检索结果-内蒙古大学图书馆

世界华人消化杂志 2002年第1期10卷 7-11页

作者：任浩朱分禄朱诗应王路戚中田中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海市200433

目的:观察接种HGV实验猴的血清学和组织病理改变,以探讨HGV对恒河猴的致病性。方法:将庚型肝炎病毒(HGV)全长RNA转录体肝内注射感染恒河猴,检测血清HGV RNA、ALT变化和抗HGV,定期取实验猴肝组织,观察肝组织病理改变,免疫组化对HGV E2... 详细信息

目的:观察接种HGV实验猴的血清学和组织病理改变,以探讨HGV对恒河猴的致病性。方法:将庚型肝炎病毒(HGV)全长RNA转录体肝内注射感染恒河猴,检测血清HGV RNA、ALT变化和抗HGV,定期取实验猴肝组织,观察肝组织病理改变,免疫组化对HGV E2蛋白的表达进行定位分析,尸检取猴的各种脏器进行常规病理检查,并分析HGV E2蛋白在心、肝、胰、脾和肾脏的表达,PCP检测心、肝、胰、脾和肾脏中HGV正负链RNA的存在,透射电镜分析肝组织超微结构的变化。结果:感染后1wk HGV RNA即阳转,最长持续达27wk,实验恒河猴血清ALT间歇性升高,最高达2106nkat·L^(-1),肝组织学活检呈现轻度炎性病变,尸检结果表明实验猴死于间质性肺炎,除肝组织炎症改变外,其他组织正常,免疫组化显示HGVE2蛋白主要在肝细胞质内表达,在心脏和脾脏亦有不同程度的表达,HGV基因组RNA和负链RNA的检测表明HGV在肝脏以外的其他脏器如心和脾脏中亦有复制,电镜结果表明肝细胞超微结构改变较大,肝窦内发现直径约25nm～30nm的病毒样颗粒呈晶格状排列。结论:HGV RNA转录体有感染性并能形成病毒血症,恒河猴对HGV感染敏感,可作为研究HGV复制及致病性的动物模型。任浩,朱分禄,朱诗应,王路,戚中田,HGV RNA转录体感染恒河猴的血清学及组织学改变,世界华人消化杂志2002;

关键词： HGVRNA转录体感染恒河猴血清学组织学改变庚型肝炎病毒病理

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人内皮抑素与IL_3信号肽融合蛋白真核表达载体的构建

引用

世界华人消化杂志 2001年第1期9卷 43-46页

作者：曹明媚潘卫陈秋莉马仲才倪之嘉吴晓兰武文斌潘欣曹广文戚中田中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海市200433

目的构建IL_3信号肽与内皮抑素融合蛋白基因的真核表达载体。方法用PCR方法扩增IL_3信号肽序列和人内皮抑素基因,然后采用重叠延伸PCR拼接的方法将两者拼接和扩增。并将IL_3-endocl)NA克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中。结果 IL_3-endo... 详细信息

目的构建IL_3信号肽与内皮抑素融合蛋白基因的真核表达载体。方法用PCR方法扩增IL_3信号肽序列和人内皮抑素基因,然后采用重叠延伸PCR拼接的方法将两者拼接和扩增。并将IL_3-endocl)NA克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中。结果 IL_3-endo融合蛋白基因包括了IL_3信号肽序列和人内皮抑素蛋白全长基因,基因总长度约701bp,被正确拼接,并克隆到pcDNA3.1(+)的CMV启动子下游。序列分析证实克隆序列、插入方向和读码框架均正确。结论成功的将IL_3信号肽序列连接到人内皮抑素基因序列前并构建了其真核表达载体,为以后的内皮抑素用于基因治疗打下了基础。

关键词：信号肽类内皮抑素基因疗法真核表达载体聚合酶链反应基因扩增

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

四环素tet-off系统调控的DT/VEGF融合基因对肝细胞癌的杀伤效应

引用

世界华人消化杂志 2000年第8期8卷 867-873页

作者：潘欣潘卫倪灿荣柯重伟曹广文戚中田中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海市200433 中国人民解放军第二军医大学附属长海医院病理科中国人民解放军第二军医大学附属长海医院普外科

