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人脐带间充质干细胞联合高压氧对模拟高原环境下小鼠卵巢功能损伤的修复作用研究

中华生殖与避孕杂志 2025年第2期45卷 183-195页

作者：杜静常瑞亚张宗翠王玲中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院生殖医学中心兰州730050 甘肃省中医药大学第一临床医学院兰州730000 中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院生殖医学中心甘肃省干细胞与基因药物重点实验室兰州730050

目的探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)联合高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对模拟高原环境下小鼠卵巢功能损伤的修复作用及作用机制。方法按照随机数字表法将64只6周龄C57BL/6雌鼠随机分为... 详细信息

目的探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)联合高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对模拟高原环境下小鼠卵巢功能损伤的修复作用及作用机制。方法按照随机数字表法将64只6周龄C57BL/6雌鼠随机分为模型组、hUCMSCs组、hUCMSCs+HBO组和对照组,每组16只。其中模型组、hUCMSCs组、hUCMSCs+HBO组小鼠放置在低压氧舱模拟海拔6500 m高原环境中持续饲养15 d,构建卵巢功能损伤模型。从造模成功后第1天开始给予对照组与模型组0.2 mL生理盐水尾静脉注射,hUCMSCs组、hUCMSCs+HBO组给予0.2 mL/只hUCMSCs(1×10^(6)个细胞)尾静脉注射,1次/周,共3次,持续干预15 d,hUCMSCs+HBO组每天予以HBO。记录小鼠一般情况、体质量、动情周期变化、性激素水平、双侧卵巢湿重、卵巢指数、各级卵泡计数情况、卵巢组织病理变化及超微结构改变,Western blotting检测卵巢组织中转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、Smad家族成员3(Smad family member 3,Smad3)蛋白的表达,以及各组小鼠产仔数、子代体质量,从而评估各组小鼠生育能力。结果①与hUCMSCs组比较,hUCMSCs+HBO组小鼠动情周期、体质量、双侧卵巢湿重、卵巢指数差异均无统计学意义(均P>0.05);血清抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)、雌二醇、孕酮、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平及各级卵泡计数差异均无统计学意义(均P>0.05),但hUCMSCs+HBO组卵巢组织颗粒细胞的核膜完整、个别线粒体轻度肿胀、粗面内质网无扩张、高尔基体无肿胀等,TGF-β1、Smad3蛋白表达水平均升高(P=0.010,P<0.001),子代情况及窝仔数差异均无统计学意义(均P>0.05)。②与对照组比较,hUCMSCs+HBO组小鼠体质量、双侧卵巢湿重、卵巢指数、血清AMH、雌二醇、孕酮水平略低,血清FSH、LH水平稍偏高,但差异均无统计学意义(均P>0.05),各级卵泡计数间差异亦均无统计学意义(均P>0.05),hUCMSCs+HBO组卵巢组织颗粒细胞的核膜、线粒体、粗面内质网、高尔基体等细胞器结构接近于对照组超微结构变化。hUCMSCs+HBO组和对照组TGF-β1蛋白表达差异无统计学意义(P=0.253)。hUCMSCs+HBO组Smad3蛋白表达水平高于对照组(P<0.001),子代体质量、窝仔数及生活习性组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论hUCMSCs联合HBO干预治疗和hUCMSCs的单一治疗均能安全、有效地促进高原环境下受损卵巢组织的卵巢功能修复作用,但hUCMSCs联合HBO修复作用更好。hUCMSCs联合HBO可能是通过上调TGF-β1/Smad3信号通路,修复受损卵巢组织的功能,从而提高缺氧环境下小鼠的生育能力。

关键词：高原卵巢损伤高压氧治疗人脐带间充质干细胞联合治疗生育力保护

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人脐带间充质干细胞联合褪黑素治疗化疗致早发性卵巢功能不全的作用及机制

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中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5281-5288页

作者：魏璐晓黄冰雪杜静石拴霞王纪田王玲中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院生殖医学中心甘肃省兰州市730000 甘肃中医药大学第一临床医学院甘肃省兰州市730000 中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院甘肃省干细胞与基因药物重点实验室甘肃省兰州市730000

