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中国人兽共患病学报 2021年第2期37卷 152-158页

作者：李秀荣闫鸿斌李立付宝权薄新文朱兴全贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家动物包虫病专业实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部人畜共患病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所石河子832000

绦虫是一类严重危害人类身体健康的寄生虫,每年给人类造成很大的经济负担。绦虫种类众多,生物学特性各异,目前绦虫病的防控和治疗措施尚不完善,对动物和人类的危害严重。随着生物信息学和基因测序技术的发展、绦虫基因组序列的测定和解... 详细信息

绦虫是一类严重危害人类身体健康的寄生虫,每年给人类造成很大的经济负担。绦虫种类众多,生物学特性各异,目前绦虫病的防控和治疗措施尚不完善,对动物和人类的危害严重。随着生物信息学和基因测序技术的发展、绦虫基因组序列的测定和解析,通过对绦虫的生物学特征和调控基因进行深度研究有助于预防和控制绦虫病,特别是人和动物的棘球蚴病和囊虫病等重要的人兽共患寄生虫病。利用绦虫基因组学和蛋白质组学等组学技术,筛选绦虫感染关键的基因和蛋白质,提供绦虫病的诊断参考依据和绦虫病治疗的潜在药物靶标。本文就绦虫基因组测序完成情况和近年来绦虫基因组学研究进展进行综述。

关键词：绦虫基因组学药物靶标

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人兽共患寄生虫病候选疫苗分子筛选方法研究进展

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中国畜牧兽医 2021年第6期48卷 2177-2187页

作者：代国栋闫鸿斌李立付宝权贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家动物包虫病专业实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业农村部人兽共患病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

人兽共患寄生虫种类多、宿主广泛且危害严重。血吸虫病、棘球蚴病、囊尾蚴病、旋毛虫病、弓形虫病等是常见的重要人兽共患寄生虫病。人类和家畜饱受寄生虫病的危害,这对公共卫生和畜牧业造成了很大的影响。控制传染源、切断传播途径和... 详细信息

人兽共患寄生虫种类多、宿主广泛且危害严重。血吸虫病、棘球蚴病、囊尾蚴病、旋毛虫病、弓形虫病等是常见的重要人兽共患寄生虫病。人类和家畜饱受寄生虫病的危害,这对公共卫生和畜牧业造成了很大的影响。控制传染源、切断传播途径和保护易感群是控制人兽共患寄生虫病流行的综合防控措施。在综合防控策略中,疫苗的使用是切断循环链、控制乃至消灭人兽共患寄生虫病的理想和有效途径之一。选用高效的抗原筛选方法挖掘潜在的疫苗候选分子是开发疫苗的前提和关键。抗原筛选技术的更新换代使得研究者发掘出了更多新抗原和保护性多肽。现有的抗原筛选方法主要包括传统的粗抗原筛选法、cDNA文库筛选法、蛋白质组学筛选法、生物信息学及多组学技术联合筛选法。很多抗原筛选的方法是伴随寄生虫疫苗研究的发展应运而生的,粗抗原筛选法是基于抗原抗体相互反应的免疫学原理而设计的,此方法筛选的天然抗原可引起机体较强的免疫反应;cDNA文库筛选抗原的优势在于筛选更有针对性,所以候选产物的成分更单一、明确;蛋白质组学筛选法是基于质谱而兴起的一种筛选技术,它既可对未知蛋白组分进行鉴定,还可对鉴定结果进行差异比较,在未知分子的发现和功能特殊的靶分子筛选中发挥着重要作用;随着后基因时代的到来,生物信息学及多组学联合筛选技术使得抗原筛选逐步进入了多维、立体的筛选模式,也使得候选抗原及其表位的功能研究更加深入,这为基因工程疫苗和多肽疫苗候选分子的筛选提供了技术手段。

关键词：寄生虫疫苗抗原筛选 cDNA文库蛋白质组学生物信息学多组学

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基于高通量测序的多房棘球蚴感染小鼠肝组织中差异circRNA的生物信息学分析

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中国兽医科学 2020年第4期50卷 437-443页

作者：李秀荣李立闫鸿斌辇晓峰张林生付宝权贾万忠中国农业科学院、兰州兽医研究所、家畜疫病病原生物学国家重点实验室、国家动物包虫病专业实验室、甘肃省动物寄生虫病重点实验室、农业部人兽共患病重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

