检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2007年第5期23卷 818-823页

作者：宋世斌景志忠陈国华王笑笑宗瑞谦中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃省动物寄生虫病重点实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室兰州730046 甘肃农业大学动物医学院兰州730070

采用PCR方法从pGEM-IL-18重组质粒中扩增出IL-18基因并构建真核融合表达载体pPIC9K-IL-18,电激法转化入毕赤酵母GS115,采用G418抗性梯度法筛选得到多拷贝重组菌株,甲醇诱导表达,应用SDS-PAGE分析重组蛋白的表达情况,并将表达蛋白用凝胶... 详细信息

采用PCR方法从pGEM-IL-18重组质粒中扩增出IL-18基因并构建真核融合表达载体pPIC9K-IL-18,电激法转化入毕赤酵母GS115,采用G418抗性梯度法筛选得到多拷贝重组菌株,甲醇诱导表达,应用SDS-PAGE分析重组蛋白的表达情况,并将表达蛋白用凝胶层析柱纯化后,用MTT法检测其生物学活性。实验结果表明重组的GS115酵母菌株可表达分泌pIL-18,其表达在72h时达高峰,分泌量可达160mg/L,纯化的重组pIL-18蛋白具有显著的促进淋巴细胞增殖的活性,说明本试验已在毕赤酵母中在国内首次成功表达了具有生物学活性的pIL-18。

关键词： pIL-18 毕赤酵母基因表达纯化生物活性

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鸡的IL-2,IL-18,IL-12基因的克隆及表达

鸡的IL-2,IL-18,IL-12基因的克隆及表达

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：张蕾刘任强张静汪明中国农业大学动物医学院国家原虫重点实验室

有研究证明IL-2,IL-18,IL-12都能够促使,Th0细胞分化向Th1分化,有助于提高鸡的细胞免疫应答能力。本研究根据GenBank上公布的鸡白介素-2,IL-18,IL-12的序列设计了特异性引物,通过RT-PCR的方法从鸡外周血淋巴细胞的RNA中扩得IL-2,IL-18,I... 详细信息

有研究证明IL-2,IL-18,IL-12都能够促使,Th0细胞分化向Th1分化,有助于提高鸡的细胞免疫应答能力。本研究根据GenBank上公布的鸡白介素-2,IL-18,IL-12的序列设计了特异性引物,通过RT-PCR的方法从鸡外周血淋巴细胞的RNA中扩得IL-2,IL-18,IL-12的序列,然后将其插入原核表达裁体pGEX-6p-1。其中,IL-12由两个亚基p40和p35组成,本研究将其分成两个亚基分别扩增,然后通过(G4S)3的linker将两个亚基连接在一起插入原核表达载体。转化大肠杆菌Rosetta株,经IPTG诱导,证明可以表达分子量分别为42kDa,49kDa,85kDa的融合蛋白。为鸡白介素的进一步功能研究奠定了基础。

关键词：白介素 IL-2,IL-18,IL-12

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利用秀丽隐杆线虫检测牛奶中伊维菌素残留

利用秀丽隐杆线虫检测牛奶中伊维菌素残留

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第三届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨“瑞普杯”新思想、新方法、新观点论坛

作者：宋猛李镝锐潘保良汪明中国农业大学动物医学院国家原虫实验室北京100193

当今，牛奶中药物残留问题受到人们的广泛重视。抗寄生虫药物在奶牛养殖中应用广泛，然而，目前我国尚缺少对牛奶中抗寄生虫药物残留检测相关的法律规定，也缺少快速的残留检测方法，建立一种方便有效的抗寄生虫药物残留检测方法，是提... 详细信息

