检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2009年第5期36卷 194-198页

作者：王婷赵德明宋怀燕中国农业大学国家动物传染性海绵状脑病实验室北京100193 中国医学科学院实验动物研究所北京100021

考察大鼠灌胃给予珍田胶囊后组织器官病理学变化。珍田胶囊以1.315、2.635、.26 g(生药)/kg剂量(分别相当于人临床剂量的13、26.1、52.2倍),对照组给予相同体积的蒸馏水;连续给大鼠灌胃180 d,逐日观察动物行为、外观及大小便。停药后继... 详细信息

考察大鼠灌胃给予珍田胶囊后组织器官病理学变化。珍田胶囊以1.315、2.635、.26 g(生药)/kg剂量(分别相当于人临床剂量的13、26.1、52.2倍),对照组给予相同体积的蒸馏水;连续给大鼠灌胃180 d,逐日观察动物行为、外观及大小便。停药后继续观察4周,检测大鼠脏器系数,观察组织器官病理学变化。各给药组大鼠一般状况未见明显异常,内脏检查无病变。未观察到与受试药物相关的病理组织学改变。

关键词：珍田胶囊长期毒性大鼠病理学

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奶牛狂犬病的诊断

奶牛狂犬病的诊断

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：尹晓敏余琦张旭赵德明中国农业大学国家动物传染性海绵状脑病实验室

狂犬病(Rabies)是由弹状病毒科狂犬病毒属狂犬病毒引起的以急性、进行性、致死性脑脊髓炎为主要特征的人兽共患烈性传染病,病死率100%。狂犬病呈世界性分布,严重威胁着人畜健康,在发展中国家尤为严重。近几年我国狂犬病的发病数呈快速... 详细信息

狂犬病(Rabies)是由弹状病毒科狂犬病毒属狂犬病毒引起的以急性、进行性、致死性脑脊髓炎为主要特征的人兽共患烈性传染病,病死率100%。狂犬病呈世界性分布,严重威胁着人畜健康,在发展中国家尤为严重。近几年我国狂犬病的发病数呈快速上升趋势。因此,加强对狂犬病

关键词：狂犬病病毒特异性海马角

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多肽PrP106-126对巨噬细胞迁移效应的影响

多肽PrP106-126对巨噬细胞迁移效应的影响

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：周海云周向梅尹晓敏张仲秋赵德明中国农业大学国家动物传染性海绵状脑病实验室北京 100193 中国农业大学国家动物传染性海绵状脑病实验室北京 100193 中国动物疫病预防控制中心北京 100125

本文采用趋化试验的方法,将PrP106-126倍比稀释作用于巨噬细胞，计算趋化指数来研究PrP106-126对巨噬细胞的趋化活性，确定PrP106-126对巨噬细胞的最佳趋化浓度。结果发现PrP106-126对巨噬细胞有明显的趋化作用，趋化浓度在160ng/mL～64... 详细信息

本文采用趋化试验的方法,将PrP106-126倍比稀释作用于巨噬细胞，计算趋化指数来研究PrP106-126对巨噬细胞的趋化活性，确定PrP106-126对巨噬细胞的最佳趋化浓度。结果发现PrP106-126对巨噬细胞有明显的趋化作用，趋化浓度在160ng/mL～640ng/ml之间，最佳趋化浓度是640ng/mL。用不同的激酶抑制剂作用于细胞，同时与巨噬细胞趋化因子fMLP和P物质进行比较，结果表明PrP106-126作用于巨噬细胞引发多种信号转导途径，这些作用途径与P物质作用途径相似。这些研究结果揭示了异常朊蛋白在从外周向中枢传播的过程中，巨噬细胞在朊蛋白病的发病过程中具有一定作用，PrP106-126诱导巨噬细胞的信号转导路径可能与P物质相关。这为传染性海绵状脑病的发病机制研究提供了新的思路和研究数据。

