检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2015年第6期31卷 620-628页

作者：梁超琼孟嫣罗来鑫刘鹏飞李健强中国农业大学植物病理学系种子病害检验与防控北京市重点实验室北京100193

本研究对江苏、浙江、湖南和北京等四个地区的葫芦、西瓜、黄瓜、西葫芦和甜瓜上的黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV）129kD和57kD蛋白复制酶基因分别进行扩增、测序和序列分析。结果显示,供试CGMMV分离物... 详细信息

本研究对江苏、浙江、湖南和北京等四个地区的葫芦、西瓜、黄瓜、西葫芦和甜瓜上的黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV）129kD和57kD蛋白复制酶基因分别进行扩增、测序和序列分析。结果显示,供试CGMMV分离物CGMMV-No.1、CGMMV-No.2、CGMMV-No.3、CGMMV-No.4和CGMMVNo.5的129kD和57kD蛋白复制酶基因序列相似性分别为99.64%和99.74%,其中CGMMV-No.1、CGMMVNo.3和CGMMV-No.4的相似性较高,三者的129kD和57kD蛋白复制酶基因序列相似性分别为99.95%和99.94%,而CGMMV-No.2的129kD和57kD蛋白复制酶基因序列与其余四个参比序列的相似性相对较低,分别为99.16%~99.27%和99.04%~99.18%;供试样品在基于129kD和57kD蛋白复制酶基因序列构建的NJ系统发育树中均被分为6个类群,CGMMV-No.1、CGMMV-No.3、CGMMV-No.4与GenBank上已报道的中国山东分离物（Accession ***754195）聚为一支,CGMMV-No.5与中国辽宁分离物（Accession ***611826）聚为一支,而浙江的CGMMV-No.2西瓜分离物在129kD蛋白复制酶基因系统发育树中与韩国西瓜分离物（Accession ***417242）聚为一支,其在57kD蛋白复制酶基因系统发育树中独立成群。本研究中供试CGMMV分离物的129kD和57kD蛋白均无显著疏水性,也无高度卷曲螺旋部位,ProtParam预测显示仅CGMMV-No.4的129kD蛋白为稳定蛋白,其余均为不稳定蛋白,CGMMV-No.1、CGMMV-No.2、CGMMV-No.3和CGMMV-No.5的129kD蛋白分别有6个、6个、2个和4个可能的跨膜结构区域,CGMMV-No.2、CGMMV-No.4和CGMMV-No.5的57kD蛋白分别有13个、13个和5个可能的跨膜结构域,供试样品129kD蛋白的糖基化位点分别有2个、4个、4个、4个和4个,57kD蛋白的糖基化位点分别有2个、5个、2个、5个和2个,其129kD和57kD蛋白的紊乱区、球蛋白区、磷酸化位点以及B细胞抗原表位位点均存在差异。综合分析认为,供试CGMMV分离物复制酶基因序列相似性较高,种内稳定且保守,种间差异明显;CGMMVNo.1、CGMMV-No.3、CGMMV-No.4和CGMMV-No.5与中国山东、辽宁分离物的亲缘关系较近,可能具有相同的侵染来源,而CGMMV-No.2与韩国分离物的亲缘关系较近,序列相似性高的供试样品在系统发育树中聚为一类;供试CGMMV分离物129kD和57kD蛋白生物信息学分析结果不具规律性。

关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒复制酶基因系统进化树生物信息学

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细菌有活力但不可培养状态及其机制研究进展

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微生物学通报 2020年第3期47卷 880-891页

作者：阚玉敏蒋娜白凯红李健强罗来鑫中国农业大学植物病理学系种子病害检验与防控北京市重点实验室北京100193

有活力但不可培养(viable but non-culturable,VBNC)状态是细菌遭遇逆境时进入的一种特殊状态,该状态下的菌体在条件适宜时可复苏并恢复其致病性,被认为是细菌躲避不良环境的一种生存策略。VBNC状态菌体对人类医学和工农业生产具有巨大... 详细信息

有活力但不可培养(viable but non-culturable,VBNC)状态是细菌遭遇逆境时进入的一种特殊状态,该状态下的菌体在条件适宜时可复苏并恢复其致病性,被认为是细菌躲避不良环境的一种生存策略。VBNC状态菌体对人类医学和工农业生产具有巨大的潜在威胁,开展关于VBNC状态的检测及诱导、复苏及其机制研究可为减少或避免该状态细菌的危害提供理论基础。本文简要综述了细菌VBNC状态在诱导、复苏及致病性等方面的研究进展,并结合本实验室及国内外相关团队近年来在植物病原细菌VBNC状态研究中的结果,详细总结了VBNC状态细菌的形成和复苏机制,对植物病原细菌在环境胁迫下的存活机制、病害田间初侵染来源分析及VBNC状态菌体在病害循环中的作用等相关研究具有重要参考意义。