分析多房棘球蚴感染小鼠肝组织中差异表达的环状RNA(circRNA),探究circRNA在宿主感染过程中可能参与的调控作用。采用高通量circRNA芯片技术比较感染组和对照组小鼠肝组织circRNA表达谱的差异,利用生物信息学对差异circRNA亲本基因进行G... 详细信息

分析多房棘球蚴感染小鼠肝组织中差异表达的环状RNA(circRNA),探究circRNA在宿主感染过程中可能参与的调控作用。采用高通量circRNA芯片技术比较感染组和对照组小鼠肝组织circRNA表达谱的差异,利用生物信息学对差异circRNA亲本基因进行GO和KEGG富集分析。结果显示,上调表达的circRNA有201个,下调表达的circRNA有9个,差异表达共计210个,经实时荧光定量PCR验证出其中4个上调和2个下调差异circRNA的表达水平变化趋势与芯片结果相一致。GO富集分析显示,在分子功能、生物过程及细胞组分均有富集;KEGG富集通路则有内吞作用、SNARE蛋白相关囊泡运动、矿物质吸收等与免疫相关的信号通路。结果提示,感染多房棘球蚴的小鼠肝组织与对照组小鼠肝组织比较,circRNA表达谱发生了显著性变化,这些差异表达的circRNA及其潜在的靶分子可能与多房棘球蚴感染宿主早期免疫反应有关。

关键词：多房棘球蚴小鼠环状RNA 生物信息学高通量测序

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双芽巴贝斯虫Hsp20一新基因型的发现及生物学特性分析

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中国兽医科学 2019年第5期49卷 567-573页

作者：曲志强张亮罗金陈泽任巧云刘文阁倪军许肖枫吴泽功罗建勋殷宏孙晓林刘光远甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 中农威特生物科技股份有限公司甘肃兰州730046 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了鉴定分离自甘肃永靖的1株双芽巴贝斯虫Hsp20基因型为一新基因型,参考双芽巴贝斯虫Hsp20核苷酸序列,设计特异性引物。对其进行扩增,利用生物信息学方法对其进行比对分析。结果显示,扩增获得了700 bp的核苷酸片段。与GenBank中公布的1... 详细信息

为了鉴定分离自甘肃永靖的1株双芽巴贝斯虫Hsp20基因型为一新基因型,参考双芽巴贝斯虫Hsp20核苷酸序列,设计特异性引物。对其进行扩增,利用生物信息学方法对其进行比对分析。结果显示,扩增获得了700 bp的核苷酸片段。与GenBank中公布的18种不同物种的氨基酸序列构建遗传发育树,结果表明本实验获得的双芽巴贝斯虫与美国株和中国新疆株的亲缘关系最近。对其氨基酸序列进行比对分析,发现在第31～85位点存在冗余,与公布的Hsp20氨基酸序列存在明显的差异。通过同源建模分析,发现该冗余致使Hsp20蛋白在第7号位形成1个环形结构,从而引起了第3号位的拉伸。通过生物信息学分析得出,获得的双芽巴贝斯虫甘肃株的Hsp20基因是一新基因型。该基因型的存在为更加准确诊断双芽巴贝斯虫病提供了依据。

关键词：双芽巴贝斯虫 Hsp20 基因型生物学特征

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蜱虫相关功能基因的研究进展

蜱虫相关功能基因的研究进展

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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第一届青年科学家学术论坛

作者：仇晓飞罗金刘文阁许肖枫倪军吴泽功谭阳春任巧云殷宏罗建勋刘光远中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州大学

蜱虫作为一种营吸血性皮外寄生虫,不仅可以通过叮咬造成动物的机械损伤,而且可传播多种病原,对人类公共卫生健康和家畜养殖业造成了严重危害。因此,研究蜱源性功能基因,对于蜱虫种群控制以及蜱传疾病的防控有着重要的意义。目前,蜱源性... 详细信息

