检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2014年第12期44卷 1251-1256页

作者：马睿麟娄忠子李立胡广卫赵全邦沈艳丽闫鸿斌张向乐殷宏蔡金山贾万忠青海省动物疫病预防控制中心青海西宁810008 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室中国农业科学院人兽共患病重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

分析了采自青海省7个县共19个细粒棘球蚴分离株样品的nad1基因和cox1基因核苷酸序列的多态性和单倍型。结果显示,18个细粒棘球蚴分离株属于G1型,1个分离株属于G3型。G1型分离株可根据nad1基因和cox1基因的核苷酸序列变异分为不同的单倍... 详细信息

分析了采自青海省7个县共19个细粒棘球蚴分离株样品的nad1基因和cox1基因核苷酸序列的多态性和单倍型。结果显示,18个细粒棘球蚴分离株属于G1型,1个分离株属于G3型。G1型分离株可根据nad1基因和cox1基因的核苷酸序列变异分为不同的单倍型,其中nad1基因的单倍型共有5种,变异位点只有5个,单倍型序列之间碱基差异1~4个,变异率达0.45%;而cox1基因的单倍型共有9种,涉及变异位点共27个,单倍型序列之间碱基差异1~11个,变异率达0.68%。突变碱基多位于密码子第3位碱基上,属于同义突变。cox1基因的多态性比nad1基因的多态性丰富。用于细粒棘球蚴G1型内分离株之间核苷酸多态性的分析则分辨率相对较高。上述研究结果为进一步开展棘球蚴病分子流行病学调查积累了数据。

关键词：细粒棘球蚴青海省 cox1基因 nad1基因基因型单倍型单核苷酸多态性

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旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsSerpin)基因的克隆及序列分析

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中国兽医科学 2014年第12期44卷 1211-1216页

作者：盖文燕李文卉张念章曲自刚付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为了分析旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsSerpin)的分子特征,提取了旋毛虫标准株ISS534,河南、云南、天津、西安、哈尔滨等6个猪旋毛虫分离株基因组DNA,设计引物进行PCR扩增,克隆不同虫株TsSerpin基因组的DNA序列。将PCR产物连接到pMD18-T... 详细信息

为了分析旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsSerpin)的分子特征,提取了旋毛虫标准株ISS534,河南、云南、天津、西安、哈尔滨等6个猪旋毛虫分离株基因组DNA,设计引物进行PCR扩增,克隆不同虫株TsSerpin基因组的DNA序列。将PCR产物连接到pMD18-T载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息学软件对TsSerpin基因序列进行预测分析。结果显示,TsSerpin cDNA序列含有1个由1 122个核苷酸组成的开放阅读框,编码由373个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量的理论值为42.5ku,理论等电点为6.54。该蛋白的二级结构中,α螺旋占36.7%,β折叠占25.2%,其余38.1%为无规则卷曲。TsSerpin第14~373位氨基酸序列为Serpin结构域,具有Serpin的保守序列FVADHPFLFFI。线性B淋巴细胞抗原表位分析显示,TsSerpin中含有12个潜在的B细胞抗原表位。TsSerpin基因的开放阅读框对应的基因组序列包含3个外显子和2个内含子。不同旋毛虫分离株TsSerpin序列高度保守,一致性在99%以上。上述研究结果为进一步研究TsSerpin蛋白的生物学功能和研制新型抗旋毛虫疫苗奠定了基础。

关键词：旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂克隆序列分析

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弓形虫硫氧还蛋白样蛋白基因的克隆与原核表达

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中国兽医科学 2014年第11期44卷 1145-1149页

作者：杨晓宇王萌张德林中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

为掌握刚地弓形虫硫氧还蛋白样蛋白(thioredoxin-like,TRXL)的生物学特性及其作为诊断候选分子的潜力,针对trxl基因序列设计引物,通过RT-PCR法扩增弓形虫trxl基因,并将其连接至pET-30a(+)原核表达载体。转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱... 详细信息

为掌握刚地弓形虫硫氧还蛋白样蛋白(thioredoxin-like,TRXL)的生物学特性及其作为诊断候选分子的潜力,针对trxl基因序列设计引物,通过RT-PCR法扩增弓形虫trxl基因,并将其连接至pET-30a(+)原核表达载体。转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,分析了rTRXL蛋白的反应原性。结果显示,弓形虫trxl基因全长1 275bp,共编码424个氨基酸,与GenBank中下载的弓形虫ME49株trxl基因的参考序列完全一致。SDS-PAGE分析表明,诱导表达的重组蛋白rTRXL的大小约48ku,与预期的结果相符,主要以包涵体形式存在。Western-blot结果显示,重组蛋白rTRXL能被感染弓形虫的猪阳性血清识别,表明重组蛋白rTRXL具有良好的反应原性。上述研究结果为弓形虫rTRXL蛋白作为新型弓形虫诊断试剂候选抗原的研究奠定了基础。

关键词：刚地弓形虫硫氧还蛋白样蛋白原核表达反应原性

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应用PCR技术鉴定我国旋毛虫分离株的研究

应用PCR技术鉴定我国旋毛虫分离株的研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会

作者：付宝权刘明远姚春雨李文卉李永光王艳华吴秀萍张德林才学鹏 Radu Blaga Pascal Boireau 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室吉林大学人兽共患病研究所内蒙古民族大学动物科技学院 University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Faculty of Veterinary MedicineCluj-Napoca

根据旋毛虫***(T1)和乡土旋毛虫***(T2)的线粒体核糖体小亚基及大亚基RNA基因序列设计合成特异性引物,同时合成旋毛虫核糖体扩展片段V特异引物,以旋毛虫***和乡土旋毛虫***标准株为对照,对我国10个旋毛虫分离株进行了PCR鉴定。结果表明... 详细信息

根据旋毛虫***(T1)和乡土旋毛虫***(T2)的线粒体核糖体小亚基及大亚基RNA基因序列设计合成特异性引物,同时合成旋毛虫核糖体扩展片段V特异引物,以旋毛虫***和乡土旋毛虫***标准株为对照,对我国10个旋毛虫分离株进行了PCR鉴定。结果表明,河南猪株、西安猪株、云南猪株、哈尔滨猪株、天津猪株、乌兰浩特犬株1旋毛虫的PCR扩增条带与T1一致,为旋毛虫***;而长春犬株与鸟兰浩特犬株2旋毛虫的PCR扩增条带与T2一致,为乡土旋毛虫***。同时对以上旋毛虫分离株5S rDNA内部基因间隔区序列进行测定,序列比对分析结果也证实这十个分离株分别属于旋毛虫***和乡土旋毛虫***,而且不同分离株5S RNA内部转录间隔区基因序列存在差异。建立的PCR方法可以应用于我国旋毛虫分离株的虫种分子分类鉴定,这对我国旋毛虫病分子病原学检测、分离株的分类鉴定以及种群遗传结构的研究都具有重要意义。

关键词：中国旋毛虫分离株 PCR 鉴定

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