背景:目前研究证明,人脐带间充质干细胞和褪黑素均可改善卵巢功能,但人脐带间充质干细胞联合褪黑素对化疗所致早发性卵巢功能不全的保护作用及机制尚未有研究报道。目的:探讨人脐带间充质干细胞联合褪黑素对化疗所致早发性卵巢功能不全... 详细信息

背景:目前研究证明,人脐带间充质干细胞和褪黑素均可改善卵巢功能,但人脐带间充质干细胞联合褪黑素对化疗所致早发性卵巢功能不全的保护作用及机制尚未有研究报道。目的:探讨人脐带间充质干细胞联合褪黑素对化疗所致早发性卵巢功能不全的保护作用及机制。方法:将动情周期正常的40只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、人脐带间充质干细胞组、褪黑素组和人脐带间充质干细胞+褪黑素组,每组8只。除对照组外,其他组腹腔注射顺铂溶液构建早发性卵巢功能不全大鼠模型,人脐带间充质干细胞组和人脐带间充质干细胞+褪黑素组于造模后第1,6,11天分别尾静脉注射1×10^(6)个人脐带间充质干细胞,褪黑素组和人脐带间充质干细胞+褪黑素组每日腹腔注射10 mg/kg褪黑素,治疗期间监测大鼠体质量和动情周期变化。治疗14 d后,ELISA法检测血清雌二醇、卵泡刺激素、促黄体生成素、抗缪勒管激素水平,计算卵巢指数,苏木精-伊红染色观察卵巢组织学形态,透射电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构,Western blot检测PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白和LC3、P62等自噬蛋白在卵巢组织中的表达。结果与结论:(1)与对照组相比,模型组大鼠体质量逐渐减轻、动情周期紊乱,卵巢指数显著下降(P<0.01);雌二醇、抗缪勒管激素水平降低(P<0.01),卵泡刺激素、促黄体生成素水平升高(P<0.01);卵巢组织学形态和卵巢颗粒细胞超微结构严重破坏;p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR和P62蛋白表达显著降低(P<0.01),LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著升高(P<0.001)。(2)与模型组相比,各治疗组大鼠体质量逐渐恢复,部分大鼠动情周期恢复正常,卵巢指数显著升高(P<0.01);雌二醇、抗缪勒管激素水平升高(P<0.05),卵泡刺激素、促黄体生成素水平降低(P<0.05);卵巢组织学形态和卵巢颗粒细胞超微结构显著改善;p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR和P62蛋白表达显著升高(P<0.001),LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著降低(P<0.01)。其中人脐带间充质干细胞+褪黑素组上述指标改善更为显著。结果表明,人脐带间充质干细胞联合褪黑素可能通过上调PI3K/AKT/mTOR信号通路,抑制卵巢颗粒细胞自噬来治疗早发性卵巢功能不全。

关键词：早发性卵巢功能不全人脐带间充质干细胞褪黑素雌激素自噬 PI3K AKT mTOR

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HRT周期子宫内膜转化日血清雌二醇水平对FET妊娠结局的影响

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中国性科学 2025年第4期34卷 37-41页

作者：武彩云倪丰苏琳王雪梅姜宏中国人民解放军联勤保障部队第901医院生殖医学中心合肥230031

目的探讨激素替代治疗(HRT)周期子宫内膜转化日血清雌二醇(E_(2))水平对冻融胚胎移植(FET)妊娠结局的影响。方法回顾性分析2019年10月至2023年2月中国人民解放军联勤保障部队第901医院收治的880例首次接受FET助孕的不孕症患者的临床资料... 详细信息