蜱虫作为一种营吸血性皮外寄生虫,不仅可以通过叮咬造成动物的机械损伤,而且可传播多种病原,对人类公共卫生健康和家畜养殖业造成了严重危害。因此,研究蜱源性功能基因,对于蜱虫种群控制以及蜱传疾病的防控有着重要的意义。目前,蜱源性基因主要研究包括信号通路相关基因,譬如G蛋白配体受体、Arrestin-domain protein、Na/K-ATPase、GTPase活化蛋白、KSR错误表达抑制剂等。该方向的研究为蜱虫基本生理功能的行使提供了理论依据,为生命科学的基础研究奠定了基础。其次在血液消化方面也做了大量的研究,譬如对半胱氨酸蛋白酶、木瓜蛋白酶、subolesin、HL05等基因功能的研究为蜱虫血液消化机理的研究奠定了基础,为后期蜱虫能量代谢机制研究提供了依据。生殖发育相关基因功能的研究一直以来是广大科研工作者研究蜱虫减虫率的重要手段。在该方面,热休克蛋白、Bm86、核糖体蛋白L24、蛋白激酶A、蛸胺受体、卵泡抑素、丙氨酸乙醛酸转氨酶、二硫异构酶、卵黄蛋白等都是人们关注的重点。这之中Bm86的研究最为成功,基于该基因疫苗的应用对蜱的防控起到了积极的作用,但因为其并非是一种光谱疫苗,而逐渐淡出人们的视线。其他发育相关基因虽然没有形成产品,但是研究的进展是可喜的,都为蜱虫的防控措施的制定提供了重要参考。另外在蜱虫的免疫防御方面人们也做出了积极的研究,这其中包括溶酶体酸性磷酸酶、cyclophilin 40等基因。以上研究不仅为蜱虫防控做出了重要的贡献,特别是对蜱传疾病防控措施的制定,以及相关制剂的研究奠定了良好的理论基础。为人类相关疾病的防控和媒介疾病的认识产生了积极的影响。

关键词：蜱防控基因功能研究进展

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人工感染细粒棘球蚴犬粪中蛋白质组的分析

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动物医学进展 2018年第1期39卷 7-15页

作者：李双男闫鸿斌李立姚刚田文俊李文卉张念章吴燕涛付宝权贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

收集感染细粒棘绦虫原头蚴后不同时间的犬粪,分离和提取蛋白质,对蛋白质在胶内酶切后,依次进行质谱分析、生物信息学和蛋白质功能富集分析。结果发现,在犬粪中共鉴定出蛋白质3 242个,其中宿主(犬)蛋白有3 107个、细粒棘球绦虫蛋白有135... 详细信息

收集感染细粒棘绦虫原头蚴后不同时间的犬粪,分离和提取蛋白质,对蛋白质在胶内酶切后,依次进行质谱分析、生物信息学和蛋白质功能富集分析。结果发现,在犬粪中共鉴定出蛋白质3 242个,其中宿主(犬)蛋白有3 107个、细粒棘球绦虫蛋白有135个。蛋白质功能富集结果显示,犬感染细粒棘球绦虫后,寄生虫与宿主相互作用,虫体在不同时间分泌特定蛋白,而蛋白质的分子生物学功能存在一定差异。研究结果对建立粪抗原诊断方法和研究细粒棘球绦虫感染宿主后的代谢途径及其生活机制提供了重要依据。

关键词：细粒棘球绦虫犬粪不同时间蛋白质组生物信息学分析

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动物寄生性蠕虫基因组学研究进展

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畜牧兽医学报 2017年第6期48卷 979-989页

作者：杨洋付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

动物(人)寄生性蠕虫病主要由寄生性线虫、吸虫和绦虫引起,严重威胁着人和动物的健康,但目前尚无有效的防治措施。近年来,随着测序技术的不断发展,越来越多种类的寄生性蠕虫基因组序列被测定和解析,寄生性蠕虫的生物学特征也被更深层次... 详细信息

动物(人)寄生性蠕虫病主要由寄生性线虫、吸虫和绦虫引起,严重威胁着人和动物的健康,但目前尚无有效的防治措施。近年来,随着测序技术的不断发展,越来越多种类的寄生性蠕虫基因组序列被测定和解析,寄生性蠕虫的生物学特征也被更深层次地挖掘。本文中作者将就寄生性蠕虫全基因组测序现状、基因的组成及特征、功能基因组的研究等进行综述,为深入了解寄生性蠕虫的起源、进化和致病机制,以及为寄生性蠕虫病的诊断、新药设计和疫苗研发提供新的思路。

关键词：寄生性蠕虫基因组测序功能基因组学

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多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基基因的克隆及原核表达

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中国畜牧兽医 2017年第10期44卷 2858-2864页

作者：杨洋李文卉张念章李婷婷李立闫鸿斌贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所、家畜疫病病原生物学国家重点实验室、农业部兽医公共卫生重点开放实验室、甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

为鉴定多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基(Tm PKA-C)基因作为诊断抗原的潜能,本试验以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增Tm PKA-C基因。将Tm PKA-C基因片段连接至p ET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western blotting和间接ELIS... 详细信息

