检索结果-内蒙古大学图书馆

豆状囊尾蚴丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)的多抗制备、组织分布及活性研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2020年第5期38卷 595-601页

作者：王莉杰王立群刘婷丽张少华刘光学李艳萍梁盼红骆学农中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

目的研究豆状囊尾蚴丝氨酸蛋白酶抑制剂(Cpserpin)的组织分布及其对丝氨酸蛋白酶的抑制效果。方法利用原核表达的重组Cpserpin (rCpserpin)免疫家兔,采用间接ELISA检测免疫后血清的效价,取免疫兔血清,制备抗体并纯化后,采用Western blot... 详细信息

目的研究豆状囊尾蚴丝氨酸蛋白酶抑制剂(Cpserpin)的组织分布及其对丝氨酸蛋白酶的抑制效果。方法利用原核表达的重组Cpserpin (rCpserpin)免疫家兔,采用间接ELISA检测免疫后血清的效价,取免疫兔血清,制备抗体并纯化后,采用Western blotting对多克隆抗体进行特异性分析,通过免疫组化试验分别观察rCpserpin在豆状带绦虫成虫和幼虫中的组织分布。构建重组质粒pPIC9K-Cpserpin,线性化后转化至毕赤酵母KM71感受态细胞,用G418筛选的高拷贝菌株进行诱导表达并纯化rCpserpin,采用发色底物法检测不同浓度(6、9、 18、 21μg/ml) rCpserpin对0.5μg/mlα-糜蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶等3种丝氨酸蛋白酶活性的抑制效果。结果间接ELISA检测结果显示,免疫血清多抗IgG抗体的效价达1∶51 200。Western blotting分析结果显示,纯化后的多克隆抗体可与rCpserpin和兔豆状囊尾蚴虫体可溶性抗原产生特异性反应。免疫组化试验结果显示,Cpserpin在囊尾蚴阶段表达量很低,但在成节和孕节中高度表达,广泛分布于虫体体壁和虫卵中。酵母表达的rCpserpin随浓度增加对α-糜蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶的抑制效果分别增强,在21μg/ml浓度时,对3种丝氨酸蛋白酶的抑制率最高,分别为(50.5±2.5)%、(71.5±1.5)%和(77.4±1.5)%(均P <0.05)。结论 rCpserpin多克隆抗体具有特异性,在豆状囊尾蚴成节和孕节中高表达,且其对α-糜蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶有较强的抑制作用。

关键词：豆状囊尾蚴丝氨酸蛋白酶抑制剂组织分布酶活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新疆边境地区蜱携带梨形虫种类的分子鉴定

引用

动物医学进展 2022年第1期43卷 31-37页

作者：仇晓飞林汉亮罗金马力克·艾则孜康逢义倪军罗毅刘文阁马站任巧云曹润来谭阳春张高峰刁沛文王奇林刘佩雯关贵全罗建勋殷宏徐庚全刘光远甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 新疆维吾尔自治区动物卫生监督所新疆乌鲁木齐830011 兰州市经济作物试验推广站甘肃兰州730083 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了调查新疆边境地区梨形虫在当地蜱中的携带情况,对采集于2019年4月份和5月份的新疆边境地区共25个县(市)的蜱进行形态学鉴定,提取DNA,利用梨形虫套式引物进行扩增并测序,并采用IQ-Tree软件的ML法构建不同地理株的进化关系。结果显示... 详细信息