关键词：有活力但不可培养严紧反应毒素-抗毒素系统蛋白酶调控因子复苏促进因子群体感应

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基于致病基因序列的LAMP方法检测番茄种子携带的溃疡病菌

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植物病理学报 2017年第5期47卷 630-639页

作者：吕青阳蒋娜韩思宁李健强罗来鑫中国农业大学植物病理学系种子病害检验与防控北京市重点实验室北京100193

本研究选取番茄溃疡病菌(Clavibacter michiganensis ***,Cmm)致病岛上的chpC基因的部分序列,作为环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)靶标片段进行LAMP引物设计。对反应体系优化后进行特异性测定,结果表明供... 详细信息

本研究选取番茄溃疡病菌(Clavibacter michiganensis ***,Cmm)致病岛上的chpC基因的部分序列,作为环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)靶标片段进行LAMP引物设计。对反应体系优化后进行特异性测定,结果表明供试的89株番茄溃疡病菌中86株检测结果为阳性,3株为阴性,供试的14株非番茄溃疡病菌(其他重要植物病原细菌)均为阴性。检测番茄溃疡病菌菌悬液样品的阈值为4.8×10~5 CFU·mL^(-1),对DNA样品的检测阈值为1.8×10^(-2) ng·μL^(-1),并据此建立了番茄溃疡病菌的LAMP检测方法。将该方法应用于番茄种子携带Cmm的检测,通过提取种子浸提液样品的总DNA,实现了对番茄种子携带Cmm的直接检测。与普通PCR相比,该方法更加快捷简便,不依赖PCR仪等昂贵的仪器设备,可以丰富现有的番茄溃疡病菌分子检测体系,为口岸等检疫部门提供简单易行的检测初筛手段。

关键词：番茄溃疡病菌环介导等温扩增种子提取液快速检测

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Bio-PCR方法检测葫芦科作物种子携带西瓜嗜酸菌的特异性引物筛选

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植物病理学报 2018年第2期48卷 263-270页

作者：阚玉敏云晓敏李玉文李健强罗来鑫中国农业大学植物病理学系/种子病害检验与防控北京市重点实验室北京100193 北京市种子管理站北京100088

由西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli)引起的细菌性果斑病是一种毁灭性的种传病害,可为害多种葫芦科作物并造成重大经济损失。该病原菌为检疫性有害生物,种子带菌是田间病害发生的最重要初侵染来源,因此,种子健康检测成为病害综合防控过... 详细信息

由西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli)引起的细菌性果斑病是一种毁灭性的种传病害,可为害多种葫芦科作物并造成重大经济损失。该病原菌为检疫性有害生物,种子带菌是田间病害发生的最重要初侵染来源,因此,种子健康检测成为病害综合防控过程中的重要环节。Bio-PCR是当前种子携带细菌检测的常用方法,而特异性引物的选择和使用是检测的关键。本研究使用已报道的7对引物对17株西瓜嗜酸菌、10株嗜酸菌属其它种的菌株和6株其它属的植物病原细菌进行了BioPCR检测,筛选出对西瓜嗜酸菌特异性最好的引物为SEQID4m/SEQID5。研究表明:使用该引物对西瓜嗜酸菌M H21纯菌菌悬液的检测限度为10~2CFU·m L^(-1);在人工添加菌悬液的模拟带菌西瓜种子中,使用ASCM和EBBA两种半选择性培养基结合引物SEQID4~m/SEQID5进行Bio-PCR检测,ASCM对种子中带菌量的检测限度可达到0.01 CFU·g^(-1),EBBA对种子中带菌量的检测限度为0.1 CFU·g^(-1)。

关键词：西瓜嗜酸菌 Bio-PCR 引物特异性灵敏度

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植物病原细菌的VBNC状态研究进展

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植物病理学报 2013年第3期43卷 249-257,252-257页

作者：蒋娜李健强罗来鑫中国农业大学植物病理学系种苗健康北京市工程研究中心种子病害检验与防控北京市重点实验室北京100193

有活力但不可培养状态(Viable But Non-Culturable,VBNC)被认为是细菌对不良环境条件的一种抗逆反应,包括5种植物病原细菌在内的数十种细菌已报道具有VBNC状态。这种特定的生理状态已经导致细菌学研究中一些方法的探索和改进,对基于分... 详细信息