目的探讨激素替代治疗(HRT)周期子宫内膜转化日血清雌二醇(E_(2))水平对冻融胚胎移植(FET)妊娠结局的影响。方法回顾性分析2019年10月至2023年2月中国人民解放军联勤保障部队第901医院收治的880例首次接受FET助孕的不孕症患者的临床资料,根据子宫内膜转化日血清E_(2)水平分为A组(E_(2)≤134.39 pg/mL,n=220)、B组(134.39337.75 pg/mL,n=220),均采用HRT准备子宫内膜行单囊胚FET。比较四组基线资料、胚胎移植情况、临床妊娠率、胚胎种植率、早期流产率和活产率,采用多因素Logistic回归分析活产率的影响因素。结果四组年龄、体重指数、不孕类型、基础卵泡刺激素(FSH)、基础E_(2)、基础孕酮(P)水平、雌激素使用时间、移植胚胎占比、转化日P水平、内膜厚度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。四组临床妊娠率、胚胎种植率、活产率随着子宫内膜转化日E_(2)水平升高而降低,D组临床妊娠率、胚胎种植率、活产率均低于A组(P<0.05);四组早期流产率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析结果显示,年龄、E_(2)>337.75 pg/mL是活产率的危险因素(P<0.05),内膜厚度是活产率的保护因素(P<0.05)。结论子宫内膜转化日E_(2)水平较高是HRT周期FET活产率的危险因素,E_(2)水平过高会增加妊娠失败风险。

关键词：冻融胚胎移植血清雌二醇妊娠结局

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辅助生殖术后并发门静脉及肠系膜上静脉血栓形成一例

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国际生殖健康/计划生育杂志 2025年第2期44卷 121-124页

作者：杜静王猛彪常瑞亚张宗翠王玲中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院生殖医学中心兰州730050 中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院消化内科兰州730050 甘肃中医药大学第一临床医学院

辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)术后的血栓多发生在上肢静脉、颈内静脉等上腔静脉以上的血管内,其主要原因与ART术后卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)形成有关。报告1例冻融胚胎移植术... 详细信息

辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)术后的血栓多发生在上肢静脉、颈内静脉等上腔静脉以上的血管内,其主要原因与ART术后卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)形成有关。报告1例冻融胚胎移植术(frozen-thawed embryo transfer,FET)后3周患者,无明显诱因出现剑突下持续性疼痛不适,经腹部彩色多普勒超声等相关检查后,考虑门静脉及肠系膜上静脉血栓形成。积极予以吸宫术终止妊娠及抗凝、抗血小板治疗后好转出院,持续抗凝治疗半年复查未见血栓存在。该患者无OHSS形成,且血栓形成部位少见,对该病例进行回顾性分析,旨在提高对ART术后并发深静脉血栓的认识。

关键词：生殖技术,辅助静脉血栓形成门静脉血栓肠系膜上静脉血栓病例报告

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缺氧通过TAZ-H2A.Z轴调控H2A.Z染色质沉积促进肺泡上皮细胞增殖的研究

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陆军军医大学学报 2025年第6期47卷 498-505页

作者：刘派予张梦洁曾继涛倪兵陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系病理生理学教研室重庆中国人民解放军联勤保障部队第991医院精神心理科湖北襄阳陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院生殖医学中心重庆

目的本研究旨在探讨转录共激活因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)与组蛋白H2A(histone H2A,H2A)的一种组蛋白变体H2A.Z,在缺氧诱导的肺损伤后修复中的作用及其潜在机制。方法利用缺氧模拟仓(5800 m)处理4 d... 详细信息

目的本研究旨在探讨转录共激活因子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)与组蛋白H2A(histone H2A,H2A)的一种组蛋白变体H2A.Z,在缺氧诱导的肺损伤后修复中的作用及其潜在机制。方法利用缺氧模拟仓(5800 m)处理4 d后,构建小鼠缺氧肺损伤模型,肺组织切片HE染色评估肺损伤程度。利用缺氧工作站(1%O_(2)浓度)处理小鼠肺泡上皮细胞系(murine lung epithelial-12,MLE12)24 h,构建MLE12缺氧细胞模型,Western blot分析检测TAZ表达。CCK-8实验评价肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cells,AECs)增殖。免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)实验验证TAZ与H2A.Z二者之间的相互作用。靶向剪切及转座酶标记技术(cleavage under targets and tagmentation,CUT&Tag)测序分析TAZ影响H2A.Z在染色质沉积情况。结果缺氧显著诱导小鼠肺组织肺泡萎缩及炎症浸润(P<0.01)。缺氧培养显著上调MLE12细胞中TAZ蛋白表达(P<0.05)。CCK-8实验发现,敲低TAZ后AECs增殖能力显著下降(P<0.01)。Co-IP证实TAZ与H2A.Z存在物理相互作用。靶向剪切及转座酶标记技术(cleavage under targets and tagmentation,CUT&Tag)测序显示缺氧促进H2A.Z在染色质上的沉积(常氧结合位点31817,缺氧结合位点44078),而TAZ敲低部分逆转此现象(结合位点37840)。结论缺氧显著上调TAZ表达,后者与H2A.Z的结合并促进H2A.Z在染色质上的沉积,增强AECs增殖以应对缺氧损伤。