为了调查新疆边境地区梨形虫在当地蜱中的携带情况,对采集于2019年4月份和5月份的新疆边境地区共25个县(市)的蜱进行形态学鉴定,提取DNA,利用梨形虫套式引物进行扩增并测序,并采用IQ-Tree软件的ML法构建不同地理株的进化关系。结果显示,采集到的1516只蜱包括4个属9个种,分别为森林革蜱(Dermacentor silvarum)、草原革蜱(***)、胫距革蜱(***)、边缘革蜱(***)、亚洲璃眼蜱(Hyalomma asiaticum)、麻点璃眼蜱(***)、小亚璃眼蜱(***)、血红扇头蜱(Rhipicephalus sanguineus)和刻点血蜱(Haemaphysalis punctate);对上述蜱种携带梨形虫种类的分子检测结果显示,共检出3种泰勒虫和6种巴贝斯虫,分别为绵羊泰勒虫(Theileria ovis)、马泰勒虫(***)、泰勒虫未定种(Theileria sp.)、驽巴贝斯虫(Babesia caballi)、粗糙巴贝斯虫(***)、隐藏巴贝斯虫(***)、犬巴贝斯虫(*** canis)、莫氏巴贝斯虫(***)及巴贝斯虫未定种(Babesia sp.)。结果表明,蜱中梨形虫的平均携带率为27.77%,且新疆边境不同地区的蜱梨形虫的携带率不同。研究结果为梨形虫病的进一步防控以及相关措施的制定提供了依据。

关键词：蜱梨形虫分子鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

芽胞杆菌的分离鉴定

引用

中国兽医科学 2021年第1期51卷 74-80页

作者：李贺海王佳慧李迎迎邱云飞刘军龙刘爱红王锦明关贵全罗建勋殷宏李有全中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了确定实验室筛选的6株芽胞杆菌(Bacillus spp.)的种名,利用形态学、DNA促旋酶A亚单位基因(DNA Gyrase Subunit A,gyr A)和DNA促旋酶B亚单位基因(DNA Gyrase Subunit B,gyr B)序列的单基因系统发育分析和PCR相结合的方法进行鉴定。结... 详细信息

为了确定实验室筛选的6株芽胞杆菌(Bacillus spp.)的种名,利用形态学、DNA促旋酶A亚单位基因(DNA Gyrase Subunit A,gyr A)和DNA促旋酶B亚单位基因(DNA Gyrase Subunit B,gyr B)序列的单基因系统发育分析和PCR相结合的方法进行鉴定。结果表明,6株芽胞杆菌的单菌落生长特征相似,革兰染色呈阳性,具有芽胞;以gyr A和gyr B基因构建的单基因系统发育树显示6株菌均与贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis)归于同一分支,自展值(Bootstrap)较高;特异性PCR结果也证实它们均为贝莱斯芽胞杆菌阳性。结论,实验室分离的6株芽胞杆菌均属于贝莱斯芽胞杆菌,这为它们的深入研究奠定了基础。

关键词：贝莱斯芽胞杆菌 PCR 系统发育分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

多房棘球绦虫主要卵抗原重组蛋白的制备及其在免疫诊断中的初步应用

引用

中国兽医科学 2021年第5期51卷 588-593页

作者：张军梅李瑞陈晓倩何学东王正荣郑亚东胡俊杰郭小腊甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室新疆石河子832000

通过对多房棘球绦虫(Echinococcus multiloculais)主要卵抗原(Em MEA)基因的表达、抗体制备及血清ELISA检测,初步评价其作为诊断抗原的价值。根据WormBase数据库Em MEA基因序列设计引物,利用RT-PCR扩增Em MEA基因并构建重组表达质粒,诱... 详细信息

通过对多房棘球绦虫(Echinococcus multiloculais)主要卵抗原(Em MEA)基因的表达、抗体制备及血清ELISA检测,初步评价其作为诊断抗原的价值。根据WormBase数据库Em MEA基因序列设计引物,利用RT-PCR扩增Em MEA基因并构建重组表达质粒,诱导表达、纯化重组蛋白Em MEA;制备Em MEA多克隆抗体并进行免疫组织定位;ELISA方法检测Em MEA重组抗原的敏感性和特异性。结果表明,Em MEA基因长度为957 bp,编码319个氨基酸,与其它绦虫中同源蛋白的氨基酸相似性为90.85%~96.93%。Em MEA重组蛋白约为40 ku,制备的多克隆抗体可识别虫体天然Em MEA蛋白,抗体效价达1∶25 600;Em MEA蛋白仅分布于原头蚴体壁。ELISA检测表明,Em MEA重组抗原和虫体天然抗原的特异性均为100%,Em MEA重组抗原的敏感性(100%)优于虫体天然抗原的敏感性(95.83%)。结合以上研究结果,Em MEA抗原具有作为多房棘球蚴病诊断抗原的潜能。

