检索结果-内蒙古大学图书馆

世界华人消化杂志 2003年第11期11卷 1743-1748页

作者：董菁成军中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039

乙型肝炎病毒(HBV)e 抗原(HBeAg)阴性 HBV 感染是相当常见一个问题,是慢性乙型肝炎(CHB)的第二状态,是与HBeAg 阳性的 CHB 同等重要的一种 HBV 感染形式.前 C 区A83位点的替换突变和 CP 双替换突变是导致 HBeAg 阴性的两种形式,而准种... 详细信息

乙型肝炎病毒(HBV)e 抗原(HBeAg)阴性 HBV 感染是相当常见一个问题,是慢性乙型肝炎(CHB)的第二状态,是与HBeAg 阳性的 CHB 同等重要的一种 HBV 感染形式.前 C 区A83位点的替换突变和 CP 双替换突变是导致 HBeAg 阴性的两种形式,而准种漂变是形成 HBeAg 阴性 HBV 的主要原因。HBeAg 阴性 CHB 是一个推断性诊断,不具有特征性表现目前拉米夫定是较为理想的治疗 HBeAg 阴性 CHB 患者的抗病毒药物,IFNα治疗的远期疗效相对较差,但治疗是改变患者预后的一项重要手段.

关键词：乙型肝炎病毒e抗原慢性乙型肝炎抗病毒治疗拉米夫定干扰素α 免疫耐受

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠和大鼠NS5ATP4同源基因序列的生物信息学分析

引用

世界华人消化杂志 2004年第7期12卷 1582-1587页

作者：成军杨倩刘妍王建军纪冬中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039

目的:克隆、鉴定、分析小鼠和大鼠NS5ATP4基因序列, 确定编码产物序列,并对于其与人的NSSATP4基因及其编码产物的序列的同源性进行分析. 方法:利用基因芯片技术获得了人NS5ATP4的cDNA序列,利用生物信息学技术确定小鼠、大鼠的NS5ATP4的... 详细信息

目的:克隆、鉴定、分析小鼠和大鼠NS5ATP4基因序列, 确定编码产物序列,并对于其与人的NSSATP4基因及其编码产物的序列的同源性进行分析. 方法:利用基因芯片技术获得了人NS5ATP4的cDNA序列,利用生物信息学技术确定小鼠、大鼠的NS5ATP4的基因及其编码产物的序列,并对于其同源性进行生物信息学分析. 结果:利用生物信息学技术确定了小鼠和大鼠的NS5ATP4 的基因及其编码产物的序列,小鼠和大鼠的NS5ATP4编码基因区分别由762和756个核苷酸(nt)组成.编码产物分别由263和261个氨基酸残基(aa)组成.与人NS5ATP4基因和蛋白质一级结构序列的同源性分别为90.29%,84.25%和95.65%,86.96%. 结论:应用生物信息学技术确定了小鼠和大鼠的NS5ATP4 的基因及编码产物的序列.

关键词：小鼠大鼠 NS5ATP4同源基因序列生物信息学分析基因芯片技术

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

丙型肝炎病毒非结构蛋白5A结合蛋白37小鼠同源基因的克隆化及结构分析

引用

世界华人消化杂志 2004年第2期12卷 291-297页

作者：成军李克王琳陆荫英刘妍钟彦伟中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039

目的:克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)结合蛋白37(NS5ABP37)的小鼠同源基因,为阐明小鼠NS5ABP37基因的生物学功能奠定基础,探索HCVNS5A蛋白与NS5ABP37蛋白之间的结合在慢性丙型肝炎的发病机制中可能的作用.方法:利用酵母双杂... 详细信息