关键词：缺氧肺泡上皮细胞 TAZ H2A.Z 增殖

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子宫内膜搔刮与宫腔灌注G-CSF对薄型子宫内膜患者行IVF-ET/ICSI后妊娠结局的影响

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重庆医科大学学报 2025年第2期50卷 224-229页

作者：张宗翠马薇王玲阎一鑫石蕊西北民族大学医学部兰州730030 中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院生殖医学中心兰州730050

目的:比较子宫内膜搔刮、宫腔灌注粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)单一治疗与联合治疗对薄型子宫内膜(thin endometrium,TE)患者行IVF-ET/ICSI后妊娠结局的影响。方法:收集2018年2月到2023年6月在中... 详细信息

目的:比较子宫内膜搔刮、宫腔灌注粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)单一治疗与联合治疗对薄型子宫内膜(thin endometrium,TE)患者行IVF-ET/ICSI后妊娠结局的影响。方法:收集2018年2月到2023年6月在中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院生殖医学中心行IVF-ET/ICSI的薄型子宫内膜患者204例。移植前未行特殊治疗的患者为对照组(A组,52例),行子宫内膜搔刮治疗者为搔刮组(B组,60例),行G-CSF宫腔灌注者为灌注组(C组,48例),行内膜搔刮联合宫腔灌注者为联合组(D组,44例)。比较对照组与各治疗组患者的一般资料、临床资料、移植胚胎情况、移植时子宫内膜情况以及移植后的胚胎种植率、临床妊娠率、生化妊娠率、早期流产率、多胎妊娠率、早产率以及活产率。结果:对照组与各治疗组间患者的年龄(F=1.392,P=0.246)、体质指数(F=1.969,P=0.120)、不孕年限(F=0.416,P=0.742)、不孕类型(χ^(2)=4.693,P=0.196)、不孕因素(χ^(2)=7.206,P=0.616)、内膜准备方法(χ^(2)=11.289,P=0.256)、基础卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)(F=1.736,P=0.161)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)(F=1.894,P=0.132)、雌二醇(estradiol,E2)(F=1.614,P=0.181)、既往移植次数(χ^(2)=4.041,P=0.257)、妊娠次数(F=0.024,P=0.995)、流产次数(F=0.118,P=0.949)、移植胚胎个数(F=0.345,P=0.793)、移植胚胎发育天数(χ^(2)=1.638,P=0.651)比较,差异无统计学意义。B组、C组、D组移植日子宫内膜厚度均高于A组(7.93±1.34、8.06±0.85、7.79±1.20 vs.6.81±0.91,F=13.88,P<0.001),B组、C组、D组移植日Ⅲ型内膜血流较A组均增高(56.7%、54.2%、56.8%vs.28.8%,χ^(2)=13.70,P=0.003),差异均具有统计学意义。B组、C组、D组的胚胎种植率及临床妊娠率均明显高于A组(51.1%、39.2%、48.6%vs.22.0%,χ^(2)=18.095,P<0.001)、(65.0%、58.3%、54.5 vs.28.9%,χ^(2)=16.116,P=0.001),差异有统计学意义。B组与C组的生化妊娠率明显高于A组(68.3%、66.7%vs.40.4%,χ^(2)=10.936,P=0.012),差异有统计学意义。D组的多胎妊娠率明显高于B组与C组(45.8%vs.20.5%、10.7%,χ^(2)=9.476,P=0.024),差异有统计学意义。B组、C组、D组的活产率均明显高于A组(55.0%、47.9%、47.7%vs.19.2%,χ^(2)=16.410,P=0.001),差异有统计学意义。A组与B组、C组、D组之间的早期流产率及早产率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。B组、C组、D组之间的胚胎种植率、临床妊娠率、生化妊娠率、早期流产率及早产率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:子宫内膜搔刮、宫腔灌注G-CSF单一治疗以及两者联合治疗均能增加TE患者的子宫内膜厚度,且均能改善TE患者行IVF-ET/ICSI后的妊娠结局,但3种治疗措施间的临床疗效并无明显差异,且联合治疗较单独治疗能增加TE患者行IVF-ET/ICSI的多胎妊娠率,增加病理妊娠发生的风险。