目的研究四环素 tet-off 调控系统对 DT_(390)-VEGF_(165)及DT_(390)-VEGF_(exon7)融合基因的调控作用,探索毒素融合基因在调控状态下治疗肝癌的有效途径。方法构建四环素 tet-off 调控的 DT_(390)-VEGF_(165)或 DT_(390)-VEGF_(exon7)融合基因真核表达载体,用脂质体介导转染肝细胞癌 HepG2,在四环素有或无的情况下观察肝癌细胞的形态变化,用质粒直接注射法观察构建物对荷肝癌裸鼠的治疗效果,结果 3μg真核表达构建物转染5×10~5个肝癌细胞/孔(24孔板)96h 后发现,无四环素时转毒素融合基因的细胞存活率为20%,对照细胞存活率为77%;四环素存在时转毒素融合基因的细胞存活率为68%,对照细胞存活率为74%;转染细胞在四环素有或无的情况下经免疫荧光抗体染色均呈现黄绿色荧光,表明融合基因在细胞中得到了表达,且四环素调控系统存在基础量的漏表达;用质粒直接注射瘤体虽可观察到质粒被吸收和表达,但由于表达效率低下,没有明显的治疗效果,结论四环素调控系统基本上可以控制毒素基因在肝癌细胞中的表达。

关键词：肝肿瘤白喉毒素分子克隆脂质体基因疗法

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人IgG四亚类对噬菌体展示Ig结合蛋白单结构域随机组合文库的体外进化筛选

引用

生物工程学报 2012年第9期28卷 1093-1105页

作者：祁培培丁莹莹吴莉莉陈秋莉王锦红刘超廖文婷张婧曹洁潘卫中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海200433 安徽医科大学病理生理学教研室安徽合肥230032

金黄色葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal protein A,SpA)和链球菌蛋白G(Streptococcal protein G,SpG)是细菌产生的特异结合宿主抗体的细菌免疫球蛋白结合蛋白(Immunoglobulin(Ig)-binding proteins,IBPs)的代表分子。SpA和SpG均包含由多个序列高度同源的结合结构域重复组成的抗体结合区,各单结构域都具有完全的结合IgG的功能。为研究这些单结构域随机组合能否产生具有新结合特性的组合分子,将SpA的A、B、C、D、E以及SpG的B2、B3共7个单结合结构域随机组合构建成噬菌体展示文库后,应用人IgG1、2、3、4为诱饵分子对该文库进行4轮筛选,获得了SpA天然分子中不存在的单结构域排列组合分子D-C。在筛选过程中,阴性对照噬菌体的逐渐减少、展示两个结构域以上的噬菌体比例不断增多,尤其是D-C组合的选择性富集和其随机连接肽的严格筛选都显示了筛选的有效性和D-C组合的重要性。噬菌体ELISA进一步证实D-C与人IgG四亚类的结合能力远强于天然SpA分子。该研究应用分子进化技术首次获得了一种与人IgG四亚类具有结合优势的新型组合分子D-C,不仅可为IgG纯化、制备、检测等方面的应用提供新的候选分子,还为细菌IBP结构功能的进一步研究提供新的手段。

关键词：噬菌体免疫球蛋白结合蛋白进化筛选 IgG 亚类

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

DT/VEGF系统对胃癌细胞的杀伤效应

引用

世界华人消化杂志 2000年第4期8卷 393-396页

作者：潘欣柯重伟潘卫贺祥曹广文戚中田中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海市200433 中国人民解放军第二军医大学附属长海医院普外科上海市200433

目的研究ＤＴ３９０基因与ＶＥＧＦ人外显子７基因晤后对胃癌细胞的杀伤作用，探索毒素晤基因治疗胃癌的有效途径，方法构建携带ＤＴ９０－ＶＥＧＦ１６５或ＤＴ３９０－ＶＥＧＦｅｘｏｎ７融合基因的真核表达载体，用脂质体介导转... 详细信息

目的研究ＤＴ３９０基因与ＶＥＧＦ人外显子７基因晤后对胃癌细胞的杀伤作用，探索毒素晤基因治疗胃癌的有效途径，方法构建携带ＤＴ９０－ＶＥＧＦ１６５或ＤＴ３９０－ＶＥＧＦｅｘｏｎ７融合基因的真核表达载体，用脂质体介导转染胃癌细胞ＳＧＣ７９０１，观察胃癌细胞的形态变化，结果５μｇ趑核表达构的转染５×１０＾５个胃癌细胞／孔（２４孔板）９６ｈ后发现，转素融合基因的细胞９０％死亡，而对照细胞形态正常。