关键词：多房棘球绦虫主要卵抗原免疫组织定位免疫诊断

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

刚地弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv的免疫保护作用

引用

中国兽医科学 2021年第3期51卷 296-304页

作者：周天缘于正青李纯静王茗悦刘军龙罗建勋徐立新宋小凯严若峰李祥瑞南京农业大学动物医学院教育部动物卫生与食品安全国际联合研究实验室江苏南京210095 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

为了探究刚地弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv的体外表达及其对小鼠的免疫保护作用,以刚地弓形虫RH株的cDNA作为模板,利用原核表达技术表达弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv。表达后的上述重组蛋白纯化后免疫小鼠,采集免疫后小鼠的血清,测定血清中的总一... 详细信息

为了探究刚地弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv的体外表达及其对小鼠的免疫保护作用,以刚地弓形虫RH株的cDNA作为模板,利用原核表达技术表达弓形虫组蛋白H2Bb及H2Bv。表达后的上述重组蛋白纯化后免疫小鼠,采集免疫后小鼠的血清,测定血清中的总一氧化氮(NO)、抗体及免疫相关细胞因子,分离小鼠脾,测定小鼠脾淋巴细胞的吞噬功能,最后小鼠腹腔接种弓形虫并绘制小鼠的生存曲线。结果显示,成功表达了弓形虫重组蛋白H2Bb(rTgH2Bb)及重组蛋白H2Bv(rTgH2Bv)。Western-blot结果表明重组蛋白具有良好的免疫原性。重组蛋白rTgH2Bb及rTgH2Bv免疫组小鼠血清中Ig G1的水平在一免和二免后均与对照组差异显著(P<0.05),rTgH2Bb及rTgH2Bv免疫组小鼠血清细胞因子γ干扰素的水平在一免及二免后均有显著提高(P<0.05)。rTgH2Bb和rTgH2Bv免疫组小鼠血清中NO含量在2次免疫后均显著高于对照组(P<0.05)。二免后重组蛋白rTgH2Bb免疫组和rTgH2Bv免疫组小鼠脾淋巴细胞的吞噬能力均显著高于对照组(P<0.05)。攻虫感染后,rTgH2Bb和rTgH2Bv免疫组小鼠的生存时间较对照组相比有所延长。结论:重组蛋白rTgH2Bb和rTgH2Bv有一定的抗弓形虫急性感染的作用,具有作为弓形虫疫苗候选抗原的潜在价值。

关键词：刚地弓形虫组蛋白原核表达免疫保护疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

细粒棘球绦虫miR-71对绵羊外周血单核细胞的免疫调节作用

引用

中国兽医科学 2021年第3期51卷 289-295页

作者：张永娥李雅婷颜鲁军杨静丁军涛郑亚东中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 新疆大学生命科学与技术学院新疆干旱区生物资源保护与利用实验室新疆乌鲁木齐830046

为了探究细粒棘球绦虫来源的miR-71(egr-mi R-71)对绵羊外周血单核细胞(PBMCs)的免疫调节作用,利用egr-mi R-71模拟物和阴性对照分别转染绵羊PBMCs,通过qPCR分析了对绵羊PBMCs中细胞因子和LPS/TLR4信号通路中关键基因表达的影响,并且还... 详细信息

