检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2024年第1期56卷 56-64页

作者：邓润辉范丽萍刘希望秦哲白莉霞葛闻博李世宏李剑勇董书伟杨亚军榆林学院生命科学学院陕西榆林719000 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

除虫脲(DFB)属于苯甲酰苯脲类化合物,能够抑制昆虫及其幼虫的几丁质合成,从而控制成虫的数量。为了解除虫脲预混剂混饲给药后,猪粪便中药物的浓度,以DFB-^(13)C_(6)为内标,建立了猪粪便中DFB药物浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测... 详细信息

除虫脲(DFB)属于苯甲酰苯脲类化合物,能够抑制昆虫及其幼虫的几丁质合成,从而控制成虫的数量。为了解除虫脲预混剂混饲给药后,猪粪便中药物的浓度,以DFB-^(13)C_(6)为内标,建立了猪粪便中DFB药物浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法。以冰乙酸-乙腈提取粪便中的DFB,采用QuEChERS技术净化提取液,LC-MS/MS测定,内标法定量。结果显示,猪粪便样品基质对于DFB的定量检测干扰较小,检测方法灵敏度高,检测限为10 ng/g,定量限为20 ng/g;检测方法的基质效应对样品的检测影响较小;标准溶液在2~500 ng/mL的浓度范围内,线性关系良好(R^(2)≥0.99);在定量限20 ng/g及低浓度(100 ng/g)、中浓度(1000 ng/g)、高浓度(5000 ng/g)的添加水平下,平均准确度在93%~110%,批内、批间变异系数均小于10%,符合方法学要求;不同浓度加标样品处理后的溶液,室温放置24 h稳定性良好,但应避免样品的反复冻融。结果表明,本试验建立的LC-MS/MS检测方法可用于猪粪便中DFB药物浓度的检测,为后期开展除虫脲预混剂的临床试验提供了可靠方法。

关键词：猪粪便除虫脲液相色谱-串联质谱法内标法

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AEE对RAW264.7细胞中iNOS表达及NO合成的影响

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黑龙江畜牧兽医 2024年第3期 16-21,30页

作者：刘亚娴李剑勇李世宏杨亚军刘希望葛闻博白莉霞秦哲李存天津农学院动物科学与动物医学学院/天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室兰州730050

为了探讨阿司匹林丁香酚酯(AEE)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的RAW264.7细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达及一氧化氮(NO)合成的影响,试验首先采用CCK-8法检测细胞存活率,采用油红O染色法观察细胞内脂滴形成情况,采用实时荧光定... 详细信息

为了探讨阿司匹林丁香酚酯(AEE)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的RAW264.7细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达及一氧化氮(NO)合成的影响,试验首先采用CCK-8法检测细胞存活率,采用油红O染色法观察细胞内脂滴形成情况,采用实时荧光定量PCR扩增、免疫荧光技术和Western-blot技术测定iNOS mRNA和蛋白的相对表达量,最后通过硝酸盐还原酶测定法测定NO含量。结果表明:AEE和ox-LDL对RAW264.7细胞没有毒性。利用80μg/mL的ox-LDL可成功诱导RAW264.7细胞泡沫化,建立泡沫细胞模型,并且AEE可明显抑制细胞内脂滴的形成。ox-LDL可极显著上调细胞中iNOS mRNA及蛋白的相对表达量(P<0.01),并且极显著增加了细胞内NO含量(P<0.01)。经AEE预处理的RAW264.7细胞中iNOS mRNA及蛋白相对表达量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),细胞内NO含量也极显著减少(P<0.01)。说明AEE可通过抑制iNOS的表达降低NO的合成,缓解RAW264.7细胞泡沫化,进而发挥抗动脉粥样硬化的作用。

关键词：动脉粥样硬化 RAW264.7 泡沫细胞一氧化氮诱导型一氧化氮合酶

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甘宁地区蛋鸡源肺炎克雷伯菌的抗菌药物敏感性及耐药基因分析

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中国兽医科学 2024年第8期54卷 1111-1118页

作者：严钰璋茹梦珂贺泂杰王玲王胜义胡庭俊崔东安广西大学动物科学技术学院广西南宁5530005 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

肺炎克雷伯菌是一种可以通过可移动遗传元件携带并传播耐药基因的机会致病菌。本研究对甘肃和宁夏地区蛋鸡源肺炎克雷伯菌进行分离和鉴定,用纸片扩散法和PCR法检测耐药表型和耐药基因型。结果显示,245份样品中分离出肺炎克雷伯菌54株(... 详细信息