关键词：巨噬细胞趋化作用激酶抑制剂 P物质信号转导发病机制

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奶牛狂犬病的诊断

奶牛狂犬病的诊断

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：尹晓敏余琦张旭赵德明中国农业大学国家动物传染性海绵状脑病实验室北京市海淀区 100193

狂犬病(Rabies)是由弹状病毒科狂犬病毒属狂犬病毒引起的以急性、进行性、致死性脑脊髓炎为主要特征的人兽共患烈性传染病，病死率100[％]。狂犬病呈世界性分布，严重威胁着人畜健康，在发展中国家尤为严重。近几年我国狂犬病的发病数... 详细信息

狂犬病(Rabies)是由弹状病毒科狂犬病毒属狂犬病毒引起的以急性、进行性、致死性脑脊髓炎为主要特征的人兽共患烈性传染病，病死率100[％]。狂犬病呈世界性分布，严重威胁着人畜健康，在发展中国家尤为严重。近几年我国狂犬病的发病数呈快速上升趋势。因此，加强对狂犬病的监测和确诊意义重大。本实验综合采用了快速反转录PCR技术，结合经典的病理组织学观察结果，对奶牛疑似狂犬病病例进行了确诊。

关键词：奶牛狂犬病烈性传染病病理组织学

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多肽PrP106-126对巨噬细胞迁移效应的影响

多肽PrP106-126对巨噬细胞迁移效应的影响

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：周海云周向梅尹晓敏张仲秋赵德明中国农业大学国家动物传染性海绵状脑病实验室中国动物疫病预防控制中心

本文采用趋化试验的方法,将PrP106-126倍比稀释作用于巨噬细胞,计算趋化指数来研究PrP106-126对巨噬细胞的趋化活性,确定PrP106-126对巨噬细胞的最佳趋化浓度.结果发现PrP106-126对巨噬细胞有明显的趋化作用,趋化浓度在160ng/mL～640ng... 详细信息

本文采用趋化试验的方法,将PrP106-126倍比稀释作用于巨噬细胞,计算趋化指数来研究PrP106-126对巨噬细胞的趋化活性,确定PrP106-126对巨噬细胞的最佳趋化浓度.结果发现PrP106-126对巨噬细胞有明显的趋化作用,趋化浓度在160ng/mL～640ng/mL之间,最佳趋化浓度是640ng/mL.用不同的激酶抑制剂作用于细胞,同时与巨噬细胞趋化因子fMLP和P物质进行比较,结果表明PrP106-126作用于巨噬细胞引发多种信号转导途径,这些作用途径与P物质作用途径相似.这些研究结果揭示了异常朊蛋白在从外周向中枢传播的过程中,巨噬细胞在朊蛋白病的发病过程中具有一定作用,PrP106-126诱导巨噬细胞的信号转导路径可能与P物质相关.这为传染性海绵状脑病的发病机制研究提供了新的思路和研究数据.

关键词： PrP106-126 巨噬细胞趋化作用激酶抑制剂 P物质信号转导

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长期服用珍田胶囊对大鼠血液生化及血细胞成分的影响

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实验动物科学 2009年第2期26卷 10-16页

作者：王婷宋怀燕赵德明中国医学科学院实验动物研究所北京100021 中国农业大学国家动物传染性海绵状脑病实验室北京100094

目的观察珍田胶囊长期服用对机体血细胞成分、肝肾功能的影响。方法珍田胶囊以1.315,2.63,5.26g(生药)/kg(分别相当于人临床剂量的13、26.1、52.2倍),对照组给予相同体积蒸馏水;连续给大鼠灌胃180d,逐日观察动物行为、外观及大小便。停... 详细信息

目的观察珍田胶囊长期服用对机体血细胞成分、肝肾功能的影响。方法珍田胶囊以1.315,2.63,5.26g(生药)/kg(分别相当于人临床剂量的13、26.1、52.2倍),对照组给予相同体积蒸馏水;连续给大鼠灌胃180d,逐日观察动物行为、外观及大小便。停药后继续观察4周,测量大鼠血常规和血生化指标。结果各给药组大鼠一般状况未见明显异常,各种血常规和血液生化指标均与对照组无显著差异。结论珍田胶囊长期服用对机体血液成分及肝肾功能无不良影响。