当今，牛奶中药物残留问题受到人们的广泛重视。抗寄生虫药物在奶牛养殖中应用广泛，然而，目前我国尚缺少对牛奶中抗寄生虫药物残留检测相关的法律规定，也缺少快速的残留检测方法，建立一种方便有效的抗寄生虫药物残留检测方法，是提高牛奶品质检测的重要保障。秀丽隐杆线虫是生物学领域最常用的模式生物之一，其对伊维菌素等抗寄生线虫药物非常敏感。伊维菌素等抗虫药可以引起秀丽隐杆线虫产卵率、运动速度、身体弯曲速度、死亡率以及发育速度等行为表型的变化。本研究基于秀丽隐杆线虫的以上特点，在研究了其对伊维菌素等抗寄生线虫药物敏感性反应的基础上，通过评价秀丽隐杆线虫在牛奶培养基中不同浓度伊维菌素时，产卵率、运动速度、身体弯曲速度、死亡率以及发育速度等指标变化，旨在建立一种可以根据秀丽隐杆线虫不同行为表型来检测牛奶中伊维菌素残留浓度的新方法;并且，通过建立秀丽隐杆线虫行为表型与伊维菌素浓度之间的关系曲线，可以在一定范围内对牛奶中伊维菌素的浓度进行半定量、甚至定量计算。

关键词：牛奶抗生素残留定量检测伊维菌素秀丽隐杆线虫

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柔嫩艾美尔球虫热休克蛋白70(EtHSP70)基因的克隆,表达及多克隆抗体的制备

柔嫩艾美尔球虫热休克蛋白70(EtHSP70)基因的克隆,表达及多克隆抗...

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：张蕾刘任强汪明中国农业大学动物医学院国家原虫重点实验室

本研究根据GenBank上公布的柔嫩艾美尔球虫热休克蛋白70(EtHSP70)基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR的方法从Houghton株柔嫩艾美尔球虫孢子化卵囊的RNA中扩增活得热休克蛋白70的基因序列,然后将其插入原核表达载体pGEX-6p-1,然后转化... 详细信息

本研究根据GenBank上公布的柔嫩艾美尔球虫热休克蛋白70(EtHSP70)基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR的方法从Houghton株柔嫩艾美尔球虫孢子化卵囊的RNA中扩增活得热休克蛋白70的基因序列,然后将其插入原核表达载体pGEX-6p-1,然后转化大肠杆菌Rosetta株,经IPTG诱导,SDS-PAGE和westernblot鉴定可高效表达分子量为99kd的融合蛋白,蛋白主要以包涵体形式表达,表达量约占菌体的40%以上。然后对表达的蛋白进行纯化,用纯化后的融合蛋白免疫兔子,制备兔抗热休克蛋白70的多克隆抗体。为进一步的关于柔嫩艾美尔球虫热休克蛋白70的功能及其作用机理的研究奠定了一定的基础。

关键词：柔嫩艾美尔球虫 EtHSP70 多克隆抗体热休克蛋白

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腔阔盘吸虫18S rRNA及亲缘关系分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2006年第5期24卷 345-348页

作者：郑亚东骆学农施程洪宗瑞谦景志忠才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 甘肃农业大学动物医学院兰州730070

目的利用分子生物学技术,研究腔阔盘吸虫的分类。方法提取腔阔盘吸虫基因组DNA,利用保守引物,PCR扩增18SrRNA片段并测序。应用DNAStar和MEGA3软件,分析腔阔盘吸虫与其他双腔吸虫18SrRNA的同源性,在此基础上绘制出系统进化树,确定它们的... 详细信息

目的利用分子生物学技术,研究腔阔盘吸虫的分类。方法提取腔阔盘吸虫基因组DNA,利用保守引物,PCR扩增18SrRNA片段并测序。应用DNAStar和MEGA3软件,分析腔阔盘吸虫与其他双腔吸虫18SrRNA的同源性,在此基础上绘制出系统进化树,确定它们的进化关系。结果腔阔盘吸虫和其他双腔吸虫18SrRNA的同源性很高,其中腔阔盘吸虫和支双腔吸虫(***)的差异最大,为2.42%,而与愁体吸虫(***)的差异较小,为1.75%;***和分叶短腺吸虫(***)的进化关系相对较近,差异为1.09%。结论双腔科吸虫的18SrRNA序列非常保守,腔阔盘吸虫和***的亲缘关系最近,而与***和***在进化上关系相对较远。