目的:克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)结合蛋白37(NS5ABP37)的小鼠同源基因,为阐明小鼠NS5ABP37基因的生物学功能奠定基础,探索HCVNS5A蛋白与NS5ABP37蛋白之间的结合在慢性丙型肝炎的发病机制中可能的作用.方法:利用酵母双杂交系统3,以HCVNS5A蛋白作为诱饵,筛选肝细胞cDNA文库,首先获得HCVNS5A结合的人肝细胞蛋白的新的编码基因.利用生物信息学(bioinformatics)技术确定NS5ABP37的小鼠同源基因序列.利用GenBank在线分析软件,对小鼠NS5ABP37蛋白一级结构特点进行分析.结果:通过酵母双杂交技术获得了人NS5ABP37的编码基因.利用生物信息学技术确定了小鼠NS5ABP37的基因序列.利用分子生物学技术获得了小鼠的NS5ABP37的基因克隆,小鼠NSSABP37基因开放读码框架(ORF)为1488nt,编码产物由495aa组成.计算分子量为54583.67道尔顿,预测等电点(pI)为4.70.小鼠NS5ABP37与白细胞抗原相关(leukocyteantigenrelated,EAR)蛋白前体蛋白(LARproteinprecursor)同源.小鼠HCVNS5ABP37基因序列被美国核苷酸数据库GenBank收录,收录号为AY234860.结论:成功确定、克隆了小鼠的NS5ABP37基因序列,并证实与白细胞抗原相关蛋白前体蛋白具有一定的同源性.这一结果,为进一步阐明小鼠的NS5ABP37基因的功能,阐明HCV感染的发病机制奠定了坚实的基础.

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白5A 结合蛋白37 小鼠克隆 NS5A HCV 基因治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

乙型肝炎病毒基因组前-X区的分子流行病学研究

引用

世界华人消化杂志 2004年第4期12卷 794-800页

作者：董菁杨倩成军中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因组是否存在前-X编码基因,并探讨前-X基因与HBV基因型之间的关系. 方法:自慢性乙型肝炎患者血清中提取乙型肝炎病毒基因组,首先应用多引物-多聚酶链反应(PCR)进行HBV基因型分型.之后将前-X区扩增,TA克隆到... 详细信息

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因组是否存在前-X编码基因,并探讨前-X基因与HBV基因型之间的关系. 方法:自慢性乙型肝炎患者血清中提取乙型肝炎病毒基因组,首先应用多引物-多聚酶链反应(PCR)进行HBV基因型分型.之后将前-X区扩增,TA克隆到pGEM Teasy载体后进行单克隆测序,利用Vector 8.0软件进行序列分析. 结果:17例患者中,A型者1例,B型3例,B/C混合型者3例,C型10例.克隆测序的45个克隆中,27个(60%) 克隆编码前-X多肽,其中18个(66.7%)克隆来自C基因型.有3种形式突变导致前-X区编码不能.前-X区多肽具有个体化突变现象. 结论:前-X区编码在B、C基因型中均为普遍存在的现象,其编码具有C型倾向性.

关键词：乙型肝炎病毒病毒基因分子流行病学 HBV 编码基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

丙型肝炎病毒核心蛋白上调细胞周期调节蛋白Weel基封表达研究

引用

世界华人消化杂志 2003年第7期11卷 947-950页

作者：王建军刘妍成军杨倩杨艳杰中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

目的：了解丙型肝炎病毒核心蛋白和细胞周期调节蛋白Weel基因表达的关系，研究HCV核心蛋白在HCV致病的分子生物学机制中的作用．方法：应用聚合酶链反应(PCR)扩增Weel基因启动子，命名为Weep．以T-A克隆法，将Weep基因片段连入载体pGEM-... 详细信息

目的：了解丙型肝炎病毒核心蛋白和细胞周期调节蛋白Weel基因表达的关系，研究HCV核心蛋白在HCV致病的分子生物学机制中的作用．方法：应用聚合酶链反应(PCR)扩增Weel基因启动子，命名为Weep．以T-A克隆法，将Weep基因片段连入载体pGEM-T．将获得的质粒pT-Weep，与报告质粒pCAT3-basic分别用KpnI和XhoI双酶切后构建Weel启动子报告载体pCAT3-Weep，分别以重组报告载体pCAT3-Weep和pcDNA3．1(-)-core瞬时转染HepG2细胞，以转染pCAT3basic的HepG2细胞为阴性对照，48h后收获细胞．应用酶联免疫黏附方法(ELISA)检测细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性，以了解HCV核心蛋白对Weel基因启动子的反式激活作用．结果：构建的表达载体pcDNA3．1(-)-core和报告载体pCAT3-Weep经过序列分析和酶切鉴定正确．pCAT3-Weep和pcDNA3．1(-)-core瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是CAT3空载体的3．4倍，pCAT3-Weep的2．3倍．结论：丙型肝炎病毒核心蛋白可反式激活Weel基因启动子，进而上调细胞周期调节基因Weel的表达。