为鉴定多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基(Tm PKA-C)基因作为诊断抗原的潜能,本试验以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增Tm PKA-C基因。将Tm PKA-C基因片段连接至p ET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western blotting和间接ELISA分析该蛋白的反应原性。结果表明,Tm PKA-C基因开放阅读框的长度为1 032 bp,可编码343个氨基酸。Tm PKA-C基因的表达产物主要以包涵体的形式存在,重组蛋白的分子质量大小约42 ku。Western blotting结果表明,该重组蛋白既能与自然感染脑多头蚴的绵羊血清发生特异性反应,又能与人工感染脑多头蚴不同时间段的绵羊血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性。间接ELISA分析结果表明,脑多头蚴绵羊血清能与重组蛋白发生特异性反应,进一步证明该重组蛋白的反应原性良好。本研究为筛选脑多头蚴病诊断新抗原奠定了基础。

关键词：多头带绦虫 TmPKA-C 原核表达反应原性

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环形泰勒虫喀什株感染牛淋巴细胞系的建立

环形泰勒虫喀什株感染牛淋巴细胞系的建立

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十六次全国学术会议暨第七次国际寄生虫学学术研讨会

作者：马全英李有全刘军龙刘爱红王锦明赵帅阳陈银银徐建林殷宏关贵全罗建勋家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

牛环形泰勒虫病是由泰勒虫属的原虫寄生于牛的淋巴细胞和红细胞内所引起的一种蜱传性血液原虫病,临床症状主要表现为高热、贫血、体表淋巴结肿胀等,该病发病率和病死率高,给畜牧业生产造成了巨大的经济损失。环形泰勒虫裂殖体阶段虫体... 详细信息

牛环形泰勒虫病是由泰勒虫属的原虫寄生于牛的淋巴细胞和红细胞内所引起的一种蜱传性血液原虫病,临床症状主要表现为高热、贫血、体表淋巴结肿胀等,该病发病率和病死率高,给畜牧业生产造成了巨大的经济损失。环形泰勒虫裂殖体阶段虫体能够感染宿主巨噬细胞、树突状细胞及B淋巴细胞,且感染宿主细胞体外培养时可以获得类似肿瘤样细胞的无限增殖能力。本研究以感染环形泰勒虫新疆喀什株的黄牛为材料,当动物体温升高,体表淋巴结穿刺发现大量裂殖体出现时,手术摘出淋巴结,体外培养裂殖体感染淋巴细胞。实验确定了环形泰勒虫裂殖体感染细胞培养的最适培养基,血清浓度及细胞接种密度,稳定细胞的增长时间,细胞株的生长曲线及细胞周期的确定。结果细胞在含10%FBS的RPMI-1640培养基中可稳定生长,以5×105cells/ml接种时可使细胞密度达到2.5-2.8×106cells/ml,细胞活率维持在95%以上;细胞72h为一个培养周期,平均直径为13.5um,连续传代20代细胞形态不变,生长周期恒定,由此形成一个稳定的细胞系,为环形泰勒虫病疫苗的研究提供新的疫苗株。

关键词：环形泰勒虫感染牛淋巴细胞细胞系

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加拿大棘球绦虫的基因分型与分子流行病学研究进展

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中国人兽共患病学报 2016年第4期32卷 392-399页

作者：李双男闫鸿斌李立娄忠子付宝权殷宏贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

通过比较加拿大棘球绦虫不同基因型的线粒体基因组,尤其是其中的cox1和nad1基因核苷酸序列的差异性,了解加拿大棘球绦虫各基因型的分子遗传标记特征与变异情况,阐明加拿大棘球绦虫基因型在棘球属中的分类地位、命名和进化关系。另外,本... 详细信息

通过比较加拿大棘球绦虫不同基因型的线粒体基因组,尤其是其中的cox1和nad1基因核苷酸序列的差异性,了解加拿大棘球绦虫各基因型的分子遗传标记特征与变异情况,阐明加拿大棘球绦虫基因型在棘球属中的分类地位、命名和进化关系。另外,本文通过对加拿大棘球绦虫各基因型的分子流行病学特征、研究意义、未来研究方向等进行综述,为从事该领域研究的学者和临床工作者提供丰富的分子流行病学信息或资料,并为棘球蚴病分子流行病学调查、预警预报和综合防治策略的制定等提供理论依据和指导。

关键词：加拿大棘球绦虫基因型分子遗传标记线粒体基因分类学流行病学

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