关键词：宫腔灌注内膜搔刮粒细胞集落刺激因子薄型子宫内膜冻融胚胎移植

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拮抗剂方案单胚胎移植临床结局分析

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中华生殖与避孕杂志 2022年第2期42卷 125-131页

作者：栾康姜宏殷慧群汪存利朱杰曹振毅吴燕中国人民解放军联勤保障部队第901医院生殖医学中心合肥230031

目的探讨拮抗剂方案单胚胎移植的临床应用价值。方法回顾性队列研究分析2017年1月至2021年3月期间在中国人民解放军联勤保障部队第901医院生殖医学中心行拮抗剂方案体外受精/卵胞质内单精子注射(in vitro fertilization/intracytoplasmi... 详细信息

目的探讨拮抗剂方案单胚胎移植的临床应用价值。方法回顾性队列研究分析2017年1月至2021年3月期间在中国人民解放军联勤保障部队第901医院生殖医学中心行拮抗剂方案体外受精/卵胞质内单精子注射(in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection,IVF/ICSI)助孕患者的临床资料,根据胚胎发育时间和移植胚胎数分为第3日(day 3,D3)单优质卵裂胚移植组(单优组),D3双优质卵裂胚移植组(双优组)和单囊胚移植组(单囊胚组)。其中新鲜周期单优组301个周期、双优组253个周期、单囊胚组127个周期;冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)周期单优组84个周期、双优组136个周期、单囊胚组396个周期;全胚冷冻首次FET单优组69个周期、单囊胚组161个周期。采用单因素方差分析及卡方检验比较新鲜和FET周期单优组、双优组、单囊胚组及首次FET周期单优组与单囊胚组的临床妊娠率、种植率、多胎妊娠率、早期流产率、持续妊娠率。结果各组不孕年限、体质量指数(body mass index,BMI)、基础卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、基础黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、基础雌二醇、抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)、促性腺激素(gonadotropin,Gn)用量、获卵数差异均无统计学意义(均P>0.05),新鲜周期中单优组的临床妊娠率、种植率、多胎妊娠率、早期流产率、持续妊娠率与新鲜周期单囊胚组比较差异均无统计学意义(均P>0.05),临床妊娠率[46.18%(139/301)]、持续妊娠率[40.86%(123/301)]、多胎妊娠率[0%(0/139)]显著低于双优组[58.89%(149/253),P<0.001;52.17%(132/253),P<0.001;30.20%(45/149),P<0.001],种植率与双优组比较差异无统计学意义(P>0.0167)。FET中单优组的临床妊娠率、种植率、持续妊娠率与双优组比较差异均无统计学意义(均P>0.0167),但均显著低于单囊胚组[62.88%(249/396),P<0.001;63.89%(253/396),P<0.001;55.30%(219/396),P<0.001],多胎妊娠率[0%(0/27)]则显著低于双优组[20.37%(11/54),P=0.013]。首次FET单优组的持续妊娠率[27.54%(19/69)]显著低于新鲜周期单优组[40.86%(123/301),P=0.040],首次FET单囊胚组的临床妊娠率[63.35%(102/161)]、种植率[63.98%(103/161)]显著高于新鲜周期单囊胚组[50.39%(64/127),P=0.027;51.97%(66/127),P=0.040]。结论拮抗剂方案单胚胎移植能显著降低多胎妊娠率;新鲜周期移植D3单优质卵裂胚可获得与D5单囊胚相似的临床结局,而FET周期移植单囊胚能获得更好的临床结局。