关键词：腔阔盘吸虫双腔科 18S rRNA 分子分类

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病理学监测在实验动物质量评价中的地位

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实验动物科学 2016年第1期33卷 49-53,58页

作者：宋志琦李超董浩迪王春雨程广宇杨利峰周向梅赵德明中国农业大学动物医学院国家动物海绵状脑病实验室北京100193

目的从病理学角度评价啮齿类实验动物的健康情况,为实验动物质量评价提供依据。方法采集不同等级啮齿类实验动物的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大肠和小肠,经10%中性福尔马林固定液固定,通过石蜡切片、HE染色、PAS染色、冰冻切片、油... 详细信息

目的从病理学角度评价啮齿类实验动物的健康情况,为实验动物质量评价提供依据。方法采集不同等级啮齿类实验动物的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大肠和小肠,经10%中性福尔马林固定液固定,通过石蜡切片、HE染色、PAS染色、冰冻切片、油红O染色后于显微镜下观察。结果虽然被检测动物的微生物学、寄生虫学和遗传学等指标都能达到或符合国家质量标准,但是病理学监测中都能观察到不同程度的组织病理学损伤,主要出现在肝脏、肺脏和肾脏,有时也发生在心脏、消化道和淋巴器官等。结论该结果说明,虽然啮齿类实验动物符合国家微生物学等标准,但仍有部分实验动物处于亚健康状态。病理学监测在实验动物质量评价中有着不可替代的重要作用。相关监管部门应该尽快制定实验动物病理学诊断的国家及地方标准,完善实验动物质量监测体系。

关键词：病理学监测啮齿类实验动物质量评价

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2020年北京市啮齿类实验动物组织病理学监测总结和分析

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实验动物科学 2022年第2期39卷 80-86页

作者：李杰赵梦洋赖梦雨宋银娟张茜茜梁正敏杨东明王元智李志萍屈孟锦董玉慧王浩然刘一朵关芷玲姚娇孙芷馨陈玉兰葛昕王冬冬高虹丽陈森赵化芬李雯赵德明周向梅杨利峰中国农业大学动物医学院国家动物海绵状脑病实验室北京100193

目的通过每年两次抽查检验北京市啮齿类实验动物的病理变化,一方面对北京市啮齿类实验动物质量总体水平做出科学评估,及时发现实验动物质量存在的问题,从而为实验动物的生产、管理和改进提供参考。另一方面强化实验动物质量管理与安全意... 详细信息

目的通过每年两次抽查检验北京市啮齿类实验动物的病理变化,一方面对北京市啮齿类实验动物质量总体水平做出科学评估,及时发现实验动物质量存在的问题,从而为实验动物的生产、管理和改进提供参考。另一方面强化实验动物质量管理与安全意识,保障和维护实验动物生产稳定。方法采集啮齿类实验动物的心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠经甲醛钙液固定,通过HE染色、油红O染色和PAS染色等方法对啮齿类实验动物的组织脏器进行病理评估。结果大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠有少数病例表现为肝细胞肿胀;小鼠、大鼠脾脏白髓减少,髓外造血增加;小鼠有极少数表现为心外膜炎、心外膜钙化、大肠寄生虫感染、小肠肠炎、肾脏肾炎;豚鼠表现为肺炎、肝导管上皮增生、小肠陈旧性出血。结论大多数送检的实验动物基本健康;SPF级小鼠和大鼠需要排查导致脾脏白髓减少的因素,以期完善进而确保动物质量。豚鼠的病理变化主要发生在普通级豚鼠的肺脏,推测普通级豚鼠的饲养环境有待改善。SPF级豚鼠中检出肺炎也需要排查病因。

