检索结果-内蒙古大学图书馆

猪圆环病毒2型ORF3基因的表达及其表达产物免疫小鼠后致细胞因子变化的研究

中国兽医科学 2013年第6期43卷 583-587页

作者：王亚军杨顺利才学鹏甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 中国动物疫病预防控制中心北京100125

为掌握猪圆环病毒2型(PCV2)ORF3蛋白免疫小鼠后引起其细胞因子变化的特征,设计了特异性引物,以PCV2FJ948167毒株的基因组DNA为模板,PCR扩增获得ORF3基因,并将其克隆到pSMK-sumo原核表达载体。把构建成功的重组质粒转化至BL21(DE3RIL str... 详细信息

为掌握猪圆环病毒2型(PCV2)ORF3蛋白免疫小鼠后引起其细胞因子变化的特征,设计了特异性引物,以PCV2FJ948167毒株的基因组DNA为模板,PCR扩增获得ORF3基因,并将其克隆到pSMK-sumo原核表达载体。把构建成功的重组质粒转化至BL21(DE3RIL strain)表达菌株,IPTG诱导后SDS-PAGE和Western-blot分析显示,ORF3基因已在大肠杆菌中表达,表达产物的分子质量约为32ku。将分离纯化后的ORF3蛋白免疫小鼠,检测免疫后不同时间点IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12在血清中的质量浓度。结果显示,免疫后小鼠血清中IL-4的质量浓度显著升高(P<0.05),而IL-10、IL-12和INF-γ的质量浓度没有明显的变化。结果表明,ORF3蛋白在PCV2诱发的体液免疫中发挥一定的作用。

关键词：猪圆环病毒2型 ORF3基因 γ-干扰素白细胞介素4 白细胞介素10 白细胞介素12

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口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白β6亚基配体结合域单克隆抗体识别的抗原表位分析

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安徽农业科学 2009年第4期37卷 1583-1585页

作者：赵建勇伏小平独军政高闪电冯艳丽常惠芸甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

[目的]分析测定口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白β6亚基配体结合域单克隆抗体(mAb)的抗原识别位点、饱和值、亲和力常数。[方法]利用叠加ELISA法、间接ELISA法、硫氰酸盐洗脱法测定C2D8、B7B6、B8C9、C4C7、E7C7 5株mAb的抗原识别位点、饱... 详细信息

[目的]分析测定口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白β6亚基配体结合域单克隆抗体(mAb)的抗原识别位点、饱和值、亲和力常数。[方法]利用叠加ELISA法、间接ELISA法、硫氰酸盐洗脱法测定C2D8、B7B6、B8C9、C4C7、E7C7 5株mAb的抗原识别位点、饱和值、亲和力常数。[结果]5株mAb间具有相似或不同的抗原识别位点,其中C4C7与E7C7、C4C7与B8C9、E7C7与B8C9等mAb间的识别位点相似,而C4C7与B7B6、E7C7与C2D8等mAb间的识别位点不同。5株mAb C2D8、E7C7、B8C9、C4C7、B7B6的饱和值分别为1∶200、1∶400、1∶800、1∶800、1∶800,亲和力为B8C9>C4C7>B7B6≥E7C7>C2D8。[结论]分析测定了5株mAb的抗原识别位点、饱和值、亲和力常数,从而为利用mAb深入研究整联蛋白αvβ6在口蹄疫病毒感染过程中的作用奠定基础。

关键词：口蹄疫病毒整联蛋白受体单克隆抗体抗原表位

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整联蛋白结构与信号转导机制

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动物医学进展 2010年第1期31卷 63-67页

作者：薛霜独军政赵建勇高闪电常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

整联蛋白是一类α/β异源二聚体膜受体分子,通过细胞膜的双向信号转导作用以调节细胞分化、迁移、免疫、黏附等生物学功能。整联蛋白能通过多种途径如黏附斑激酶、胞内-外离子浓度及结构域构象变化等介导细胞信号转导。近年来,研究的焦... 详细信息

整联蛋白是一类α/β异源二聚体膜受体分子,通过细胞膜的双向信号转导作用以调节细胞分化、迁移、免疫、黏附等生物学功能。整联蛋白能通过多种途径如黏附斑激酶、胞内-外离子浓度及结构域构象变化等介导细胞信号转导。近年来,研究的焦点是整联蛋白如何通过构象的改变来调节细胞信号转导以及对配体的亲和力。论文主要从分子水平上就整联蛋白结构和介导的信号转导机理进行了综述。

关键词：整联蛋白构象信号转导配体亲和力

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灭活的羊口疮病毒抑制口蹄疫病毒在BHK-21细胞中的复制

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中国兽医科学 2022年第4期52卷 403-409页

作者：张大俊王国春史喜绢杨博张婷崔卉梅袁兴国赵登率陈学辉杨金柯郝雨郑海学刘湘涛张克山中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业农村部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 辽宁省现代农业生产基地建设工程中心辽宁沈阳110000