有活力但不可培养状态(Viable But Non-Culturable,VBNC)被认为是细菌对不良环境条件的一种抗逆反应,包括5种植物病原细菌在内的数十种细菌已报道具有VBNC状态。这种特定的生理状态已经导致细菌学研究中一些方法的探索和改进,对基于分离培养的植物病原细菌学研究产生了重大影响。本文对已经报道VBNC状态的植物病原细菌进行了综述,介绍了VBNC状态细菌的诱导因素、恢复条件、致病性、检测方法等方面的研究进展,对未来植物病原细菌的VBNC研究提出了展望。

关键词： VBNC 植物病原细菌诱导检测恢复致病性

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四川凉山苦荞种子携带细菌多样性

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植物保护 2022年第5期48卷 190-196,238页

作者：白凯红阿别小兵陈星蒋娜李健强罗来鑫中国农业大学植物病理学系农业农村部有害生物监测与绿色管理重点实验室种子病害检验与防控北京市重点实验室北京100193

苦荞Fagopyrum tataricum是四川省凉山彝族自治州主要的粮食作物之一,作为近年来新兴的保健食品,其种子携带的细菌种群鲜有报道。本研究从凉山州7个县的苦荞主产区共采集了46份苦荞种子样品,通过分离培养法及基于16S rRNA基因的扩增子... 详细信息

苦荞Fagopyrum tataricum是四川省凉山彝族自治州主要的粮食作物之一,作为近年来新兴的保健食品,其种子携带的细菌种群鲜有报道。本研究从凉山州7个县的苦荞主产区共采集了46份苦荞种子样品,通过分离培养法及基于16S rRNA基因的扩增子测序法,对苦荞种子携带的主要细菌类群进行了研究。结果显示:分离培养法从46份样品中共获得618株细菌分离物,隶属于10个属,其中泛菌属Pantoea和短小杆菌属Curtobacterium分离频率最高,分别为52.5%和20.7%,是种子携带的优势菌群。扩增子测序法从13份样品中共获得279个属的细菌,其中泛菌属为优势菌群。通过样本层级聚类分析,发现来自冕宁县的苦荞种子样品MNCQ-4携带的细菌丰富度与多样性最大,而来自昭觉县的样品ZJ-5最小。研究结果表明,同一个地区的不同样品,菌群多样性也存在差异。本研究丰富了荞麦种带细菌的研究,为种子处理、病害防治提供了依据。

关键词：苦荞种子细菌分离鉴定扩增子测序

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黄瓜中与黄瓜绿斑驳花叶病毒侵染相关的miRNA表达特征分析

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植物病理学报 2016年第1期46卷 56-62页

作者：梁超琼刘华威罗来鑫李健强中国农业大学植物病理学系、种子病害检验与防控北京市重点实验室北京100193 分子植物病理实验室、美国农业部农业研究中心贝茨维尔20705

MicroRNA作为一种内源小分子非编码RNA,在植物生长发育、信号转导、转录调控、新陈代谢及各种胁迫条件下发挥重要作用。本研究通过生物信息学技术对黄瓜miR159和miR858的靶基因进行预测和功能分析,结果显示miR159和miR858的靶基因主要为... 详细信息

MicroRNA作为一种内源小分子非编码RNA,在植物生长发育、信号转导、转录调控、新陈代谢及各种胁迫条件下发挥重要作用。本研究通过生物信息学技术对黄瓜miR159和miR858的靶基因进行预测和功能分析,结果显示miR159和miR858的靶基因主要为MYB类转录因子家族成员,参与植物生长发育和抗病过程。实时荧光定量PCR分析黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)不同侵染时期在黄瓜不同组织中目的miRNA的表达特征,结果表明黄瓜miR159和miR858的表达具有时空特异性和组织特异性,二者均可对CGMMV侵染做出响应并存在显著差异表达。

关键词：黄瓜黄瓜绿斑驳花叶病毒侵染 microRNA 靶基因表达特征

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不适温度条件诱导西瓜嗜酸菌进入VBNC状态的研究

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植物病理学报 2021年第1期51卷 104-114页

作者：王梦雨蒋娜阚玉敏李健强罗来鑫中国农业大学植物保护学院植物病理学系种子病害检验与防控北京市重点实验室农业农村部作物有害生物监测与绿色防控重点实验室北京100193