关键词：真核表达载体胃肿瘤基因治疗 VEGF

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

携带人β干扰素基因的人乙型肝炎特异性真核表达载体的构建

引用

世界华人消化杂志 2000年第5期8卷 520-523页

作者：潘欣柯重伟潘卫武文斌张斌贺祥曹广文戚中田中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海市200433 中国人民解放军第二军医大学附属长海医院普外科上海市200433

目的构建乙型肝炎病毒(HBV)C 区启动子调控的人β干扰素(IFN-β)基因的真核表达载体.方法切除真核表达载体 pcDNA3.1(+)-DT_(390)-VEG_(exon7)内部的 CMV 启动子及 DT_(390)序列使之成为 p3.1V_7;从逆转录病毒载体 pMNSM-IFN-β质粒中... 详细信息

目的构建乙型肝炎病毒(HBV)C 区启动子调控的人β干扰素(IFN-β)基因的真核表达载体.方法切除真核表达载体 pcDNA3.1(+)-DT_(390)-VEG_(exon7)内部的 CMV 启动子及 DT_(390)序列使之成为 p3.1V_7;从逆转录病毒载体 pMNSM-IFN-β质粒中游离人β干扰素基因;用 PCR 方法从 pGEM.7Z-HBV 质粒中扩增人乙型肝炎病毒(HBV)的 C区启动子序列;通过转换酶切位点,将 HBV C 区启动子和人β干扰素基因共同插入到 p3.1V_7中,构建成受 HBV C 区启动子控制的人β干扰素基因真核表达载体 p3.1 V_***-IFN-β.结果构建完成携带人β干扰素基因的人乙型肝炎特异性真核表达载体.结论该载体为慢性病毒性肝炎的特异性干扰素基因治疗奠定了基础.

关键词： IFN-β基因乙型肝炎病毒真核表达载体治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

内皮抑素-可溶性血管内皮细胞生长抑制因子融合基因重组腺病毒的包装与鉴定

引用

世界华人消化杂志 2003年第6期11卷 741-744页

作者：李喆潘欣潘卫曹贵松闻兆章方国恩戚中田毕建威华积德中国人民解放军第二军医大学附属长海医院普通外科上海市200433 中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海市200433

目的:构建内皮抑素-可溶性血管内皮细胞生长抑制因子融合基因重组腺病毒载体并包装成重组腺病毒,为下一步基因治疗打下基础。方法:用PCR方法在hENDO基因的5’端引入IL_3信号肽、3’端引入弹性蛋白连接肽序列(linker),再与sVEGI基因连接... 详细信息

目的:构建内皮抑素-可溶性血管内皮细胞生长抑制因子融合基因重组腺病毒载体并包装成重组腺病毒,为下一步基因治疗打下基础。方法:用PCR方法在hENDO基因的5’端引入IL_3信号肽、3’端引入弹性蛋白连接肽序列(linker),再与sVEGI基因连接,插入到pCAl3腺病毒载体中,用脂质体介导包装出重组腺病毒,PCR法对重组腺病毒进行鉴定。结果:构建完成hENDO-sVEGI融合基因重组腺病毒载体,融合基因包括IL_3信号肽、hENDO全长基因、弹性蛋白连接肽序列和sVEGI基因,总长度约1114bp,经酶切鉴定、序列分析证实克隆序列、插入方向和读码框架均正确,可包装出携带融合基因的重组腺病毒,用TCID_(50)法测定粗制重组腺病毒滴度为2×10^(11) TCID_(50)/L。结论:成功构建了hENDO-sVEGI融合基因,连接肽序列使两蛋白空间构象不受影响,IL_3信号肽保证蛋白可被分泌至胞外,完成携带融合基因的重组腺病毒的包装与鉴定,为进一步开展肿瘤基因治疗研究奠定了基础。

关键词：内皮抑素可溶性血管内皮细胞生长抑制因子融合基因重组腺病毒包装鉴定基因治疗肿瘤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

IL-28B基因多态性在丙型肝炎患者治疗中的作用

引用

世界华人消化杂志 2011年第7期19卷 661-666页

作者：许刚任浩中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海市医学生物防护重点实验室上海市200433

Interleukin(IL)-28B(interferon lambda3,IFN-λ3)是一类属于IFN-λ家族的新型白介素,编码基因位于19号染色体上.近期的多项研究阐述了IL-28B的基因多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)在丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染者治疗上的重要性,并成功的定位了两个关联性最强的SNPs:rs12979860-IL-28B上游3kb处,rs8099917-IL-28B上游8kb处.IL-28B的基因多态性具有很好的临床应用前景,根据其基因型可以预测患者的自愈率,以及对聚乙二醇干扰素-α(PEG-IFN-α)和利巴韦林(ribavirin,RBV)联合治疗的持续应答率,从而有助于确定HCV感染者的个性化治疗方案.