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白细胞周期调节蛋白Weel 基因表达分子生物学聚合酶链反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

丙型肝炎病毒核心蛋白上调NIP3基因表达研究

引用

世界华人消化杂志 2003年第7期11卷 951-954页

作者：王建军刘妍成军杨倩杨艳杰中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

目的:了解丙型肝炎病毒核心蛋白和NIP3基因的表达的关系,研究HCV核心蛋白在HCV致病的分子生物学机制中的作用.方法:聚合酶链反应(PCR)扩增NIP3基因启动子,以T-A克隆法,将NIPP基因片段连入载体pGEM-T.获得的质粒pT-NIPP,和报告质粒pCAT3-... 详细信息

目的:了解丙型肝炎病毒核心蛋白和NIP3基因的表达的关系,研究HCV核心蛋白在HCV致病的分子生物学机制中的作用.方法:聚合酶链反应(PCR)扩增NIP3基因启动子,以T-A克隆法,将NIPP基因片段连入载体pGEM-T.获得的质粒pT-NIPP,和报告质粒pCAT3-basic分别用SacI和Bg1Ⅱ双酶切后构建报告载体pCAT3-NIPP,分别以重组报告载体pCAT3-NIPP和pcDNA3.1(-)-core应用FuGENE 6转染试剂瞬时转染NIH3T3细胞,以转染pCAT3 basic的HepG2细胞为阴性对照,48 h后收获细胞.应用酶联免疫黏附方法(ELISA)检测细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性,以了解HCV核心蛋白对NIP3基因启动子的反式激活作用.结果:构建的表达载体pcDNA3.1(-)-core和报告载体pCAT3-NIPP经过序列分析和酶切鉴定正确.pCAT3-NIPP和pcDNA3.1(-)-core瞬时转染的NIH3T3细胞中的CAT表达活性为pCAT3-NIPP的1.9倍,是pCAT3 basic的3.6倍,明显升高.结论:丙型肝炎病毒核心蛋白可反式激活NIP3基因启动子,进而上调NIP3基因的表达.

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白 NIP3基因基因表达聚合酶链反应分子生物学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因的筛选

引用

中华肝脏病杂志 2003年第1期11卷 8-10页

作者：陆荫英李克王琳刘妍王业东成军张玲霞中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA... 详细信息

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落,PCR从中扩增出目的片段并测序,进行生物信息学分析。结果成功克隆出HBVPreS2基因并在酵母细胞中表达,配合后选出既能在4缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基又能在铺有X-α-半乳糖(X-α-gal)的4缺培养基上生长并变成蓝色的真阳性菌落26个,其中含金属硫蛋白A2基因的菌落有12个,细胞色素C氧化酶Ⅱ有1个,细胞色素:P450 IVF亚基2个,细胞色素C氧化酶Ⅳ亚基同功酶1有2个,人血白蛋白3个,。Na+-K+ATP酶β1亚基1个,前清蛋白2个,植物血凝素半乳糖苷结合亚基1个,未知基因2个。结论成功克隆出HBV PreS2蛋白的结合蛋白,为进一步研究HBV PreS2的作用提供了新线索。

关键词：乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因筛选

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

乙型肝炎病毒E抗原结合蛋白E-19的猴同源基因的克隆化与序列分析

引用

世界华人消化杂志 2004年第4期12卷 805-808页

作者：吴煜成军陆荫英王琳刘妍张健李克中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039

目的:乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)对HBV的感染和复制都不是必须的,普遍认为他与HBV引起免疫耐受,免疫系统功能障碍有关.应用酵母双杂交技术我们克隆了人肝细胞cDNA文库中与HBeAg相互作用蛋白的基因E-19,应用生物信息学技术克隆猴的E-19同... 详细信息

目的:乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)对HBV的感染和复制都不是必须的,普遍认为他与HBV引起免疫耐受,免疫系统功能障碍有关.应用酵母双杂交技术我们克隆了人肝细胞cDNA文库中与HBeAg相互作用蛋白的基因E-19,应用生物信息学技术克隆猴的E-19同源基因. 方法:应用酵母双杂交系统3,将多聚酶链反应(PCR)法扩增的HBeAg基因连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,提取阳性菌落并测序,确定人E-19基因序列,利用生物信息学技术克隆猴的E-19同源基因,并进行编码产物的序列分析. 结果:成功克隆出人的HBeAg结合蛋白新基因E-19.应用生物信息学技术,确定克隆了猴E-19同源基因,编码基因全长378 nt,编码产物由125 aa组成. 结论:成功克隆出人的HBeAg的肝细胞结合蛋白E-19基因,并发现、确定了猴E-19的同源基因,为研究E-19 基因的结构与功能、表达与调控、生物学意义以及在病毒性肝炎发病机制中的作用奠定了基础.