肺炎克雷伯菌是一种可以通过可移动遗传元件携带并传播耐药基因的机会致病菌。本研究对甘肃和宁夏地区蛋鸡源肺炎克雷伯菌进行分离和鉴定,用纸片扩散法和PCR法检测耐药表型和耐药基因型。结果显示,245份样品中分离出肺炎克雷伯菌54株(分离率22.04%),54株(100.00%)分离株均有生物膜形成能力。分离株对大观霉素、复方新诺明、四环素、恩诺沙星和氧氟沙星等抗菌药物耐药严重,92.59%的分离株呈多重耐药表型。qnrB(90.74%)、bla_(SHV)(85.19%)、floR(75.93%)、sul1(72.22%)、gyrA(70.37%)和tetA(64.81%)等耐药基因检出率较高,并与耐药表型具有相关性。另外,发现1株多重耐药肺炎克雷伯菌携带产ESBLs基因bla_(SHV)、bla_(TEM)、bla_(CTX-M)和脂肽类耐药基因mcr-1和mcr-8等11种耐药基因,推测是通过可移动遗传元件形成的多种耐药基因富集株。本研究表明甘宁地区蛋鸡中肺炎克雷伯菌检出率较高,多重耐药情况严重,且耐药基因丰富。

关键词：肺炎克雷伯菌抗菌药物耐药性耐药基因蛋鸡

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利福昔明在人工胃/肠液和大鼠肠道菌群及组织样品中的稳定性初步分析

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中国农业大学学报 2022年第5期27卷 240-248页

作者：陶琦刘希望秦哲白莉霞李世宏李剑勇杨亚军中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室兰州730050

为初步分析利福昔明(Rifaximin)在人工胃/肠液和肠道菌群及动物组织样品中的稳定性,将利福昔明分别与空白人工胃液(pH=1.3,不含酶)、空白人工肠液(pH=6.8,不含酶)、人工胃液(pH=1.3,含胃蛋白酶)、人工肠液(pH=6.8,含胰蛋白酶)、SD大鼠(... 详细信息

为初步分析利福昔明(Rifaximin)在人工胃/肠液和肠道菌群及动物组织样品中的稳定性,将利福昔明分别与空白人工胃液(pH=1.3,不含酶)、空白人工肠液(pH=6.8,不含酶)、人工胃液(pH=1.3,含胃蛋白酶)、人工肠液(pH=6.8,含胰蛋白酶)、SD大鼠(雄性)肠道菌群及不同组织样品的匀浆液等共孵育不同时间后,采用高效液相色谱法(HPLC)检测剩余利福昔明百分比的变化。结果表明:1)在空白人工胃液中,随孵育时间的增加,剩余利福昔明百分比虽有下降,但仍在90%以上;在人工胃液中孵育6h,其剩余百分比为84.03%;而在空白人工肠液和人工肠液中孵育6h后,其剩余百分比则分别降至81.14%和78.12%。2)利福昔明在SD大鼠肠道菌群中孵育12h后,虽发生部分降解,但剩余百分比仍在90%以上,总体呈稳定的趋势。3)利福昔明在空白SD大鼠的胃、肝、小肠和大肠及内容物的匀浆液中分别孵育6h后,其剩余百分比分别为92.09%、75.95%、78.24%和83.90%。综上,利福昔明在酸性条件下较稳定,而在碱性条件下,胰蛋白酶、胃蛋白酶和肠壁、肝脏代谢酶等对其稳定性的影响亦较为有限。本研究将为兽用利福昔明口服制剂的开发提供数据支持。

关键词：利福昔明人工胃液人工肠液肠道菌群组织样品稳定性

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牛源金黄色葡萄球菌与无乳链球菌荚膜多糖蛋白结合疫苗的研制与免疫原性研究

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中国兽医科学 2024年第4期54卷 446-453页

作者：牟小青张亚茹杨峰尚立宏罗金印丁学智李宏胜中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050 甘肃省动物疫病预防控制中心甘肃兰州730046

为了评价牛源金黄色葡萄球菌J581株和无乳链球菌A20株荚膜多糖蛋白结合疫苗的免疫原性,对制备的3批荚膜多糖进行了多糖、蛋白质及核酸含量检测,同时分别用纯化的J581和A20株荚膜多糖与破伤风类毒素偶联制备了质量浓度分别为5、10、15μg... 详细信息