关键词：北京市啮齿类实验动物病理检测总结和分析

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EdU标记多房棘球蚴成体干细胞方法的建立

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中国病原生物学杂志 2022年第9期17卷 1045-1047,1052页

作者：曹珊菱郭小腊郑亚东孙晓林甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室浙江农林大学动物科技学院动物医学院

目的建立EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine)标记多房棘球蚴体内成体干细胞(neoblasts)的方法,用于观察其细胞形态和分布特点。方法采用0.25%胰蛋白酶消化法从多房棘球蚴包囊中分离原代细胞,分别对原代细胞和多房棘球蚴进行EdU染色,利... 详细信息

目的建立EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine)标记多房棘球蚴体内成体干细胞(neoblasts)的方法,用于观察其细胞形态和分布特点。方法采用0.25%胰蛋白酶消化法从多房棘球蚴包囊中分离原代细胞,分别对原代细胞和多房棘球蚴进行EdU染色,利用激光共聚焦显微镜检测EdU阳性细胞。结果用建立的EdU标记方法检查多房棘球蚴体内成体干细胞,EdU阳性细胞体积较小,细胞核较大,呈球形或近球形。在成熟的原头节头节中,EdU阳性细胞主要分布在其中后端,呈分散分布,且原头节头节是否外翻在EdU阳性细胞数量上无明显不同。同时,大多数EdU阳性细胞也表达磷酸化组蛋白H3。结论建立的EdU标记多房棘球蚴成体干细胞的方法可靠,简单,易操作,为该细胞的功能研究提供了新的技术手段。

关键词：多房棘球蚴原头节原代细胞成体干细胞 EdU

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北京地区奶牛新孢子虫和梨形虫的调查与分析

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黑龙江畜牧兽医（下半月） 2014年第5期 57-58页

作者：蔡泽川于童关文怡侯引绪北京农业职业学院北京102442 中国农业大学动物医学院/国家动物原虫实验室北京100193

为了了解北京地区奶牛新孢子虫和梨形虫的感染情况,笔者采用姬姆萨染色法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法对2011年4月份至2012年3月份期间采自北京地区不同奶牛场的484份奶牛血液和血清样本进行了检测。结果 484份样本中共检测出梨形虫阳... 详细信息

为了了解北京地区奶牛新孢子虫和梨形虫的感染情况,笔者采用姬姆萨染色法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法对2011年4月份至2012年3月份期间采自北京地区不同奶牛场的484份奶牛血液和血清样本进行了检测。结果 484份样本中共检测出梨形虫阳性血液数59例,总阳性率为12.19%,新孢子虫病阳性血清46份,总阳性率为9.50%,说明这两种病在北京地区普遍存在,应引起重视。

关键词：奶牛新孢子虫梨形虫调查分析

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动物寄生线虫遗传多样性的研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2015年第5期33卷 387-392页

作者：殷方媛李法财赵俊龙胡敏华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物医学院武汉430070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

动物寄生线虫分子遗传标记的发展对兽医寄生虫学中的基础和应用研究领域有着重要意义。通过对线虫种群遗传多样性的研究,不仅能够为抗药性等位基因的扩散提供理论依据,而且对线虫病防治策略的制定具有指导作用。因此,本文就分子遗传标记... 详细信息

动物寄生线虫分子遗传标记的发展对兽医寄生虫学中的基础和应用研究领域有着重要意义。通过对线虫种群遗传多样性的研究,不仅能够为抗药性等位基因的扩散提供理论依据,而且对线虫病防治策略的制定具有指导作用。因此,本文就分子遗传标记(RFLP、RAPD、PCR-SSCP、AFLP、SSR和线粒体DNA)在寄生线虫遗传多样性研究中的应用进行综述。

关键词：动物寄生线虫遗传多样性分子遗传标记

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