检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通讯 2008年第3期19卷 448-451页

作者：毕研丽沈小燕才学鹏从国正常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄类动物烈性传染病,疫苗接种是防治口蹄疫暴发的主要措施之一,而要控制口蹄疫流行,首先要将病毒感染动物从疫苗接种群体中区分开来。以口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)为抗原,检测动物体内的NSP抗体是一种很好... 详细信息

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄类动物烈性传染病,疫苗接种是防治口蹄疫暴发的主要措施之一,而要控制口蹄疫流行,首先要将病毒感染动物从疫苗接种群体中区分开来。以口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)为抗原,检测动物体内的NSP抗体是一种很好的区分感染动物和疫苗免疫动物的诊断方法,许多实验室开展了相关研究,并取得了一定的成绩。

关键词：口蹄疫病毒非结构蛋白鉴别诊断

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胶体金免疫层析试纸条在病原体检测及医学诊断中的应用

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实用诊断与治疗杂志 2008年第1期22卷 39-40页

作者：邵军军常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州市730046

胶体金标记免疫层析技术作为一种新型的免疫学快速诊断和检测技术,不仅具有敏感、特异、便捷、快速等特点,而且适合基层和现场使用。使其成为当今快速检测微生物病原体以及临床快速诊断疾病的主要技术手段,在生物医学研究方面发挥着越... 详细信息

胶体金标记免疫层析技术作为一种新型的免疫学快速诊断和检测技术,不仅具有敏感、特异、便捷、快速等特点,而且适合基层和现场使用。使其成为当今快速检测微生物病原体以及临床快速诊断疾病的主要技术手段,在生物医学研究方面发挥着越来越重要的作用,具有广阔的应用前景。

关键词：免疫学诊断胶体金标记免疫层析技术生物医学医学检测

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细胞凋亡的研究进展

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生物技术通讯 2008年第2期19卷 274-276页

作者：周建华丛国正高闪电常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

细胞凋亡是存在于所有哺乳动物细胞中的保守途径,它在胚胎发育阶段的组织形成和维持细胞动态平衡中有十分重要的作用。细胞凋亡的途径主要为两种,即死亡受体信号途径和线粒体途径,它们的激活会产生不同的上游事件,但下游事件是一致的。... 详细信息

细胞凋亡是存在于所有哺乳动物细胞中的保守途径,它在胚胎发育阶段的组织形成和维持细胞动态平衡中有十分重要的作用。细胞凋亡的途径主要为两种,即死亡受体信号途径和线粒体途径,它们的激活会产生不同的上游事件,但下游事件是一致的。细胞凋亡是受多基因严格控制的过程。随着分子生物学技术的发展,对多种细胞凋亡的过程有了相当的认识,但凋亡过程的确切机制尚不完全清楚。简要阐述了与细胞凋亡相关的信号转导途径,以及参与其中的多种调节因子的作用机理。

关键词：细胞凋亡信号转导途径调节因子

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猪圆环病毒2型河北株的全基因组克隆与系统进化分析

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动物医学进展 2008年第10期29卷 1-4页

作者：王光祥郑海学刘湘涛尚佑军常艳燕靳野中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

应用PCR方法从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的死亡仔猪组织病料中扩增出PCV-2全基因组(1767bp),将此基因片段克隆入pMD20-T载体,筛选获得重组质粒pMD-PCV2并对其进行序列测定,然后对全基因组进行同源性和遗传进化分析。结果表明,... 详细信息

应用PCR方法从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的死亡仔猪组织病料中扩增出PCV-2全基因组(1767bp),将此基因片段克隆入pMD20-T载体,筛选获得重组质粒pMD-PCV2并对其进行序列测定,然后对全基因组进行同源性和遗传进化分析。结果表明,PCV-2分离毒株与参考株的全基因组同源性介于94%～98.4%之间,ORF1的同源性介于97.0%～98.8%,ORF2的同源性略低,介于91.9%～98.4%之间。该毒株与荷兰株、广西株和上海株等在一个进化分支上。本研究有助于监测PCV-2的疫源和进化关系,为进一步深入研究病毒基因功能奠定一定基础。