由西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli)引起的瓜类果斑病,是危害西瓜和甜瓜等葫芦科作物的一种典型的种传细菌性病害。已有文章报道西瓜嗜酸菌在铜离子诱导下可进入"有活力但不可培养"(viable but non-culturable,VBNC)状态,并... 详细信息

由西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli)引起的瓜类果斑病,是危害西瓜和甜瓜等葫芦科作物的一种典型的种传细菌性病害。已有文章报道西瓜嗜酸菌在铜离子诱导下可进入"有活力但不可培养"(viable but non-culturable,VBNC)状态,并在适当条件下复苏,成为生产中潜在的病害初侵染来源。本文结合实际生产中的种子温汤浸种和低温储藏等条件,分别设定了50℃、55℃高温和4℃低温对西瓜嗜酸菌AAC00-1进行处理,通过流式细胞术(flow cytometry,FCM)和平板培养法分别检测菌体活性和可培养性。结果显示,不适宜的温度条件能够诱导西瓜嗜酸菌AAC00-1进入VBNC状态,其中55℃高温20和30 min的两个处理,所有活菌均进入VBNC状态。将处理后的AAC00-1接种西瓜子叶,接种植株未表现出果斑病症状,且不能从接种部位分离得到可培养菌体。表明本诱导条件下的VBNC状态***菌体不能通过短时间活体接种复苏。本研究分析了西瓜嗜酸菌在不适宜温度条件下进入VBNC状态的能力,为解析病害可能的初侵染来源提供了理论依据,对葫芦科作物果斑病防控具有重要的生产实践意义。

关键词：西瓜嗜酸菌温度处理流式细胞术 VBNC

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四川凉山苦荞种子携带真菌多样性分析

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作物杂志 2023年第3期 260-266页

作者：白凯红阿别小兵许晓丽蒋娜李健强罗来鑫中国农业大学植物病理学系/农业农村部有害生物监测与绿色管理重点实验室/种子病害检验与防控北京市重点实验室北京100193

苦荞是四川省凉山彝族自治州主要的粮食作物之一,病原真菌引起的叶部和根部病害严重影响了苦荞的产量与品质,种子带菌是引起病害发生的重要初侵染来源。对来自凉山州7个县的46份苦荞种子的内、外部携带真菌类群进行了分离培养,及基于18S... 详细信息

苦荞是四川省凉山彝族自治州主要的粮食作物之一,病原真菌引起的叶部和根部病害严重影响了苦荞的产量与品质,种子带菌是引起病害发生的重要初侵染来源。对来自凉山州7个县的46份苦荞种子的内、外部携带真菌类群进行了分离培养,及基于18S r RNA基因扩增子测序的检测。结果表明,分离培养法从种子内部和外部分别获得786和594株真菌分离物,共17个属,其中镰刀菌属(Fusarium)和链格孢属(Alternaria)分别是种子内部寄藏和外部携带的优势菌群。18S rRNA基因扩增子测序法分别从种子内部和外部获得39个和41个属的真菌,核盘菌属(Sclerotinia)同时为苦荞种子内部寄藏与外部携带的优势菌群。同一地区不同样品的菌群多样性存在差异。

关键词：苦荞真菌分离鉴定扩增子测序

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黄瓜绿斑驳花叶病毒病防治研究进展

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植物保护 2016年第6期42卷 29-37,57页

作者：刘华威罗来鑫朱春雨梁超琼刘鹏飞李健强中国农业大学植物病理学系种子病害检验与防控北京市重点实验室北京100193 种苗健康北京市工程研究中心农业部植物病理学重点实验室北京100193 农业部农药检定所北京100026

黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)主要危害葫芦科作物,已被世界上许多国家和地区列为检疫性有害生物。CGMMV目前在我国23个省、市、区已有报道发生和危害,严重影响葫芦科作物的生产;近年来该病害在国内外... 详细信息

黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)主要危害葫芦科作物,已被世界上许多国家和地区列为检疫性有害生物。CGMMV目前在我国23个省、市、区已有报道发生和危害,严重影响葫芦科作物的生产;近年来该病害在国内外呈现迅猛扩展的趋势并对生产造成危害。本文综述了防治该病害的种子处理、化学及生物防治、嫁接以及转基因等分子生物学方法;分析了CGMMV与寄主黄瓜互作研究的最新进展,对小分子RNA参与调控寄主对CGMMV病毒的防控策略提出了展望,并概述了下一代测序技术、基因编辑技术在植物新病毒的检测、鉴定以及培育抗病新品种等方面的应用。

关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒防治方法研究进展

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