关键词：拮抗剂方案单囊胚移植单卵裂胚移植临床结局

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长效长方案促排卵前采取高纯度人尿促性素预处理的临床分析

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中华妇幼临床医学杂志（电子版） 2021年第2期17卷 152-158页

作者：包莉莉杨波王冬雪李冬秀中国人民解放军联勤保障部队第九八零医院生殖医学中心石家庄050000

目的探讨在长效长方案促排卵前,采取高纯度人尿促性素(HP-hMG)预处理,对接受体外受精/卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)-胚胎移植(ET)助孕的不孕女性临床妊娠结局的影响。方法选择2018年1月至2019年8月,于中国人民解放军联勤保障部队第九... 详细信息

目的探讨在长效长方案促排卵前,采取高纯度人尿促性素(HP-hMG)预处理,对接受体外受精/卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)-胚胎移植(ET)助孕的不孕女性临床妊娠结局的影响。方法选择2018年1月至2019年8月,于中国人民解放军联勤保障部队第九八零医院生殖医学中心进行IVF/ICSI-ET助孕,并采用长效长方案促排卵的171例卵巢储备功能正常的不孕女性为研究对象。回顾性分析其临床病例资料。根据启动促性腺激素(Gn)前是否采用HP-hMG预处理,将其分为研究组(n=102,采用HP-hMG进行预处理)与对照组(n=69,未进行预处理)。对2组受试者的一般临床资料、接受IVF/ICSI-ET助孕中相关临床指标、ET相关指标、妊娠结局及助孕相关不良反应发生率等,采用独立样本t检验及χ^(2)检验进行统计学比较。本研究经本院伦理委员会批准(审批文号:2020-KY-129),所有受试者均签署知情同意书。结果①2组受试者年龄、人体质量指数(BMI)、原发不孕者所占比例、不孕年限、基础窦卵泡计数(AFC),以及基础血清激素,包括卵泡刺激素(FSH)、促黄体激素(LH)、雌二醇及孕酮水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。②2组受试者降调节后血清FSH、LH、雌二醇及孕酮水平,Gn启动日血清FSH及雌二醇水平,Gn使用时间及剂量,人绒毛膜促性腺激素(hCG)日血清LH、雌二醇及孕酮水平,以及移植日子宫内膜厚度比较,差异亦均无统计学意义(P>0.05)。研究组受试者Gn启动日血清LH水平为(1.27±0.81)IU/L,显著高于对照组的(0.46±0.21)IU/L,并且差异有统计学意义(t=-8.115、P<0.001)。③2组受试者的获卵数、获卵率、MⅡ卵率、正常受精率、优质胚胎率、鲜胚移植率、移植胚胎数、IVF与ICSI比值(IVF/ICSI)、临床妊娠率及自然流产率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组中、重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)及卵巢低反应发生率均为0,显著低于对照组的4.4%及5.8%,并且差异均有统计学意义(χ^(2)=4.514、P=0.034,χ^(2)=6.055、P=0.014)。结论接受IVF/ICSI-ET助孕不孕女性,在长效长方案促排卵前采取HP-hMG预处理,可在不增加Gn使用时间及剂量前提下,降低OHSS及卵巢低反应发生。

关键词：促生育素类卵巢过度刺激综合征控制性超排卵受精,体外精子注射,细胞质内妊娠结局女(雌)性

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白藜芦醇介导AMPK/mTOR信号通路调控线粒体自噬缓解小鼠精原细胞氧化应激损伤和凋亡

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中国药学杂志 2024年第5期59卷 416-424页

作者：石拴霞王纪田宋诚魏璐晓甄雪蓉黄冰雪阎一鑫王玲中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院生殖医学中心兰州730050 甘肃中医药大学第一临床医学院兰州730000 中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院甘肃省干细胞与基因药物重点实验室兰州730050