为探究灭活的羊口疮病毒(ORFV)调节宿主免疫应答后对口蹄疫病毒(FMDV)复制的调控作用,本研究通过制备、灭活、纯化ORFV,采用RT-qPCR方法评估并分析在预先使用灭活的ORFV处理的BHK-21细胞中FMDV的复制情况以及细胞因子的变化情况。研究... 详细信息

为探究灭活的羊口疮病毒(ORFV)调节宿主免疫应答后对口蹄疫病毒(FMDV)复制的调控作用,本研究通过制备、灭活、纯化ORFV,采用RT-qPCR方法评估并分析在预先使用灭活的ORFV处理的BHK-21细胞中FMDV的复制情况以及细胞因子的变化情况。研究结果显示,灭活的ORFV上调细胞因子GM-CSF、IFN-γ、IL-1α、IL-2、IL-6和IL-10的转录水平,显著抑制FMDV在BHK-21细胞中的复制。也就是说,灭活的ORFV通过上调宿主细胞因子的转录进而抑制FMDV复制。这一研究结果为灭活的ORFV作为免疫调节剂提供了依据并为其应用提供了可能性。

关键词：口疮病毒口蹄疫病毒细胞因子 BHK-21细胞

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内生真菌链格孢菌醋酸乙酯提取物对大肠杆菌抑菌机制的研究

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中草药 2018年第2期49卷 374-381页

作者：王永刚杨光瑞马雪青王鸣刚冷非凡王帆马建忠陈吉祥兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃兰州730050 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 中国科学院青岛生物能源与过程研究所山东青岛266101 兰州理工大学能源与动力工程学院甘肃兰州730050

目的研究分离自药用植物白毛蛇Humata tyermanni的内生真菌链格孢菌发酵产物醋酸乙酯提取物(B06e)对大肠杆菌的抑菌机制。方法采用倍比稀释法测定了B06e对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC);测定了B06e作用前后大肠杆菌培养液电导率、核酸和... 详细信息

目的研究分离自药用植物白毛蛇Humata tyermanni的内生真菌链格孢菌发酵产物醋酸乙酯提取物(B06e)对大肠杆菌的抑菌机制。方法采用倍比稀释法测定了B06e对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC);测定了B06e作用前后大肠杆菌培养液电导率、核酸和蛋白质的变化;结合流式细胞仪、扫描电子显微镜、凝胶阻滞实验、圆二色谱和荧光实时定量PCR的分析方法研究了B06e对大肠杆菌细胞膜结构、形态、DNA的影响。结果 B06e对大肠杆菌的MIC为25μg/m L,3×MIC处理组的电导率是对照组的1.01倍;3×MIC处理组的β-半乳糖苷酶活性是对照组的11.6倍;流式细胞仪分析表明3×MIC处理组被碘化丙啶(PI)染色的阳性细胞比是对照组的286.5倍;扫描电子显微镜结果显示,B06e处理后菌体表面变得粗糙,细胞膜大量塌陷;以上结果说明B06e能增大细胞膜的通透性,破坏细胞膜的完整性。凝胶阻滞、圆二色谱的结果表明,B06e能够以嵌插的方式与DNA结合,但不能降解DNA;实时定量PCR结果表明,经B06e处理后rec A和rec N基因的表达量分别是对照组的2.9和3.7倍,说明B06e能破坏DNA的结构,迫使大肠杆菌启动了SOS修复。结论 B06e通过破坏大肠杆菌细胞膜完整性和DNA的结构,使得细菌代谢紊乱,最终导致细菌丧失了生长繁殖的能力。

关键词：大肠杆菌白毛蛇内生真菌链格孢菌抗菌机制细胞膜通透性细胞膜结构 DNA损伤

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口蹄疫病毒前导蛋白的分子生物学研究进展

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中国动物传染病学报 2014年第1期22卷 73-79页

作者：张萌白兴文李平花范朋举包慧芳孙普卢曾军曹轶梅刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)编码的前导蛋白,不仅是一个重要的蛋白酶,而且对于病毒来说是一个重要的毒力因子,其能够作用于宿主细胞的特异性蛋白,抵抗宿主细胞所产生的抗病毒效应。本文章简述了口蹄疫病毒前导蛋白... 详细信息

口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)编码的前导蛋白,不仅是一个重要的蛋白酶,而且对于病毒来说是一个重要的毒力因子,其能够作用于宿主细胞的特异性蛋白,抵抗宿主细胞所产生的抗病毒效应。本文章简述了口蹄疫病毒前导蛋白酶的基本特性,例如前导蛋白的基因结构与病毒复制的关系,前导蛋白酶活性的具体特点,以及前导蛋白影响病毒毒力的分子机制。

关键词：口蹄疫病毒前导蛋白先天性免疫

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蛋白质组学样品处理方法研究进展

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中国动物检疫 2011年第6期28卷 78-81页

作者：卢国栋张克山刘永杰尚佑军郭建宏郑海学田宏刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室

蛋白质组学研究已经成为后基因组时代的研究热点,是生命科学研究领域又一个新的突破口。以双向凝胶电泳为主的蛋白质分离技术以及基于生物质谱的蛋白质鉴定技术是目前该领域主要研究技术手段。在双向凝胶电泳蛋白分离和蛋白质谱鉴定中,... 详细信息