关键词：白介素-28B 单核苷酸多态性丙型肝炎治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

内皮抑素-血管内皮细胞抑制因子重组腺病毒对荷胃癌裸鼠的治疗

引用

世界华人消化杂志 2003年第9期11卷 1282-1285页

作者：潘欣李喆张珉王泳潘卫戚中田中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海市200433 中国人民解放军第二军医大学附属长海医院普通外科上海市200433 中国人民解放军第二军医大学附属长海医院眼科上海市200433

目的:研究重组腺病毒携带hENDO-VEGI_(151)融合基因治疗胃癌的可行性。方法:分别用 500 μL滴度为 1×10^(12)TCID_(50)/L的粗制重组腺病毒AdCA13—hENDO—VEGI_(151)或AdLacZ皮下注射治疗荷胃癌裸鼠,隔天1次,共注射10次。最后一次... 详细信息

目的:研究重组腺病毒携带hENDO-VEGI_(151)融合基因治疗胃癌的可行性。方法:分别用 500 μL滴度为 1×10^(12)TCID_(50)/L的粗制重组腺病毒AdCA13—hENDO—VEGI_(151)或AdLacZ皮下注射治疗荷胃癌裸鼠,隔天1次,共注射10次。最后一次注射24h后处死动物,检测肿瘤体积、抑瘤率、目的基因的表达、增生细胞核抗原指数(PCNA LI)、肿瘤细胞凋亡指数(AI)、肿瘤微血管密度(MVD)。结果:注射AdCA13-hENDO-VEGI_(151)的治疗组肿瘤体积为328±156mm^3,注射AdLacZ的对照组肿瘤体积为2356±1 140 mm^3,差异显著(F=12.42,P=0.0125),抑瘤率为86.1％;重组腺病毒携带的目的基因均能在荷胃癌裸鼠肿瘤组织中表达;治疗组PCNA LI为 0.13± 0.09％,对照组为 1.40 ± 0.53％,差异显著(F=22.30,P=0.0033);治疗组AI为5.09 ± 0.25％,对照组AI为0.61±0.67％,差异显著(F=155.13,P=0.0 001);治疗组MVD为0.06±0.03％,对照组MVD为 1.09 ± 0.76％,差异明显(F=7.38,P=0.0348)。结论:重组腺病毒携带的融合基因能在荷胃癌裸鼠体内表达出有生物学活性的融合蛋白,并表现出一定的抑瘤效果。

关键词：胃癌基因治疗动物实验 hENDO—VEGI151 重组腺病毒内皮抑素血管内皮细胞抑制因子新生血管

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

沙利度胺对子宫内膜异位症的内膜间质细胞体外表达VEGF的影响

引用

中国新药与临床杂志 2007年第9期26卷 641-645页

作者：王建军李怀芳赵平同济大学附属同济医院妇产科上海200065 中国人民解放军第二军医大学微生物学教研室上海200433

目的:观察沙利度胺(ThD)对子宫内膜异位症病人内膜间质细胞的增殖及其血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:刮取子宫内膜异位症病人的子宫内膜组织,经体外分离、培养,用波形蛋白单抗进行免疫组化染色鉴定,应用四唑盐(MTS)分析肿瘤... 详细信息

目的:观察沙利度胺(ThD)对子宫内膜异位症病人内膜间质细胞的增殖及其血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:刮取子宫内膜异位症病人的子宫内膜组织,经体外分离、培养,用波形蛋白单抗进行免疫组化染色鉴定,应用四唑盐(MTS)分析肿瘤坏死因子α(TNF-α)和ThD对间质细胞生长的影响,以实时荧光定量PCR、Western Blot和定量ELISA分析在存在外源TNF-α的情况下,不同浓度ThD对间质细胞表达VEGF的影响。结果:TNF-α能促进子宫内膜间质细胞的增殖和分泌VEGF,而ThD能剂量依赖性抑制内膜间质细胞的增殖,并逆转TNF-α对VEGF的上调作用。结论:ThD可抑制体外培养的子宫内膜异位症内膜间质细胞的增殖及其VEGF的表达和分泌,提示ThD对于治疗子宫内膜异位症可能具有一定的作用。

关键词：沙利度胺子宫内膜异位症体外研究血管内皮生长因子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：