性 CD28 同源模建 IgG2 功能位点突变体结构域氨基酸亲和力模板

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α-连接素表达与胃癌生物学行为的关系

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世界华人消化杂志 2003年第9期11卷 1275-1278页

作者：徐采朴周永宁陈渝中国人民解放军第三军医大学西南医院全军消化专科中心重庆市400038 中国人民解放军第三军医大学西南医院烧伤研究所重庆市400038

目的:检测α-连接素在胃癌及癌前组织的表达,并分析其与临床病理学及患者生存的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测163例胃癌、44例异型增生、25例肠化生、28例萎缩性胃炎石蜡标本的α-连接素表达水平。结果:肠化生以及对照组胃黏膜... 详细信息

目的:检测α-连接素在胃癌及癌前组织的表达,并分析其与临床病理学及患者生存的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测163例胃癌、44例异型增生、25例肠化生、28例萎缩性胃炎石蜡标本的α-连接素表达水平。结果:肠化生以及对照组胃黏膜均保留正常的细胞膜染色;萎缩性胃炎组仅有1例异常染色。α-连接素在胃癌异常表达率为76％;异型增生为43％。BorrmannⅢ型和BorrmannⅣ型α-连接素异常表达率显著高于 Borrmann Ⅰ型和Borrmann Ⅱ型(P<0.01)。α-连接素在管状腺癌、黏液腺癌及印戒细胞癌的异常表达率分别为78％、79％和91％,显著高于乳头状腺癌(47％)(P<0.01)。α-连接素在肠型胃癌和弥漫型胃癌的异常表达率分别为68％(73/108)和95％(38/40),二者之间具有显著性差异(P<0.01),α-连接素表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移和远处转移无关(分别P>0.05),α-连接素正常表达患者并未显示生存优势。结论:胃癌组织广泛存在α-连接素表达异常,且异常表达与分化程度差密切相关,α-连接素表达异常可能是胃癌发生、发展过程中的早期事件。

关键词： α-连接素胃癌生物学行为免疫组织化学临床病理学细胞黏附功能

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人胎肝干细胞的体外分离培养与鉴定

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世界华人消化杂志 2005年第4期13卷 452-455页

作者：毛海洲陈耀凯王宇明张磊刘国栋中国人民解放军第三军医大学西南医院全军感染病研究所重庆市400038

目的:对人胎肝干细胞进行体外分离、培养与鉴定, 为其在生物人工肝及肝细胞移植方面的应用奠定基础方法:取16—29周龄死产人胚胎肝脏,参照本室建立的方法对胎肝干细胞进行分离.所获细胞悬液用50 g反复离心,沉淀物用F12培养液悬浮细胞:... 详细信息

目的:对人胎肝干细胞进行体外分离、培养与鉴定, 为其在生物人工肝及肝细胞移植方面的应用奠定基础方法:取16—29周龄死产人胚胎肝脏,参照本室建立的方法对胎肝干细胞进行分离.所获细胞悬液用50 g反复离心,沉淀物用F12培养液悬浮细胞:将细胞悬液加入Percoll液进行梯度离心,吸取50%与70%Percoll层之间的细胞层,用Hanks液洗涤两次后离心.将细胞团悬浮于DMEM/F12(2:1)培养液中,接种于塑料培养瓶或六孔培养板中;在37℃50 mL/L CO2孵箱中培养. 采用免疫组织化学法鉴定细胞表型. 结果:原代细胞呈圆形或卵圆形,体积明显小于肝细胞,胞核大而胞质少,核浆比较小,培养中细胞生长旺盛.培养的细胞胞质CK19,OV6及白蛋白染色均呈阳性;部分细胞胞质同时表达白蛋白和CK19. 结论:人胚胎肝脏中存在在肝干细胞,这些细胞表现出不同的分化状态.

关键词：胎肝肝干细胞人胎 CK19 人胚胎体外分离肝脏细胞悬液 DMEM 悬浮细胞

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可回复性永生化逆转录病毒载体pLNCTIGIox的构建与表达

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世界华人消化杂志 2005年第8期13卷 975-978页

作者：陈耀凯李俊刚王宇明中国人民解放军第三军医大学西南医院全军感染病研究所重庆市400038

目的:为建立可回复性永生化肝细胞株,构建带有筛选基因NeoR、报道基因EGFP及重组位点loxP的可回复性永生化逆转录病毒载体.方法:将2.1kbSV40T亚克隆到pIRES2-EGFP的相应位点,再酶切下3.4kbSV40T-IRES-EGFP片段插入逆转录病毒载体pLNCX2... 详细信息

目的:为建立可回复性永生化肝细胞株,构建带有筛选基因NeoR、报道基因EGFP及重组位点loxP的可回复性永生化逆转录病毒载体.方法:将2.1kbSV40T亚克隆到pIRES2-EGFP的相应位点,再酶切下3.4kbSV40T-IRES-EGFP片段插入逆转录病毒载体pLNCX2的两个相同酶切位点之间,构成新载体pLNCTIG.最后,将线性化pLNCTIG和loxP双链片段混合连接.取连接产物转化高效感受态DH5α细胞.菌落PCR和酶切法鉴定阳性克隆.转染包装细胞PT67并在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达.扩大培养稳定转染的细胞,免疫组化染色检测SV40T基因的表达.结果:随机挑取19个克隆,3个电泳分离出约1.1kb阳性条带.取上述阳性克隆进行酶切鉴定,结果仅出现一条约9.5kb的条带,证明该克隆为阳性重组体.转染PT67细胞24h后,荧光显微镜下可见散在多处绿色荧光.免疫组化染色显示细胞胞核呈阳性染色.结论:成功构建并表达可回复性永生化逆转录病毒载体pLNCTIGlox.

关键词：可回复性永生化逆转录病毒载体 pLNCTIGlox 构建表达肝细胞

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