关键词：珍田胶囊长期毒性血液学指标血生化

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热力学因素对绵羊重组朊蛋白体外构象转化的作用

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中国农业大学学报 2009年第4期14卷 21-27页

作者：王伊琴秦贞奎包勇敢乔俊文赵德明中国农业大学动物医学院/国家动物传染性海绵状脑病实验室北京100193 内蒙古二连浩特出入境检验检疫局内蒙古二连浩特011100 中国检验检疫科学研究院北京100123

构建了绵羊朊蛋白的原核表达载体,获得了高纯度的融合表达蛋白。并在热力学因素的作用下,研究了重组绵羊朊蛋白的构象转化。以基因型为ARQ/ARQ蒙古绵羊的血液DNA为模板,利用DNA重组技术,将绵羊朊蛋白正常成熟蛋白基因OvPrP插入表达载体p... 详细信息

构建了绵羊朊蛋白的原核表达载体,获得了高纯度的融合表达蛋白。并在热力学因素的作用下,研究了重组绵羊朊蛋白的构象转化。以基因型为ARQ/ARQ蒙古绵羊的血液DNA为模板,利用DNA重组技术,将绵羊朊蛋白正常成熟蛋白基因OvPrP插入表达载体pET30a,在大肠杆菌BL2l(DE3)中高效表达,获得的表达产物以包涵体形式存在,并对其进行纯化和复性。超滤浓缩后浓度约为0.5 mg/mL的OvPrP97-234,进行热力学处理,利用远紫外线圆二色谱(CD)分析热力学处理前、后蛋白的二级结构的变化,同时,对热力学处理前、后的蛋白进行了蛋白酶K抗性的检测,并对其高级结构进行了预测。结果表明:获得的表达产物经SDS-PAGE分析可见分子量为16kD的蛋白条带,Western-blotting的鉴定证实了所获得的蛋白是特异性的朊蛋白。经Jascow32软件分析,测得天然构象的OvPrP97-234的二级结构含量为:α螺旋为28.8%、β折叠为0%、转角和无规卷曲为71.1%,无蛋白酶K的抗性。经过热力学处理之后,OvPrP97-234的二级结构含量为:α螺旋为19.3%,β折叠为36.9%,转角和无规卷曲为43.8%,有一定的蛋白酶K抗性。绵羊重组朊蛋白的体外构象转化的分析为朊蛋白的体外构象转化机制和致病机理的研究提供科学依据。

关键词：绵羊重组朊蛋白原核表达构象转化圆二色谱热力学因素

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RNAi抑制PrP表达载体的构建及其在PrP功能研究中的初步应用

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畜牧兽医学报 2008年第3期39卷 337-342页

作者：李玉荣周向梅尹晓敏杨建民乔俊文赵德明中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室

本文旨在构建有效抑制朊蛋白(Prion protein,PrP)表达的重组质粒,并以此为工具控制PrP表达,从而探讨PrP对细胞SOD活性的影响。设计并化学合成1对含有发夹结构的寡核苷酸片段(shPrP),退火后与表达载体pG-super(Hairpin siRNA expressing ... 详细信息

本文旨在构建有效抑制朊蛋白(Prion protein,PrP)表达的重组质粒,并以此为工具控制PrP表达,从而探讨PrP对细胞SOD活性的影响。设计并化学合成1对含有发夹结构的寡核苷酸片段(shPrP),退火后与表达载体pG-super(Hairpin siRNA expressing vector)定向连接,构建重组质粒pG-super-shPrP。对重组子进行PCR鉴定,测序正确后,脂质体法转染C6细胞,采用实时荧光定量RT-PCR检测PrP mRNA的表达水平,以验证pG-super-shPrP的抑制效率;结果表明:重组质粒pG-super-shPrP构建成功,且显著降低C6细胞PrP mRNA表达(P<0.05),抑制效率为34.2%。利用pG-super、pG-super-shPrP分别转染C6细胞,并检测细胞SOD总活性及SOD表达水平,探讨PrP对细胞SOD活性的影响及其作用机制,结果表明PrP促进细胞SOD的活性(P<0.01),但对细胞SOD的表达量无影响,即PrP对SOD活性的促进作用与SOD1的表达量无关。本研究在成功构建了PrP的RNA干扰表达质粒的基础上,利用此质粒,在细胞水平上揭示了PrP对细胞SOD活性的促进作用。