关键词：猪圆环病毒2型基因组克隆序列分析

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猪口蹄疫病毒受体整合素β8亚基配体结合域的原核表达和多克隆抗体制备

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甘肃农业大学学报 2008年第3期43卷 8-12页

作者：独军政高闪电常惠芸赵建勇丛国正邵军军林彤才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

病毒受体是决定病毒宿主特异性和组织嗜性的重要因素.利用原核细胞表达了猪口蹄疫病毒受体整合素β8亚基的配体结合域(LBD)片段,分离纯化目的蛋白后免疫兔,制备兔多克隆抗体.以含有猪β8亚基全长cD-NA的质粒为模板,经PCR扩增得到位于β... 详细信息

病毒受体是决定病毒宿主特异性和组织嗜性的重要因素.利用原核细胞表达了猪口蹄疫病毒受体整合素β8亚基的配体结合域(LBD)片段,分离纯化目的蛋白后免疫兔,制备兔多克隆抗体.以含有猪β8亚基全长cD-NA的质粒为模板,经PCR扩增得到位于β8成熟肽氨基端的LBD基因片段,与带有GST标签的原核表达载体pGEX 4T-1相连,构建原核表达质粒pGEX/β8LBD,测序确认读码框正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3),以IPTG诱导表达重组β8LBD融合蛋白.通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后提取包涵体,以电泳分离纯化的重组融合蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,鉴定血清效价和特异性.结果显示,实现了重组猪β8LBD融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达,SDS-PAGE显示分子量约为46 000,主要以包涵体形式存在于菌体中.制备的兔多克隆抗体效价达1∶12 800以上,该血清可与目的蛋白发生特异性反应.这将为进一步研究猪整合素β8亚基在宿主体内的分布及其在口蹄疫病毒致病过程中的作用奠定基础.

关键词：猪口蹄疫病毒受体 β8亚基配体结合域原核表达多克隆抗体

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连环恒温扩增技术研究进展

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实用诊断与治疗杂志 2008年第6期22卷 448-450页

作者：毕研丽沈小燕才学鹏丛国正中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州市730046

连环恒温扩增技术是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,利用一种链置换DNA聚合酶在恒温65℃左右保温几十分钟而完成的核酸扩增反应,通过检测反应过程中获得的副产品焦磷酸镁所形成白色沉淀的混浊度来判定扩增结果。由于其具有快速、... 详细信息

连环恒温扩增技术是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,利用一种链置换DNA聚合酶在恒温65℃左右保温几十分钟而完成的核酸扩增反应,通过检测反应过程中获得的副产品焦磷酸镁所形成白色沉淀的混浊度来判定扩增结果。由于其具有快速、简便、特异性好、成本低等优点,已经广泛应用于临床诊断、食品卫生检疫及基因芯片的开发;在细菌和病毒的检测方面对临床医学有重要意义。本文就连环恒温扩增的技术原理及其应用作一综述。

关键词：连环恒温扩增技术临床诊断

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整联蛋白与其配体结合的分子机制研究进展

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生物技术通讯 2008年第6期19卷 916-918页

作者：赵建勇高闪电独军政常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

整联蛋白是细胞表面的主要膜受体,具有介导细胞与细胞基质间的黏附及病毒吸附细胞等功能。αⅠ结构域型整联蛋白和非αⅠ结构域型整联蛋白与配体结合的方式各异。对整联蛋白-配体复合物分子结构的研究表明,整联蛋白利用其配体结合位点的... 详细信息

整联蛋白是细胞表面的主要膜受体,具有介导细胞与细胞基质间的黏附及病毒吸附细胞等功能。αⅠ结构域型整联蛋白和非αⅠ结构域型整联蛋白与配体结合的方式各异。对整联蛋白-配体复合物分子结构的研究表明,整联蛋白利用其配体结合位点的αMIDAS(依赖金属离子的吸附位点)、βMIDAS与各种类型配体结合。