为了探究细粒棘球绦虫来源的miR-71(egr-mi R-71)对绵羊外周血单核细胞(PBMCs)的免疫调节作用,利用egr-mi R-71模拟物和阴性对照分别转染绵羊PBMCs,通过qPCR分析了对绵羊PBMCs中细胞因子和LPS/TLR4信号通路中关键基因表达的影响,并且还利用Griess试剂测定了NO的分泌水平。结果显示,egr-mi R-71的过表达会显著上调CD14,为阴性对照组的2.21倍(P<0.01),但IL-1α、IL-1β、TNF-α的表达则显著下调,分别是阴性对照组的74%、59%和76%(P<0.05)。NO的测定结果还显示,egr-mi R-71能明显促进NO的生成(P<0.05)。以上结果提示,egr-mi R-71对绵羊PBMCs具有免疫调节作用。

关键词：细粒棘球绦虫 miR-71 免疫调节作用外周血单核细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

环形泰勒虫转运蛋白实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

引用

中国兽医科学 2021年第9期51卷 1113-1120页

作者：史康妍李志曹天行李霞关贵全殷宏罗建勋刘军龙赵洪喜宁夏大学农学院宁夏银川750021 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

根据GenBank中公布的环形泰勒虫转运蛋白(Theileria annulata cargo protein)基因序列,设计1对特异性引物,用于建立环形泰勒虫转运蛋白TB Green实时荧光定量PCR检测方法。结果显示:本方法对环形泰勒虫具有特异性,与中华泰勒虫、东方泰... 详细信息

根据GenBank中公布的环形泰勒虫转运蛋白(Theileria annulata cargo protein)基因序列,设计1对特异性引物,用于建立环形泰勒虫转运蛋白TB Green实时荧光定量PCR检测方法。结果显示:本方法对环形泰勒虫具有特异性,与中华泰勒虫、东方泰勒虫、牛巴贝斯虫和双芽巴贝斯虫无交叉反应;本方法的最低检测限为10.4 copies;组内和组间的变异系数均小于5%,具有较好的稳定性。对来自10个省(自治区)的766份样品进行检测,发现该环形泰勒虫实时荧光定量PCR方法的检测敏感性高于普通PCR的。本研究中建立的环形泰勒虫转运蛋白实时荧光定量PCR方法具有特异性强、敏感性高、稳定性好的特点,为检测环形泰勒虫病提供了一种快速、有效的诊断方法。

关键词：环形泰勒虫环形泰勒虫转运蛋白实时荧光定量PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

粪肠球菌BN6株的体外益生特性评价

引用

中国兽医科学 2021年第3期51卷 337-342页

作者：王佳慧姜仲文满永恒李贺海孙世雄殷宏蒋雨红席鸽王雅李有全兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 中农威特生物科技股份有限公司甘肃兰州730046

为了评价粪肠球菌BN6株的益生潜能,本试验测定了BN6株在低pH值和高胆盐环境的耐受性,对抗生素敏感性以及抑菌、细菌的疏水率、自凝集率和抗氧化性能等特性。结果表明,BN6株在pH=2.5的PBS中耐受3 h的存活率达到97.45%,并且能够耐受0.3%... 详细信息

为了评价粪肠球菌BN6株的益生潜能,本试验测定了BN6株在低pH值和高胆盐环境的耐受性,对抗生素敏感性以及抑菌、细菌的疏水率、自凝集率和抗氧化性能等特性。结果表明,BN6株在pH=2.5的PBS中耐受3 h的存活率达到97.45%,并且能够耐受0.3%的胆盐环境;BN6株对氨苄西林、万古霉素、红霉素、阿莫西林和氯霉素敏感;BN6株培养上清对大肠埃希氏杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌和普通变形杆菌等肠道致病菌具有良好的抑菌作用;以二甲苯和三氯甲烷为有机相,疏水率分别为47.8%和55.19%,自凝集率为21.57%;BN6株无细胞提取物和菌体DPPH清除率分别为26.83%±4.93%和22.13%±9.43%,无细胞提取物抗脂质过氧化率35.55%±3.28%。结论,粪肠球菌BN6株具有良好的益生特性,可作为候选益生菌进行深入研究。

关键词：粪肠球菌抑菌试验抗氧化性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

屎肠球菌携带毒力基因及其耐药性检测

引用

中国兽医科学 2020年第11期50卷 1428-1432页

作者：王佳慧贾丹李贺海刘爱红王锦明刘军龙关贵全罗建勋殷宏李有全中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