为了评价牛源金黄色葡萄球菌J581株和无乳链球菌A20株荚膜多糖蛋白结合疫苗的免疫原性,对制备的3批荚膜多糖进行了多糖、蛋白质及核酸含量检测,同时分别用纯化的J581和A20株荚膜多糖与破伤风类毒素偶联制备了质量浓度分别为5、10、15μg/m L的6种荚膜多糖蛋白结合疫苗及质量浓度各为10μg/m L的J581和A20株荚膜多糖蛋白结合混合疫苗,用这几种疫苗对小鼠进行免疫,采用间接ELISA方法及Ig G试剂盒对免疫前后不同时间段的小鼠血清进行抗J581和A20株荚膜多糖的特异性抗体水平及Ig G抗体效价检测。结果表明,制备的3批纯化荚膜多糖中,J581多糖平均质量浓度为49.78 mg/L,A20多糖平均质量浓度为55.76 g/L,2种多糖中蛋白和核酸含量均低于1%,符合疫苗生产要求;小鼠免疫试验结果表明,6种不同多糖含量的荚膜多糖蛋白结合疫苗和荚膜多糖混合疫苗均能刺激机体产生一定水平的特异性抗体效价及Ig G抗体,且在第28天抗体水平达到最高,其中荚膜多糖蛋白混合疫苗组中J581和A20抗体效价及特异性Ig G水平均显著高于6种单疫苗组(P<0.05)。本研究为研制金黄色葡萄球菌和无乳链球菌荚膜多糖蛋白结合疫苗奠定了基础。

关键词：奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌无乳链球菌荚膜多糖蛋白结合疫苗免疫

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柚皮苷可通过多种途径修复猪胸膜肺炎放线杆菌诱导的小鼠肺上皮屏障损伤

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畜牧兽医学报 2024年第11期55卷 5299-5309页

作者：黄麒霖刘晨景晓涵黄丽娜潘香逸石雄伟仇正英辛蕊华中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省中兽药工程技术研究中心兰州730050 兰州大学药学院应用有机化学国家重点实验室兰州730013

旨在研究柚皮苷(naringin,NAR)对猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)感染引起小鼠肺上皮屏障损伤的防治效果。将40只6~8周龄的雄性昆明小鼠随机分为5组,分别为对照组、模型组、NAR低剂量组、NAR中剂量组以及NAR... 详细信息

旨在研究柚皮苷(naringin,NAR)对猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)感染引起小鼠肺上皮屏障损伤的防治效果。将40只6~8周龄的雄性昆明小鼠随机分为5组,分别为对照组、模型组、NAR低剂量组、NAR中剂量组以及NAR高剂量组。连续灌胃给药8 d,空白组和模型组给予生理盐水。在第7天,小鼠以气管插管灌注的方式感染APP(1×10^(8)CFU·mL^(-1),100μL·只^(-1)),空白组灌注等体积无菌生理盐水,各组小鼠于造模后48 h处死,采样并评估NAR的防治作用。通过X射线图像表明,NAR可降低小鼠肺泡灌洗液中APP载菌量,并且能够缓解肺部病理损伤;此外,NAR干预后,可逆转由于APP诱导的小鼠肺组织中ZO-1、Occludin-1和Claudin-1紧密连接蛋白的表达降低,从而促进肺上皮屏障修复。为进一步探讨NAR促进肺上皮屏障修复的机制,研究发现NAR不仅减少小鼠肺组织中促炎因子IL-6和TNF-α的分泌,还增加了抑炎因子IL^(-1)0表达,同时能够增加抗氧化酶SOD2和Hmox1表达,表明NAR能够增强机体抗炎及抗氧化能力;此外,NAR可抑制TGF-β1/Smad2/3通路,减少由APP诱导的肺纤维组织增生;通过分析凋亡相关关键蛋白和Tunel荧光标记发现,NAR可呈剂量依赖性的减少细胞凋亡。综上所述,NAR可通过抗炎、抗氧化、抗纤维化和抗凋亡等途径,修复小鼠肺上皮屏障损伤,从而有效逆转APP诱导的肺部炎症损伤、发挥防治APP的功效。