目的观察白藜芦醇(resveratrol,RES)是否通过腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(amp-activatedproteinkinase/mammalian target of rapamycin,AMPK/mTOR)信号通路调控线粒体自噬缓解小鼠精原细胞(Gc-1 spg)氧化应激损伤。方法设置空白对照组(Control)、过氧化氢组(H_(2)O_(2))、H_(2)O_(2)+RES组、H_(2)O_(2)+RES+AMPK抑制剂(Compound C,CC)组,各组给予相应处理后。CCK-8检测细胞活力,试剂盒检测过氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物(glutathione peroxidase,GSH-PX)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)SOD、MDA、GSH-PX、LDH和ATP水平,JC-1检测线粒体膜电位,MitoTracker?Green FM检测活细胞线粒体形态,Hoechst 33342染色检测细胞核凋亡率,透射电镜观察细胞超微结构及线粒体自噬变化,Western blot检测凋亡蛋白Bcl-2关联X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2 protein,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-3),自噬蛋白微管相关蛋白轻链3(light chain 3,LC3)、P62,通路相关蛋白AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR表达水平。结果H_(2)O_(2)促进Gc-1 spg细胞氧化应激损伤,激活AMPK/mTOR信号通路和线粒体自噬,提高p-AMPK/AMPK和LC3表达并降低p-mTOR/mTOR和P62表达;RES能缓解Gc-1 spg细胞氧化应激损伤,进一步提高p-AMPK/AMPK和LC3表达,降低p-mTOR/mTOR和P62表达,促进Gc-1 spg细胞线粒体自噬;AMPK抑制剂能逆转RES对Gc-1 spg细胞氧化应激损伤的保护作用,抑制SOD和GSH-PX活性并增加MDA和LDH水平,降低细胞线粒体膜电位,增加线粒体损伤,破坏细胞核,增加Bax、Caspase-3和P62表达水平并降低Bcl-2和LC3表达水平,增加细胞凋亡率,降低线粒体自噬。结论RES可能通过AMPK/mTOR信号通路促进Gc-1 spg细胞线粒体自噬缓解线粒体氧化应激损伤和细胞凋亡。

关键词：白藜芦醇过氧化氢小鼠精原细胞腺苷酸活化蛋白激酶哺乳动物雷帕霉素靶蛋白线粒体自噬凋亡

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诱导人脐带间充质干细胞向颗粒细胞样细胞分化的实验研究

引用

中华生殖与避孕杂志 2019年第8期39卷 643-649页

作者：李玉姜宏殷慧群杜馨刘聪慧中国人民解放军联勤保障部队第901医院生殖医学中心合肥230031

目的探讨人脐带间充质干细胞(HUMSCs)向卵巢颗粒细胞(GCs)分化的可行性。方法通过骨形态发生蛋白4 (BMP4)预处理,联合人卵泡液和卵丘GCs诱导HUMSCs向卵巢GCs分化;以人GCs作为对照。免疫荧光法检测HUMSCs诱导分化前和诱导分化12 d卵泡刺... 详细信息

目的探讨人脐带间充质干细胞(HUMSCs)向卵巢颗粒细胞(GCs)分化的可行性。方法通过骨形态发生蛋白4 (BMP4)预处理,联合人卵泡液和卵丘GCs诱导HUMSCs向卵巢GCs分化;以人GCs作为对照。免疫荧光法检测HUMSCs诱导分化前和诱导分化12 d卵泡刺激素受体(FSHR)的表达;Real-time PCR检测HUMSCs诱导分化前、后GCs特异性基因FSHR、抗苗勒管激素(AMH)、芳香化酶19A1 (CYP19A1)及干细胞多能性相关基因OCT4的表达。结果诱导前HUMSCs无绿色荧光标记的FSHR表达;诱导分化12 d后,细胞形态与贴壁生长的人GCs相近,可见绿色荧光标记的FSHR表达,但荧光信号弱于阳性对照组;OCT4表达水平显著下调(P<0.001),GCs特异性基因FSHR、AMH和CYP19A1基因表达水平均显著上调(P均<0.001),表明诱导分化后HUMSCs已失去干细胞特性,向GCs定向分化,并具备GCs的部分特性。结论初步建立了HUMSCs向GCs分化的体外培养体系;HUMSCs在体外可成功诱导分化为GCs样细胞。

关键词：人脐带间充质干细胞颗粒细胞分化

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