蛋白质组学研究已经成为后基因组时代的研究热点,是生命科学研究领域又一个新的突破口。以双向凝胶电泳为主的蛋白质分离技术以及基于生物质谱的蛋白质鉴定技术是目前该领域主要研究技术手段。在双向凝胶电泳蛋白分离和蛋白质谱鉴定中,样品处理影响甚至决定着蛋白分离效果和鉴定结果。因此有效的样品处理技术是获得真实、可靠实验数据的关键,在比较蛋白质组学研究中样品处理尤为重要。本文针对双向电泳前的蛋白质样品处理及质谱鉴定前的样品处理技术的研究进展作以综述。

关键词：蛋白质组学样品处理技术研究进展

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持续感染口蹄疫病毒VP1和3ABC基因变异研究

持续感染口蹄疫病毒VP1和3ABC基因变异研究

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中国畜牧兽医学会2006学术年会

作者：沈小燕丛国正常惠芸邵军军独军政林彤谢庆阁中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室

为了明确口蹄疫病毒持续感染和口蹄疫病毒基因变异之间的潜在关系,研究口蹄疫病毒结构蛋白VP1和非结构蛋白3ABC基因在持续感染动物体内的动态变化规律。用O／Akesu／58 FMDV以104ID50／mL剂量舌面穿刺接种5头中国黄牛。探杯定期采集实... 详细信息

为了明确口蹄疫病毒持续感染和口蹄疫病毒基因变异之间的潜在关系,研究口蹄疫病毒结构蛋白VP1和非结构蛋白3ABC基因在持续感染动物体内的动态变化规律。用O／Akesu／58 FMDV以104ID50／mL剂量舌面穿刺接种5头中国黄牛。探杯定期采集实验牛咽喉部黏性液体(O／P液),分离到12株持续感染毒株。RT-PCR方法扩增了VP1和3ABC基因,克隆测序后分析发现VP1基因出现16个核苷酸位点的固定突变,造成两个位点氨基酸突变(I56→T、A210→E);非结构蛋白3ABC基因表现较为稳定,未发现固定位点的突变。系统发生树分析,持续感染毒株VP1和3ABC基因没有向其他基因型突变的趋势。我们推断口蹄疫的持续感染可能决定于感染最初的1-2个月间,在持续感染期病毒基本保持抗原性稳定存在于机体。

关键词：口蹄疫病毒持续感染基因变异 VP1 3ABC

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羊传染性脓疱病毒逃避宿主免疫应答的机制

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中国草食动物科学 2014年第S1期34卷 11-13页

作者：张克山刘永杰成伟伟尚佑军逯忠新刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

天然免疫又称为非特异性免疫、固有免疫是机体与生俱来的抵抗体外病原体侵袭、清除体内抗原性异物的第一道屏障[1]。细胞天然免疫是机体天然免疫的关键组成部分,随着人们对巨噬细胞、NK细胞及树突状细胞(DCs)等天然免疫细胞的深入研究,... 详细信息

天然免疫又称为非特异性免疫、固有免疫是机体与生俱来的抵抗体外病原体侵袭、清除体内抗原性异物的第一道屏障[1]。细胞天然免疫是机体天然免疫的关键组成部分,随着人们对巨噬细胞、NK细胞及树突状细胞(DCs)等天然免疫细胞的深入研究,加上天然免疫具有即时性且缺乏记忆的特点,天然免疫得到越来越广泛的重视和深入的研究。

关键词：羊传染性脓疱宿主免疫应答固有免疫抗原性非特异性免疫关键组成凋亡蛋白免疫原性体液免疫反

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羊传染病四季发病特点及其防制

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中国草食动物科学 2012年第S1期32卷 436-437页

作者：张克山尚佑军逯忠新刘湘涛家畜疫病病原生物学国家重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

1四季羊发生传染病特点春暖花开的春季,"冬眠"的微生物开始复苏,圈养了整个冬天的羊离开羊舍出去活动,加上初春季节羊的膘情不理想,抵抗力相对较低,给羊传染病的发生和流行创造了极为便利的条件。尤其是冬季出生的羔羊,在春... 详细信息

1四季羊发生传染病特点春暖花开的春季,"冬眠"的微生物开始复苏,圈养了整个冬天的羊离开羊舍出去活动,加上初春季节羊的膘情不理想,抵抗力相对较低,给羊传染病的发生和流行创造了极为便利的条件。尤其是冬季出生的羔羊,在春季断奶时,羔羊本身抵抗力弱加上断奶应激易发生传染病。因此春季必须高度重视羊传染病,做好免疫接种、药物预防和定期消毒等工作。夏季湿热的环境为羊传染病尤其是细菌性传染病的发生、传播和流行提供了有利条件。

关键词：断奶应激羊舍免疫接种羊肠毒血症药物预防羊快疫羊病羊口疮李氏杆菌病羊炭疽

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