关键词：整联蛋白受体配体依赖金属离子的吸附位点

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环介导等温基因扩增技术及其在病毒检测中的应用

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生物技术通讯 2008年第2期19卷 290-292页

作者：周广青常惠芸邵军军中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

环介导等温扩增是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有特异性高、敏感性高、简单、快捷及不需要昂贵的仪器设备等特点,受到了生物医学研究者的高度关注。目前,该方法已经被广泛应用于各种病原微生物检测。简要综述了环介导等温扩增... 详细信息

环介导等温扩增是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有特异性高、敏感性高、简单、快捷及不需要昂贵的仪器设备等特点,受到了生物医学研究者的高度关注。目前,该方法已经被广泛应用于各种病原微生物检测。简要综述了环介导等温扩增技术的原理、特点,及其在病毒检测中的应用。

关键词：环介导等温扩增技术病毒检测

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口蹄疫病毒反向遗传操作和病毒空衣壳组装

口蹄疫病毒反向遗传操作和病毒空衣壳组装

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：刘在新李平花曹轶梅卢曾军白兴文孙普郭建宏刘湘涛殷宏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/国家口蹄疫参考实验室/农业部畜禽病毒学重点实验室

构建的口蹄疫病毒(FMDV)基因组全长cDNA克隆,置于T7启动子下游,与表达T7RNA聚合酶的真核质粒共转染BHK-21细胞,能顺利稳定的拯救获得病毒。拯救的病毒和野生型口蹄疫病毒一样,对酸敏感,当pH值低于7.0时,完整的衣壳结构就会裂解成12S的... 详细信息

构建的口蹄疫病毒(FMDV)基因组全长cDNA克隆,置于T7启动子下游,与表达T7RNA聚合酶的真核质粒共转染BHK-21细胞,能顺利稳定的拯救获得病毒。拯救的病毒和野生型口蹄疫病毒一样,对酸敏感,当pH值低于7.0时,完整的衣壳结构就会裂解成12S的五聚体。昆虫细胞的正常pH值偏酸,低于7.0,很难利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中组装口蹄疫病毒空衣壳结构。采用定点突变改变了Asia1型口蹄疫病毒结构蛋白的2个氨基酸。将改造和未改造的P12A基因和3C基因分组插入带双启动子的杆状病毒转移载体中,经重组获得了两株携带目的基因的重组杆状病毒。重组杆状病毒感染High FiveTM细胞,表达了目的蛋白。电镜观察到改造的P12A基因重组杆状病毒产生了直径为25nm～30nm的类似口蹄疫病毒粒子的空衣壳结构,而未改造的P12A基因重组杆状病毒未能观察到同等大小的衣壳结构。本研究建立了稳定的口蹄疫病毒反向遗传操作技术平台,首次在昆虫细胞中组装成了FMDV完整的空衣壳结构。

关键词：口蹄疫病毒病毒拯救定点突变昆虫细胞空衣壳结构

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整联蛋白结构及其功能研究进展

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生物技术通讯 2008年第1期19卷 101-104页

作者：高闪电独军政周建华常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

整联蛋白是广泛存在于真核细胞表面的完整的膜受体家族,包括由至少18种不同的α亚基及8种β亚基形成的20多种αβ异二聚体。整联蛋白配体主要有胶原蛋白、纤维结合蛋白、层粘连蛋白、玻连蛋白、血小板凝血酶敏感蛋白、胞间黏附分子、细... 详细信息

整联蛋白是广泛存在于真核细胞表面的完整的膜受体家族,包括由至少18种不同的α亚基及8种β亚基形成的20多种αβ异二聚体。整联蛋白配体主要有胶原蛋白、纤维结合蛋白、层粘连蛋白、玻连蛋白、血小板凝血酶敏感蛋白、胞间黏附分子、细胞反受体、补体蛋白,以及多种细菌和病毒蛋白,在介导血管内皮细胞和肿瘤细胞的黏附、淋巴细胞运输、肿瘤生长及感染等都有重要的作用。

关键词：整联蛋白受体配体结构与功能

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