关键词： RNAi C6细胞朊蛋白表达超氧化物歧化酶

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PrP106-126对大脑皮质神经元和星形胶质细胞朊蛋白基因表达的影响

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中国兽医学报 2008年第1期28卷 58-62页

作者：宁章勇赵德明杨建民周向梅于博孔小明尹晓敏华南农业大学兽医学院广东广州510642 中国农业大学国家动物传染性海绵状脑病实验室北京100094

采用实时荧光定量RT-PCR的方法,对PrP106-126处理的大脑皮质神经元和星形胶质细胞模型进行了朊蛋白基因表达相对定量的研究。大脑皮质神经元经PrP106-126处理后,与SCR处理组和对照组相比,基因表达量明显下降。PrP106-126处理的星形胶质... 详细信息

采用实时荧光定量RT-PCR的方法,对PrP106-126处理的大脑皮质神经元和星形胶质细胞模型进行了朊蛋白基因表达相对定量的研究。大脑皮质神经元经PrP106-126处理后,与SCR处理组和对照组相比,基因表达量明显下降。PrP106-126处理的星形胶质细胞与对照组和SCR处理组相比,朊蛋白基因的表达量显著升高。该试验结果为深入了解TSEs的分子致病机制和正常朊蛋白的功能提供了基础数据。

关键词： PrP106-126 大脑皮质神经细胞星形胶质细胞基因表达传染性海绵状脑病

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金黄地鼠Dpl基因克隆及其组织特异性表达的研究

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中国兽医杂志 2008年第11期44卷 3-6页

作者：李玉荣周向梅尹晓敏杨建民赵德明中国农业大学动物医学院国家动物传染性海绵状脑病实验室北京海淀100193 河北农业大学动物科技学院河北保定071001

本文成功克隆了金黄地鼠Dpl(PrP-like protein doppel,Doppel)基因,并采用实时荧光定量PCR法对其组织特异性表达进行了研究。根据已发表家鼠Dpl基因序列设计引物,采用PCR直接扩增金黄地鼠(Hamster)的Dpl基因CDs区,序列测定和分析表明金... 详细信息

本文成功克隆了金黄地鼠Dpl(PrP-like protein doppel,Doppel)基因,并采用实时荧光定量PCR法对其组织特异性表达进行了研究。根据已发表家鼠Dpl基因序列设计引物,采用PCR直接扩增金黄地鼠(Hamster)的Dpl基因CDs区,序列测定和分析表明金黄地鼠的Dpl基因CDs区全长537 bp,编码178个氨基酸的前体蛋白,不存在基因多态性。经基因序列对比分析,金黄地鼠与其他10种属哺乳动物Dpl基因有较高同源性,均为70.8%以上,且与鼠科Dpl序列的同源性最高(86%)。实时定量PCR结果表明,在所检测组织中,Dpl mRNA在睾丸表达量最高,其次为脾脏、心脏、骨髓和脑,其在肝脏、肺脏、肾脏和肌肉中的表达低于检测水平;成年动物与未成年动物相比,在睾丸组织的表达量,成年鼠显著高于未成年鼠;在成年鼠脑组织检测不到Dpl mRNA的表达。本研究对金黄地鼠Dpl基因序列进行分析测定,并对其在不同组织的生理表达进行了定量,以期为其功能的进一步研究提供基础数据。

关键词：金黄地鼠 Dpl 克隆实时荧光定量PCR mRNA表达

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