关键词：乙型肝炎病毒 E抗原 HBeAg 结合蛋白E-19 猴同源基因克隆化序列多聚酶链反应 PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基因表达谱芯片技术筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白3反式调节靶基因

引用

世界华人消化杂志 2003年第7期11卷 930-934页

作者：成军刘妍洪源王建军杨倩中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039

目的:丙型肝炎病毒(HCV)的非结构蛋白3(non-structural protein 3,NS3)是由HCV基因组编码的具有多种功能的蛋白质.NS3蛋白的表达对于HCV感染肝细胞的基因表达谱具有显著影响.为了研究NS3蛋白反式调节的靶基因,我们应用基因芯片技术对于p... 详细信息

目的:丙型肝炎病毒(HCV)的非结构蛋白3(non-structural protein 3,NS3)是由HCV基因组编码的具有多种功能的蛋白质.NS3蛋白的表达对于HCV感染肝细胞的基因表达谱具有显著影响.为了研究NS3蛋白反式调节的靶基因,我们应用基因芯片技术对于pcDNA3.1(-)和pcDNA3.1(-)-NS3分别转染的HepG2细胞的基因表达谱进行分析.方法:以含有HCV-H全基因组cDNA的质粒pBRTM3011作为模板,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增NS3蛋白编码基因片段,以常规的分子生物学技术构建表达载体pcDNA3.1(-)-NS3.以脂质体技术转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,提取总mRNA,逆转录为cDNA,与转染空白表达载体pcDNA3.1(-)的HepG2细胞进行DNA芯片分析并比较.结果:构建的表达载体经过限制性内切酶分析和DNA序列测定,证实准确无误.以单链可变区抗体的Western blot杂交技术证实构建的表达载体转染hepG2细胞之后有NS3蛋白的表达,提取高质量的总mRNA并进行逆转录成为cDNA,进行DNA芯片技术分析.在1 152个基因表达谱的筛选中,发现有34个基因表达水平显著上调,37个基因表达水平显著下调.结论:HCV的NS3蛋白是一种反式激活因子.NS3基因的表达对于肝细胞基因表达谱有显著影响.DNA芯片技术是分析反式激活靶基因的有效技术途径.

关键词：基因表达谱基因芯片技术筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白3 反式调节靶基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

乙型肝炎病毒基因组前-前-S基因区的分子流行病学研究

引用

世界华人消化杂志 2004年第4期12卷 785-789页

作者：杨倩董菁成军中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因组是否存在前-前-S编码基因,并探讨前-前-S基因与HBV基因型分布之间的关系. 方法:自慢性乙型肝炎患者血清中提取病毒基因组DNA, 首先应用多引物-多聚酶链反应(PCR)进行HBV基因型分型,之后将前-前-S区扩增... 详细信息

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因组是否存在前-前-S编码基因,并探讨前-前-S基因与HBV基因型分布之间的关系. 方法:自慢性乙型肝炎患者血清中提取病毒基因组DNA, 首先应用多引物-多聚酶链反应(PCR)进行HBV基因型分型,之后将前-前-S区扩增,TA克隆到pGEM Teasy载体后进行单克隆测序,利用Vector 8.0软件进行序列分析. 结果:选择15例患者,经过HBV基因型分型实验确定基因型为B型者1例,B/C混合型者5例,C型9例.自15例患者血清中提取的HBV基因组中扩增出前-前-S基因片段,TA克隆后选择31个克隆进行测序,测序结果证明这31个克隆均编码前-前-S基因. 结论:前-前-S区编码在B、C基因型中均为普遍存在的现象.

关键词：乙型肝炎病毒基因 HBV 前-前-S基因区基因组

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：