关键词：天然药物柚皮苷猪胸膜肺炎放线杆菌猪肺上皮屏障损伤

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海南省奶源和养殖环境主要肠杆菌科细菌的分布及基因分型

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畜牧兽医学报 2023年第12期54卷 5184-5197页

作者：郝若晨唐敏嘉刘光亮张艳 Muhammad Shoaib 尚若锋曹宗喜蒲万霞海南省农业科学院畜牧兽医研究所、海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室海口571100 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室兰州730050 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州730046

本研究从2021年海南省两个奶牛场采集的52份样本中分离肠杆菌科细菌,并对分离菌株进行了毒力基因、质粒型和生物被膜形成能力检测及肠杆菌科细菌基因间重复序列分子分型(ERIC-PCR)研究,以期明确牛奶及奶牛场环境中肠杆菌科细菌分布流行... 详细信息

本研究从2021年海南省两个奶牛场采集的52份样本中分离肠杆菌科细菌,并对分离菌株进行了毒力基因、质粒型和生物被膜形成能力检测及肠杆菌科细菌基因间重复序列分子分型(ERIC-PCR)研究,以期明确牛奶及奶牛场环境中肠杆菌科细菌分布流行状况及其生物学特性。首先,采用16S rDNA PCR和ERIC-PCR对分离的肠杆菌科细菌进行鉴定和去重,结果显示52份样本中分离到肠杆菌科细菌49株,其中大肠埃希菌(Escherichia coli)32株,肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)13株,阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)3株,产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)1株;其次,采用PCR方法进行了分离菌株的毒力基因检测,结果显示,ompA的检出率最高;之后,采用CARATTOLI创建的基于PCR的质粒复制子分型,结果显示K质粒的检出率最高;采用刚果红琼脂法对分离菌株进行了生物被膜形成能力定性检测,发现49株肠杆菌科细菌中有37株指示有生物被膜形成能力;最后,通过ERIC-PCR分型进行了肠杆菌科细菌的亲缘关系和遗传多样性分析,发现49株肠杆菌科菌株可划分为17型(Ⅰ~ⅩⅦ),Ⅵ型为优势型(均为Escherichia coli),共20株。整体研究表明肠杆菌科细菌在奶源环境中广泛存在、生物特性多样,推测具有一定的致病力和耐药性,引起人类和动物疾病风险较高,提示养殖、运输中的卫生和规范操作至关重要。

关键词：肠杆菌科细菌分子分型质粒型生物被膜

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菊苣酸对磷酰胺氮芥诱导巨噬细胞免疫抑制的调节作用

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中国兽医学报 2024年第2期44卷 319-326页

作者：冯晨婧白莉霞杨亚军刘希望李世宏秦哲葛闻博许笑李剑勇李存天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

用3μmol/L磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导RAW264.7细胞24 h,建立体外细胞免疫抑制模型;给予不同剂量(25、50、100μmol/L)的菊苣酸(chicoric acid,CA)干预细胞24 h,考察CA对免疫抑制的调节作用。利用CCK-8法检测细胞活力,... 详细信息

用3μmol/L磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导RAW264.7细胞24 h,建立体外细胞免疫抑制模型;给予不同剂量(25、50、100μmol/L)的菊苣酸(chicoric acid,CA)干预细胞24 h,考察CA对免疫抑制的调节作用。利用CCK-8法检测细胞活力,中性红吞噬法检测细胞吞噬能力,ELISA试剂盒测定细胞IL-1β和IL-6表达,NO含量测定试剂盒测定细胞NO水平,实时荧光定量PCR测定IL-1β、IL-6和iNOS mRNA的相对表达量。结果显示,3μmol/L PM诱导RAW264.7细胞24 h后,巨噬细胞活力与吞噬能力显著降低(P<0.05),NO、IL-1β与IL-6的表达以及相应的mRNA相对表达量均显著下降(P<0.05),巨噬细胞免疫抑制模型成功建立;给予不同剂量(25、50、100μmol/L)的CA干预24 h后,巨噬细胞活力与吞噬能力显著增强(P<0.05),巨噬细胞NO、IL-1β与IL-6分泌水平以及相应的mRNA相对表达量明显升高(P<0.05)。结果表明,PM可以有效建立体外巨噬细胞免疫抑制模型,CA可能通过增强巨噬细胞活力与吞噬能力,促进炎症因子表达发挥免疫增强作用,从而提高机体免疫功能。本研究建立体外巨噬细胞免疫抑制模型,探究CA对PM诱导RAW264.7细胞免疫抑制的调节作用,为将CA开发为新型兽用免疫增强剂提供了理论基础。