为探究屎肠球菌携带毒力基因及耐药性相关基因,本研究采用PCR方法对不同来源的41株屎肠球菌中携带10种毒力基因、万古霉素耐药基因和四环素耐药基因进行检测,并应用K-B纸片法分析屎肠球菌对9种抗生素的敏感性。结果表明,在41株屎肠球菌... 详细信息

为探究屎肠球菌携带毒力基因及耐药性相关基因,本研究采用PCR方法对不同来源的41株屎肠球菌中携带10种毒力基因、万古霉素耐药基因和四环素耐药基因进行检测,并应用K-B纸片法分析屎肠球菌对9种抗生素的敏感性。结果表明,在41株屎肠球菌中检测3种毒力基因gel E、efaAfs和ccf的阳性率均为100%,其他毒力基因的阳性率依次为cpd(80.49%)、agg(39.02%)、cylM(4.88%)、cylB(9.76%)、cylA(9.76%)、cob(4.88%)及esp(0);在41株屎肠球菌中,能检测出4种毒力基因的菌株数占46.34%,能检测到5种毒力基因的菌株数占29.27%;41株屎肠球菌对庆大霉素、萘啶酸和卡那霉素的耐药率均为100%,对其他抗生素的耐药率分别为诺氟沙星(31.7%)、四环素(26.83%)、氯霉素(7.31%)、万古霉素和阿莫西林(4.88%)、氨苄西林(0)。通过对不同基质屎肠球菌携带毒力基因和耐药性的检测分析,为今后屎肠球菌毒力基因和耐药性的分子机制研究奠定基础。

关键词：屎肠球菌毒力基因耐药基因耐药性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基因Ⅰ型乙型脑炎病毒病毒样颗粒的制备及其对小鼠的免疫原性分析

引用

畜牧兽医学报 2020年第6期51卷 1391-1398页

作者：施磊周亚红田占成高闪电独军政关贵全刘光远罗建勋殷宏中国农业科学院、兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室、甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

降低猪场的流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)感染率对于阻断人的JE暴发至关重要,鉴于我国JE防控形势的紧迫性和现有基因Ⅲ型商品化乙型脑炎病毒疫苗对部分基因Ⅰ型乙型脑炎病毒(genotypeⅠJapanese encephalitis virus,GⅠJEV... 详细信息

降低猪场的流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)感染率对于阻断人的JE暴发至关重要,鉴于我国JE防控形势的紧迫性和现有基因Ⅲ型商品化乙型脑炎病毒疫苗对部分基因Ⅰ型乙型脑炎病毒(genotypeⅠJapanese encephalitis virus,GⅠJEV)流行毒株免疫保护的不确定性,急需研制安全高效、成本低廉的新型猪用GI JEV疫苗。本研究在杆状病毒载体pFastBacTM多克隆酶切位点插入GⅠJEV的prME基因表达盒,测序验证后的阳性重组质粒转染DH10BacTM感受态细胞后获得Bacmid-prME重组杆粒,进一步将其转染至Sf9昆虫细胞后,获得Bac-prME重组杆状病毒。Western blot、间接免疫荧光及电镜观察GⅠJEV病毒样颗粒组成蛋白表达及病毒样颗粒形成情况,通过小鼠免疫试验初步评价GⅠJEV病毒样颗粒的免疫原性。Sf9昆虫细胞中prME基因表达盒编码的蛋白得到高效表达,且组装形成病毒样颗粒。病毒样颗粒免疫原性评估结果表明:GⅠJEV病毒样颗粒可诱导免疫小鼠产生高滴度的乙型脑炎病毒中和抗体。本研究利用杆状病毒昆虫细胞表达系统获得了GⅠJEV病毒样颗粒,为研制安全高效的乙型脑炎病毒病毒样颗粒亚单位疫苗提供物质基础。

关键词：乙型脑炎病毒杆状病毒病毒样颗粒免疫原性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：