关键词：菊苣酸磷酰胺氮芥巨噬细胞免疫抑制免疫增强

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参姜止痢合剂的抗炎镇痛功效评价

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中国兽医杂志 2025年第1期61卷 128-132页

作者：刘莲郭志廷张康张景艳王磊李建喜中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省中兽药工程技术研究中心甘肃兰州730050

为探究中兽药参姜止痢合剂的抗炎、镇痛作用,本试验采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀抑制试验建立炎症模型,采用醋酸扭体试验和热板法镇痛试验建立疼痛模型,各试验造模前将昆明小鼠随机分为5个组,分别为阴性对照组(灌胃生理盐水)、阳性药物对照... 详细信息

为探究中兽药参姜止痢合剂的抗炎、镇痛作用,本试验采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀抑制试验建立炎症模型,采用醋酸扭体试验和热板法镇痛试验建立疼痛模型,各试验造模前将昆明小鼠随机分为5个组,分别为阴性对照组(灌胃生理盐水)、阳性药物对照组[醋酸地塞米松片(抗炎),阿司匹林肠溶片(镇痛)]、参姜止痢合剂高剂量组(1 g/mL,0.4 mL)、参姜止痢合剂中剂量组(1 g/mL,0.2 mL)和参姜止痢合剂低剂量组(1 g/mL,0.1 mL),每组12只。连续预处理6 d后造模,观察并计算小鼠耳肿胀度和耳肿胀抑制率,记录小鼠扭体潜伏期,计算疼痛抑制率,测定不同检测时间点的痛阈值,以评价参姜止痢合剂的抗炎、镇痛作用。结果显示,与阴性对照组相比,中、高剂量参姜止痢合剂和阳性药物预处理6 d可极显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀度(P<0.01),且中剂量组耳肿胀抑制率最高,达到72%;参姜止痢合剂中、高剂量组和阳性药物对照组小鼠腹腔注射醋酸后扭体潜伏期均延长,且15 min内出现的扭体次数显著降低(P<0.05或P<0.01);中、高剂量参姜止痢合剂和阳性药物在末次预处理后1.5 h均能显著增加小鼠的痛阈值(P<0.05或P<0.01)。结果表明,参姜止痢合剂具有良好的抗炎、镇痛作用,为参姜止痢合剂的临床应用提供了参考依据。

关键词：中兽药参姜止痢合剂抗炎镇痛

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人工胃/肠液和大鼠肠道菌群对氟苯尼考磺胺噻唑稳定性的影响

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动物医学进展 2023年第12期44卷 76-81页

作者：朱兆晗刘希望杨亚军白莉霞秦哲李世宏李准李剑勇葛闻博甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

为新型偶联化合物-氟苯尼考磺胺噻唑(FST)研制和开发口服制剂提供数据支持,采用高效液相色谱法,对FST在5种溶液介质(无蛋白酶人工肠液、人工肠液、无蛋白酶人工胃液、人工胃液及大鼠肠道菌群培养液)中不同时刻的含量进行了研究,判断其... 详细信息

为新型偶联化合物-氟苯尼考磺胺噻唑(FST)研制和开发口服制剂提供数据支持,采用高效液相色谱法,对FST在5种溶液介质(无蛋白酶人工肠液、人工肠液、无蛋白酶人工胃液、人工胃液及大鼠肠道菌群培养液)中不同时刻的含量进行了研究,判断其稳定性差异。结果表明,FST在人工胃液和无蛋白酶人工胃液0~6 h含量保持基本稳定;在人工肠液和无蛋白酶人工肠液中孵育30 min已完全降解,且新出现的色谱峰在相同色谱条件下与氟苯尼考和磺胺噻唑对照品出峰时间相同。由此可知,FST的代谢产物为氟苯尼考和磺胺噻唑;FST在肠道菌群中发生了降解,0~8 h,FST含量迅速下降,而8~12 h趋于平稳,降至50%。说明FST在人工肠液中有明显的降解,在人工胃液中趋于稳定,肠道菌群对其稳定性也有一定的影响。

关键词：氟苯尼考磺胺噻唑人工肠液人工胃液肠道菌群稳定性

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